微生物试题(问答)grcz.docx

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1、1、微生生物具有有种类多多、分布布广、繁繁殖迅速速、代谢谢旺盛、易易变异等等特点，这这些特点点具有广广泛的应应用价值值。（1）微微生物种种类多、分分布广，其其生理类类型多种种多样，如如细菌光光合作用用；化能能合成作作用；生生物固氮氮作用；厌氧性性的生物物氧化作作用及其其烃代谢谢；合成成各种次次生代谢谢产物，如如抗生素素、维生生素等；分解各各种复杂杂化合物物，如纤纤维素、木木素等，以以及一些些有毒物物质。这这些对人人类都是是极有利利的，还还能为生生产实践践和科学学研究提提供丰富富的菌种种资源。（2）微微生物代代谢旺盛盛及快速速繁殖能能力，应应用到工工业发酵酵上，在在短时间间内能获获得较多多的产物

2、物。在环环境保护护及农业业上都有有很大的的应用价价值。（3）微微生物个个体小，对对外界环环境条件件表现出出敏感性性（即易易变性），可可用于菌菌种选育育，能在在短时间间获得优优良菌种种。2、真核核微生物物与原核核微生物物在结构构上的区区别：结构原核微生生物真核微生生物细胞壁除少数外外都含有有肽聚糖糖没有肽聚聚糖C膜常缺少固固醇常有固醇醇内膜比较简单单，有中中体复杂，有有内质网网和高尔尔基体核糖体70S (500S+330S)80S(60SS+400S)线粒体和和叶绿体体的核糖糖体为770S细胞器无有目液泡泡、溶酶酶体、微微体核膜无有核仁无有DNA单分子，没没有组蛋蛋白多条染色色体，与与组蛋白白结

3、合分裂没有有丝丝分裂有有丝分分裂。有有丝分裂裂器带有有微管纺纺锤体有性生殖殖不连续过过程,无无减数分分裂,仅仅部分遗遗传互补补体重组组连续过程程, 减减数分裂裂,全部部染色体体互补体体的重组组大小一般小,直径通通常22mm通常大，直直径2mmm大于于1000mm3、病毒毒的增殖殖过程也也叫病毒毒的复制制。病毒毒的复制制周期基基本上可可分为连连续的五五个阶段段：（1）吸吸附：吸吸附在宿宿主细胞胞表面；（2）侵侵入：吸吸附后侵侵入宿主主细胞内内；（3）脱脱壳：溶溶酶体分分泌酶去去除衣壳壳和囊膜膜；（4）生生物合成成：核酸酸复制，病病毒蛋白白质合成成；（5）装装配与释释放：新新合成的的核酸与与蛋白质

4、质，在细细胞内一一定部位位装配成成病毒颗颗粒，然然后离开开宿主细细胞。4、细菌菌细胞膜膜的功能能：答：（11）控制制细胞内内外物质质的交换换和渗透透；（2）调调节菌体体内与环环境间的的平衡；（3）是是重要酶酶系统活活动的场场所，对对细胞生生命活动动极为重重要；5、微生生物的营营养物质质可归为为五大类类，即碳碳源、氮氮源、无无机盐、生生长因子子和水等等。其生生理功能能分别为为:（1）碳碳源：构成细细胞结构构物质；合成某某些次生生代谢产产物的原原料；可供微微生物生生命活动动的能量量。（2）氮氮源：是合成成细胞原原生质的的原料；是合成成生理活活动物质质的原料料；是构成成细胞结结构物质质的原料料；是某

5、些些代谢产产物的原原料。（3）无无机盐：是细胞胞质不可可缺少的的组成成成分；是某些些生理活活性物质质的组成成成分；参与细细胞渗透透压、氢氢离子浓浓度、氧氧化还原原电位的的调节；作为某某些微生生物的能能源。（4）生生长因素素：主要要是作为为酶的重重要组成成成分。（5）水水：作为细细胞生化化反应的的介质；参与代代谢过程程的生化化反映，并并提供氢氢、氧元元素；作为溶溶剂，参参与物质质运输；传递热热量，调调节体温温。6、酶在在微生物物细胞中中的分布布特点：答：（11）参与与营养物物质运输输的各种种酶，主主要分布布在细胞胞膜上；（2）对对糖类或或其他有有机物进进行发酵酵的各种种酶，主主要在细细胞质中中；

6、（3）呼呼吸酶类类和电子子传递系系统：原原核生物物在细胞胞的内膜膜上，真真核生物物的在线线粒体内内；（4）蛋蛋白质合合成的酶酶类，主主要分布布在核糖糖体上；（5）光光合作用用的酶类类，主要要在载色色体中。其其中光合合磷酸化化的酶系系集中在在载色体体的膜上上，而固固定二氧氧化碳的的酶则溶溶于载色色体的间间质中。7、微生生物代谢谢的能量量来源：答：（11）光能能营养型型微生物物来自光光能；（22）化能能异养型型的微生生物来自自有机物物；（33）化能能自养型型的微生生物来自自无机物物。8、微生生物的次次生代谢谢物与人人类的关关系十分分密切：答：次生生代谢物物是指微微生物利利用细胞胞分解代代谢和合合成

7、代谢谢中的某某些中间间产物合合成一些些化学结结构特殊殊、生理理功能尚尚不明确确、对细细胞生命命过程并并非必要要的物质质，如抗抗生素、毒毒素、激激素、色色素等。与人类类的关系系非常密密切：（1）抗抗生素：是微生生物产生生的一种种有特异异性抑菌菌和杀菌菌作用的的有机化化合物，如如青霉素素对医疗疗保健事事业具有有“巨大”成绩。同同时，对对抗生素素的研究究，推动动了微生生物形态态、分类类、代谢谢、育种种和发酵酵工程等等方面的的研究和和发展。（2）毒毒素：有有的对人人类有害害，如白白喉、破破伤风、黄黄曲霉毒毒素、鼠鼠疫毒素素等；有有的对人人类有利利，如苏苏云金芽芽孢杆菌菌产生伴伴孢晶体体，用于于预防园园

8、林和蔬蔬菜害虫虫。（3）激激素：是是刺激动动植物生生长发育育的有机机化合物物，如吲吲哚乙酸酸、赤霉霉素等。（4）色色素：红红曲菌产产生鲜红红的颜色色，可用用于医药药食品染染色剂。9、理化化因子对对微生物物生长的的影响答：（11）温度度：微生生物对高高温比对对低温敏敏感。低低温时，微微生物只只受到抑抑制、并并不死亡亡。因为为低温代代谢活力力虽然降降低，生生长停滞滞，但原原生质不不被破坏坏，故能能较长时时间保持持活力，当当温度提提高后，仍仍能恢复复正常生生长。高高温时，当当超过微微生物耐耐受的最最高温度度，不但但停止生生长，还还会引起起死亡。因因为高温温能使蛋蛋白质变变性，破破坏酶的的活力，使使细

9、胞遭遭受不可可逆的破破坏。（2）水水分与干干燥：湿湿环境有有利于微微生物的的生长，环环境干燥燥，除少少数真菌菌外，多多数微生生物则不不能生长长，甚至至死亡。因因为干燥燥影响酶酶的活性性，使代代谢不能能进行，导导致细胞胞处于休休眠状态态，严重重使细胞胞脱水，蛋蛋白质变变性坏死死。（3）空空气与氧氧化-还还原电位位：好氧微生生物需要要通气良良好、氧氧化-还还原电位位高的环环境；厌厌氧微生生物，要要求无氧氧、氧化化-还原原电位低低的环境境；兼性性厌氧微微生物，有有氧无氧氧环境都都可生长长，代谢谢途径不不同，产产物随之之而异。（4）酸酸碱度：细胞内内一般要要求中性性环境，如如外界环环境pHH值超过过微

10、生物物的耐受受范围，影影响微生生物的物物质吸收收、酶的的活性和和代谢途途径，并并抑制微微生物的的生长。（5）光光与辐射射：可见见光及红红外线波波长较短短的部分分，是光光能营养养型微生生物用于于光合作作用的能能源，但但强烈的的可见光光长时间间照射，由由于光氧氧化作用用，也可可杀伤微微生物。杀杀伤作用用最强的的是紫外外线、XX射线和和g射线。紫外线线对微生生物有明明显的致致死作用用，其中中波长在在25002880nmm波长范范围，杀杀菌力最最强，原原因是核核酸对紫紫外线有有强的吸吸收性，使使核酸形形成胸腺腺嘧啶二二聚体，干干扰核酸酸的复制制，轻则则突变，重重则死亡亡。经紫紫外线照照射的微微生物，损

11、损伤轻的的具有光光复活作作用。XX射线和和g射线，作作用于菌菌体，使使细胞蛋蛋白质、酶酶等重要要物质发发生氧化化，引起起细胞损损伤或死死亡。（6）渗渗透压：等渗透透压对细细胞有利利；当渗渗透压骤骤然改变变超过限限度，对对细胞有有害，甚甚至死亡亡，原因因是：在在高渗透透压下，细细胞易脱脱水，使使细胞内内水分渗渗到环境境中去，造造成细胞胞质浓缩缩，引起起质壁分分离，甚甚至死亡亡；低渗渗透压下下，水渗渗到细胞胞内，引引起细胞胞膨胀，破破裂或死死亡。10、乙乙醇杀菌菌作用的的机制是是：答：乙醇醇有很强强的脱水水性，易易改变细细胞膜的的渗透性性，损伤伤细胞壁壁，也能能侵入蛋蛋白质结结构，使使菌体蛋蛋白质

12、变变性，致致细胞死死亡。乙醇杀菌菌作用以以70%浓度为为最好，因因为高浓浓度会使使细胞脱脱水，表表面形成成硬膜，乙乙醇透入入受阻，所所以杀菌菌不如770%浓浓度效果果好。11、重重金属盐盐类具有有杀菌作作用，是是因为：答：重金金属盐类类对微生生物的致致死作用用，主要要在于重重金属离离子容易易和细胞胞蛋白质质结合，使使蛋白质质变性，或或与酶蛋蛋白的羧羧基（-SH）结结合使其其失去活活性。因因此，重重金属盐盐类都可可使蛋白白质沉淀淀，所以以被广泛泛用作杀杀菌剂。12、抗抗生素的的作用机机制：答：（11）抑制制细胞壁壁合成：对于细细菌，某某些抗生生素能选选择性地地抑制肽肽键的形形成，破破坏肽聚聚糖网

13、络络，阻抑抑细胞壁壁的合成成；对于于真菌某某些抗生生素能阻阻碍细胞胞壁中几几丁质的的合成，因因此具有有抗菌作作用。（2）损损伤细胞胞膜：某某些抗生生素能与与细胞膜膜结合，使使细胞膜膜功能的的完整性性受到破破坏，导导致细胞胞损伤，甚甚至死亡亡。（3）抑抑制蛋白白质合成成：某些些抗生素素能阻扰扰mRNNA与核核糖体的的结合，因因而抑制制菌体蛋蛋白质的的合成。（4）干干扰核酸酸的合成成：主要要是干扰扰破坏DDNA的的复制，阻阻碍RNNA的转转录过程程，对各各类细胞胞都有损损害。13、活活性污泥泥法处理理污水的的作用机机制：答：（11）一级级处理又称预处处理，主主要是通通过滤筛筛网及沉沉淀等物物理化学

14、学方法除除去污水水中的粘粘土、淤淤泥及其其他碎屑屑等污染染物。（2）形形成活性性污泥经过沉淀淀处理的的污水，进进入接种种有活性性污泥的的曝气池池，充分分混和并并通气，使使活性污污泥中的的动胶菌菌等大量量繁殖，形形成菌胶胶团絮凝凝物，随随后丝状状微生物物、原生生动物等等交织或或附着在在菌胶团团上，形形成绒絮絮状活性性污泥颗颗粒。（3）有有机污物物的吸附附分解活性污泥泥具有很很强的吸吸附和分分解有机机污物能能力，当当污水与与活性污污泥接触触时，其其中的有有机污物物很快被被吸附到到活性污污泥颗粒粒上，进进而被微微生物氧氧化分解解。（4）二二次沉淀淀处理结束束时，将将混合液液输入二二次沉淀淀池，使使活

15、性污污泥凝集集沉淀。（5）后后处理从二次沉沉淀池中中流出的的污水经经加氯消消毒后排排入江河河内。沉淀的活活性污泥泥，其中中一部分分再回到到曝气池池，作为为活性污污泥接种种物；其其余部分分浓缩进进入沼气气池进行行厌氧分分解处理理。14、厌厌氧发酵酵法处理理污水的的作用机机理：厌厌氧发酵酵法是在在密闭的的沼气池池中进行行的。（1）产产酸阶段段通过兼性性厌氧菌菌和少数数专性厌厌氧菌的的作用，将将蛋白质质、脂肪肪、碳水水化合物物水解为为有机酸酸、CHH4、H2等（2）产产甲烷阶阶段通过甲烷烷细菌的的作用，将将产酸阶阶段产生生的物质质分解或或合成CCH4、COO2等气体体。4H2+CO22 CHH4+2

16、HH2OCH3CCOOHH CH44+ CCO215、微微生物在在自然界界中的作作用：答：（11）在自自然界生生态系统统的物质质转化中中，具有有重要作作用；（2）在在土壤及及能源物物质的形形成过程程中，有有重要作作用；（3）再再保护环环境有很很重要作作用。16、微微生物的的育种方方法：答：（11）诱变变育种：用物理理、化学学因素处处理微生生物细胞胞，使细细胞内遗遗传物质质的结构构上发生生变化，从从而导致致微生物物遗传性性状的改改变。然然后，再再根据育育种的目目的要求求，挑选选出有实实用价值值的变异异菌株。（2）杂杂交育种种：由于于基因重重组能导导致微生生物获得得新的遗遗传性状状，因此此，具有有

17、有性生生殖或准准性生殖殖的真核核微生物物和能够够发生接接合的原原核微生生物，可可通过人人工杂交交的方法法获得新新种，人人工杂交交是使两两个同种种或同属属的个体体细胞进进行接合合，从中中筛选带带有新遗遗传性状状的个体体。（3）原原生质体体育种：包括原原生质体体诱变育育种和原原生质体体融合育育种。原原生质体体诱变育育种是以以原生质质体为出出发菌，用用物理、化化学的诱诱变剂处处理，然然后使细细胞壁再再生，从从中挑选选高产优优质的变变异菌株株。原生生质体融融合育种种是用人人工方法法强制二二亲本细细胞发生生融合，从从而可能能导致遗遗传重组组，产生生新型的的遗产后后代。（4）基基因工程程：建立立在分子子水

18、平上上的基因因人工转转移技术术。用人人工方法法在离体体条件下下得到所所需的外外源基因因，然后后把这个个外源基基因连接接在载体体DNAA上，并并通过转转化或其其他方法法把带有有外源基基因的载载体引入入受体细细胞，从从而可使使受体细细胞获得得外源基基因的遗遗传信息息，并进进行正常常的复制制表达和和遗传。17、原原核微生生物的基基因重组组方式：答：（11）接合合：两个个细菌细细胞接触触，相互互之间暂暂时沟通通，并传传递遗传传物质的的过程。F+FFF+F+HfrFHffr+FF(大多多数情况况下)FFFF+F（2）转转化：细细菌的无无细胞DDNA片片段转入入到另一一个细菌菌细胞上上，并使使后者获获得了

19、新新遗传性性状的现现象。（3）转转导：以以噬菌体体为媒介介，将供供体细胞胞的DNNA片段段携带到到受体细细胞中，从从而使受受体细胞胞中获得得了供体体细胞部部分遗传传性状的的现象。18、遗遗传物质质在微生生物细胞胞中的存存在形式式：答：遗传传物质在在真核微微生物和和原核微微生物细细胞中存存在方式式是不同同的。（1）真真核微生生物：酵酵母菌、霉霉菌、单单细胞藻藻类和原原生动物物等的遗遗传物质质DNAA主要以以染色体体的形式式存在于于细胞核核中，核核有核膜膜包围。在在染色体体中，DDNA与与蛋白质质相结合合。多数数真核微微生物细细胞中999%以以上的DDNA集集中在细细胞核中中，只有有少量的的DNA

20、A存在于于叶绿体体、线粒粒体、中中心体等等细胞器器中。（2）原原核微生生物：细细菌、放放线菌等等的DNNA在细细胞内是是以裸露露状态存存在的，它它不与蛋蛋白质结结合，也也没有核核膜包围围。原核核微生物物的细胞胞核仅仅仅是由DDNA缠缠绕在一一起形成成的一个个核区。一一个核一一般只有有一条双双链的DDNA分分子，呈呈环状或或线状。在在原核微微生物的的核外也也有一些些小型的的环状或或线状的的DNAA结构，分分散于细细胞质中中，叫质质粒。19、微微生物遗遗传的特特点：答：（11）有DDNA也也有RNNA高等生物物中，遗遗传物质质是DNNA。在在微生物物中，真真核微生生物及原原核微生生物的遗遗传物质质

21、也是DDNA，而而病毒中中有的是是DNAA，有的的是RNNA。（2）有有双链也也有单链链高等生物物中，遗遗传物质质DNAA都是双双链结构构。在微微生物中中，真核核微生物物和原核核微生物物的DNNA也是是双链；而病毒毒中，无无论是DDNA或或RNAA，都既既有双链链，也有有单链。20、DDNA分分子中的的碱基配配对原则则：答：A与与T配对对，G与与C配对对。21、诱诱变育种种的基本本程序。答：诱变变育种大大致可分分为诱变变阶段、初初筛阶段段、复筛筛阶段、鉴鉴定阶段段、培养养阶段等等。（1）诱诱变阶段段：是整整个诱变变育种的的基础，也也是能否否获得预预期效果果的成败败的关键键。出发发菌株的的选择：

22、通过诱诱变前的的探索性性试验确确定，对对诱变剂剂敏感的的菌株，变变异率和和正变率率都高的的菌株，可可用作出出发菌；诱变剂剂、剂量量和处理理方式的的选择：诱变剂剂的作用用是导致致微生物物发生突突变。通通过实验验，把诱诱变剂的的剂量与与死亡率率、变异异率、正正变率、负负变率作作曲线，根根据曲线线找出微微生物出出现的变变异率和和正变率率最高时时的处理理条件和和使用的的剂量范范围，即即为最佳佳的处理理方式和和最佳剂剂量。（2）初初筛阶段段：初筛筛是诱变变剂处理理后的第第一次筛筛选，也也是要在在大量的的处理菌菌中挑选选出发生生正变异异的菌株株，初筛筛阶段工工作量的的大，因因此要简简化初筛筛方法，主主要是

23、简简化培养养方法和和分析方方法。抗生素素菌种筛筛选中采采用琼脂脂块预选选法；蛋白酶酶菌种筛筛选中采采用酪素素培养平平皿预选选法；淀粉酶酶菌种筛筛选中采采用淀粉粉固体培培养基碘碘色反应应观察法法。（3）复复筛阶段段：复筛筛是以出出发菌株株作对照照的条件件下，反反复对初初筛中挑挑选到的的正变异异菌株进进行比较较，从中中选出有有进一步步试验价价值的变变异株。在在复筛中中，方法法必须严严格，产产物的分分析必须须力求准准确、详详尽。（4）鉴鉴定阶段段：为了了肯定新新获得的的菌株是是否有应应用和生生产的价价值，还还要在复复筛的基基础上对对新菌株株进行应应用试验验、毒性性试验、质质量分析析、性能能分析等等全

24、面的的考察比比较，才才能对新新菌株作作出结论论。（5）培培养条件件试验阶阶段：通通过鉴定定保留下下来的优优良菌株株，还必必须进行行全面、系系统的培培养条件件试验。试试验包括括：筛选选出最佳佳培养基基配方（如如碳源及及浓度、氮氮源及浓浓度、最最佳C/N浓度度、需要要生长因因子的种种类及浓浓度等）；最适的的种龄和和接种量量；各种种无机离离子（包包括金属属离子）对对生长、代代谢及发发酵的影影响；最最适的通通气量（包包括生长长的通气气量和发发酵的通通气量）；最适的的pH值值（包括括起始ppH、生生长及代代谢的最最适pHH、最终终的pHH等）；最适培培养时间间（包括括中间补补料的时时间）等等。最后进行行

25、扩大试试验，对对整个诱诱变育种种作出结结论。22、在在人工诱诱变后的的黑曲霉霉悬液中中筛选出出赖氨酸酸缺陷型型菌株的的实验方方案：答：(11)富集集：可采采用制霉霉菌素浓浓缩法、菌菌丝过滤滤法、差差别杀菌菌法中的的任意一一种。如如：制霉霉菌素浓浓缩法：将处理理液培养养在含制制霉菌素素的基本本培养基基中，野野生型因因生长而而被杀死死。(2)分分离：可可采用逐逐个检出出法、夹夹层培养养法、限限量补充充培养法法、影印印培养法法中的一一种。如如：逐个个检出法法：将菌菌悬液作作适当稀稀释后，涂涂布在补补充培养养基Lyss平皿上上，使长长出单个个菌落，然然后逐个个接种在在-、Lyss平皿的的相应位位置上培

26、培养，若若-上没有长长出菌落落，而在在Lyss相应位位置上长长出菌落落，则该该菌株即即为Lyys菌株。23、在在人工诱诱变后的的枯草杆杆菌悬液液中筛选选出亮氨氨酸缺陷陷型菌株株的实验验方案：答：（11）富集集：可采采用青霉霉素浓缩缩法、差差别杀菌菌法的任任意一种种。青霉素浓浓缩法：将处理理液培养养在青霉霉素的基基本培养养液中，野野生型因因生长而而被杀死死。差别杀菌菌法：将将处理液液培养在在基本培培养液中中，野生生型能够够生长，芽芽孢萌发发形成营营养细胞胞，然后后将培养养液加热热60、155分钟，杀杀灭野生生型营养养细胞。(2) 分离：可采用用逐个检检出法、夹夹层培养养法、限限量补充充培养法法、

27、影印印培养法法中的一一种。限量补充充培养法法：在-上上加入微微量的LLeu，由由Leuu于菌株株受到营营养的限限制，因因而只能能长成微微小菌落落，根据据菌落的的大小，即即可区分分出野生生型和LLeu。24、在在人工诱诱变后的的枯草杆杆菌悬液液中筛选选出蛋氨氨酸缺陷陷型菌株株的实验验方案：答：(11)富集集：可采采用青霉霉素浓缩缩法、差差别杀菌菌法的任任意一种种。青霉素浓浓缩法：将处理理液培养养在青霉霉素的基基本培养养液中，野野生型因因生长而而被杀死死。差别杀菌菌法：将将处理液液培养在在基本培培养液中中，野生生型能够够生长，芽芽孢萌发发形成营营养细胞胞，然后后将培养养液加热热80、155分钟，杀

28、杀灭野生生型营养养细胞。（2）分分离：可可采用逐逐个检出出法、夹夹层培养养法、限限量补充充培养法法、影印印培养法法中的任任意一种种。如：逐个检检出法：将菌悬悬液作适适当稀释释后，涂涂布在补补充培养养基Mett平皿上上，使长长出单个个菌落，然然后逐个个接种在在-、Mett平皿的的相应位位置上培培养，若若-上没有长长出菌落落，而在在Mett相应位位置上长长出菌落落，则该该菌株即即为Meet菌株。25、真真核微生生物准性性杂交的的过程分分为三个个阶段：答：（11）体细细胞融合合，进行行质配，形形成异核核体细胞胞（菌丝丝）；（2）异异核体细细胞在质质配的基基础上进进行核配配。两个个核融合合成为二二倍体

29、，称称为杂合合二倍体体；（3）杂杂合二倍倍体细胞胞在有丝丝分裂时时产生少少量的重重组体和和非整倍倍体或单单倍体等等分离子子。在准性生生殖过程程中，无无论单倍倍体菌丝丝或异核核体菌丝丝、杂合合二倍菌菌丝都能能进行无无性繁殖殖，产生生分生孢孢子。26、病病原菌的的毒力包包括的内内容：荚膜侵袭力毒力 酶类外毒素毒素内毒素27、病病原微生生物传染染途径：答：（11）呼吸吸道传染染。如：结核、白白喉、百百日咳、流流感等。（2）消消化道传传染。如如：伤寒寒、痢疾疾、肝炎炎、霍乱乱等。（3）接接触传染染。如：麻风、炭炭疽等。（4）节节肢动物物媒介传传染。如如：乙型型脑炎、蚤蚤传播鼠鼠疫、恙恙虫幼虫虫传播恙恙

30、虫病等等。28、机机体获得得抗体的的途径：答：（11）患传传染病或或隐性感感染。（2）人人工预防防接种。（3）通通过母体体胎盘获获得。29、微微生物命命名的基基本原则则：答：属名名加种名名。属名，词词头第一一个字母母必须大大写，是是拉丁文文名词或或拉丁化化的名词词；后一一个是种种名，则则需小写写，是拉拉丁文名名词或拉拉丁化的的形容词词。30、高高压灭菌菌法升压压前要将将冷空气气排尽，因因为：答：因为为混有空空气的水水蒸汽不不是纯蒸蒸汽，当当达到灭灭菌的压压力时，其其温度低低于纯蒸蒸汽的温温度。高高压蒸汽汽灭菌是是利用高高温致死死微生物物，由于于达不到到要求的的温度就就不能杀杀灭微生生物，因因此

31、升压压前务必必将冷空空气排尽尽。31、间间歇灭菌菌法的原原理：答：微生生物的营营养细胞胞和休眠眠细胞对对温度的的敏感性性不同，营营养细胞胞是不耐耐热的，在在801000水中330分钟钟即可完完全杀死死。因此此只要把把各种休休眠细胞胞转变为为营养细细胞，就就可在8801100的条件件下把他他们杀死死。间歇歇灭菌就就是基于于以上原原理进行行的。32、冷冷冻干燥燥保藏法法应用举举例：答：（11）牛奶奶脱脂：取鲜牛牛奶一瓶瓶，于烧烧杯中煮煮沸、静静置冷却却，去除除浮在上上层的脂脂肪。重重复操作作三次后后，用脱脱脂棉花花过滤；也可将将鲜牛奶奶以30000rrpm离离心几分分钟，去去除上层层脂肪。重重复离

32、心心几次，即即可得脱脱脂牛奶奶。（2）保保护剂灭灭菌：将将脱脂牛牛奶装入入三角烧烧瓶，塞塞上棉塞塞，用00.5kkg/mm2蒸汽压压力下灭灭菌300分钟。（3）无无菌试验验：将灭灭菌牛奶奶放入332恒温箱箱培养33天，检检查灭菌菌是否彻彻底。（4）制制备孢子子悬液或或菌悬液液：将经经检查无无菌的脱脱脂牛奶奶加入已已培养好好的菌种种斜面，如如是产孢孢子的菌菌，制成成孢子悬悬液，不不产孢子子的菌，制制成菌悬悬液。（5）准准备安瓿瓿管：取取1020支支安瓿管管，洗净净、烘干干、配棉棉塞，用用牛皮纸纸包好，于于1600干热灭灭菌2小小时，备备用。（6）分分装安瓿瓿管：用用无菌吸吸管或较较长的毛毛细滴管

33、管，将菌菌悬液或或孢子悬悬液按无无菌操作作加入已已灭菌的的安瓿管管中，装装量不超超过安瓿瓿球部的的1/33。（7）预预冻：将将安瓿管管放入干干冰酒精精中进行行预冻，也也可放低低温冰箱箱中（3545）冻结结。（8）真真空干燥燥：将冻冻结的安安瓿管放放在冰盐盐水中，再再连接在在接有PP2O5作吸水水剂的高高真空泵泵上抽干干。脱脂脂牛奶干干燥后，呈呈白色块块状，轻轻轻振动动安瓿管管，即可可脱离管管壁。（9）封封口保存存：待抽抽干（一一般需88100小时）后后，将安安瓿管从从冰盐水水中取出出，再在在室温下下继续抽抽真空半半小时，然然后在真真空条件件下用酒酒精灯在在安瓿管管的颈部部熔化封封口，放放入冰箱

34、箱中保存存。特点：因冷冻冻干燥保保藏法同同时具备备低温、干干燥、真真空（缺缺氧）条条件，因因此，用用此法保保藏菌种种的效果果最好，菌菌种的保保藏最长长可达220年以以上。此法适适合于各各类微生生物的保保藏，包包括病毒毒和噬菌菌体。33、工工业生产产上深层层培养发发酵罐的的三级种种子培养养过程为为：答：试管管或茄子子瓶斜面面 一级级种子罐罐对数生生长期 二级级种子罐罐对数生生长期发酵罐罐34、从从土壤中中分离产产a-淀粉酶酶活力较较高的细细菌菌株株的实验验方案为为：（1）采采样：选选择含淀淀粉较多多的土壤壤如淀粉粉厂土壤壤。预备备一只无无菌三角角瓶，去去掉表层层几厘米米土壤，用用无菌铲铲迅速铲铲

35、取一定定量土壤壤装入三三角瓶中中。（2）样样品稀释释：预备备一只带带有玻璃璃珠和999mll稀释液液的无菌菌三角瓶瓶，用无无菌工具具称取一一克土壤壤样品加加入三角角瓶内，振振荡155分钟，制制成单孢孢子悬液液。将单单孢子悬悬液作适适当系列列稀释。（3）平平板培养养：采用用涂布法法或划线线法分离离纯培养养基。培培养基可可采用选选择培养养基：在在淀粉培培养基中中加入少少量制霉霉菌。采采用淀粉粉培养基基碘色反反应观察察法，选选择透明明圈较大大的单个个菌落移移入斜面面。另：由于于产a-淀粉粉酶的菌菌株多是是芽孢杆杆菌，可可直接将将单孢子子悬液加加热至880，处理理15分分钟，然然后作适适当系列列稀释。

36、35、苏苏云金芽芽孢杆菌菌杀虫原原理：答：苏云云金芽孢孢杆菌能能产生多多种对虫虫体有害害的毒素素。当害害虫食入入含有芽芽孢和伴伴孢晶体体的苏云云金芽孢孢杆菌后后，晶体体毒素经经虫体肠肠液分解解，转化化为有活活性的毒毒素，并并使害虫虫的中肠肠麻痹而而引起瘫瘫痪，停停止进食食，随后后细菌穿穿过被破破坏的肠肠壁，进进入血腔腔大量繁繁殖，导导致害虫虫加速死死亡。36、氨氨基酸的的生产方方法：（1）野野生型菌菌株发酵酵法：如如Gluu的生产产。（2）营营养缺陷陷型突变变株发酵酵法：如如赖氨酸酸的生产产就是用用高丝氨氨酸缺陷陷型发酵酵制得；（3）添添加前体体法：由由前体a-氨氨基丁酸酸生产异异亮氨酸酸；（

37、4）酶酶转化法法：如由由二氨基基庚二酸酸生产赖赖氨酸。37、肠肠道菌中中的大肠肠杆菌、伤伤寒沙门门氏菌和和气杆菌菌的鉴别别方法为为：答：进行行混合酸酸发酵的的主要是是肠道菌菌，如大大肠杆菌菌、伤寒寒沙门氏氏菌、气气杆菌等等。这些些肠杆菌菌在形态态上很相相似，可可根据它它们在发发酵葡萄萄糖时产产生的不不同产物物来进行行区别、鉴鉴定。例例如大肠肠杆菌在在酸性条条件下发发酵葡萄萄糖时，能能产生大大量二氧氧化碳气气体，而而伤寒沙沙门氏菌菌则只产产生酸不不产生气气体，根根据此现现象可将将这两种种菌区分分开来；大肠杆杆菌和气气杆菌比比较时，大大肠杆菌菌产酸多多，气杆杆菌产酸酸少。在在葡萄糖糖发酵液液中加入

38、入甲基红红指示剂剂就可观观察到不不同的结结果：大大肠杆菌菌发酵过过程中产产酸多，甲甲基红由由黄变红红，气杆杆菌发酵酵中指示示剂颜色色不变。另另外，气气杆菌在在发酵过过程中，能能将丙酮酮酸缩合合为乙酰酰乳酸，在在脱羧为为3-羟羟基丁酮酮。后者者可在碱碱性条件件下与空空气中的的氧反应应生成二二乙酰，二二乙酰能能与蛋白白胨培养养基中胍胍基起反反映，生生成红色色化合物物，使培培养液变变成红色色，这个个反应称称为V.P.反反应。38、在在人工诱诱变后的的黑曲霉霉中筛选选出组氨氨酸缺陷陷型菌株株的实验验方案：答：(11)富集集：可采采用制霉霉菌素浓浓缩法、菌菌丝过滤滤法、差差别杀菌菌法中的的任意一一种。制

39、霉菌菌素浓缩缩法：将将处理液液培养在在含制霉霉菌素的的基本培培养液中中，野生生型因生生长而被被杀死。菌丝过过滤法：将处理理液培养养在基本本培养液液中，野野生型能能够生长长长出菌菌丝，然然后将培培养液用用滤器进进行过滤滤。差别杀杀菌法：将处理理液培养养在基本本培养液液中，野野生型能能够生长长长出菌菌丝，然然后将培培养液加加热588、4分分钟，杀杀灭菌丝丝营养细细胞。（2）分分离：可可采用逐逐个检出出法、夹夹层培养养法、限限量补充充培养法法、影印印培养法法中的任任意一种种。逐个检检出法：将菌悬悬液作适适当稀释释后，涂涂布在补补充培养养基Hiss平皿上上，使长长出单个个菌落，然然后逐个个接种在在-、

40、Hiss平皿的的相应位位置上培培养，若若在-上没有长长出菌落落，而在在Hiss相应位位置上长长出菌落落，则该该菌株即即为Hiis菌株。夹层培培养法：将菌悬悬液作适适当稀释释后，涂涂布在基基本培养养基-平皿上上培养，待待长出菌菌落后作作标记，然然后在其其上倾上上Hiss培养基基补充培培养，新新长出的的菌落即即是Hiis菌株形形成的菌菌落。影印接接种法：将菌悬悬液作适适当稀释释后，涂涂布在补补充培养养基Hiss平皿上上，若在在-上没有长长出菌落落，而在在Hiss相应位位置上长长出菌落落，则该该菌落即即是Hiis菌株形形成的菌菌落。限量补补充培养养法：在在-上加入入微量HHis，由由于Hiis菌株受受到营养养的限制制，因而而只能长长成微小小菌落，根根据菌落落的大小小，即可可区出野野生型和和Hiss。