大鼠肾小球系膜细胞肾炎模型_葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响.docx

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1、大鼠肾小球系膜细胞肾炎模型_葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响 摘要 目的：探讨葛根素对大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增殖的影响。方法：体外培育大鼠肾小球系膜细胞，分空白比照组和葛根素组。葛根素组采纳MTT法，视察12h、24h、48h和72h后GMcs的增殖水平。结果：随着葛根素浓度的提高及作用时间的延长，GMCs细胞的生长抑制率呈现上升趋势。结论：葛根素能抑制GMCs增殖，并与药物的浓度和作用时间呈明显正相关。 关键词 葛根素 大鼠 肾小球系膜细胞 增殖 肾小球系膜细胞增殖和系膜基质蓄积是大多数肾小球疾病发生、发展的共同病理表现，最终可导致肾小球硬化和肾间质纤维化1。临床上用于治疗肾脏疾

2、病的很多药物都有抑制GMCs的增殖作用。 葛根素（Pue）是从豆科葛属植物野葛的干燥根中提取并分别出来的一种单体，具有扩张血管、降血脂、降血压、改善微循环、抗氧化等药理作用。本探讨通过体外细胞培育，视察葛根素对大鼠肾小球系膜细胞GMCs增殖的影响，为临床应用供应科学依据。 1 材料与方法 1.1 材料：大鼠肾小球系膜细胞GMCs由武汉高校供应，胎牛血清及MEM培育液购自GIBCO公司。 1.2 细胞培育：大鼠肾小球系膜细胞株用含体积分数为10%胎牛血清的MEM培育基，于37，5%CO2饱和湿度条件下培育，23天传代1次。 1.3 试验分组：试验分空白比照组和用药组(Pue组)，Pue组的Pue

3、终浓度分别为0.5mgml、1mgml、1.5mgml、2mgml、2.5mgml、3mgml和3.5mgml，每个浓度重复3孔。 1.4 MTT法测定GMCs的增殖水平：取对数生长期细胞使其脱壁，用10胎牛血清MEN培育液重悬成单细胞悬液。以1103孔密度将GMCs细胞接种于96孔细胞培育板，用含10胎牛血清的MEM培育液培育24h后，弃去原有细胞培育液，加入用培育液稀释的葛根素各200ul，比照组只加含10胎牛血清的MEM培育液，在培育12h、24h、48h和72h后,每孔加入5mgmlMTT溶液20ul，接着培育4h后终止培育，当心吸弃孔内上清液，每孔加入DMSO150ul，震荡混合仪震

4、荡10min，使结晶充分溶解，选择490nm波长酶标分析仪测定每孔光汲取值(OD值)。 2 结果 将GMCs细胞与不同浓度葛根素共培育后，用MTT法测定OD值，结果见表1。 3 探讨 肾小球系膜细胞GMCs常作为体外探讨肾脏病变发朝气制和药物疗效的细胞模型，系膜细胞增殖及炎症介质的释放在肾脏疾病的发生、发展及肾小球硬化中具有重要作用2。临床上很多用于治疗肾脏疾病的药物都有抑制GMCs增殖的作用。葛根素是豆科植物野葛干燥根的提取物。在本试验中，葛根素能抑制GMCs的增殖，0.5mg/ml浓度葛根素与GMCs细胞共培育12h后，检测的GMCs增殖水平与比照组之间无显著性差异，但随着葛根素浓度的增加或是共培育时间增加，与比照组之间都存在显著性差异。表明葛根素呈浓度依靠性地抑制肾小球系膜细胞的增殖，提示葛根素可以通过抑制GMCs的增殖来爱护肾脏，从而延缓纤维化肾病及肾小球硬化的发生、发展。 4 参考文献 1万建新，尤丹瑜，许昌声.氟伐他汀对转化生长因子1诱导的系膜细胞结缔组织生长因子和型胶原表达的影响J.中国药理学通报，2007，23（11）：1501-1505. 2Marx J.How the glucocorticoids suppress immunity.ScienceJ.1995,270(12)：232-241. 收稿日期 2008-11-21