临床医学专业优秀论文丝裂霉素c治疗准分子激光屈光性角膜切削术后角膜上皮下混浊的实验研究.doc
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1、临床医学专业优秀论文 丝裂霉素C治疗准分子激光屈光性角膜切削术后角膜上皮下混浊的实验研究关键词:丝裂霉素C 准分子激光 屈光性角膜切削术 角膜上皮 角膜扩张症 细胞凋亡 动物模型摘要:背景和目的: 准分子激光被广泛地用于治疗屈光不正和角膜外表混浊。近年来激光技术、手术技巧和药物治疗的开展提高了PRK的治疗效果。PRK和LASEK所进行的外表切削不仅防止了与角膜瓣相关的并发症,减少了术后角膜扩张症的风险,同时PRK或LASEK联合波前像差引导的个体化切削可以提供更好的视觉质量。角膜上皮下混浊(Haze)仍是准分子激光角膜切削术后常见的并发症之一。许多研究者在临床工作中发现,丝裂霉素C能抑制PRK
2、或LASEK术后损伤愈合反响,预防和治疗角膜上皮下混浊,减轻屈光回退,没有出现与丝裂霉素C相关的不良反响。先前对丝裂霉素C治疗PRK术后Haze的研究主要为临床病例观察和实验标本光镜和电镜下的形态学研究。本实验利用兔PRK模型,观察PRK术后角膜损伤愈合的病理生理过程,通过TUNEL和免疫组织化学的方法对PRK术后基质细胞凋亡,增殖和转化进行研究,探讨丝裂霉素C对PRK术后角膜损伤愈合影响,及其治疗角膜上皮下混浊和屈光回退的机制。 方法: 对24只新西兰白兔行-9.0DPRK手术,左眼为对照组,右眼为MMC处理组。MMC处理组在切削后用含0.02MMC的甲基纤维素海绵覆盖创面2分钟。术后裂隙灯
3、显微镜检查各组角膜上皮愈合情况,进行Haze分级。术后4周超声角膜实质测厚评价屈光回退程度。分别于术后24小时、72小时、7天和28天处死6只动物,取下角膜标本。利用HE染色观察角膜上皮的损伤愈合及炎症细胞浸润,TUNEL染色观察角膜基质细胞凋亡,免疫组织化学方法观察PRK术后角膜PCNA,-SMA和。TGF-1表达。 结果: 1临床观察结果两组角膜上皮均于术后3天完全愈合,统计学分析无显著差异(P>0.05)。 秩和检验分析,MMC组角膜Haze轻于对照组(P<0.025)。超声角膜实质测厚提示MMC组术后4周角膜厚度变化大于对照组(P<0.01)。
4、 2HE染色结果术后1天,MMC组基质层炎症细胞浸润数与对照组无显著差异(P=0.588)。术后3天,MMC组基质层炎症细胞浸润数显著少于对照组(P<0.01)。对照组术后1天与术后3天相比基质层炎症细胞浸润数无显著差异(P=0.288)。 3免疫组织化学染色结果术后24小时和术后72小时,MMC组与对照组相比基质细胞凋亡数均无显著差异(2个时间点均有P>0.05)。对照组术后72小时与术后24小时相比基质细胞凋亡数显著减少(P<0.05)。PRK术后72小时和术后7天,MMC组增殖的基质细胞数均显著少于对照组(2个时间点均有P<0.01
5、)。对照组术后7天与术后72小时相比增殖的基质细胞数显著增多(P<0.01)。术后28天,对照组角膜基质浅层中出现-SMA(+)细胞:MMC处理组角膜基质层中-SMA染色阴性。术后28天,对照组上皮及基质浅层TGF-1染色阳性,MMC处理组上皮及基质层TGF-1染色阴性。 结论: 丝裂霉素C通过抑制上皮细胞增生,减少角膜基质层炎症细胞浸润,抑制角膜基质细胞增殖、转化和TGF-1表达,减轻PRK术后损伤愈合反响,抑制Haze形成和屈光回退,对上皮愈合时间和基质细胞凋亡无明显影响。PRK术中合理应用MMC可以有效的预防Haze的形成。正文内容 背景和目的: 准分子激光被广泛地用于治疗
6、屈光不正和角膜外表混浊。近年来激光技术、手术技巧和药物治疗的开展提高了PRK的治疗效果。PRK和LASEK所进行的外表切削不仅防止了与角膜瓣相关的并发症,减少了术后角膜扩张症的风险,同时PRK或LASEK联合波前像差引导的个体化切削可以提供更好的视觉质量。角膜上皮下混浊(Haze)仍是准分子激光角膜切削术后常见的并发症之一。许多研究者在临床工作中发现,丝裂霉素C能抑制PRK或LASEK术后损伤愈合反响,预防和治疗角膜上皮下混浊,减轻屈光回退,没有出现与丝裂霉素C相关的不良反响。先前对丝裂霉素C治疗PRK术后Haze的研究主要为临床病例观察和实验标本光镜和电镜下的形态学研究。本实验利用兔PRK模
7、型,观察PRK术后角膜损伤愈合的病理生理过程,通过TUNEL和免疫组织化学的方法对PRK术后基质细胞凋亡,增殖和转化进行研究,探讨丝裂霉素C对PRK术后角膜损伤愈合影响,及其治疗角膜上皮下混浊和屈光回退的机制。 方法: 对24只新西兰白兔行-9.0DPRK手术,左眼为对照组,右眼为MMC处理组。MMC处理组在切削后用含0.02MMC的甲基纤维素海绵覆盖创面2分钟。术后裂隙灯显微镜检查各组角膜上皮愈合情况,进行Haze分级。术后4周超声角膜实质测厚评价屈光回退程度。分别于术后24小时、72小时、7天和28天处死6只动物,取下角膜标本。利用HE染色观察角膜上皮的损伤愈合及炎症细胞浸润,TUNEL染
8、色观察角膜基质细胞凋亡,免疫组织化学方法观察PRK术后角膜PCNA,-SMA和。TGF-1表达。 结果: 1临床观察结果两组角膜上皮均于术后3天完全愈合,统计学分析无显著差异(P>0.05)。 秩和检验分析,MMC组角膜Haze轻于对照组(P<0.025)。超声角膜实质测厚提示MMC组术后4周角膜厚度变化大于对照组(P<0.01)。 2HE染色结果术后1天,MMC组基质层炎症细胞浸润数与对照组无显著差异(P=0.588)。术后3天,MMC组基质层炎症细胞浸润数显著少于对照组(P<0.01)。对照组术后1天与术后3天相比基质层炎症细胞浸润数
9、无显著差异(P=0.288)。 3免疫组织化学染色结果术后24小时和术后72小时,MMC组与对照组相比基质细胞凋亡数均无显著差异(2个时间点均有P>0.05)。对照组术后72小时与术后24小时相比基质细胞凋亡数显著减少(P<0.05)。PRK术后72小时和术后7天,MMC组增殖的基质细胞数均显著少于对照组(2个时间点均有P<0.01)。对照组术后7天与术后72小时相比增殖的基质细胞数显著增多(P<0.01)。术后28天,对照组角膜基质浅层中出现-SMA(+)细胞:MMC处理组角膜基质层中-SMA染色阴性。术后28天,对照组上皮及基质浅层T
10、GF-1染色阳性,MMC处理组上皮及基质层TGF-1染色阴性。 结论: 丝裂霉素C通过抑制上皮细胞增生,减少角膜基质层炎症细胞浸润,抑制角膜基质细胞增殖、转化和TGF-1表达,减轻PRK术后损伤愈合反响,抑制Haze形成和屈光回退,对上皮愈合时间和基质细胞凋亡无明显影响。PRK术中合理应用MMC可以有效的预防Haze的形成。背景和目的: 准分子激光被广泛地用于治疗屈光不正和角膜外表混浊。近年来激光技术、手术技巧和药物治疗的开展提高了PRK的治疗效果。PRK和LASEK所进行的外表切削不仅防止了与角膜瓣相关的并发症,减少了术后角膜扩张症的风险,同时PRK或LASEK联合波前像差引导的个体化切削可
11、以提供更好的视觉质量。角膜上皮下混浊(Haze)仍是准分子激光角膜切削术后常见的并发症之一。许多研究者在临床工作中发现,丝裂霉素C能抑制PRK或LASEK术后损伤愈合反响,预防和治疗角膜上皮下混浊,减轻屈光回退,没有出现与丝裂霉素C相关的不良反响。先前对丝裂霉素C治疗PRK术后Haze的研究主要为临床病例观察和实验标本光镜和电镜下的形态学研究。本实验利用兔PRK模型,观察PRK术后角膜损伤愈合的病理生理过程,通过TUNEL和免疫组织化学的方法对PRK术后基质细胞凋亡,增殖和转化进行研究,探讨丝裂霉素C对PRK术后角膜损伤愈合影响,及其治疗角膜上皮下混浊和屈光回退的机制。 方法: 对24只新西兰
12、白兔行-9.0DPRK手术,左眼为对照组,右眼为MMC处理组。MMC处理组在切削后用含0.02MMC的甲基纤维素海绵覆盖创面2分钟。术后裂隙灯显微镜检查各组角膜上皮愈合情况,进行Haze分级。术后4周超声角膜实质测厚评价屈光回退程度。分别于术后24小时、72小时、7天和28天处死6只动物,取下角膜标本。利用HE染色观察角膜上皮的损伤愈合及炎症细胞浸润,TUNEL染色观察角膜基质细胞凋亡,免疫组织化学方法观察PRK术后角膜PCNA,-SMA和。TGF-1表达。 结果: 1临床观察结果两组角膜上皮均于术后3天完全愈合,统计学分析无显著差异(P>0.05)。 秩和检验分析,MMC组角膜
13、Haze轻于对照组(P<0.025)。超声角膜实质测厚提示MMC组术后4周角膜厚度变化大于对照组(P<0.01)。 2HE染色结果术后1天,MMC组基质层炎症细胞浸润数与对照组无显著差异(P=0.588)。术后3天,MMC组基质层炎症细胞浸润数显著少于对照组(P<0.01)。对照组术后1天与术后3天相比基质层炎症细胞浸润数无显著差异(P=0.288)。 3免疫组织化学染色结果术后24小时和术后72小时,MMC组与对照组相比基质细胞凋亡数均无显著差异(2个时间点均有P>0.05)。对照组术后72小时与术后24小时相比基质细胞凋亡数显著减少(
14、P<0.05)。PRK术后72小时和术后7天,MMC组增殖的基质细胞数均显著少于对照组(2个时间点均有P<0.01)。对照组术后7天与术后72小时相比增殖的基质细胞数显著增多(P<0.01)。术后28天,对照组角膜基质浅层中出现-SMA(+)细胞:MMC处理组角膜基质层中-SMA染色阴性。术后28天,对照组上皮及基质浅层TGF-1染色阳性,MMC处理组上皮及基质层TGF-1染色阴性。 结论: 丝裂霉素C通过抑制上皮细胞增生,减少角膜基质层炎症细胞浸润,抑制角膜基质细胞增殖、转化和TGF-1表达,减轻PRK术后损伤愈合反响,抑制Haze形成和屈光回退,对
15、上皮愈合时间和基质细胞凋亡无明显影响。PRK术中合理应用MMC可以有效的预防Haze的形成。背景和目的: 准分子激光被广泛地用于治疗屈光不正和角膜外表混浊。近年来激光技术、手术技巧和药物治疗的开展提高了PRK的治疗效果。PRK和LASEK所进行的外表切削不仅防止了与角膜瓣相关的并发症,减少了术后角膜扩张症的风险,同时PRK或LASEK联合波前像差引导的个体化切削可以提供更好的视觉质量。角膜上皮下混浊(Haze)仍是准分子激光角膜切削术后常见的并发症之一。许多研究者在临床工作中发现,丝裂霉素C能抑制PRK或LASEK术后损伤愈合反响,预防和治疗角膜上皮下混浊,减轻屈光回退,没有出现与丝裂霉素C相
16、关的不良反响。先前对丝裂霉素C治疗PRK术后Haze的研究主要为临床病例观察和实验标本光镜和电镜下的形态学研究。本实验利用兔PRK模型,观察PRK术后角膜损伤愈合的病理生理过程,通过TUNEL和免疫组织化学的方法对PRK术后基质细胞凋亡,增殖和转化进行研究,探讨丝裂霉素C对PRK术后角膜损伤愈合影响,及其治疗角膜上皮下混浊和屈光回退的机制。 方法: 对24只新西兰白兔行-9.0DPRK手术,左眼为对照组,右眼为MMC处理组。MMC处理组在切削后用含0.02MMC的甲基纤维素海绵覆盖创面2分钟。术后裂隙灯显微镜检查各组角膜上皮愈合情况,进行Haze分级。术后4周超声角膜实质测厚评价屈光回退程度。
17、分别于术后24小时、72小时、7天和28天处死6只动物,取下角膜标本。利用HE染色观察角膜上皮的损伤愈合及炎症细胞浸润,TUNEL染色观察角膜基质细胞凋亡,免疫组织化学方法观察PRK术后角膜PCNA,-SMA和。TGF-1表达。 结果: 1临床观察结果两组角膜上皮均于术后3天完全愈合,统计学分析无显著差异(P>0.05)。 秩和检验分析,MMC组角膜Haze轻于对照组(P<0.025)。超声角膜实质测厚提示MMC组术后4周角膜厚度变化大于对照组(P<0.01)。 2HE染色结果术后1天,MMC组基质层炎症细胞浸润数与对照组无显著差异(P=0.588)。
18、术后3天,MMC组基质层炎症细胞浸润数显著少于对照组(P<0.01)。对照组术后1天与术后3天相比基质层炎症细胞浸润数无显著差异(P=0.288)。 3免疫组织化学染色结果术后24小时和术后72小时,MMC组与对照组相比基质细胞凋亡数均无显著差异(2个时间点均有P>0.05)。对照组术后72小时与术后24小时相比基质细胞凋亡数显著减少(P<0.05)。PRK术后72小时和术后7天,MMC组增殖的基质细胞数均显著少于对照组(2个时间点均有P<0.01)。对照组术后7天与术后72小时相比增殖的基质细胞数显著增多(P<0.01)。
19、术后28天,对照组角膜基质浅层中出现-SMA(+)细胞:MMC处理组角膜基质层中-SMA染色阴性。术后28天,对照组上皮及基质浅层TGF-1染色阳性,MMC处理组上皮及基质层TGF-1染色阴性。 结论: 丝裂霉素C通过抑制上皮细胞增生,减少角膜基质层炎症细胞浸润,抑制角膜基质细胞增殖、转化和TGF-1表达,减轻PRK术后损伤愈合反响,抑制Haze形成和屈光回退,对上皮愈合时间和基质细胞凋亡无明显影响。PRK术中合理应用MMC可以有效的预防Haze的形成。背景和目的: 准分子激光被广泛地用于治疗屈光不正和角膜外表混浊。近年来激光技术、手术技巧和药物治疗的开展提高了PRK的治疗效果。PRK和LAS
20、EK所进行的外表切削不仅防止了与角膜瓣相关的并发症,减少了术后角膜扩张症的风险,同时PRK或LASEK联合波前像差引导的个体化切削可以提供更好的视觉质量。角膜上皮下混浊(Haze)仍是准分子激光角膜切削术后常见的并发症之一。许多研究者在临床工作中发现,丝裂霉素C能抑制PRK或LASEK术后损伤愈合反响,预防和治疗角膜上皮下混浊,减轻屈光回退,没有出现与丝裂霉素C相关的不良反响。先前对丝裂霉素C治疗PRK术后Haze的研究主要为临床病例观察和实验标本光镜和电镜下的形态学研究。本实验利用兔PRK模型,观察PRK术后角膜损伤愈合的病理生理过程,通过TUNEL和免疫组织化学的方法对PRK术后基质细胞凋
21、亡,增殖和转化进行研究,探讨丝裂霉素C对PRK术后角膜损伤愈合影响,及其治疗角膜上皮下混浊和屈光回退的机制。 方法: 对24只新西兰白兔行-9.0DPRK手术,左眼为对照组,右眼为MMC处理组。MMC处理组在切削后用含0.02MMC的甲基纤维素海绵覆盖创面2分钟。术后裂隙灯显微镜检查各组角膜上皮愈合情况,进行Haze分级。术后4周超声角膜实质测厚评价屈光回退程度。分别于术后24小时、72小时、7天和28天处死6只动物,取下角膜标本。利用HE染色观察角膜上皮的损伤愈合及炎症细胞浸润,TUNEL染色观察角膜基质细胞凋亡,免疫组织化学方法观察PRK术后角膜PCNA,-SMA和。TGF-1表达。 结果
22、: 1临床观察结果两组角膜上皮均于术后3天完全愈合,统计学分析无显著差异(P>0.05)。 秩和检验分析,MMC组角膜Haze轻于对照组(P<0.025)。超声角膜实质测厚提示MMC组术后4周角膜厚度变化大于对照组(P<0.01)。 2HE染色结果术后1天,MMC组基质层炎症细胞浸润数与对照组无显著差异(P=0.588)。术后3天,MMC组基质层炎症细胞浸润数显著少于对照组(P<0.01)。对照组术后1天与术后3天相比基质层炎症细胞浸润数无显著差异(P=0.288)。 3免疫组织化学染色结果术后24小时和术后72小时,MMC组与对照组相比
23、基质细胞凋亡数均无显著差异(2个时间点均有P>0.05)。对照组术后72小时与术后24小时相比基质细胞凋亡数显著减少(P<0.05)。PRK术后72小时和术后7天,MMC组增殖的基质细胞数均显著少于对照组(2个时间点均有P<0.01)。对照组术后7天与术后72小时相比增殖的基质细胞数显著增多(P<0.01)。术后28天,对照组角膜基质浅层中出现-SMA(+)细胞:MMC处理组角膜基质层中-SMA染色阴性。术后28天,对照组上皮及基质浅层TGF-1染色阳性,MMC处理组上皮及基质层TGF-1染色阴性。 结论: 丝裂霉素C通过抑制上皮细胞增生
24、,减少角膜基质层炎症细胞浸润,抑制角膜基质细胞增殖、转化和TGF-1表达,减轻PRK术后损伤愈合反响,抑制Haze形成和屈光回退,对上皮愈合时间和基质细胞凋亡无明显影响。PRK术中合理应用MMC可以有效的预防Haze的形成。背景和目的: 准分子激光被广泛地用于治疗屈光不正和角膜外表混浊。近年来激光技术、手术技巧和药物治疗的开展提高了PRK的治疗效果。PRK和LASEK所进行的外表切削不仅防止了与角膜瓣相关的并发症,减少了术后角膜扩张症的风险,同时PRK或LASEK联合波前像差引导的个体化切削可以提供更好的视觉质量。角膜上皮下混浊(Haze)仍是准分子激光角膜切削术后常见的并发症之一。许多研究者
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