生物实验相关试剂、技术、方法fyto.docx

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1、生物实验验相关试试剂、技技术、方方法www.3600gaookaoo.一、常用用仪器、试试剂或药药品的用用途1、NNaOHH：用于于吸收CCO2或改变变溶液的的pH2、CCa(OOH)22：鉴定定CO223、CCaCll2：提高高细菌细细胞壁的的通透性性4、HHCl：解离（115%）或或改变溶溶液的ppH5、NNaHCCO3：提供供CO22、作为为酸碱缓缓冲剂6、酸酸碱缓冲冲剂（NNa2CO3/NaaHCOO3，Naa2HPPO4/NaHH2POO4）：用于调调节溶液液pH7、NNaCll：配制制生理盐盐水（00.9%）或用用于提取取DNAA（0.14MM或2MM)8、琼琼脂：激激素或其其他物

2、质质的载体体或培养养基，用用于激素素的转移移或培养养基9、酒酒精：用用于消毒毒(755%)、提提纯DNNA（995%）、叶叶片脱色色、配制制解离液液（955%的冷冷酒精）及及洗去浮浮色（550%）100、蔗糖糖：配制制蔗糖溶溶液，测测定植物物细胞液液浓度或或观察质质壁分离离和复原原111、二苯苯胺：用用于DNNA的鉴鉴定（沸沸水浴，蓝蓝色）122、甲基基绿：检检测DNNA，呈呈绿色133、吡罗罗红：检检测RNNA，呈呈红色155、斐林林试剂（甲甲液0.1g/mL NaOOH、乙乙液0.05gg/mLLCuSSO4）/班班氏试剂剂：鉴定定可溶性性还原性性糖（沸沸水浴，砖砖红色沉沉淀）166、双缩

3、缩脲试剂剂：用于于蛋白质质的鉴定定（紫色色）177、苏丹丹染液液(橘黄黄色）和和苏丹染液(红色）：用于脂脂肪鉴定定188、碘液液：用于于鉴定淀淀粉（变变蓝色）199、龙胆胆紫溶液液或醋酸酸洋红：碱性染染料，用用于染色色体染色色时，前前者呈深深蓝色，后后者呈红红色200、改良良苯酚品品红染液液：检测测染色体体，红色色211、健那那绿B：检测线线粒体，专专一性让让线粒体体染色呈呈蓝绿色色222、重铬铬酸钾溶溶液：检检测酒精精，呈灰灰绿色233、溴麝麝香酚蓝蓝水溶液液：检测测CO22，由蓝蓝变绿再再变黄244、吲哚哚酚试剂剂：用于于维生素素C的鉴鉴定255、伊红红美蓝：鉴定有有无大肠肠杆菌的的存在2

4、66、亚甲甲基蓝：用于活活体染色色或检测测污水中中的耗氧氧性细菌菌（细菌菌的氧化化可使之之褪色）277、pHH试纸：检验物物质的酸酸碱性，如如乳酸288、卡诺诺氏固定定液：用用于细胞胞有丝分分裂根尖尖的固定定299、解离离液（55%盐酸酸和955%酒精精按1：1的比比例配成成）：有有丝分裂裂中根尖尖的分离离与固定定300、层析析液：用用于叶绿绿素的分分离，主主要类型型：由由20份份石油醚醚（在660990下下分馏出出来的）、22份丙酮酮和1份份苯混合合而成；955%的酒酒精；93号号汽油；9份份体积分分数为995%的的酒精和和1份苯苯混合；汽油油或四氯氯化碳加加少许无无水硫酸酸钠。311、20

5、0%新鲜鲜肝脏研研磨液：含有HH2O22酶，可可促进HH2O22分解产产生O22322、无土土营养液液：用于于植物无无土栽培培333、柠檬檬酸钠：血液抗抗凝剂355、秋水水仙素（CC22H25O6N）：用于单单倍体育育种，作作用机理理是可抑抑制植物物细胞有有丝分裂裂中纺缍缍体的形形成，可可导致细细胞内染染色体数数目加倍倍。是119377年发现现的，是是从百合合科植物物秋水仙仙的种子子和球茎茎中提取取出来的的一种植植物碱。它它是白色色或淡黄黄色的粉粉末或针针状结晶晶，有剧剧毒，使使用时应应特别注注意。366、滤纸纸：过滤滤或纸层层377、纱布布、尼龙龙布：过过滤，遮遮光388、云母母片：阻阻止生

6、长长素传递递399、微电电流计：测量神神经元受受刺激时时，神经经元细胞胞内或细细胞间的的兴奋传传递情况况二、实验验技术1、光光学显微微镜的使使用：包包括显微微镜的取取送、放放置、旋旋转、对对光（反反光镜及及光圈的的使用）、低低倍观察察、高倍倍观察、镜镜头的擦擦拭；显显微镜的的放大倍倍数（是是物体的的长和宽宽，不是是面积，也也不是体体积）、焦焦距问题题、物镜镜离装片片的远近近、准焦焦螺旋的的使用、显显微镜使使用时物物象移动动方向、显显微镜使使用时异异物的判判断（通通常通过过移动玻玻片、转转动转换换器或旋旋转目镜镜来判断断）。2、临临时装片片、切片片和涂片片的制作作：适用用于显微微镜观察察，凡需需

7、在显微微镜下观观察的生生物材料料，必须须先制成成临时装装片、切切片和涂涂片，如如观察植植物细胞胞的质壁壁分离和和复原中中要制作作洋葱表表皮细胞胞的临时时装片，在在生物组组织中脂脂肪的鉴鉴定中要要制作花花生种子子的切片片，在观观察动物物如人体体血液中中的细胞胞中要制制作血液液的涂片片等等。3、研磨磨，过滤滤：适用用于从生生物组织织中提取取物质如如酶、色色素等，要要求学生生熟练掌掌握研磨磨、过滤滤的方法法，如研研磨时要要先将生生物材料料切碎，然然后加入入摩擦剂剂（常用用二氧化化硅）、提提取液和和其它必必要物质质，充分分研磨之之后，往往往要进进行过滤滤，以除除去渣滓滓，所用用过滤器器具则根根据需要要

8、或根据据试题中中提供的的器材加加以选用用，如可可用滤纸纸、纱布布、脱脂脂棉、尼尼龙布等等。4、解解离技术术：适用用于破坏坏细胞壁壁，分散散植物细细胞，制制作临时时装片。5、恒恒温技术术：适用用于有酶酶参加的的生化反反应，一一般用水水浴或恒恒温箱，根根据题目目要求选选用。6、层层析技术术：适用用于溶液液中物质质的分离离。主要要步骤包包括制备备滤纸条条、划滤滤液细线线、层析析分离等等。7、植植物叶片片中淀粉粉的鉴定定：适用用于光合合作用的的有关实实验，主主要步骤骤包括饥饥饿处理理、光照照、酒精精脱色、加加碘等。8、根根尖培养养技术：有丝分分裂实验验的材料料9、小小动物饲饲养技术术：饲养养小白鼠鼠等

9、实验验动物100、无土土栽培技技术：用用于植物物必需元元素与非非必需元元素的鉴鉴定111、微电电流测量量技术：用于刺刺激神经经元细胞胞时，兴兴奋的传传递情况况。刺激激神经元元的某一一点时，相相对于该该神经元元的刺激激点而言言，其两两侧均有有电位变变化（用用两表则则可在两两侧任意意位置，用用一表测测定则相相对于受受刺激点点不等距距位置有有两次偏偏转）可可证明在在同一神神经元内内具有双双向传递递性；刺刺激突触触前神经经元时，突突触后神神经元可可测得电电位变化化，刺激激突触后后神经元元时，突突触前神神经元测测不到电电位变化化，可证证明突触触传递具具有单向向传递性性。122、pHH控制技技术：利利用缓

10、冲冲液调节节pH，确确保实验验环境的的pH相相对稳定定。三、实验验方法1、显显微观察察法：如如观察细细胞有丝丝分裂观观察叶绿绿体和细细胞质流流动用显显微镜观观察多种种多样的的细胞等等。2、观观色法：如生物物组织中中还原糖糖、脂肪肪和蛋白白质的鉴鉴定观察察动物毛毛色和植植物花色色的遗传传DNAA和RNNA的分分布等。3、同同位素标标记法（元元素示踪踪法）：如噬菌菌体浸染染细菌的的实验恩恩格尔曼曼实验等等。4、补补充法：如用饲饲喂法研研究甲状状腺激素素，用注注射法研研究动物物胰岛素素和生长长激素，用用移植法法研究性性激素等等。5、摘摘除法：如用阉阉割法、摘摘除法研研究性激激素、甲甲状腺激激素或生生

11、长激素素的作用用雌蕊受受粉后除除去正在在发育着着的种子子等。6、杂杂交法：如植物物的杂交交、测交交实验等等。7、化化学分析析法：如如番茄对对Ca和和Si的的选择吸吸收叶绿绿体中色色素的提提取和分分离等。8、理理论分析析法：如如大、小小两种草草履虫的的竞争实实验植物物向性动动物的研研究等。9、模模拟实验验法：如如渗透作作用的实实验装置置分离定定律的模模拟实验验等。100、引流流法：临临时装片片中液体体的更换换，用吸吸水纸在在一侧吸吸引，于于另一侧侧滴加换换进的液液体。11、实实验条件件的控制制方法增增加水中中O2：泵入入空气或或吹气或或放入绿绿色植物物；减减少水中中O2：容器器密封或或油膜覆覆盖

12、或用用凉开水水；除除去容器器中COO2：NaaOH溶溶液、NNa2CO3溶液；除除去叶中中原有淀淀粉：置置于黑暗暗环境（饥饥饿）；除除去叶中中叶绿素素：酒精精水浴加加热（酒酒精脱色色）；除除去植物物光合作作用对呼呼吸作用用的干扰扰：给植植株遮光光；单单色光的的获得：棱镜色色散或透透明薄膜膜滤光；血血液抗疑疑：加入入柠檬酸酸钠（去去掉血液液中的CCa2 ）；线线粒体提提取：细细胞匀浆浆离心；骨骨无机盐盐的除去去：HCCl溶液液；消消除叶片片中脱落落酸的影影响：去去除成熟熟的叶片片；消消除植株株本身的的生长素素：去掉掉生长旺旺盛的器器官或组组织（芽芽、生长长点）；补补充植物物激素的的方法：涂抹、喷

13、喷洒、用用含植物物激素的的羊毛脂脂膏或琼琼脂作载载体；补补充动物物激素的的方法：口服（饲饲喂）、注注射；阻阻断植物物激素传传递：插插云母片片法。12、实实验结果果的显示示方法实实验现象象的观测测指标光合作作用：OO2释放放量或CCO2吸吸收量或或有机物物生成量量。例：水生植植物可依依气泡的的产生量量或产生生速率；离体叶叶片若事事先沉入入水底可可依单位位时间内内上浮的的叶片数数目；植植物体上上的叶片片可依指指示剂（如如碘液）处处理后叶叶片颜色色深浅。呼呼吸作用用：O22吸收量量或COO2释放量量或有机机物消耗耗量原原子或分分子转移移途径：同位素素标记法法或元素素示踪法法细细胞液浓浓度大小小或植物

14、物细胞活活性：质质壁分离离与复原原溶溶液浓度度的大小小：U型型管 半半透膜甲甲状腺激激素作用用：动物物耗氧量量、发育育速度等等生生长激素素作用：生长速速度(体体重、体体长变化化)胰胰岛素作作用：动动物活动动状态（是是否出现现低血糖糖症状昏昏迷）胰胰高血糖糖素作用用：尿糖糖的检测测（在尿尿液中加加班氏试试剂进行行沸水浴浴，看是是否出现现砖红色色沉淀）菌菌量的多多少：菌菌落数、亚亚甲基蓝蓝褪色程程度生生长素作作用及浓浓度高低低的显示示：可通通过去除除胚芽鞘鞘后补充充生长素素后的胚胚芽生长长情况来来判断（弯弯曲、高高度）淀淀粉：碘碘液（变变蓝色）还还原性糖糖：斐林林试剂/班氏试试剂（沸沸水浴后后生成

15、砖砖红色沉沉淀）CCO2：Caa(OHH)2溶液（澄澄清石灰灰水变浑浑浊)乳乳酸：ppH试纸纸OO2：余烬烬复燃蛋蛋白质：双缩脲脲试剂（紫紫色）脂脂肪：苏苏丹染染液(橘橘黄色）；苏丹染液(红色）DDNA：二苯胺胺（沸水水浴，蓝蓝色）、甲甲基绿（染染色后，呈呈绿色）RRNA：吡罗红红（呈红红色）、苔苔黑酚乙乙醇溶液液四、实验验原则1、对照照原则阳性性对照：给对照照组施以以已经被被证明是是一种有有效的处处理因素素。空白白对照：指不做做任何实实验实验验的对照照组或不不给对照照组以任任何处理理因素。值值得注意意的是，不不给对照照组任何何处理因因素是相相对实验验组而言言的，实实际上对对照组还还是要做做一

16、定的的处理，只只是不加加实验组组的处理理因素，或或者说相相对于实实验组而而言，除除实验变变量外，别别的处理理与实验验组完全全相同。空空白对照照能明白白地对比比和衬托托实验组组的变化化和结果果，增加加说服力力。通常常未经实实验因素素处理的的对象组组为对照照组，经经实验因因素处理理的对象象组为实实验组；或处于于正常情情况下的的对象组组为对照照组，未未处于正正常情况况下的对对象组为为实验组组。自身身对照：指对照照组和实实验组都都在同一一研究对对象上进进行，不不另设对对照。自自身对照照方法简简便，关关键是看看清实验验处理前前后现象象变化的的差异。实实验处理理前的对对象状况况为对照照组，实实验处理理后的

17、对对象变化化则为实实验组。相互互对照：不另设设对照组组，而是是几个实实验组相相互对比比对照，其其中每一一组既是是实验组组也是其其他级别别的对照照组。在在等组实实验法中中，若不不设空白白对照，则则大都是是运用相相互对照照。相互互对照较较好地平平衡和抵抵消了无无关变量量的影响响，使实实验结果果具有说说服力。条件件对照：指虽然然给对象象施以某某种实验验处理，但但是这种种处理是是作为对对照意义义的，给给定的处处理因素素正是为为了保证证实验中中对照组组与实验验组相比比只是少少了实验验变量的的影响，或或者说这这种处理理不是实实验假设设所给定定的实验验变量意意义的。通通常施以以条件因因素的对对象组为为对照组

18、组，施以以实验因因素的对对象组为为实验组组。标准准对照：生物生生理、生生化的某某些项目目也都有有相应的的标准，将将观察测测定的实实验数值值与规定定的标准准值相比比较，以以确定其其正常与与否的对对照方法法。2、单一一变量原原则理解解该原则则，应弄弄清几组组变量：即实验验变量与与反应变变量，无无关变量量与额外外变量。实实验变量量与反应应变量：a实实验变量量是研究究者主动动操纵的的条件和和因子，是是作用于于实验对对象的刺刺激变量量（也称称自变量量），自自变量须须以实验验目的和和假设为为依据，应应具有可可变性和和可操作作性。bb反应应变量（又又称因变变量或应应变量），是是随自变变量变化化而产生生反应或

19、或发生变变化的变变量，反反应变量量是研究究是否成成功的证证据，应应具可测测性和客客观性。cc.二者者关系：实验变变量是原原因，反反应变量量是结果果，即具具因果关关系无关变变量与额额外变量量：无关关变量又又称干扰扰变量、控控制变量量，是指指与研究究目标无无关，但但却影响响研究结结果的变变量。额额外变量量，指实实验中由由于无关关变量所所引起的的变化和和结果。无无关变量量是原因因，额外外变量是是结果，二二者也具具有因果果关系。为为确保实实验结果果的准确确，实验验者应严严格控制制无关变变量，防防止额外外变量的的出现，否否则实验验结果的的真实性性无法得得到认定定，如我我们常在在实验过过程中强强调选取取生

20、长状状况相同同的幼苗苗数量大大小相同同的种子子置于相相同并适适宜条件件下培养养加入等等量的清清水等均均是为了了控制无无关变量量对实验验结果的的干扰。所谓谓单一变变量原则则，就是是要尽可可能控制制无关变变量的作作用，以以确保实实验变量量的唯一一性。【案案例剖析析】例如如，生物物课本内内温度对对酶活性性影响的的实验中中：实验验变量是是低温（冰冰），适适温(660），高高温（沸沸水）；酶的活活性变化化即反应应变量；试管的的洁净度度，淀粉粉酶的稀稀释度，可可溶性淀淀粉的浓浓度，碘碘液的量量和浓度度，温度度处理时时间，操操作程序序等是无无关变量量。实验验中不论论有几个个实验变变量，都都应做到到每个自自变

21、量对对应一个个因变量量，此外外还要做做到操作作规范。在在实验设设计、实实施的全全过程中中，应严严格操纵纵实验变变量，严严格控制制无关变变量，尽尽可能消消除误差差，获取取较为精精确的反反应变量量。3、等量量原则实验验中要做做到单一一变量（即即实验变变量）外外，其它它变量需需注意等等量原则则，即：生生物材料料要相同同：即所所用生物物材料的的数量、质质量、长长度、体体积、来来源和生生理状况况等方面面要尽量量相同或或至少大大致相同同。实实验器具具要相同同：即试试管、烧烧杯、水水槽、广广口瓶等等器具的的大小、型型号、洁洁净度等等相同。实实验试剂剂要相同同：即试试剂的成成分、浓浓度、体体积要相相同。即即使

22、使用用不同试试剂也要要注意体体积相同同。处处理方法法要相同同：保温温或冷却却、光照照或黑暗暗、搅拌拌或振荡荡都要一一致。有有时尽管管某种处处理对对对照实验验来说，看看起来似似乎是毫毫无意义义的，但但还是要要作同样样的处理理。4、科科学原则则：即实实验方案案的设计计要科学学，包括括原理、操操作、程程序、方方法等。5、安安全原则则：尽量量避免危危险性操操作（如如确需使使用，应应注明，防防止环境境污染和和人身伤伤害）。如：在叶绿绿体色素素的提取取和分离离实验中中，使用用丙酮时时，强调调指出：用滤纸纸打孔盖盖住研钵钵进行研研磨以减减少挥发发。6、可可行原则则：实验验设计应应注意取取材方便便、药品品便宜

23、、装装置简单单、经济济实用、步步骤简洁洁、操作作性强、花花时经济济，在现现有实验验条件下下能够完完成。五、操作作设计注注意事项项1、应应注意实实验选材材的合理理性如：所选选材料应应有利于于实验现现象的观观察：如如可溶性性还原糖糖的鉴定定中应选选择白色色或近白白色的材材料；所所选材料料应容易易获得：尽可能能选择无无明显季季节性、地地域性的的材料；所所选材料料应价格格便宜2、应应注意操操作细节节的合理理性如：溶液液或培养养基灭菌菌后是否否要冷却却后使用用？冷却却后向向淀粉糊糊中加了了唾液后后是否要要振荡试试管呢？要酶酶促反应应的试管管如何加加热？是是直接加加热，还还是水浴浴加温？水浴加加热用用酒精

24、溶溶解叶中中叶绿素素时，酒酒精直接接或隔水水加热？隔水加加热使使甲状腺腺激素、胰胰岛素、生生长激素素进入动动物体内内的方法法应如何何操作？是饲喂喂，还是是注射？甲状腺腺激素饲饲喂，胰胰岛素、生生长激素素注射不不同的情情况下要要合理地地选用不不同的水水。如：清水、池池水、凉凉开水、蒸蒸馏水、生生理盐水水。3、应应注意操操作顺序序的合理理性例：为验证证pH对对唾液淀淀粉酶活活性的影影响。在在如下实实验步骤骤中，最最佳顺序序应该是是在在1-55号试管管中分别别加入00.5%的淀粉粉液2mmL；加加完淀粉粉液后，向向各试管管中加入入相应的的缓冲液液3mLL，使各各试管中中反应液液的pHH依次稳稳定在5

25、5.000、6.20、66.800、7.40、88.000；分分别向11-5号号试管中中加入00.5%唾液11mL，然然后进行行37恒温水水浴；(反应过过程中，每每隔1mmin从从第3号号试管中中取出一一滴反应应液，滴滴在比色色板上，加加一滴碘碘液显色色，待呈呈橙黄色色时，立立即取出出5支试试管，加加碘液显显色并比比色，记记录结果果；A BB C D答案案：C4、应应注意实实验方案案的可操操作性例：为验证证镁是植植物生活活的必需需元素。请请写出你你的设计计思路。方案案1：将将幼苗中中运载MMg2 的载体体去掉方案案2：用用去掉镁镁的砂性性土壤培培养幼苗苗方案案3：将将植物体体内的MMg2 分离

26、出出来方案案4：取取生长状状况一致致的大豆豆幼苗，用用符合实实验要求求的容器器，对照照组盛有有含植物物必需的的各种矿矿质元素素的完全全培养液液，实验验组盛有有不含镁镁离子的的完全培培养液，两两组置于于相同的的适宜条条件下培培养；观观察比较较两组植植物的生生长发育育情况。方案案1、22、3均均缺乏可可操作性性，正确确思路应应该是方方案4。六、实实验类型型的区分分与实验验结果的的预测和和分析1、验验证性实实验与探探究性实实验的判判断实验验目的不不同：验验证性实实验旨在在通过实实验让学学生熟悉悉固有的的现象，增增加对已已有知识识的掌握握；探究究性实验验的目的的是在假假设的指指引下获获取支持持假设或或

27、推翻假假设的科科学证明明，并对对实验所所得现象象进行分分析以获获得具有有价值的的结论。实验验步骤有有别：验验证性实实验往往往是在已已有的实实验步骤骤设计框框架下进进行操作作的过程程，操作作者的任任务是严严格按照照设计步步骤进行行准确的的操作，求求得预想想中的实实验结果果，实验验者重在在理解实实验原理理、掌握握操作要要领和实实验的一一些基本本技能。探探究性实实验的步步骤在实实验者的的设计中中占有主主要的地地位，什什么样的的步骤取取决于实实验者对对探究性性实验目目的理解解程度，对对实验结结果的假假想的细细致程度度。实验验者在自自己的假假设中通通过创新新思维活活动设计计出实验验步骤并并完成操操作，既

28、既有对步步骤的期期望也有有对操作作精确度度的自我我要求，目目标是获获得假设设的成功功。实验验结果不不同：验验证性实实验的实实验结果果是已知知的，探探究性实实验的结结果是未未知的。2、区区别不同同实验，全全面预测测结果：可能的的结果都都要预测测到。对对探究性性实验的的结果的的预测和和分析要要从是不不是和中中间三个个方面进进行；而而验证性性实验结结果的预预测和分分析则一一般从是是否两个个方面进进行。3、正正确分析析实验现现象，找找出实验验原理、实实验现象象的内在在联系，给给出实验验结论。七、实验验语言组组织1、应注注意实验验组别的的编号如：凡实验验中涉及及到两组组或两组组以上，所所用器材材需用11

29、、2、33或A、BB、C或或甲、乙乙、丙等等加以编编号便于于区分。2、应注注意分步步描述实实验步骤骤如：第一步步；第二二步；11、；22、；3、对在在量上难难以准确确描述的的，应尽尽可能用用定性的的语言表表达如：一段时时间适宜宜温度适适量的一一定量的的用相同同型号的的选取生生长状况况相同的的大小数数量相同同的等体体积的置置于相同同且适宜宜条件下下加入等等量的等等。4、叙说说中注意意语言规规范、表表达准确确，不用用含糊的的口语如：盖玻片片不说成成薄的玻玻璃片；等量的的不说成成一样多多的；振振荡不说说成晃动动摇动；加碘后后，不变变蓝不说说成无色色或没有有颜色变变化；不不变不说说成无现现象等。5、注意意避免词词不达意意如：如图二二，有些些学生描描述为分分别在甲甲、乙两两试管中中加入AA、B物物质，如如此表达达则成了了图三的的含义，显显然与图图二不符符。准确确的描述述应为在在甲乙两两支试管管中分别别加入AA、B物物质或在在甲试管管中加入入A物质质，乙试试管中加加入B物物质。6、选用用表格、曲曲线等形形式进行行具体、准准确表达达若需需使用表表格、曲曲线时，应应注意表表格设计计合理、曲曲线描绘绘准确，做做到具体体、实用用、直观观，易理理解。摘自：wwww.3600gaookaoo窗体顶端端窗体底端端