CAR-T细胞用于治疗肺癌.docx

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1、CAR-T细胞用于治疗肺癌抽象使用表达嵌合抗原受体（CAR-T）的转基因T淋巴细胞进行过继细胞治疗是治疗癌症最有前途的先进疗法之一，在血液恶性肿 瘤中取得了前所未有的结果。然而，CAR-T细胞在实体瘤中的疗效仍然非常不尽如人意，因为强大的免疫抑制性肿瘤微环境阻 碍了免疫反响。开发针对实体瘤的下一代个性化CAR-T细胞是临床上的必要性。确定新的CAR-T疗法的治疗靶点，以提高实 体瘤的疗效，生存率，持久性和平安性仍然是癌症免疫治疗的关键前沿。在这里，我们总结了 CAR-T细胞免疫疗法在肺癌中的 基本，转化和临床结果，从分子工程和机制研究到临床前和临床开发。关键字:卡T;过继细胞疗法;免疫治疗;实

2、体瘤;肺癌.引言免疫疗法在癌症治疗中发挥了重要作用，特别是基于免疫检查点阻滞和过继T细胞转移的免疫疗法1。免疫检查点抑制 剂（ICIs）的治疗包括全身施用抗体，阻断癌细胞和T细胞之间的抑制相互作用，从而释放抗肿瘤免疫应答。这些治疗可以作 为单一疗法或与化疗联合使用。使用最广泛的抗体基于阻断PD-L1/PD-1相互作用的抗体2, 3, 4, 5o ICI阻滞策略是有效的, 但存在一些临床问题：许多患者表现出原发性或获得性耐药性，并且缺乏可靠的反响预测生物标志物。此外，这些治疗具有相 对较高的本钱，并且可以在一些患者中诱导炎症或自身免疫性毒性。此外，在一组称为高进展性疾病的患者中，在给予ICI后，

3、 肿瘤生长速率可能会加速，这与临床快速恶化有关6, 7, 8, 9o过继性T细胞免疫治疗或过继T细胞转移（ACT）与ICI阻滞剂的治疗组合，可能会克服ICI单一疗法的局限性， 并改善一些患者的预后。ACT战略包括几种模式。在这些免疫疗法中，T细胞经过基因工程改造，通过嵌合抗原受体（CARS） 或肿瘤抗原特异性T细胞受体（TCR）的表达特异性识别和杀死癌细胞10。基于临床相关性最有效的是用慢病毒和逆转录病毒 载体修饰自体T细胞以表达CARS或TCR11, 12, 13, 14, 15。CAR-T细胞作为治疗癌症的先进和个性化疗法具有巨大的前景。近年来，FDA已批准其中几种细胞产品用于治疗血液恶

4、性肿瘤16。对于实体瘤的CAR-T治疗，已经从几个I / II期试验中发表了适度的结果。然而，使用ACT治疗实体瘤仍需要更 多的数据和进一步的开发。1 . CART细胞的临床前开发嵌合抗体-T细胞受体分子通常被构造为单链免疫球蛋白可变结构域，用于细胞外与其靶标（scFvs）的结合，较链区，跨 膜结构域以及来自T细胞共刺激分子（如CD28或4-1BB）的一个或多个细胞内信号传导结构域（图1） 17.1989年，Gross, Waks和Eshhar首次描述了免疫球蛋白-T细胞受体嵌合分子作为具有抗体型特异性的功能受体的设计和表达18。该研究的作 者表达了这些嵌合基因，将TCR常数结构域融合到抗2,

5、 4, 6-三硝基苯基（TNP）抗体（SP6）的可变结构域中。1993年， 作者将scFv抗体结合结构域与CD3分子的y（Y）或zeta （）链相结合，证明了细胞毒性淋巴细胞的特异性靶标识别和细胞 活化19。这被认为是第一代第一代CAR,尽管它在临床上还不是有效的。Evolution of CAR engineeringscFv （VM VJ，signaling domainCo&Umuiation signal 1Coslimulation signal 2Costimulatocy Itgand（/）CytokinesTransmemtxan domain图1 .汽车工程的演变。scFv结

6、构域赋予靶抗原特异性。跨膜结构域将CAR锚定在T细胞膜上。设计的第1代（第一代）CARS 包含CD3（或FcRy信号域，第2代和第3代CARS具有一个或两个与CD3（域串联的共刺激域。两种最常见的共刺激结构域 是CD28和4-1BB,两者都与高患者反响率相关。第4代CAR-T可以另外设计以释放转基因细胞因子，或者其细胞内信号传导 可以由外部共刺激配体诱导。在接下来的几十年中，对CARS的研究有所增加，导致第一代、第二代、第三代和目前第四代CAR设计，这些设计是新 兴的免疫药理学领域的一局部17, 20o第一代CARS仅由CD3c或CD3YYY链组成，而第二代CARS那么从T细胞共刺激分子 （如

7、CD28或4-1BB）添加信号结构域。这些信号结构域的结合概括了当与MHC肽和共刺激受体接合时TCR复合物的适当激 活。因此，CAR分子在效应器功能、增殖、细胞因子分泌、对肿瘤外毒性（如细胞凋亡）的抵抗力、疗效和体内持久性等方面 增强T细胞功能17, 21, 22o第三代CARS通过同时引入CD28和4-1BB的信号结构域，进一步提高了这些效应器的功能、 功效和持久性23, 24, 25o从首次描述CARS开始开展10年后，描述了肿瘤反响性人CAR-T疗效的第一个临床前证据26, 27,这种特定的CAR 设计针对B细胞特异性CD19外表抗原。与CD80和IL-15诱导共刺激。这种第二代CD19

8、靶向CAR在体外和体内研究中显示 出对慢性淋巴细胞白血病（CLL）癌细胞的有效杀伤。此外，目前正在开发第四代CAR,所谓的T细胞被重定向到通用细胞因子介导的杀伤（TRUCKS）或装甲CARs28这 些CAR结构旨在提高CAR-T增殖和抗肿瘤疗效29。TRUCC由包含两个或三个共刺激分子（如CD28、4-1BB和CD40L）信 号传导域的CAR分子组成，或者它们可以设计为含有CAR诱导的转基因细胞因子（如IL-12、IL-17或CCL19）以调节肿瘤微 环境17, 23, 30, 31, 32, 33。除了 CAR设计之外，所谓的智能CAR-T细胞产品”结合了不同的策略来提高其功效。例如，合并的

9、CAR-T细胞制剂， 多CAR-T细胞，串联CAR-T细胞，条件CAR-T细胞，分裂CAR, iCAR或自杀开关等。合并的CAR-T细胞由至少两个单靶 向工程CAR-T细胞的混合物组成，每个细胞具有不同的抗原特异性。例如，Feng等人对化疗和放疗耐药的晚期胆管癌患者施 用EGFR-和CD133特异性CAR-T混合细胞，实现了局部反响，但具有急性毒性34。多CAR-T细胞由两个或多个单独的CARs 组成，靶向每个T细胞特异性表达的不同抗原。例如，Hedge等人联合靶向HER2和IL-13RO2的CARs,证明双特异性T细 胞产物增强了体外和体内CAR-T抗肿瘤活性35。Ruella等人生成了抗C

10、D19和抗CD123 CAR-T细胞的双重药物，用于治疗 和预防CD19导向CAR-T细胞治疗的B细胞恶性肿瘤中CD19抗原丧失逃逸的策略36。遵循类似的方法，三价CAR-T细胞 已经通过在同一 T细胞内表达具有不同抗原特异性的三种CAR来设计。Bielamowicz等人利用该策略，通过CAR靶向HER2、 IL13Ra2和EphA2来克服胶质母细胞瘤患者间抗原异质性37串联CAR-T细胞由单个CAR结构组成，通过不同的抗原结合 结构域同时靶向不同的抗原。例如，Grada等人报道TanCAR是一种功能性人工双特异性分子，针对两种肿瘤抗原（CD19和 HER2）,保存了 CAR细胞溶解和抗肿瘤活

11、性38。类似地，Hedge等人生成了与HER2和IL13Ra2结合的串联CAR-T细胞, 表现出增强的T细胞功能和活性，并减少抗原逸失39。其他研究显示，使用TanCAR和基于纳米体的双特异性CAR-T细胞策 略也取得了类似的令人鼓舞的结果，例如，将针对CD19和CD20的靶标40, CD20和HER241或CD22和CD1942结合靶 标用于癌症治疗。第3章CAR-T细胞疗法的临床开发CAR-T细胞的首次临床应用于20年前在晚期转移性卵巢癌和肾细胞癌患者中实施43, 44。Kershaw等人进行了一项I 期研究，使用基因修饰的自体T细胞对卵巢癌相关抗原。-叶酸受体（FR）与高剂量IL-2组合

12、反响。除了这种策略之外，作者还 使用了对FR和同种异体细胞都有反响的双重特异性T细胞，以及与同种异体外周血单核细胞的免疫接种。一些第一批患者经 历了 3级和4级治疗相关的毒性，可能是由于IL-2给药，而接受同种异体细胞免疫接种的患者经历了 1级和2级治疗相关的毒 性效应。在这项研究中，获得了大量修饰的肿瘤反响性T细胞，用于输注到患者中。然而，这些细胞未能长期存在，并失去了 对肿瘤细胞的反响能力。2006年，Lamers等人描述了一种临床GMP方案过程，该过程使用竣酸酎酶IX特异性scFv转基因 转基因基因生成和扩增自体基因修饰的原代人T淋巴细胞，用于转移性肾细胞癌的免疫基因治疗44。本研究通过

13、逆转录病毒转 导产生用于癌症治疗的功能性基因修饰的自体T细胞。在此过程中，必须从患者或供体血液中别离T细胞，激活，进行基因修 饰和扩增，以允许表达CAR构建体。然后，患者可以通过化疗进行预处理.，并将CAR-T细胞直接注入患者体内17。以下报道 的CAR-T临床试验纳入了复发性/难治性神经母细胞瘤患者45、惰性非霍奇金滤泡性B细胞淋巴瘤和套细胞淋巴瘤46。在第 一种情况下，CAR-Ts针对CD171肿瘤抗原（L1细胞粘附分子），并包括带有自杀酶HyTK的表达盒45。在第二种情况下， 自体转基因T细胞被定向对抗CD20抗原。在这两种情况下，都实现了输注后修饰T细胞的持续循环和临床疗效，证明了过继

14、 性T细胞疗法的平安性，盈利能力和潜在的抗癌作用。然而，在未来几年内，针对B淋巴细胞抗原CD19的CAR-T细胞将用 于治疗B细胞恶性肿瘤，从而取得重大进展。随后进行了更多的临床试验，主要是I期。截至2016年底，仅进行了 220项CAR-T细胞临床试验。其中，134人正在 研究CAR-T治疗血液系统恶性肿瘤（主要靶向CD19,但也靶向BCMA, CD123, CD138, CD16V, CD20, CD22, CD30, CD33, CD70, Igk, IL-1RAP, Lewis Y, NKG2D 配体和 ROR1） , 78 人用于实体瘤（靶向 CEA, c-MET, EGFR, EG

15、FRvlll, EpCAM, EphA2, ErbB2/Her2, FAP, FR-a, GD2, GPC3, IL-13Ra2, L1-CAM,美索色林,MUC1, MUC16ecto, PD-L1, PSCA、PSMA和ROR1）和9项是长期随访研究17。目前，ClinicalTrials.gov数据库中注册了 1032项研究，突出了这些疗 法在癌症治疗中的相关性和改进途径。血液系统恶性肿瘤CAR-T细胞疗法在血液恶性肿瘤的治疗方面显示出显着的成功，并且一些已被监管机构授权用于不同的肿瘤类型和临床 环境。前两种CAR-T细胞治疗产品靶向B细胞标志物CD19 （阿昔巴坦西洛酮和替沙根勒克立醇

16、），并从相对较小的非随机试 验结果中获得批准。在临床试验ZUMA-1中到达54%的完全缓解后，2017年FDA批准了 Axicabtagene, EMA于2018年批 准了治疗侵袭性B细胞淋巴瘤和转化性滤泡性淋巴瘤，这些淋巴结瘤已进展为两线治疗47。Tisagenlecleucel被FDA和EMA 批准用于治疗B细胞淋巴瘤和转化型滤泡性淋巴瘤，这是II期试验JULIET阳性结果的结果的结果48。在这项临床试验中，40% 的完全缓解发生在复发/难治性B细胞前体急性淋巴细胞白血病的成年患者中。在相同的临床背景下，lisocabtogene maraleucel 最近获得了成年患者的批准，而复发/难

17、治性外套细胞淋巴瘤患者可以用brexucabtagene autoleucel治疗。最后，自2021年3 月以来，多发性骨髓瘤患者已经能够从CAR-T疗法中受益，因为FDA批准CAR-T靶向B细胞成熟抗原（BCMA）在对先前四 个系产生耐药或复发后。迄今为止，全球药物机构批准了六种CAR-T疗法（ Kymriah, Yescarta, Tecartus, Breyanzi和ARI-0001用于针对CD19 + B细胞淋巴组织增生性疾病的CAR-T,以及Abecma和Carvykti用于多发性骨髓瘤的CAR-T抗BCMA）。数十项新提案正 在临床试验层面进行评估。必须提到的是，CAR-T疗法在骨

18、髓恶性肿瘤中的临床试验面临更大的困难，因为仅由恶性原始细胞表达的外表抗原仍然 未知。这个挑战是开发实体瘤CAR-T疗法的主要限制之一，但不是唯一的限制。实体瘤CAR-Ts在治疗一些血液系统恶性肿瘤方面显示出显着的疗效，但这些疗法对于实体瘤的治疗基本上是无效的。因此，迫 切需要开发创新的CAR-T细胞疗法来克服这一关键瓶颈。肿瘤异质性使得识别CAR-T细胞治疗的强大且合适的靶点成为一个真正的挑战。另一个并发症是由于需要将靶抗原限制 在肿瘤细胞中，在健康组织中表达低或没有表达。一些抗原已被提议作为实体瘤的靶标，并在临床阶段进行表征，包括EGFR, HER2, EGFR806, Mesothelin

19、, PSCA, MUC1, Claudin 18.2, EpCAM, GD2, AFP, Nectin4/ FAP, CEA, Lewis Y, Glypican-3, EGFRvlll, IL-13Ra2, CD171, MUC16, AXL, CD20, CD80/86, c-MET, DLL-3, DR5, EpHA2, FR-a, gp1OO, MAGE-A1 /3/4, LMP1, CAIX, MSLN, PSMA, PD-1, GPC3、ROR1、VEGFR2或CA-125等49。这些靶点中的大多数正在评估 用于不同临床阶段胸部恶性肿瘤的治疗50（图2）。5-e-LJ。JBqEnN

20、5-e-LJ。JBqEnN图2.抗原靶向于CAR-T临床试验中用于肺癌治疗。该图表示图例中指定阶段的临床试验数量，针对指示的蛋白质。使用CAR-T细胞治疗实体肿瘤的主要困难可能是存在血液恶性肿瘤中不存在的强免疫抑制性肿瘤微环境（TME）。TME 包括复杂的细胞和细胞外结构。因此，它含有不同的细胞类型，包括白细胞，内皮细胞，脂肪细胞，成纤维细胞等。非细胞元 件主要包括细胞外基质（ECM）、细胞外囊泡和细胞因子51, 52o TME在促进肿瘤侵袭和转移方面起着重要作用，它通过物 理屏障和免疫抑制可溶性分子和受体强烈阻碍了 CAR-T细胞的疗效53。细胞外基质和成纤维细胞也阻碍了 CAR-T细胞从血

21、液到肿瘤内部的运输。肿瘤组织切片的活细胞成像研究说明，在纤连 蛋白和胶原I较少的区域，活性T细胞运动增强，而在致密基质区域迁移的T细胞较差54, 55o此外，透明质酸（HA）在TME 中的积累增加有助于癌症进展和治疗耐药性，并且它与TME中较低的T细胞密度有关，支持富含HA的细胞外基质可以作为T 细胞和肿瘤细胞之间的屏障以防止T细胞浸润到TME中的观点。即使效应T细胞成功浸润肿瘤，它们也会面临免疫细胞的免疫 抑制活性，例如肿瘤相关（M2）巨噬细胞、髓源性抑制细胞或Tregs56, 57, 58, 59, 60, 61。此外，组成肿瘤的细胞分泌 免疫抑制因子，阻碍T细胞的活化，甚至诱导其凋亡62

22、, 63, 64, 65。己经提出了克服这些困难的不同策略，包括细胞因子和趋化因子分泌，双特异性CARS或基质降解66,如本综述前几节 所述。然而，这些后期CARS的临床疗效尚未在临床试验中得到正式评估。肺癌的CAR-T临床实验的当前开展目前，超过200项介入临床试验正在评估CAR-T疗法在实体瘤中的疗效（图3a）。其中大多数是I期和I / II期，开放标 签和单组分配临床试验。这些临床试验中靶向的实体瘤主要是肝脏，腹膜，结肠，结直肠，胰腺，胃，胆道，肾脏，肺，卵巢, 输卵管，黑色素瘤，乳房，胶质母细胞瘤，神经母细胞瘤，宫颈癌，肉瘤，骨肉瘤，甲状腺，前列腺癌，鼻咽癌，视网膜母细 胞瘤和髓样癌。

23、只有一项临床试验已到达治疗胰腺癌伴肝转移的H/HI期，尽管尚未开始招募（NCT04037241 ） oa) Solid tumorsb) Solid tumorsKMervenbon ModelStatuiAAocatkxiAssignmentMaskingPrimary Put pose, E * PfMMA I PtSkM I RmmMI PhAM I MUMm SuepvriM Ervog by *rUtorc) Lung cancerStatusktrvnbon ModelAttainmentMaskingPnmry PurposeNo ye cecyuOnUN*nMnsuojs Su

24、tspended图3.CAR-T细胞介入临床试验对肺癌的分期、研究条件、状态和研究设计（分配、干预模型分配、掩蔽和主要目的）进行分类。 （a）研究CAR-T治疗实体瘤的介入性临床试验。（b）研究CAR-T治疗肺癌的介入性临床试验。目前，50项介入临床试验正在研究肺癌患者的CAR-T （图3b）（补充材料表S1）。其中大多数是I期和非比拟性I / II 期篮子试验，包括被诊断患有不同肿瘤类型的异质性队列，这些患者共享共同外表蛋白的表达。只有少数非小细胞肺癌（NSCLC） 患者的CAR-T临床试验报告了初步结果，描述了大局部适度的临床活动。MSLN靶向CAR在表达MSLN （美索替林）的实体 瘤中

25、的早期临床试验在到达II期之前被中断，因为在15名患者中没有观察到反响（NCT01583686）。另一项针对第二代PD-L1 靶向CAR的试验也被中断，因为第一位患者经历了严重的细胞因子释放综合征（CRS）,导致间质性肺炎，需要在重症监护下 给予大剂量皮质类固醇和托珠单抗（NCT03330834） ,第二代抗ROR1 CAR-T构建体（NCT02706392）在2例NSCLC患者 中诱导了混合反响，除1级CRS外无相关毒性67, 68o2021年ESMO免疫肿瘤学大会上介绍了一项使用CLDN6靶向CAR-T 细胞结合或不与CAR-T细胞扩增RNA疫苗联合或不联合的I期临床试验的有希望的初步结果

26、，报告5例患者中有3例肿瘤缩 小69。一项关于通过CRISPR-Cas9敲除PD-1的MUC1靶向CAR-T细胞治疗NSCLC患者的I期试验（NCT03525782）具 有可控的毒性，并且没有3-5级不良事件。然而，没有发现明显的活动迹象。在纳入研究的20例患者中，有11例（55%）患 者表现为最正确反响，9例（45%）在治疗后进展70。4名HLA-A2阳性患者转移性NY-ESO-1阳性NSCLC接受NY-ESO-1靶 向CAR-T细胞和IL-2。一例经历了 3个月的稳定疾病，另一例经历了持续4个月的局部反响，其余两例在治疗后不久进展。然 而，耐受是可以接受的，只有一名患者出现G3不良事件71

27、。在一名接受tnMUCI靶向CAR共表达CD2和CD3c细胞内 信号传导结构域的治疗患者中，疾病稳定在4周时到达。在这项研究中，在先前给予淋巴细胞吸收化疗后，观察到CAR扩增 有所改善72。最后，在接受第二代EGFR靶向CAR-T的9例EGFR阳性NSCLC患者中，1例放射学反响持续1年以上，伴 有鳞状NSCLC, 2例病情稳定2个月。患者中，中枢记忆和效应记忆CAR-T细胞的比例分别为23.5%和25.8%73。目前，在4项早期I期，28期I期，20期I/II期和1项II期临床试验中，CAR-T细胞临床试验中靶向了 53种肿瘤特异 性抗原（图3）。这些试验中最普遍的目标之一是MUC1。粘蛋白

28、的异常过表达与癌细胞生长和转移有关。粘蛋白1 （MUC1） 是肺癌临床试验中最常用的靶向抗原，特别是用于治疗NSCLC。MUC1是一种在人类肺癌中过度表达的细胞膜糖蛋白。据报道, 它在癌变和从癌前病变进展为浸润性癌方面有作用74, 75o美索替林可能是肺癌CAR-T临床试验中第二大靶向抗原。间皮素 在晚期肺腺癌中表达，与较差的生存率相关76。NSCLC中CAR-T疗法的最新潜在目标是PD-L1。该分子是PD-L1/PD-1免 疫疗法功效的公认生物标志物。事实上，PD-1轴阻滞剂己被确定为有效的一线治疗4, 5, 7, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86

29、o PD-1 和 PD-L1 正在通过 aPD1-MSLN-CAR-T 细胞(NCT04489862) , Zeushield 细胞毒性 T 淋巴细胞 (NCT03060343),抗 CTLA-4/PD-1 表达 CAR-Ts (NCT03182816, NCT03182803), HerinCAR-PD1 细胞(NCT02862028, NCT04429451),联合产物(NCT03525782)或自体 APD-L1 装甲抗 CD22 CAR-T 细胞(NCT04556669)在 CAR-T 临床试 验中靶向。事实上，许多靶向PD-1/PD-L1轴的CAR-T细胞正在临床前水平上发育，显示出

30、有希望的体外和体内抗原特异性活 化、细胞因子生成和肿瘤生长的有效抑制87, 88, 89, 90o CTLA-4在NSCLC中的表达也可能相关，但没有明确的预后价值 91o 一些I / II期临床试验正在研究表达EGFR-CAR-Ts或表达mesoCAR-Ts的抗CTLA-4 / PD-1。止匕外，HER2已被证明在 NSCLC中起作用，因为在NSCLC患者中己经描述了 HER2中的儿种突变和畸变。因此，特别是在HER2外显子20突变中， 突变的HER2仍然是NSCLC治疗的潜在治疗靶点，也是预后因素92。此外，超过60%的NSCLC癌表达EGFR,这是激活 突变时NSCLC肿瘤的主要驱动因素

31、93, 94o因此，EGFR在NSCLC肿瘤进展和治疗耐药性中具有相关作用94, 95, 96。 GPC3蛋白表达在肺鳞状细胞癌和肺腺癌中也显示出临床意义97。事实上，转移和分化不良癌症的肺癌患者GPC-3表达增加， 对预后有影响97, 98o CD276 (或B7-H3)也成为肺癌CAR-T临床领域的靶向。事实上，它是一种新型的有前途的共抑制检 查点分子，在T细胞反响的调控中起重要作用99, 100。B7-H3在NSCLC中表达，它与肿瘤进展和转移、肿瘤免疫逃逸和浸 润FOXP3+Tregs有关101, 102。TM4SF1在肺癌中也上调，包括细胞系和组织103。该蛋白的表达与肺癌进展，肿瘤

32、细胞 生长，治疗耐药性，侵袭和转移有关。其他被提议作为靶标的相关抗原包括CLDN6, GD2, CEA, PSMA, NY-ESO1, Lewis-Y 和PD-L1。这些抗原的过表达与较差的预后、细胞增殖和迁移有关71, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111。例如， GD2在SCLC细胞中高度表达105, 112, PSMA和NY-ESO1在NSCLC和SCLC肿瘤细胞中表达，以及其他肿瘤类型108, 109, 113。表达NY-ESO-1的肿瘤的NSCLC患者对NY-ESO1特异性TCR T细胞治疗表现出临床反响71。最后,VEGFR2, MAGE-A

33、1, MAGE-A4, PSCA, AXL, Claudin 18.2, TGFB, CD22, ROR1, 0X40, DLL3, MSLN 和 EpCAM 正在 CART 细胞肺癌临床试验中靶向。均在肺癌中差异表达，在NSCLC中更常见，与肿瘤细胞增殖、治疗耐药性、预后不良相关104, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137o因此，有强有力的证据支持所有这些肿瘤特异性抗原作为新兴靶标和肿瘤标志物

34、的效用，用于开发基于CAR-T细 胞的治疗策略，用于肺癌和其他实体瘤的新型免疫疗法的临床开发。4.结论在许多临床试验中，使用CAR-T细胞技术治疗实体瘤是非常具有挑战性的，但成功率非常有限。生产CAR-T细胞疗法 所需的高成木和大量时间，以及由于临床恶化而失去治疗患者的机会之窗的风险，是血液肿瘤患者和实体瘤患者面临的障碍。 此外，由于遗传毒性损伤，由接受重症治疗的患者的淋巴细胞产生的CAR-T细胞的功能和持久性可能很困难。由同种异体供体 产生的通用CAR-T的持续开展可能会克服这些限制，尽管这种方法有其自身的挑战。关于实体瘤的治疗，为CAR-T治疗鉴定合适的特异性靶抗原比血液肿瘤更困难。然而，

35、在“癌症基因组图谱(TCGA)等 公共数据库的支持下，提供了涵盖不同癌症类型的数千个肿瘤样本的基因组和蛋白质组学数据，已经投入了大量精力来鉴定和 测试可能具有显着治疗效用的靶抗原，同时增加了专门针对肺癌的CAR-T疗法的疗效，生存率，持久性和平安性。TME也是 一个仅限于实体瘤治疗的挑战。它通过物理屏障和肿瘤和宿主细胞的免疫抑制活性，在防止CAR-T细胞的浸润和抗肿瘤反响方 面发挥关键作用。需要新的方法来增强CAR结构的设计，或者用克服TME的策略来补充这些CAR-T细胞。使用基质降解，免 疫检查点局部阻断抗体/纳米体产生CAR-T细胞或免疫抑制细胞耗竭等不同策略对TME进行修饰可能是提高疗效的关键。总而言之，开发具有提供有效和持久肿瘤控制潜力的创新CAR分子工程策略将是肺癌治疗最有前途的进步之一。临床前 和临床开发新方法，在实体瘤中，特别是在肺癌中，在实体癌的微环境中实现更好的CAR-T细胞浸润和存活，对于成功治疗实 体瘤至关重要。