从蜂王浆中提取蜂王酸的研究-蜂王浆提取王浆酸.docx

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1、从蜂王浆中提取蜂王酸的研究|蜂王浆提取王浆酸 摘要：目的探讨从蜂王浆中提取蜂王酸（10-HAD）的工艺。方法二次有机溶剂提取，二次调pH，用高效液相色谱法对10-HDA进行定性分析。结果蜂王浆中10-HDA的最佳提取条件为：蜂王浆水溶液pH 10，加入乙醚提取杂质，再调pH 2加入乙醚提取10-HDA。结论此法可从蜂王浆中高效提取10-HDA。 关键词：蜂王浆；蜂王酸；提取；高效液相色谱法；测定 中图分类号：S896.3 文献标识码：A 文章编号：1672-979X(2008)03-0030-03 Extraction Study on 10-HDA from Royal jelly WANG

2、 Wen-feng1, XU Ling1, WANG Teng-fei1, MEI Ying-jie2, WANG Rui-ming1* (1.Shandong Institute of Light Industry, Jinan 250353, China; 2. Zibo Institute of Product Quality Supervision & Inspection , Zibo 255000, China) Abstract：Objective To discuss the technique of extraction of 10-HDA from royal jelly.

3、 Methods The HPLC was used for the qualitative analysis of 10-HDA with two organic solvents used and pH adjusted twice. ResultsThe best extraction condition of 10-HDA from the royal jelly was as follows: first adjusting the pH of the solution to 10, then adding ether for the extraction of impurity;

4、secondly adjusting the pH to 2, then adding ether for the extraction of 10-HDA . Conclusion This method can be used for the high effective extraction of 10-HAD from royal jelly. Key words：royal jelly; 10-hydroxy-2-decenoic acid; extract; high pressure liquid chromatography; determination 蜂王酸（10-HAD，

5、又称王浆酸），自然界只有蜂王浆中含有，是蜂王浆中重要的不饱和脂肪酸，有提高机体免疫力1、抑制多种癌细胞2，治疗急性辐射损伤3和化学物质所致损伤4等多种生理活性。国内不少厂家已起先探讨10-HDA的提取。目前生产10-HDA主要有两条基本途径：物理提取法5和化学合成法6。化学合成路途或工艺大多流程太长，或产率过低，或合成条件苛刻，目前无工业生产价值。我们初步探讨了从蜂王浆中提取10-HDA的工艺流程，以为提取10-HDA供应数据。 1材料 1.1试剂 蜂王浆（养蜂场野生蜂王浆）；无水乙醚（天津巴斯夫化工有限公司）；无水乙醇（天津化学试剂三厂）。 1.2仪器 电子分析天平；电热恒温干燥箱；离心机；

6、全温振荡器；旋转蒸发仪。 2方法 2.1单因素试验 2.1.1确定蜂王浆水溶液pH（）7称取5份蜂王浆各5 g置于250 mL三角瓶中，加入50 mL水溶解，置200 r/min摇床中震荡10 min。用6 mol/L NaOH调溶液pH（）为8.0，9.0，10.0，11.0，12.0。震荡摇匀后，加入50 mL乙醚（）置200 r/min摇床震荡10 min提取杂质，置分液漏斗中静置34 h。取下层水液（乙醚层用旋转蒸发仪回收）用1:1盐酸调pH（）至2.0，摇匀，加入50 mL乙醚（）置200 r/min摇床摇匀，静置过夜，充分提取10-HDA。用旋转蒸发仪回收乙醚得10-HDA浓缩液，

7、加入510 mL乙醇溶解，滤纸过滤，去除不溶于乙醇的杂质，置于平皿内晾干即得10-HDA粗提产品。见图1。 由图1可见，pH（）10以上时，平均提取率达到较高的水平。10-HDA是一种单不饱和脂肪酸，在pH 10左右的溶液中以盐的形式存在，这时可用乙醚除去蜂王浆中的脂溶性杂质。 2.1.2确定乙醚（）加入量其他提取条件不变，乙醚（）加入量分别为30，40，50，60，70 mL。结果见图2。 由图2可见，加入乙醚超过50 mL时，平均提取率几乎不变，故选取乙醚（）的最佳加入量为50 mL。 2.1.3确定蜂王浆水溶液pH（）其他提取条件不变，用1:1盐酸调pH（）为1.0，2.0，3.0，4.

8、0，5.0。结果见图3。 由图3可见，pH（）为2.0时，提取率最高。因此，选取2.0为最佳pH（）值。 2.1.4确定乙醚（）加入量其他提取条件不变，乙醚（）加入量分别调整为30，40，50，60，70 mL，结果见图4。 2.2正交试验 依据以上单因素试验的结果，拟定4因素5水平正交试验，试验步骤同上，数据见表1。 3结果与探讨 3.110-HDA的提取效果 用高效液相色谱法8在相宜条件下分析10-HDA的标准品和提取的粗产品，结果见图5。 3.2提取10-HDA最佳参数的确定 提取10-HDA的最佳参数为A3B3C2D4（见表1）。即调pH 10，用50 mL乙醚提取杂质；再调pH 2.

9、0，60 mL乙醚提取10-HDA（综合考虑提取率和原料成本，乙醚（）的加入量改为50 mL）。 4结语 10-HDA具有多种生理活性，尤其是有抗癌功能，是一种自然的绿色保健品，将越来越受到关注。目前化学合成法尚不具有工业生产价值，因此，用有机溶剂提取10-HDA的方法具有不行取代的优势，它操作简洁，耗费低廉，省时省力，提取效果较好。本试验用乙醚、乙醇两种溶剂提取，效果较好，最高浓度可达87 %。两种溶剂价格低廉，乙醚的沸点较低，便于回收，达到了工业生产的要求，因而适于推广运用。不足之处是在提取过程中，蜂王浆中的其他活性成分如小分子氨基酸、维生素等未能合理利用，造成部分资源奢侈。 参考文献 1

10、王文风，徐玲，王瑞明，等. 10-HDA的探讨与应用J. 食品科技，2007，32（5）：270-273. 2王腾飞，王瑞明，刘洪玲，等. 发酵液中10-HDA的药理保健作用及分析确定J. 四川食品与发酵，2006，42（1）：56-58. 3汪多仁. 王浆酸的开发与应用进展J. 养蜂科技，2004.（4）：6-10. 4杨晓林. 人参总甙及蜂王浆抗化学物质所致DNA损伤作用初探J. 北京医科高校学报，2002，22（1）：75-76. 5王龙杰, 卢泽勤. 蜂王酸的应用及制备J. 广西化工，2001，25（1）：38-42. 6Kulkarni S M. A short synthesis of royal jelly acid10-hydroxy-(E)-2-decenoic达式acid J. Indian J Chem, Sect.B23B(5), 2004：460. 7王腾飞，王海燕，刘洪玲，等. 发酵液中提取10-HDA的探讨J. 酿酒科技，2006，（1）：27-29. 8倪辉，杨远帆，彭莺. 蜂王浆中10-HDA的探讨进展J. 中国蜂业，2006，57（3）：9-10.