SN∕T 4723-2016 根结线虫属（非中国种）检疫鉴定方法(出入境检验检疫).pdf

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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4723-2016 根结线虫属(非中国种)检疫鉴定方法Detection and identification of Meloidogyne spp.(non-Chinese species)2016-12-12发布2017-07-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局SN/T 4723-2016 目。昌本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由同家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国宁搜出入境检验检疫局、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和同深圳出入境检验检疫局、南京农业大学、华

2、南农业大学。本标准主要起草人:顾建锋、王金成、何沽、张君丽、王白、李芳荣、林宁、丰侃。根结线虫属(非中国种)检疫鉴定方法1 范围本标准规定了根结线虫MeloidiLyl1e中同种与非中同种的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物、植物产品、士壤和|介质等传带的根结线虫的鉴定。2 规范性引用文件SN/T 4723-2016 下列文件对于本文件的应用是必不口J少的。凡是注日期的寻|用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件.其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GI3/T 6682 分析实验室用水规格和|试验方法GB/T 24829 毛剌线虫属(传毒种类)检疫鉴定方法SN/T

3、1157 进出境植物苗水检疫规程SN/T 2117 伪哥伦比亚根结线虫检疫鉴定方法3 根结线虫属线虫基本信息学名:MelidogyneGoeldi,1887 英文名:Root-knot nematodes 分类地位:垫jJ口(Tylenchida)，垫jJ总科(Tylenchoidea)，纽带科(Hoplolaimidae)，根结亚科山1eloidogyninae)，根结线虫属(Meloidop，ye)。传播途径:带线虫根组织、球根、球茎和被污染的土壤都是根结线虫传播的主要载体o远距离传播主要借助于受侵染的植物繁殖材料的调运;农事操作中农机具和|人员寺的茹带以及灌溉和|风雨运功可造成近距离扩散

4、。根结线虫属其他相关信息参见附录八。根结线虫属线虫为植物根系、球根、王求茎等地下组织的专性内奇生线虫，其寄主及分布范围均十分广泛ot=I前该属已知线虫98平中，其中最常见的是南方根结线虫M.川、()gnzta、花生根结线虫M.renarza、爪哇根结线虫M.javI1ca、北方根结线虫M.ha户归和象耳豆根结线虫M.erterol()hii，我国已有记录近/10种.其中23种确定为中国种(参见附录B)。4 方法原理根结线虫工龄幼虫线形，在根及根罔士壤中活功，入侵寄主根部后同着寄生，逐渐发育为卵圆形雌虫，导致寄主根部膨大量根瘤状。因此，如发现疑似根结，口l直接剖检获得雌虫，也口J从奇主植物根系及

5、根罔士壤或介质中分离获得工龄幼虫或雄虫。获得线虫后，根据其雌虫、雄虫和r=二龄幼虫形态，判别其是再为根结线虫属，然后进一步用形态学和l分子生物学相结合的方法，并参考其寄主、地理分布等信息，判断其种类oH前已经报道的根结线虫共98平中，其中40种在我国曾有报道。根据文献报道频次、分布是否广泛、描述是否充分等.将其中23种作为中国种，其余17种是否为中国种有待进一步核实O若判断其非SN/T 4723-2016 该方法所述的2:-3种中国种之一，根据检疫风阶原则，叫判定为非中国种，并应联系有关鉴定专家进行鉴定。5 器材和试剂5.1 仪器设备和器具PCI5株，则要求取样5份以r.O样品置密闭塑料袋中，

6、标明品名、报检号、米源国、检测要求等信息，及时送实验室检测。如小苗带士较少，则尽可能多取根和|士样，不带士的苗应1J细检查根部。土壤、介质或其他植物产品口J参照该方法o7 实验室检验7.1 线虫分离实验室接到样品后应f即进行线虫分离O若不能及时分离，可将样品暂时保存于4O(冷藏箱中。士壤、介质等可用改良漏斗法分离线虫(见GB/T24829).根结可直接剖检分离线虫(见SN/T2117)o7.2 体视显微镜镜检根结线虫工龄幼虫较细小，体长多在400m500m，行动迟缓，虫体一般内容物较多，颜色偏深o雄虫本长达1500m.行动迟缓。雌虫须剖开根结才能看到.呈球形或近梨形，长500m700m.宽30

7、0m500m.乳白色半透明状。7.3 标本制作若镜检发现二龄幼虫或推虫，需制作临时玻片或水久玻片(见GB/T24829)。若发现雌虫应制作会阴花纹永久玻片(见SN/T2117)。SN/T 4723-2016 7.4 生物显微镜观察、摄影和测量仔细观察雌虫、推虫和二龄幼虫主要鉴定特征并思微摄影，主要鉴定特征包括雌虫会阴花纹形态，雌虫、雄虫和|工龄幼虫的头部和口针形态，背食道腺开口到口针基球的距离(dorsalgland orifice，简称DGO)，以及二龄幼虫的体长、口针长度及基部球形态、尾形及透明区长度等特征。应在每张国片加相应标尺.测量并计算:体长/虫体最宽处体宽()、体长/食道腺体长度(

8、的、体长/尾长(c)、尾长/月工门处虫体直径(c)、阴门至头端的长度/体长X100(V)等值(根结雌虫一般不测V值，测阴门裂长和月工阴距等)。如样品足够，应测量雌虫、雄虫、工龄幼虫各20条以上。8 形态学鉴定8.1 根结线虫属形态鉴定8.1.1 雌虫虫体梨形至Ij球形，具突出的知颈，白色，静止不动;无砸囊期;长:-lSOm:-lmm，宽:-l 00，um 700m。阴门和月工门位于末端，无尾;会阴部具指纹状花纹，一般平，较少有突起;侧尾腺口点状，位于肝门两侧略靠前的位置;角质层具环纹;口针细弱.一般12，Llm15m，基部球小;排泄孔位于中食道球前，通常位于口针基部稍后位置;双生用腺，前伸，在

9、虫体内盘绕;雌虫卵不留在体内，而是产在一个胶质囊内。8.1.2 雄虫蠕虫形，体长可达2mm，尾末端扭曲;角质层环纹明显，侧区有4条刻线;雷区组缩不明显，但具明白的唇盘，唇环较少，1条:-l条;口号十强壮，lillim2Sm长，基部球大;食道腺主要从腹面覆盖肠;交合刺较细弱，一般2511m33.1m长，引带长711m 11.1m;单精巢;尾端圆，侧尾腺口圆点状，位于月工门附近;无交合伞。8.1.3 二龄幼虫自品虫形，具环纹句长2S0liIn600 vmo头部结构与雄虫相似，但小很多，头架轻微骨化，属区撞缩不清晰，有1个4个不清晰的唇环，口针弱，不长于2011m，基部球显著膨大.中食道球较大，瓣门

10、清晰，排泄孔位于半月体后，透明尾明白，尾末端窄，不规则。8.1.4 与抱囊线虫属区别根结线虫属和f包囊线虫属比较近似，其区别参见附录C。8.2 根结线虫属的判定发现雌虫、推虫或二龄幼虫符合卜述形态特征，主要根据成熟雌虫寄生于根内;雌虫尾末端不突起、具会阴花纹;雄虫)雷区骨化弱、口针较弱;二龄幼虫虫体细、口针细弱、透明尾较短等特征，可判定为根结线虫属(参见附录。o8.3 根结线虫中国种形态鉴定判定为根结线虫属后，可以根据23种根结线虫中同种形态特征描述(参见附录D)和|线捕罔(参见附录E)对其进行形态学鉴定。3 SN/T 4723-2016 9 分子生物学鉴定9.1 多重PCR方法多重PCR方法

11、具体操作步骤参见附录Fc9.2 种特异PCR方法种特异PCR方法具体操作步骤参见附录Gc9.3 线粒体DNA限制性内切酶片段长度多态性方法(mtDNA-RFLP方法)mtDNA-RFLP方法具体操作步骤参见附录Hc9.4 DNA条形码方法DJA条形码方法具体操作步骤参见附录1010 鉴定流程及结果判定当从根围土壤或介质中获得根结线虫二龄幼虫或推虫，或是发现根结后剖检获得雌虫后，应进一步分离检测，尽量找齐雌、雄虫和|工龄幼虫等3种虫态.以便开展形态学鉴定手11分子生物学鉴定O酋先参照附录C，判断其是否为根结线虫属。鉴于由方根结线虫、花生根结线虫、爪哇根结线虫、北方根结线虫和象耳豆根结线虫的发生较

12、为普遍，叫先针对这5种线虫开展种特异PCR检测、多重PCR检测或mtDNA-RF1，P检测。如检测结果为阳性，或与口标酶切片段大小一致，则可确定其种类。如检测结果均为阴性或与口标酶切片段大小不一致，口J进一步以28S基因作为DNA条形码基因，测序后进行DNA序列分析，口J对多数根结线虫属线虫进行鉴定。要判断待检样品是否为非中同种，应先将其鉴定到种。由于根结线虫属内各种形态特征非常近似，单凭形态学方法很难鉴定到种。如该种线虫为实导(旨主首次截获，或该种线虫之前在其来源国或奇主未见报道，通常需要将形态学方法与多种不同的分子生物学方法互相印证.才能做出准确的鉴定结论。门记录和标本样品保存若鉴定为根结

13、线虫(非中同种)，应将剩余的线虫杀死、同定后制成永久玻片保存;可用/1%甲醇同走后于指形管中长期保存。应保存的记录信息包括样品编号、为害症状(包括相关照片)、被感染材料的状态和来源、经鉴定的有古生物学名、测计数据、显微照片、标本鉴定人、鉴定时间、制作人、制作时间等信息。对含有线虫的剩余样品材料-经登记后妥善保存。保存期至少为6个月，期满后视情况作销毁处理。4 SN/T 4723-2016 附录A(资料性附录)根结线虫属其他相关信息A.1 生物学特性根结线虫雌虫将卵产在胶质卵块中，卵块通常见于根结的表面，但也口J包埋于根结组织中。卵块最初软、粘、透明，以后逐渐变得结实，同时颜色变暗。条件适宜时，

14、1龄幼虫在卵内蜕皮发育成工龄幼虫。三龄幼虫可在士壤中移功，找到合适的寄主后，可侵入根组织，随后在根内建立永久的取食位点，诱导根部细胞形成巨细胞O巨细胞诱导形成后，二龄幼虫不再移动，虫体膨大为香肠形。条件适宜的情况下，大约14d后，二龄幼虫蜕皮变成3龄幼虫，然后蜕皮变成4龄幼虫，再蜕皮变成成虫。二龄幼虫和成虫存在时间较长，而3龄和4龄幼虫总共存在的时间为4d6 dc 3龄和生龄幼虫没有口针，不取食;推虫蠕虫形，不取食，一般在虫口密度很高或食物缺乏等不利于雌虫发育的条件下形成。除少数根结线虫属线虫为两性生殖外，大部分根结线虫属线虫为孤雌生殖的，从而其生活周期更短、繁殖率更高，更有利于其成为植物病原

15、。A.2 生态学特性A.2.1 地理分布根结线虫口J从地理分布分为Mt暖地区种类和寒冷地区种类。奇氏根结线虫M.chilwuudi、北方根结线虫M.haLa、纳阿根结线虫M.naasi等为寒冷地区种类.能在士壤平均温度低于10oc条件下生存，而由方根结线虫M.i盯ognz.ta、花生根结线虫M.arenaria、爪哇根结线虫M.javanica、知小根结线虫M.e:.cigua等都是温暖地区种类，不能在士壤平均温度低于10C条件下生存。4种最常见根结线虫，即由方根结线虫M.inc愣1阳、花生根结线虫M.arenaria、爪哇根结线虫M.1val1LCa和|北方根结线虫M.ha卢，为世界性分布。

16、有些根结线虫种类，如奇氏根结线虫M.ch iLwoodi、埃塞俄比亚根结线虫M.f:lhio户口、虚假根结线虫M.fall川、拟禾本科根结线虫M.grmznz、短小根结线虫M.e:rig圳、象耳豆根结线虫M.enterulubii，分布范罔相对较窄O还有一些种类分布非常局限.如高粱根结线虫M.acronea只在南部非洲有发现.巴拉那根结线虫M.户aranaenszs仅在巴西、危地马拉报道。A.2.2 寄主范围根结线虫为专件寄生线虫，寄主范罔极为广泛，可侵染几千种不同的植物，包括单子叶植物和|双子叶植物，草本植物和木本植物。热带、亚热带和温带地区的多种粮食作物、蔬菜、水果、观赏植物均口J受根结线

17、虫侵染。与分布范围相似，根结线虫不同种类的奇主范围差异明报。最常见4平中根结线虫寄主极为广泛，而有的线虫种类寄主非常有限.如埃塞俄比亚根结线虫M.ethio户lca只寄生葡萄、狲猴桃、大豆和甘展。A.2.3 为害症状根结线虫危害寄主植物根部，一般地上部分不表现明显症状。但Z与植株在生长早期被大量根结线虫危吉根部时.植株地卜部分口J矮化、变色、枯萎、长势不良等症状，导致结实不良，严重时成片死亡。3 SN/T 4723-2016 根结线虫危吉症状主要在根部。拔起病株，去除根系附着的土壤，口J见根长有根结。初期根结只有针尖大小，随着不断生长，其体积可增大到根直径的数倍。根结形态与线虫种类及寄主有关。

18、例如:三叶草根结线虫Mt:loid0 g yne lrifiJlio户hila引起的根结瘦长，瓜类植物的根结一般十分明白，一些禾本科植物上不形成根结，木本植物上的根结往往很小。6 编号根结线虫中文名称猴桃根结线虫2 花生根结线虫3 柑桶根结线虫4 龙眼根结线虫。4、海根结线虫6 象耳豆根结线虫7 繁峙根结线虫8 幅建根结线虫拟禾本科根结线虫10 禾本科根结线虫11 海南根结线虫12 北力根结线虫13 同班牙根结线虫l斗市方根结线虫15 爪哇根结线虫16 简问1根结线虫17 济南根结线虫18 孔氏根结线虫19 林民根结线虫20 闽南根结线虫21 番民根结线虫22 悬铃木根结线虫23 中华根结线虫

19、附录B(资料性附录)根结线虫名录表B.123种根结结虫(中国种)名录学名几I.actinidiaeLi心Yu，1991 伞M.renn(-1巳al，1889)Chitwood句1949M.citri Zhang,Gao也We口巨.1990 凡I.dimoca户usLiu.Zhan日，2001 几I.do1Z;haiensisZhcng,Lin&.Zhcng,1990 凡I.P7zt厅。lohiiYiZng.EisenbLck,1日l3M.fanzhinzsis Chen,Peng.Zheng,1JJ M.fujiarzerz川PLn，1刊5几I.grarninicfGoldcn.Rirchfi

20、cld,196 几1.raminis(Slcdgc c.Goldcn,196/1)矶Thitchcad，1968 凡I.hainn盯lsisLiao巳-Fen日，lJ95 M.ha户1(丁hilwood，1949 NI.his户Hirschmann，1986 NI.irz且zt(Kofoid忌.White啕1919)-、hitwood，19斗9儿l.javJ1I(Treub，18吕5)Chilwood，1949 几I.jianyngensisYang,Hu句Chen&.Zhu.1990 M.jinanensis Zha且g.Su,1986 几I.kon且iYang,Wang&二F巳口g句198

21、8 M.lini Yang,Hu心Xu，1988.M.nngnaniZhang，1993 几fnyuerzsisLiao,Yang,Fcng&.Karsscn,200 M.户latarziHirschmann,1J82 几I.sinensisZhang,1983 SN/T 4723-2016 7 SN/T 4723-2016 表B.2根结线虫(非中国种)名录编号根结线虫中文名学名1 高粱根结线虫J飞1eloido且ntacrneCoetzee，1956 2 非洲根结线虫1.africana Whilehead,1!J60 3 水生根结线虫M.aquatilis Ebsary.Eveleigh,

22、1983 阿拉伯根结线虫M.raZ，icidLp臼&.Salazal咽1989 阿登根结线虫Mrdenensis Sants,1968 6 甘南根结线虫J飞1.artielliFranklin，1961 贝特根结线虫A飞1.baicaCaslill口，飞!ovla，号，Suhholin&.Troccoli,200:.,8 巴西利可Ji.根结线虫凡1.bra、口lensisCharchar 8,.Eisenback,2002 9 短尾根结线虫NI.Z，revudLs，1953 10 加利福尼亚根结线虫M.lifurniensis Abdcl-Rahman&.Maggcnti,1987 11)11

23、茶根结线虫J飞fmcllieGolden,1979 12 锦鸡儿根结线虫NI.，ye Shagalina,Ivanva.Krall,198:!13 仁罗莱纳根结线虫M.正rolinensisEiscnback,1982 14 奇氏根结线虫J!I.chitwoodi Golden,OBannon,SanlO已Finley句1980l豆钻天柑11根结线虫11.chusenia F:rshcnk&.Lcbcclcva,1992 16 克里斯蒂根结线虫J飞1.chrislieiGoldcn&.Kaplan,1986 17 咖啡根结线虫，1.co矿盯fLordello.Zamilh,1960 18 十宁

24、形根结线虫凡1.crucianiGarcia-Martin巳z，Taylor.Smart,l!J日 219 洋前根结线虫11.cynaiensis Pham,1990 20 光纹根结线虫TvI.decalimea tWhil巳he址，1%8沙丘根结线虫11.dunensis Paolomaes Rius,Vovlas,Troccoli,Liebanas,Landa&.21 Castillo,2007 22 迪茨根结线虫M.duylsi Karsscn,van Aclst 8二vandcr Puttcn,1998 23 埃塞俄比亚根结线虫M.ethio户icaWhitehead,1968 24

25、短小根结线虫凡1.e.riguaGoldi,1887 25 伪根结线虫M.falla:L Kars，号cn，1996 26 佛罗里达根结线虫M.flidensis Handoo,Nyczepir,Esmenj川1，van d巳rBeek,Caslagnone-Seren口，Carla,Skanlar&.Higgins,2004 27 德州花生根结线虫凡1.ha户1anaria EisenbackBernard,Starr,I e&一Tomaszewski，2004 28 一户根结线虫M.ihinhei j飞ra)口，1992 29 印度根结线虫11.indiWhitchcad，1968 30

26、无饰根结线虫M.inortLordello，1956a:n 伊萨尔科根结线虫tvI.izalco川，sisCarneiro,Almeid乱，Gomes&.Hernn1曰，2005 32 古库尤根结线虫M.kikllYnsis De Grisse,1961 8 SN/T 4723-2016 表B.2(续)编号根结线虫中文名学名33 本|纳根结线虫几f走。en口与Eisenhack,Bernard&.Schmitt,1995:4 克民根结线虫凡1.kalliJepson,1!JR4 35 日克根结线虫几1.1 uc i Carneiro,Correa，八lmeida.Gomes.Deimi.Cas

27、tagnone-sereno心Karssen.2014 36 橄悦根结线虫.M.lusilnuAbrantcs 8,.Santos,1991 37 苹果根结线虫.M.mali Itoh.hshima已.Ichinoh巴，1969:R 海根结线虫凡f.maitimaJepson.1!JR7 39 马!j:l、天根结线虫凡1.maryladiJ epson 一Goldenin Jepson.1987 斗。口大根结线虫1II1.me且adr矶Thitehead.1968 11 口球根结线虫几1.megl.ylHaldwin8二Sasscr，197942 红树根结线虫几1.mersaSiddiqi&.

28、Booth句199113 小头根结线虫.M.micruce hlus Cliff i立Hirschmann，198.144 小突根结线虫.M.microlyla Mulvcy,Towll5hcnd&.Pottcr,197 小根结线虫.M.mir Karss巳n.Bolk,van Aelsl,van den Beld,Kox.Korlha，号15 Molendijk.Zijlslra,van Hoof&.Cook.2004 46 摩济哥根结线虫.M.m川ciensisRammah&.Hirschmann.1990 47 纳西根结线虫几1.n.，iFranklin.196;a 4R 纳托根结线虫凡

29、1.ataliaeGolden.Rose.Bird,1!Jl1 斗9水稻根结线虫M.oryzae 孔1aas，Sa口ders&一Dede，1978 SO 欧民根结线虫凡1.oteifaiElmiligy,1!J6l 51 草根结线虫M.ott旷soni(Thorne,1969)Franklin.1971 52 卵形根结线虫1II1.uOlis Riffle,1963 巴拉那根结线虫M.户rnaen口sCarnciro,Carnciro,Abrantcs,Santos&.Almci巾，1996 54 裂主在根结线虫M.户rtitylKleynhans句1986hS5 矮牵牛根结线虫Metunia

30、e Charchm.Eisenback.Hirschmann.l!J!J!J 56 菜豆根结线虫凡1.户haseliCharchar,Eiscnback,Charchar&.Boitcau,2008b 57 松根结线虫儿1户iniEisenhack.Yang&.Harlman,19K5 58 胡椒根结线虫几1.户1户eriSah,Ganguly&.Eapcn,2000 59 皮内根结线虫几f卢isiCharchar.Eisenoack.Charchar&.Boiteau,2008a 60 多头I不根结线虫凡1.ly户hanulataCharchar.Eisenback.Vieira,Fonse

31、ca-boileux.Ritcux,2009 61 前孔根结线虫M.卢r户raSpaull,1977 62 标根结线虫几1.quercian(主。ldc口，1979 63 萨拉斯根结线虫几1.sal口Lp巳z，1984 9 SN/T 4723-2016 表B.2(续)编号根结线虫中文名学名64 萨瑟根结线虫M.as.eri Ha口doo，Huettel&.Golden,1994 6ii 休民根结线虫A飞1.spwelliMulvey巳咀Anderso口，1980 北欧根结线虫11.siluestris Castillo,Vovlas,Troccoli,Libanas,Palomares Riv

32、s&-66 Landa.2C1C19 67 透明根结线虫M.户rlinaeCRauFassuliot凹，1965)Whitchcad,1968 68 亚北方根结线虫J飞1.uoart 1iBernard句198169 劫、古那崎根结线虫A飞if.sugl:narJlienSl:SToida也Yaegilshi，1!J84 70 l苔古先根结线虫凡1.tad sh ikistanica Kirj 且nova一Ivanova.1%5 71 东同根结线虫NI.thailandHandoo，Skantar.larta 一Ebe，20ClS 72 气:叶草根结线虫11.lrilul o hlHcrnar

33、d&.Eiscnback,1997 73 麦稻根结线虫J飞1.triticoryzaeGaur,Saha&.Khan.1993 7/1 土耳其斯坦根结线虫NI.tu是estShagalina，Ivanova.K rall,198:!7S 范氏根结线虫M.vandervele Klcynhall5,1988 10 SN/T 4723-2016 附录(资料性附录)根结线虫属与子包囊线虫属区别C dm阳幽声岛内川锢，、.情且路网翩翩审、陈附mvK H 说明:AG 根结线虫属;HN 于包囊线虫属;A、H二龄幼虫整体(注意根结线 虫属二龄幼虫更细);B、I二龄幼虫头部(根结线虫属二龄幼虫唇区骨化及门针较

34、弱);C,二龄幼虫尾部(根结线虫属的透明区(标为黑色)更短);D、K发育中的雄虫(根结线虫属有尾尖突);E、L一一发育中的雄虫(根结线虫属有尾尖突);F、M-JII1i虫(根结线虫属的卵排出到体外的胶质稍中，于包囊线虫属 则位于雌虫体内);G、N雌虫头部(箭头不不同的排泄孔位置)。11 根结线虫属与于包囊线虫属区别图C.1SN/T 4723-2016 表C.1根结线虫属线虫和线虫子包囊居区别发育阶段特征根结线虫属于包褒线虫属体形较细，体前部近圆惟形较粗.体前部近圆柱形!再l主骨化和生益缩不明显骨化和生益缩明显二龄幼虫门毛|较细弱，1911m 较强壮，2011m30 11m 透明尾较短较长唇仄骨

35、化弱，唇环2个高度骨化，唇环4个S个雄虫口针较细弱较强壮排泄孔位于中食迫球瓣门前位于中食迫球瓣门后表皮薄.白色，先I丁后不变为黄褐色，不形成J包褒厚，死亡后变为茧褐色.形成J包褒雌虫glJ 排入卵囊中，只有少量留在雌虫体内大量留在雌虫体内.只有少量排入小卵囊中尾末端不突起，只会阴花纹突起啕只阴门推寄主症状形成根部膨大不形成根瘤生物学特性奇生特性成熟雌虫一般留在根内成熟雌虫体后部常露出根外12 SN/T 4723-2016 附录D(资料性附录)23种根结线虫中国种形态特征描述D.1 弥猴桃根结线虫MeloidogYlleactillidiae Li&Yu,1991 雌虫:成熟雌虫球形或袋状，有明

36、报的颈部，偶尔知颈向腹面弯曲。口针细小，基球小而圆，长11m 16 fimo会阴花纹圆形至卵圆形，线纹平滑.紧密，断裂少。侧区线纹排列疏松.断裂多，偶尔形成翼状。阴门两端发出的线纹断裂多.可直接伸向月工门、尾区及月工尾之内。雄虫:体细长，头冠低平.口针长20m26nl，侧线4条，近尾部往往网中各化o二龄幼虫:头高而圆，头冠低平，口针长13m15，um，口针基球圆形，高约1.5，um，宽约2.6m。尾部细长，1:斩尖，有的结缩。奇主植物:狲猴桃、西瓜、番丽、辣椒。分布:河南省信阳市。D.2 花生根结结虫MeloidogYllearellaria(Neal,1889)Chitwood,1949 雌

37、虫:梨形，后部元末端突起;口针13m17m.锥部弯向背部，向前渐变细.顶部钝;杆部宽，圆柱状，向后逐渐变宽;口针基部球圆形到泪滴形;会阴花纹变异较大，圆到卵圆形，线纹细微到显著;背弓低平，线纹平时或波纹状，连续或断裂，在侧线处略向尾端弯曲;背弓在侧部通常呈肩状;背部线纹和腹部线纹通常在侧线附近交叉相遇，呈锯齿状;侧区显著，略不规则。雄虫:唇区不组缩，光滑，偶尔具有1个2个不规则的唇环，唇盘基本为圆形，略高于中唇，通常无侧唇，口针20fim28 fim，基部球撞缩，角状或更加融合，背食道腺开口到口针基球的距离(DGO)=4 f!m8!1mc 工龄幼虫:L二39211m605 fim，半月体位于排

38、世孔前1个3个环纹的位置，尾长4411m 69 11m，尾尖回到尖，透明尾不清晰，长611m13 11mo 奇主:十分广泛句单子叶植物和双子叶植物均叫奇生。分布:世界范罔内分布，较温暖地区以及冷凉地区的温室中均有发生。D.3 柑槽根结结虫MeloidogYllecitri Zhang,Gao&Weng,1990 雌虫:虫体白色.球形或梨形，有明显的颈部.体后部硝隆起。头部具2个环纹，头骨架中等。口针细，锥部明显弯向背面，杆部圆柱形，基部球呈横卵形。会阴花纹近圆形，背弓f因而i平，有时在背弓两侧形成角状.无侧线。月工门上方有横纹或短纵纹.无阴门纹和l会阴纹，阴唇上有细密横纹。雄虫:头低平，与身体

39、连续。口号十粗，口针基球横卵形，锥部直。侧线4条，有网纹。单精巢前伸.元回折。交合刺发达-弓形.基部圆J市部饨。引带镰刀状，基部较宽。侧尾腺口一个位于世殖腔水平处另一个位于世硝腔稍后.尾端钝圆。二龄幼虫:头部平哉，与虫体连续。口针纤细，锥部直，基部球宽圆形，与杆部分开。侧带隆起，侧线4条。尾部渐细，近尾端有1次2次组缩，有明显的透明区，尾端饨。奇主:柑情。分布:广东省、福建省。13 SN/T 4723-2016 D.4 龙眼根结线虫Meloidogynedimocarpus Liu&冗hang，2001 雌虫:体白色至1炎黄色，梨形.有明显的颈部。口针粗短.基音节球发达.横卵圆形。会阴花纹近圆

40、形.线纹细密，背弓中等高，尾端为线纹的起源中心，有由不规则知线纹组成的尾轮，由连续或断续知线纹组成的近环形同心圆包罔。线纹包至阴门两侧，阴门与月工门之间有多条连续线纹，阴门唇常有横线纹。侧区两侧为双侧线，或有一侧为单侧线，部分线纹口J通过侧线。侧尾腺口小，但易观察，侧尾腺口问血与阴门裂长度相吁。雄虫:头架中等发达，头冠低，头部比第一体环处窄。口针直，针锥与针杆相连处和针杆与基球相连处均略增粗，口针基部球圆，与杆部界限明显。排f世孔位于半月体前4个O个体环处，孔宽约占两个体环O侧区侧线4条，具网纹。尾端钝圆，缺2个:-l个环。交合剌发达，寻|带新月形o侧尾腺口明旱，位于泄殖腔水平线处。二龄幼虫:

41、头架中等发达，口号十纤细，直，口号十基部球困O中食道球椭圆形，瓣门大O半月体明报，位于食道腺与肠相接处水平线或稍前，排f世孔紧靠其后。食道腺延伸较长，覆盖肠腹面。侧区有4条侧线o尾部常向腹面弯曲，直肠膨大O尾较长.:斩细，末端钝圆，尾端透明区明白，尾末端有1次2次组缩。寄主:龙眼o分布:福建省。D.5 东海根结线虫Meloidogynedonghaiensis Zhe吨.Lin&Zhe吨，1990 雌虫:体洋梨形，具较短的颈，颈部环纹明显。中食道球近圆形。会阴花纹圆形或近圆形，背弓低圆，会阴花纹长100VmC81 11m 123m).宽9611m(78 vm 110 11m)c尾部中央常由数条

42、纹形成圆闺形o侧尾腺口小，一般不在同一水平线上，但清晰可见。阴门裂周罔无纹，有时仅有少量纹连接阴门裂的一端或两端O两侧扇内侧近背部处有许多波纹状细纹或碎细纹O侧区一般不明白o雄虫:头顶端平，中央做凹，边缘弧形。头区无环纹。口针发达，锥体和基杆大约相等，基部球圆，前端斜平。体环明显，体中部环宽3t1m4 t1m.排泄孔离虫体前端190t1m左右，半月体长约5，!lm，位于排情孔前2个3个体环处。侧区一般有4条侧线，约占虫本宽的1/4.有时在体中部口J看到J;)条侧线，体末端侧线仅4条或更少，侧区无网格。精巢1个，直生，末端无折叠。交合刺成对，引带短，侧面观略思弯曲。尾部圆形或呈指状，知于月工门处

43、体宽，一般无纹或具少量不明报的环纹。侧尾腺口位于泄殉腔后，一般不在同一水平上。二龄幼虫:体较长，头前端平或弧形，唇区结缩不明思。体环纹明旱，体中部环宽l.2ml.3mo口针细。半月体位置稍前于排iIt孔。侧区有4条侧线。直肠不膨大。尾部圆锥形.:斩尖，有数个组缩.末端饨圆。寄主:柑桶。分布:福建省晋江市。D.6 象耳豆根结线虫Meloidogyneenterolobii Yang&Eisenback,1983 雌虫:梨形，无末端突起;口针14vm17m，基部球忏形，锯齿状，撞缩;会阴花纹圆到卵圆形，背弓圆;线纹细弱，无侧区或背部线纹与腹部线纹交汇形成单线。雄虫:唇区不撞缩，唇盘不隆起，无侧唇，

44、口号十18m25m，基部球圆，向后倾斜，结缩，DGO二3m5m。14 SN/T 4723-2016 二龄幼虫:长:i77m52Snl，半月体位于排情孔前2个体环的位置，尾长43m6:inl，透明尾5m15nl.尾尖饨尖。奇主:广泛，主要有象耳豆、炯草、辣椒、西瓜和棉花等。分布:中同、法同、瑞士、南非、塞内加尔、两非、美同、巴两、波多黎各、瓜德罗苦岛、古巴、马拉维、委内瑞拉等OD.7 繁峙根结线虫Meloidogynefanzhiensis Chen,Peng&Zhe吨，1990 雌虫:体梨形，乳白色，颈部向一侧弯曲，头帽低平，与体躯交界处不结缩。在SEM下唇盘与中唇对称，中唇凹陷形成I对亚中唇

45、，侧唇小，头感器开口明显可见，口孔圆形，周罔有6个内唇感觉器开口O口针较强，基部球与杆部界限明白O排泄孔偏后，约位于2倍头端至口针基部球末长度处。食道腺与肠在腹面重叠o体末端不隆起，会阴花纹椭圆形，弓门稍高，波纹中密度，走向较平Jili)J而圆，近尾点的背纹较密而有波折，远尾点的背纹较稀而平时，近月工门处的背纹向内弯曲O侧区的线纹向内弯曲呈近似旋涡形，会阴区内线纹极少。腹面线纹较少，平Jili)J、细弱。雄虫:体蠕虫形。头帽隆突，与体区交界处撞缩O侧面现头帽平或略呈弧形;背腹面现头感器开口较明显可见o在SEM下.头区口孔卵圆形，口孔周罔有6个内唇感觉器开口.唇盘略|逢突，中唇凹陷形成一对亚中唇

46、，头感器开口长裂缝形。在LM下，口针较短，平均长12.2411m.基球圆形，与杆部分界明白，锥部长约为杆部的1.5倍;背食道腺开口到口号十基部球的距离变化较大，为4.18m7.j2fJ-m.平均为5.3911mo排f世孔到头端的距离约占体长的10%。半月体在排f世孔前方约211m处。侧线4条，交合刺1对，形状、大小基本一致，末端钝圆形，导刺带新月形，尾部末端似有一帽状结构。二龄幼虫:体型小，隔虫形O头区与体躯交界处不撞缩，头骨架硬化程度小。侧面现头顶平或略弧形;背腹面观头感器明显可见。在SEM下，唇盘圆形，头感器明显，长裂缝状。口针较短，平均长9.4211m.基部球圆形，背食道腺开口到口针基球

47、末的距离较知，排泄孔位于中食道球后，约为3倍于头端到口针基球末的长度处，半月体位于排世孔后，离排世孔111m3 11m，尾短o呈固锥形.平均长26.1711m.直肠膨大。奇主:马铃薯。分布:山两省oD.8 福建根结线虫Meloidogynefujinensis Pan.1985 雌虫:孕卵雌虫仅以颈部嵌入根皮并产卵。体膨大，梨形或球形，颈部明显.体后无隆起。口针很细，基部球小而倒斜。排泄孔位于头顶之后2倍4借口针长的水平卜，在中食道球之前。会阴花纹椭圆形，弓高中等，元侧线，侧尾腺口小。看不清。阴门裂右缘外的阴门板有一中央凹陷的小圆隆起O背区侧线平滑，两侧线纹搜浪形。腹侧线纹较平展，比背侧的线纹

48、略疏O雄虫:体细长，圆柱状。)雷有融合。头顶略凹人，颊长5m.头部有六辐射状的头架，头架高7 fJ-m8 fJ-mo口针发达句有倒斜的基部球，基球高4m.宽5m7mo中部食道球较不发达，前细后粗，梨形，中央有明显的瓣门.瓣门之后为食道球的分泌物所充满而fl彭大。中食道球的前部无与腔相连的泡状结构，食道球之后有的膨大成一壶腹。神经环在食道球稍后.瓣门27m42mo食道腺发达，腺叶在腹侧盖肠之前端，长133m160m.宽19m。半月体在排f世孔前3个体环处，其长为1个L个体环O侧区由4条侧线组成，无网隙。侧线一直延伸到尾部交合剌以下。尾钝圆，末端龙体环。单精巢，很长，前端无反折或有反折。交合刺向腹

49、面弯曲。二龄幼虫:体细长。头圆形，分不出小头帽。头区高3m.头架底部宽5m6mo口号十细，具小的倒斜基部球.(高1m.宽2，um)。食道腺叶从腹面益肠。半月体位于排f世孔相同的水平上。侧区有15 SN/T 4723-2016 4条侧线，无网隙。尾中等长，圆锥形，末端尖锐，且无体环。直肠不膨大。寄主:柑桶。分布:福建省。D.9 拟禾本科根结结虫Meloidogynegraminicola Golden&Birchfield,1965 雌虫:体形较长，末端轻微突起;口针12fLmlS IHH，基部球大，卵圆形，植缩;会阴花纹圆形至iJ椭圆形，线纹光滑，无侧区O雄虫:唇区不结缩，唇盘不隆起，一般有侧

50、唇;口针lSm20fJ-m，基部球卵圆形，结缩，DGO=3m4D10 二龄幼虫:体长410!J-m480Dl，半月体位于排i世孔前或附近的位置，尾长60m80Dl，尾尖细圆。寄主:水稻和多种禾本科植物，双子叶杂草也是很好的奇主O分布:普遍存在于水稻种植区。D.10 禾本科根结线虫Meloidogynegraminis CSledge&Golden,1964)Whitehead,1968 雌虫:虫本长梨形，两侧对称或不对称，颈部矩，口针长12m14fJ-m句针椎部略向后弯，基部球卵圆形并略向后倾斜，排世孔位于距头部前端约一个口针长的位置o会阴花纹卵圆形，其粗糙条纹和l有棱的背弓，尾末端区域无条纹