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1、生物传感器在食品微生物检验中的应用 一、一、生物传感器概述生物传感器概述 能感受规定的被测量并按照一定的规能感受规定的被测量并按照一定的规律转换成可用输出信号的器件或装置,律转换成可用输出信号的器件或装置,通常由通常由敏感元件敏感元件和和转化、转换元件转化、转换元件组组成。成。传感器传感器:生物传感器的概念生物传感器的概念敏感元件:敏感元件:指传感器中能直接感受或相应被测指传感器中能直接感受或相应被测量的部分。量的部分。转换元件:转换元件:指将敏感元件感受或响应的被测量指将敏感元件感受或响应的被测量转换成适应于传输或测量的电信号转换成适应于传输或测量的电信号部分。部分。由由生物识别元件生物识别
2、元件和和信号转换器信号转换器组成,能够选择性组成,能够选择性地对样品中的待测物发出响应,通过生物识别系地对样品中的待测物发出响应,通过生物识别系统和电化学或其他传感器把待测物质的浓度转为统和电化学或其他传感器把待测物质的浓度转为电信号,根据电信号大小定量测出待测物质的浓电信号,根据电信号大小定量测出待测物质的浓度。度。生物传感器是应用生物活性材料(如酶、蛋白质、生物传感器是应用生物活性材料(如酶、蛋白质、DNADNA、抗体、抗体、抗原、生物膜等)与物理或化学换抗原、生物膜等)与物理或化学换能器有机结合的一门交叉学科,是物质在分子水能器有机结合的一门交叉学科,是物质在分子水平的快速、微量分析方法
3、。有共同的结构:一种平的快速、微量分析方法。有共同的结构:一种或数种相关生物活性材料及能把生物活性表达的或数种相关生物活性材料及能把生物活性表达的信号转换为电信号的物理或化学换能器。信号转换为电信号的物理或化学换能器。生物传感器(生物传感器(BiosensorBiosensor):二、生物传感器的发展史二、生物传感器的发展史19621962年,年,ClarkClark利用酶法和离子选择电极利用酶法和离子选择电极(ISEISE)技术,构成了技术,构成了“酶电极酶电极”的雏形;的雏形;19671967年,年,UpdikeUpdike将葡萄糖氧化酶固化在将葡萄糖氧化酶固化在ClarkClark氧电极
4、表面,这种酶电极能反复用于血糖测氧电极表面,这种酶电极能反复用于血糖测定;定;第一代生物传感器:第一代生物传感器:6060年代初年代初7070年代中年代中第二代生物传感器:第二代生物传感器:7070年代后期年代后期8080年代初年代初相继出现微生物传感器、组织传感器、细胞传相继出现微生物传感器、组织传感器、细胞传感器和受体传感器;感器和受体传感器;根据生物学反应中产生的各种信息(如光电根据生物学反应中产生的各种信息(如光电效应、场效应、热效应、质量变化和光效应等)效应、场效应、热效应、质量变化和光效应等)来设计各种更精密、灵敏的检测装置。来设计各种更精密、灵敏的检测装置。第三代生物传感器:第三
5、代生物传感器:8080年代中期年代中期9090年代年代三、生物传感器的特点三、生物传感器的特点经济、简便:一般不需要进行样品预处理,经济、简便:一般不需要进行样品预处理,测定时一般不需要另外添加其他试剂;测定时一般不需要另外添加其他试剂;专一性强;专一性强;体积小便于携带,可实验连续在线检测和体积小便于携带,可实验连续在线检测和现场检测;现场检测;操作系统比较简单,容易实现自动分析,操作系统比较简单,容易实现自动分析,准确度高;准确度高;样品用量小,响应快,可反复使用;样品用量小,响应快,可反复使用;得到的信息量大,可用于指导生产。得到的信息量大,可用于指导生产。优点:优点:敏感膜上生物分子的
6、固定量以及固定分敏感膜上生物分子的固定量以及固定分子的活性很难控制,导致传感器使用的子的活性很难控制,导致传感器使用的一致性、可靠性差,测量精密度低;一致性、可靠性差,测量精密度低;生物分子的活性保持受许多因素影响,生物分子的活性保持受许多因素影响,导致传感器使用寿命不长;导致传感器使用寿命不长;生物敏感膜的制备工艺复杂,成品率不生物敏感膜的制备工艺复杂,成品率不高,难以批量生产;高,难以批量生产;测定环境要求严格。测定环境要求严格。缺点:缺点:四、生物传感器的分类:四、生物传感器的分类:1 1、按工作原理分:、按工作原理分:2 2、按所用的生物活性物质分:、按所用的生物活性物质分:酶传感器酶
7、传感器 微生物传感器微生物传感器 组织传感器组织传感器 细胞器传感器细胞器传感器 免疫传感器免疫传感器 核酸生物传感器等核酸生物传感器等3 3、按信号转换器类型:、按信号转换器类型:生物传感器的信号转换器类型生物传感器的信号转换器类型电化学式电化学式光学式光学式其他其他电位式电位式电流式电流式电导式电导式光光导导纤纤维维光光电电子子元元件件表表面面声声波波压压电电晶晶体体热热敏敏件件平平面面波波导导表表面面等等离离子子体体共共振振传传感感聚聚合合物物修修饰饰电电极极金金属属电电极极离离子子选选择择性性电电极极传传感感有有机机盐盐修修饰饰电电极极场场效效应应晶晶体体管管气气敏敏电电极极贵贵金金属
8、属电电极极碳碳素素或或半半导导体体电电极极 根据生物传感器信号转换的途径,分为:根据生物传感器信号转换的途径,分为:(一)生物或化学转变成电信号(一)生物或化学转变成电信号(二)热变化转变成电信号(二)热变化转变成电信号(三)光效应转变成电信号(三)光效应转变成电信号(四)直接产生电信号(四)直接产生电信号(五)质量信号转换成频率信号(五)质量信号转换成频率信号五、生物传感器的工作原理五、生物传感器的工作原理被测物被测物固定化酶等固定化酶等光检测器光检测器电信号电信号hn n一、酶生物传感器一、酶生物传感器六、六、生物传感器在食品分析中的应用生物传感器在食品分析中的应用固定化酶可与各种转换器组
9、合成酶传感器,用固定化酶可与各种转换器组合成酶传感器,用来检测对应的底物。我们把固定化酶与电化学来检测对应的底物。我们把固定化酶与电化学电极组合而成的电化学酶传感器又称为电极组合而成的电化学酶传感器又称为酶电极酶电极,是利用吸附、共价、交联、包埋等方法将酶固是利用吸附、共价、交联、包埋等方法将酶固定化,然后与电化学检测器件复合而成。定化,然后与电化学检测器件复合而成。用于固定酶电极用于固定酶电极的电化学器件的电化学器件测电流:测电流:O O2 2、H H2 2O O2 2、H H2 2电极电极测电位:测电位:H H+、COCO2 2、NHNH3 3电极等电极等酶传感器在食品领域的应用:酶传感器
10、在食品领域的应用:(一)酶传感器在食品营养成分分析过程中的应用(一)酶传感器在食品营养成分分析过程中的应用 葡萄糖葡萄糖O O2 2-葡萄糖酸内酯葡萄糖酸内酯H H2 2O O2 2(二)生物传感器在食品安全监督方面的应用二)生物传感器在食品安全监督方面的应用 掺假鉴定掺假鉴定 农药及其残留、重金属、硝酸盐等有害物质检测农药及其残留、重金属、硝酸盐等有害物质检测 GODGOD 抗原抗原是一种进入机体后能刺激机体产生免疫反应是一种进入机体后能刺激机体产生免疫反应的物质。当抗原进入机体后刺激的物质。当抗原进入机体后刺激B B细胞产生抗体。细胞产生抗体。抗原和抗体可以特异性地结合。抗原和抗体可以特异
11、性地结合。免疫传感器免疫传感器是利用生物体内抗原与抗体专一性结是利用生物体内抗原与抗体专一性结合并导致电化学变化而设计的,分为合并导致电化学变化而设计的,分为:二、免疫传感器二、免疫传感器非标记免疫传感器非标记免疫传感器标记免疫传感器标记免疫传感器几种新型免疫传感器及其在食品分析中的应用:几种新型免疫传感器及其在食品分析中的应用:(一)酶免疫传感器(一)酶免疫传感器(二)光寻址电位传感器(二)光寻址电位传感器(三)受体免疫传感器(三)受体免疫传感器(四)光学免疫传感器(四)光学免疫传感器(五)压电免疫传感器(五)压电免疫传感器(六)免疫芯片(六)免疫芯片 生物芯片生物芯片指包被在固相载体上的高
12、密度指包被在固相载体上的高密度DNADNA、抗抗原、细胞、组织的微点阵,主要包括芯片实验室、基因原、细胞、组织的微点阵,主要包括芯片实验室、基因芯片、蛋白质芯片等。如果在固相载体上包被抗原、抗芯片、蛋白质芯片等。如果在固相载体上包被抗原、抗体的微点阵,就构成体的微点阵,就构成免疫芯片免疫芯片。微生物传感器微生物传感器是由载体结合的微生物细胞是由载体结合的微生物细胞和电化学器件组成,目前已开发了两种传感和电化学器件组成,目前已开发了两种传感器,一种是以微生物呼吸活性为指标的呼吸器,一种是以微生物呼吸活性为指标的呼吸型传感器,一种是以微生物的代谢产物为指型传感器,一种是以微生物的代谢产物为指标的电
13、极活性物质测定型传感器。标的电极活性物质测定型传感器。三、微生物传感器三、微生物传感器在各种生物传感器中,微生物传感器最适合在各种生物传感器中,微生物传感器最适合发酵工业的测定。发酵工业的测定。微生物传感器可以对食品中的成分和毒物进微生物传感器可以对食品中的成分和毒物进行检测:行检测:原材料及代谢产物的测定原材料及代谢产物的测定 微生物细胞总数的测定微生物细胞总数的测定 代谢实验的鉴定代谢实验的鉴定 食品中毒素的检测食品中毒素的检测组织传感器组织传感器的基本原理与酶传感器相同,是把动的基本原理与酶传感器相同,是把动植物组织薄片的生物催化层与基础电极相结合,植物组织薄片的生物催化层与基础电极相结
14、合,可看成是酶传感器的衍生形式。可看成是酶传感器的衍生形式。优点:优点:原料易得、成本低廉、灵敏度高、稳定性原料易得、成本低廉、灵敏度高、稳定性强、制作简单、使用方便。强、制作简单、使用方便。四、组织传感器四、组织传感器组织传感器组织传感器动物组织传感器动物组织传感器植物组织传感器植物组织传感器DNADNA生物传感器生物传感器是一种能将目的是一种能将目的DNADNA得存在转变为得存在转变为可检测得电、光、声、波等信号的传感装置。可检测得电、光、声、波等信号的传感装置。其原理是在电极上固定一条有十几到上千个核其原理是在电极上固定一条有十几到上千个核苷酸的单链苷酸的单链DNADNA(ssDNAss
15、DNA),),通过通过DNADNA分子杂交,分子杂交,对另一条含有互补碱基序列的对另一条含有互补碱基序列的DNADNA进行识别,进行识别,结合成双链结合成双链DNADNA(dsDNAdsDNA)。)。(一)(一)DNADNA修饰电极制作传感器修饰电极制作传感器(二)光学(二)光学DNADNA生物传感器生物传感器 光纤光纤DNADNA生物传感器生物传感器 光渐消逝波光渐消逝波DNADNA传感器传感器 表面等离子体共振表面等离子体共振DNADNA生物传感器生物传感器(三)压电晶体(三)压电晶体DNADNA传感器传感器五、五、DNADNA杂交传感器杂交传感器由细胞器组成的传感器可用来测定用单一酶由细
16、胞器组成的传感器可用来测定用单一酶组成的传感器所不能测定的物质。组成的传感器所不能测定的物质。六、细胞器传感器六、细胞器传感器线粒体传感器线粒体传感器微粒体传感器微粒体传感器叶绿体传感器叶绿体传感器磁粒体传感器磁粒体传感器溶酶体传感器溶酶体传感器辅酶辅酶I I传感器传感器谷胺酰胺传感器谷胺酰胺传感器仿生型生物传感器仿生型生物传感器七、仿生型生物传感器七、仿生型生物传感器人工酶仿生生物传感器人工酶仿生生物传感器脂质膜开关传感器脂质膜开关传感器分子印迹技术分子印迹技术(molecular imprinting technique,molecular imprinting technique,MIT
17、MIT)是指制备对某一特定的目标分子(模板分子、是指制备对某一特定的目标分子(模板分子、印迹分子或烙印分子)具有特异选择性的聚合物印迹分子或烙印分子)具有特异选择性的聚合物的过程。的过程。设计分子印记传感器的一个重要方面是找到适当的设计分子印记传感器的一个重要方面是找到适当的方法解决聚合物与转换器间的界面问题。方法解决聚合物与转换器间的界面问题。MIPMIP传感器在食品分析、医药和药理研究及战地和城传感器在食品分析、医药和药理研究及战地和城市环境化学和生化试剂的快速检测方面由很好的市环境化学和生化试剂的快速检测方面由很好的应用前景。应用前景。八、分子印迹生物传感器八、分子印迹生物传感器生物传感器的发展趋势生物传感器的发展趋势v向商品化方面发展向商品化方面发展v生物传感器系统的研究趋势正向笔式、生物传感器系统的研究趋势正向笔式、卡片式和有存储记忆功能的生物传感器卡片式和有存储记忆功能的生物传感器方向发展。方向发展。此此课课件下件下载载可自行可自行编辑编辑修改,修改,仅仅供供参参考!考!感感谢谢您您的支持,我的支持,我们们努力做得更好!努力做得更好!谢谢谢谢
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