微生物学基础知识grew.docx

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1、第一模块块 微生生物学基基础知识识第一章 微生生物概述述一. 什什么是微微生物微生物是是一类肉肉眼不能能直接看看见，必必须借助助光学显显微镜或或电子显显微镜放放大几百百倍、几几千倍甚甚至几万万倍才能能观察到到的微小小生物的的总称。微生物具具有形体体微小、结结构简单单；繁殖殖迅速、容容易变异异；种类类繁多、分分布广泛泛等特点点。 二. 微微生物的的分类：根据微生生物有无无细胞基基本结构构、分化化程度、化化学组成成等特点点，可分分为三大大类。1. 非非细胞型型微生物物 无无细胞结结构，无无产生能能量的酶酶系统，由由单一核核酸（DDNA/RNAA）和蛋蛋白质衣衣壳组成成，必须须在活细细胞内增增殖。病

2、病毒属于于此类微微生物。2. 原原核细胞胞型微生生物 细胞核核分化程程度低，只只有DNNA盘绕绕而成的的拟核，无无核仁和和核膜。这这类微生生物包括括细菌、衣衣原体、支支原体、立立克次体体、螺旋旋体和放放线菌。3. 真真核细胞胞型微生生物 细胞核核的分化化程度高高，有核核膜、核核仁和染染色体，能能进行有有丝分裂裂。如真真菌、藻藻类等。三. 微微生物的的作用及及危害1. 微微生物的的作用绝大多数数微生物物对人和和动物是是有益的的，已广广泛应用用于农业业、食品品、医药药、酿造造、化工工、制革革、石油油等行业业，发挥挥了越来来越重要要的作用用。例如如与我们们日常生生活密切切相关的的如酸奶奶、酒类类、抗

3、生生素、疫疫苗等。2. 微微生物的的危害微生物中中也有一一部分能能引起人人及动、植植物发生生病害，这这些具有有致病性性的微生生物，称称为病原原微生物物。如人人类的许许多传染染病（感感冒、伤伤寒、痢痢疾、结结核、脊脊髄灰质质炎、病病毒性肝肝炎等），均均是由病病原微生生物引起起的。 从药品生生产的卫卫生学而而言，微微生物对对药品的的原料、生生产环境境和成品品的污染染是造成成生产失失败、成成品不合合格的重重要因素素。 第二章 微生生物的类类群和形形态结构构一. 细细菌细菌是一一类细胞胞细而短短、结构构简单、细细胞壁坚坚韧，以以二分裂裂方式无无性繁殖殖的原核核微生物物，分布布广泛。1. 细细菌的形形态

4、与结结构 观察细细菌最常常用的仪仪器是光光学显微微镜，其其大小可可以用测测微尺在在显微镜镜下测量量，一般般以微米米为单位位。细菌菌按其形形态不同同，主要要分为球球菌、杆杆菌和螺螺形菌三三类。 （11） 球球菌 多数球球菌直径径在1微微米左右右，外观观呈球形形或近似似球形。由由于繁殖殖时分裂裂平面不不同可形形成不同同的排列列方式，分分为双球球菌、链链球菌、葡葡萄球菌菌等。 （22） 杆杆菌 形态多多数呈直直杆状，也也有的菌菌体稍弯弯，多数数呈分散散存在，也也有的呈呈链状排排列，分分为棒状状杆菌、链链状杆菌菌、球杆杆菌等。 （33） 螺螺形菌 菌体体弯曲，呈呈弧形或或螺旋形形。如幽幽门螺杆杆菌。

5、细菌虽虽小，仍仍具有一一定的细细胞结构构和功能能。细胞胞壁、细细胞膜、细细胞质和和核质等等各种细细菌都有有，是细细菌的基基本结构构。2. 细细菌的繁繁殖二分裂繁繁殖是细细菌最普普遍、最最主要的的繁殖方方式。在在分裂前前先延长长菌体，染染色体复复制为二二，然后后垂直于于长轴分分裂，细细胞赤道道附近的的细胞质质膜凹陷陷生长，直直至形成成横隔膜膜，同时时形成横横隔壁，这这样便产产生两个个子细胞胞。 细菌生长长速度很很快，一一般约220miin分裂裂一次。若若按此速速度计算算，细菌菌群体将将庞大到到难以想想象的程程度。但但事实上上由于细细菌繁殖殖中营养养物质的的逐渐消消耗，有有害代谢谢产物的的逐渐积积

6、累，细细菌不可可能始终终保持高高速度的的无限繁繁殖。经经过一段段时间后后，细菌菌繁殖速速度逐渐渐减慢，死死亡菌数数增多，活活菌增长长率随之之下降并并趋于停停滞。3. 细细菌的菌菌落单个或少少数细菌菌细胞生生长繁殖殖后，会会形成以以母细胞胞为中心心的一堆堆肉眼可可见、有有一定形形态构造造的子细细胞集团团，这就就是菌落落。细菌菌菌落常常表现为为湿润、粘粘稠、光光滑、较较透明、易易挑取、质质地均匀匀以及菌菌落正反反面或边边缘与中中央部位位颜色一一致等。二. 真真菌真菌是一一类有细细胞壁，无无叶绿素素，以寄寄生或腐腐生方式式生存，少少数为单单细胞，多多数为多多细胞，能能进行无无性或有有性繁殖殖的一类类

7、真核细细胞型微微生物。真菌包括括单细胞胞与多细细胞两类类。单细细胞真菌菌呈圆形形或卵圆圆形，称称为酵母母菌；多多细胞真真菌由菌菌丝和孢孢子组成成，并交交织成团团，称丝丝状菌或或霉菌。真菌生长长的最适适的温度度为222288，最最适的ppH值为为466。其繁繁殖能力力强，但但生长速速度比细细菌慢，常常需1-4周才才形成菌菌落。真真菌对热热的抵抗抗力不强强，一般般加热660770 1小时时即被杀杀死，但但对干燥燥、日光光、紫外外线和一一些化学学消毒剂剂有抵抗抗力，但但对2.5碘碘酒、110甲甲醛则较较敏感。1. 霉霉菌霉菌是丝丝状真菌菌的俗称称，意即即发霉霉的真菌菌，它它们往往往能形成成分枝繁繁茂

8、的菌菌丝体，但但又不象象蘑菇那那样产生生大型的的子实体体。（1）霉霉菌的形形态、大大小和结结构构成霉菌菌营养体体的基本本单位是是菌丝。菌菌丝是一一种管状状的细丝丝，把它它放在显显微镜下下观察，很很像一根根透明胶胶管，它它的直径径一般为为3-110微米米，比细细菌的细细胞约粗粗几倍到到几十倍倍。菌丝丝可伸长长并产生生分枝，许许多分枝枝的菌丝丝相互交交织在一一起，就就叫菌丝丝体。（2）霉霉菌的繁繁殖霉菌有着着极强的的繁殖能能力，而而且繁殖殖方式也也是多种种多样的的。在自自然界中中，霉菌菌主要依依靠产生生形形色色色的孢孢子进行行繁殖。孢孢子有点点像植物物的种子子，不过过数量特特别多，特特别小。霉菌的

9、孢孢子具有有小、轻轻、干、多多，以及及形态色色泽各异异、休眠眠期长和和抗逆性性强等特特点，每每个个体体所产生生的孢子子数，经经常是成成千上万万的，有有时竟达达几百亿亿、几千千亿甚至至更多。这这些特点点有助于于霉菌在在自然界界中随处处散播和和繁殖。对对人类的的实践来来说，孢孢子的这这些特点点有利于于接种、扩扩大培养养、菌种种选育、保保藏和鉴鉴定等工工作，对对人类的的不利之之处则是是易于造造成污染染、霉变变和易于于传播动动植物的的霉菌病病害。 （3）霉霉菌的菌菌落由于霉菌菌的菌丝丝较粗而而长，因因而霉菌菌的菌落落较大，有有的霉菌菌的菌丝丝蔓延，没没有局限限性。菌菌落质地地一般比比较疏松松，外观观干

10、燥，不不透明，呈呈现或紧紧或松的的蛛网状状、绒毛毛状或棉棉絮状；菌落与与附着物物的连接接紧密，不不易挑取取；菌落落正反面面的颜色色和边缘缘与中心心的颜色色常不一一致。 2. 酵酵母菌酵母菌在在自然界界中分布布很广，尤尤其喜欢欢在偏酸酸性且含含糖较多多的环境境中生长长，例如如，在水水果、蔬蔬菜、花花蜜的表表面和在在果园土土壤中最最为常见见。 （1）酵酵母菌的的形态、大大小和结结构酵母菌是是单细胞胞真核微微生物。酵酵母菌细细胞的形形态通常常有球形形、卵圆圆形、腊腊肠形、椭椭圆形、柠柠檬形或或藕节形形等。比比细菌的的单细胞胞个体要要大得多多，一般般为1-5微米米5-30微微米。酵母菌具具有典型型的真

11、核核细胞结结构,有有细胞壁壁、细胞胞膜、细细胞核、细细胞质、液液泡、线线粒体等等。（2）酵酵母菌的的繁殖酵母菌有有多种繁繁殖方式式，包括括无性繁繁殖和有有性繁殖殖。有人人把只进进行无性性繁殖的的酵母菌菌称作假酵母母，而而把进行行有性繁繁殖的酵酵母菌称称作真真酵母。（3）酵酵母菌的的菌落大多数酵酵母菌的的菌落特特征与细细菌相似似，但比比细菌菌菌落大而而厚，菌菌落表面面光滑、湿湿润、粘粘稠，容容易挑起起，菌落落质地均均匀，正正反面和和边缘、中中央部位位的颜色色都很均均一，菌菌落多为为乳白色色，少数数为红色色，个别别为黑色色。 三. 病病毒病毒属非非细胞型型微生物物，在自自然界分分布非常常广泛，可可

12、在人、动动物、植植物、真真菌和细细菌中寄寄居并引引起感染染。病毒毒是体积积最小、结结构最简简单的微微生物，它它仅有一一种核酸酸（DNNA或RRNA）作作其遗传传物质。病病毒必须须在宿主主活细胞胞内寄生生，依靠靠细胞提提供的能能量、营营养物质质及生物物大分子子合成机机制，完完成病毒毒的复制制过程。病毒与人人类的关关系极为为密切，人人类的传传染病约约75是由病病毒引起起的。有有些病毒毒传染性性强，可可引起世世界大流流行（如如流感、艾艾滋病等等）。1. 病病毒的大大小、形形态和结结构病毒体积积微小，大大多数病病毒只有有采用电电子显微微镜将其其放大数数千、数数万倍才才能看见见。病毒毒的形态态不一，基基

13、本可归归纳为三三种：杆杆状、球球状和这这两种形形态结合合的复合合型。病毒没有有细胞构构造，病病毒粒子子的主要要成分是是核酸和和蛋白质质，在宿宿主细胞胞协助下下，通过过核酸的的复制和和核酸蛋蛋白装配配的形式式进行增增殖。病病毒的结结构通常常有螺旋旋对称型型、200面体立立体对称称型和复复合对称称型。2. 病病毒的增增殖病毒只有有在宿主主的活细细胞里才才能进行行增殖。病病毒的增增殖不是是二分裂裂方式，而而是以其其基因组组为模板板，藉DDNA多多聚酶或或RNAA多聚酶酶以及其其它必要要因素，经经过复杂杂的生化化合成过过程，复复制出病病毒的基基因组。此此时宿主主细胞的的生化合合成受到到抑制，病病毒基因

14、因则经过过转录、翻翻译等过过程，产产生大量量病毒蛋蛋白质，再再经过装装配，最最终释放放出子代代病毒。病病毒这种种以核酸酸分子为为模板进进行增殖殖的方式式称为自自我复制制。3. 理理化因素素对病毒毒的影响响（1）物物理因素素温度 多数数病毒耐耐冷不耐耐热。在在干冰温温度（-70）和液液氮温度度（-1196）下，病病毒感染染性可保保持数月月甚至数数年。在在5060 300分钟，1100几秒钟钟即可灭灭活。pH 多数数病毒在在pH559范范围内稳稳定，强强酸或强强碱条件件下可被被灭活。射线 X射射线、射线和和紫外线线都能灭灭活病毒毒。（2）化化学因素素主要有化化学消毒毒剂、抗抗生素及及中草药药等。除

15、除强酸、强强碱消毒毒剂外，酚酚类、氧氧化剂、卤卤素类、醇醇类等对对病毒均均有灭活活作用。例例如20003年年非典时时期，大大家都用用84、过过氧乙酸酸等来消消毒，884的主主要成分分就是次次氯酸钠钠，就是是刚才所所说的卤卤素类消消毒剂，而而过氧乙乙酸的就就是冰醋醋酸和过过氧化氢氢按一定定比例混混合制成成的，属属于强酸酸加氧化化。第三章 消毒毒与灭菌菌下列术语语常用于于表示物物理或化化学方法法对微生生物的杀杀灭程度度。消毒：杀杀死物体体上病原原微生物物的方法法,并不不一定能能杀死含含细菌的的芽胞。消消毒所用用的试剂剂称为消消毒剂。灭菌：杀杀灭物体体上所有有微生物物的方法法。灭菌菌比消毒毒要求高高

16、，包括括杀灭细细菌芽孢孢在内的的全部病病原微生生物和非非病原微微生物。抑菌：抑抑制体内内或体外外细菌的的生长繁繁殖。常常用的抑抑菌剂为为各种抗抗生素，可可抑制细细菌的繁繁殖。防腐：防防止或抑抑制体外外细菌生生长繁殖殖的方法法，细菌菌一般不不死亡。同同一种化化学药品品在高浓浓度时为为消毒剂剂，低浓浓度时常常为防腐腐剂。消消毒与灭灭菌的方方法一般般可分为为物理学学方法和和化学方方法两大大类。一. 物物理消毒毒灭菌法法用于消毒毒灭菌的的物理因因素有热热力、辐辐射、过过滤等。1. 热热力灭菌菌法高温对细细菌具有有明显的的致死作作用，因因此最常常用于消消毒与灭灭菌。多多数无芽芽孢的细细菌经555660作

17、作用300600分钟后后死亡。经经80湿热55100分钟可可杀死所所有细菌菌繁殖体体、真菌菌和酵母母菌。细细菌芽孢孢对高温温有很强强的抵抗抗力，例例如炭疽疽芽孢杆杆菌的芽芽孢，耐耐受515分分钟的煮煮沸，而而肉毒梭梭菌的芽芽孢则需需煮沸335小小时才死死亡。热力灭菌菌法分干干热灭菌菌和湿热热灭菌两两大类，相相同温度度下，后后者的灭灭菌效力力比前者者大。2. 辐辐射灭菌菌法（1）紫紫外线 作用用于DNNA，使使细菌DDNA的的复制和和转录受受到干扰扰，导致致细菌变变异或死死亡。常常用于室室内的空空气消毒毒。（2）电电离辐射射 对对各种细细菌均有有致死作作用。常常用于大大量一次次性医用用塑料制制品

18、的消消毒和食食品的消消毒。（3）微微波 是一种种波长为为1mmm1mm的电磁磁波，可可穿透玻玻璃、塑塑料薄膜膜及陶瓷瓷等物质质，但不不能穿透透金属表表面。多多用于检检验室用用品、无无菌室的的用具的的消毒。3. 滤滤过除菌菌法用物理阻阻留的方方法将液液体或空空气中的的细菌除除去,以以达到除除菌目的的。滤菌器含含有微细细小孔0.222微米米,只允允许液体体或气体体通过,而大于于孔径的的细菌等等颗粒不不能通过过 。适用范围围：血清清、毒素素、抗生生素以及及空气等等的除菌菌。二. 化化学消毒毒灭菌法法许多化学学药物能能影响微微生物的的化学组组成、物物理结构构和生理理活性，从从而发挥挥防腐、消消毒及灭灭

19、菌的作作用。洁净室(区)应应定期消消毒，使使用的消消毒剂不不得对设设备、物物料和成成品产生生污染。消消毒剂品品种应定定期更换换，防止止产生耐耐药菌株株。常用消毒毒剂的种种类和用用途类别作用机制制常用种类类用途酚类蛋白变性性，细胞胞膜损伤伤石炭酸地面、器器具表面面、皮肤肤消毒醇类蛋白变性性乙醇皮肤、体体温计消消毒氧化剂氧化、蛋蛋白沉淀淀高锰酸钾钾皮肤、尿尿道、蔬蔬菜、水水果消毒毒重金属盐盐氧化、蛋蛋白酶变变性红汞、硫硫柳汞皮肤、粘粘膜、小小创伤消消毒氧化剂氧化、蛋蛋白沉淀淀过氧乙酸酸、碘酒酒塑料、玻玻璃器材材、皮肤肤消毒表面活性性剂蛋白变性性，细胞胞膜损伤伤新洁而灭灭手术洗手手、浸泡泡手术器器械

20、第四章 GMMP与微微生物药品生产产中微生生物的生生态学分分布在药品生生产中，由由于受到到各种要要素（制制药厂房房环境的的空气、制制药用水水、操作作人员、物物料、设设备等）的的影响，都都可能导导致药品品的微生生物污染染。因此此，GMMP对各各种要素素都提出出了防止止污染的的基本要要求。中中国药典典微生物物限度检检查法规规定的检检查项目目包括细细菌数、霉霉菌数、酵酵母菌数数和控制制菌检查查。1. 空空气中的的微生物物空气本身身并不产产生污染染，因为为空气不不含必要要的水分分和营养养，不是是适合微微生物生生长繁殖殖的天然然环境，但但是一般般的大气气环境仍仍含有不不少的细细菌、霉霉菌和酵酵母菌。空气

21、中的的微生物物来自灰灰尘微粒粒（自然然因素如如风，人人为因素素如车），来来自人的的皮肤与与衣服，以以及谈话话、咳嗽嗽、打喷喷嚏等造造成的飞飞沫。空空气中微微生物数数量取决决于灰尘尘量和活活动状况况，例如如，有活活跃人群群的地方方微生物物多，不不清洁的的房间比比清洁的的房间多多，潮湿湿的地方方比干燥燥的地方方多。因因此，空空气是侵侵袭我们们产品的的污染物物的主要要媒介。因因此保持持空气洁洁净是极极为重要要的。在药品生生产中，减减少空气气中微生生物数量量的方法法有多种种，常用用的有以以下3种种方法： 空气气洁净技技术采用用的过滤滤方法 过滤是最最常用的的方法。过过滤介质质种类很很多，例例如：纤纤维

22、素、玻玻璃棉或或人造纤纤维等。空空气净化化装置可可用于整整个房间间如无菌菌操作室室，也可可只限于于操作区区域局部部如超净净工作台台。 化学学消毒方方法 采用消消毒剂作作用于室室内空气气和物体体表面。 紫外外线照射射方法 采用用紫外线线对室内内空气进进行照射射。2. 制制药用水水中的微微生物在生产过过程中，水水是应用用最广泛泛的原料料之一。从从理论上上来讲，微微生物在在纯水中中是不能能生长的的。但是是，所有有的各类类水不管管怎样仔仔细蒸溜溜或过滤滤，总会会含有一一定量的的可溶性性有机物物和盐类类。正是是这些可可溶性的的物质被被微生物物利用作作为它们们生长的的养料源源泉。工艺用水水在制药药企业防防

23、止污染染及作为为制药用用水方面面至关重重要。因因为它不不仅直接接用于产产品的生生产，而而且也用用于清洗洗设备和和用于冷冷却。药药品微生生物污染染的关键键环节在在于工艺艺用水，因因为水是是微生物物生长代代谢的一一个必要要成分。中中国药典典收载了了纯化水水和注射射用水的的质量标标准。常用的对对水消毒毒的方法法，与空空气消毒毒的方法法一样，也也是化学学消毒剂剂、过滤滤与紫外外线照射射3种。 化学学消毒剂剂方法 对水水的消毒毒以化学学消毒剂剂方法较较常用，效效果也最最好。常常使用次次氯酸钠钠或通氯氯气。在在使用中中，应注注意到水水系统中中不能留留有消毒毒不到的的“死角角”。 膜过过滤法 适用用于水系系

24、统的连连续循环环处理。 紫外外线照射射法 在水系系统中应应用紫外外线照射射消毒，适适用于需需要特殊殊处理的的水（如如光学透透明度要要求高），一一般在末末端之前前。这种种方法因因处理过过的水无无臭无味味，而优优于化学学消毒剂剂方法；因不产产生微生生物移居居滤器的的现象，而而优于膜膜滤器。在水系统统中，这这3种方方法综合合应用，设设计安装装在适当当的位置置。3. 厂厂房建筑筑与设备备表面的的微生物物厂房建筑筑物的内内表面，以以及设备备表面、容容器内外外表面等等，都可可以是微微生物寄寄生存的的地方。由由于空气气中的湿湿度，所所有表面面都包上上一层含含水的薄薄膜。这这层薄膜膜由于静静电吸引引而饱含含尘

25、埃微微粒，有有很多时时候，表表面还覆覆盖一层层油状物物质，此此层油膜膜易受到到尘粒污污染。表表面因尘尘埃微粒粒和微生生物由空空气传播播的回降降而受到到污染。 请记住：一个表表面看起起来很干干净，而而实际上上已经被被千百万万个微生生物所污污染，除除非已经经做了正正确的消消毒灭菌菌。制药企业业生产车车间的厂厂房，库库房及实实验室都都必须清清洁整齐齐。建筑筑物表面面不透水水，光滑滑平整、无无裂缝、接接口严密密、无颗颗粒物脱脱落，并并能耐受受清洗和和消毒。设设备、管管道应易易于拆卸卸、结构构简单，便便于清洁洁消毒。特特别是药药品生产产过程中中使用的的容器，包包括内包包装容器器，都应应进行清清洗和消消毒

26、。4. 人人体的微微生物微生物广广泛分布布于自然然界，人人体与自自然环境境接触，当当然也不不能例外外。凡是是人体体体表皮肤肤与外界界相通的的腔道如如口腔、鼻鼻腔、肠肠道、眼眼结膜、泌泌尿生殖殖道等均均存在不不同种类类的微生生物，其其中有些些微生物物可以长长期寄居居在人的的体表、皮皮肤和黏黏膜上。以下举出出一些人人员污染染的途径径和方式式：人的头头发和皮皮肤水滴衣着化妆品品和珠宝宝手饰生产过过程中人人们所引引起的混混杂和误误差(1) 人的头头发和皮皮肤 每分钟从从人类皮皮肤中要要散发出出约100,0000个微微生物。我我们的手手上，也也拥有大大量的微微生物。此此外，在在人们正正常的日日常活动动中

27、都接接触大量量微生物物。皮肤肤上经常常存在白白色葡萄萄球菌、枯枯草杆菌菌、类白白喉杆菌菌、大肠肠杆菌等等，有时时还有非非致病性性的抗酸酸菌、真真菌等。(2) 水滴呼吸和咳咳嗽将产产生出大大量水滴滴，这种种水滴既既含有尘尘粒污染染也含有有微生物物污染。口腔是对对污染最最为敏感感的地区区，常见见的微生生物有白白色葡萄萄球菌、类类白喉杆杆菌、乳乳酸杆菌菌、放线线菌、真真菌、螺螺旋体等等。呼吸吸道常存存在空气气中的细细菌，如如葡萄球球菌、类类白喉杆杆菌；在在鼻咽部部还有链链球菌、奈奈氏菌属属。一次次咳嗽或或喷嚏将将把千百百万个微微生物引引入工作作环境内内。 (3) 衣着从可洗涤涤的纺织织物中，可可能散

28、发发出棉绒绒和淀粉粉粒。而而从羊毛毛、开士士米和其其它松软软的针纺纺织物中中也可能能散落出出纤维和和磨损下下的微粒粒。污染染也可能能通过我我们的鞋鞋子进入入工作场场所。 (4) 化妆品品和珠宝宝手饰 发胶、香香水、睫睫毛膏、香香粉等，为为微生物物污染提提供了极极好的源源泉。耳耳环、戒戒指、项项链、手手链能传传播微生生物污染染。如果果，一小小片珠宝宝碎片落落入一批批产品中中，则可可能引起起严重的的尘粒污污染。 (5) 生产过过程中人人们所引引起的混混杂和误误差由人引起起的污染染也可能能来自于于生产过过程中出出现的混混杂和误误差。例例如，当当员工没没有按照照SOPP进行工工作时，车车间的污污染程度

29、度增加。让让装产品品的容器器不加盖盖存放，将将导致产产品污染染。由于人体体携带有有不同种种类的微微生物，因因此在药药品生产产的全过过程中，每每个工序序都有可可能发生生由人体体携带的的微生物物导致药药品污染染的危险险。例如如，用未未经清洁洁消毒的的手直接接接触药药品使其其污染，通通过谈话话、咳嗽嗽等方式式引起药药品的污污染。人体不同同部位所所带细菌菌数量部位细菌数量量手部前额头皮腋窝鼻腔分泌泌物唾液粪便10010000/ cm221000010000000/ cm22约1000万/ cm22约10000万/ g约10000万/ g约10亿亿/ gg710亿亿/ gg5. 物物料的微微生物物料系指

30、指原料、辅辅料和包包装材料料等。原辅料可可能将大大量的微微生物带带入到药药物制剂剂中。因因此，选选用符合合标准的的原辅料料，将有有利于控控制药品品和环境境的污染染水平。来源于动动物的原原料药或或辅料（如如明胶），有有可能被被动物病病原体所所污染；来源于于植物的的原料药药或辅料料（如淀淀粉）则则可能被被多种细细菌、霉霉菌、酵酵母菌所所污染。原辅料的的处理方方法因药药物类型型而异，许许多原辅辅料需进进行消毒毒或灭菌菌处理。植植物药材材可用晾晾晒、烘烘烤方法法使之充充分干燥燥，以减减少微生生物繁殖殖。原辅料在在储藏过过程中必必须注意意环境条条件。包装材料料，特别别是内包包装材料料，一方方面包装装药品

31、，另另一方面面防止外外界微生生物进入入药中。若若处理不不当，在在药品储储藏和运运输过程程中，极极易引起起污染，造造成严重重后果。总总之，包包装材料料应考虑虑不同需需要加以以清洁或或消毒处处理进行行合理封封装。原则是尽尽量减少少微生物物数量，预预防发生生污染。二. 微微生物污污染导致致药物变变质的因因素药品的生生产、储储存、使使用的全全过程，都都有因微微生物污污染而导导致药物物变质的的因素。而而药物变变质，一一般需要要很高的的微生物物污染程程度。也也就是说说，微生生物面广广、量大大的繁殖殖才出现现显著的的易被觉觉察的损损坏现象象。微生物污污染导致致药物变变质的因因素有以以下几个个方面：1. 微微

32、生物污污染数量量在药品生生产中应应将微生生物污染染数量控控制在最最低限度度，这就就需要采采取综合合措施。2. 微微生物生生长的营营养因素素许多药物物成分，都都有微生生物生长长所需的的碳源、氮氮源或无无机盐类类。生产产用水（纯纯化水、注注射用水水）亦能能支持微微生物生生长。3. ppH值pH值为为中性时时最适合合微生物物生长。某某些微生生物在ppH3.5或ppH8.099.5仍仍能生长长。4. 温温度对于微生生物污染染引起药药物变质质的温度度，不同同的微生生物有不不同的最最适温度度。根据据微生物物生长的的最适温温度不同同，可以以将微生生物分为为嗜冷、兼兼性嗜冷冷、嗜温温、嗜热热和超嗜嗜热等五五种

33、不同同的类型型。对嗜嗜温微生生物来说说，可将将药物储储藏在阴阴冷、干干燥处。三. 防防止微生生物污染染的原则则1. 了了解污染染源对药品生生产全过过程可能能造成污污染的来来源，进进行深入入的了解解研究，从从而设计计一个完完好的生生产工艺艺，制定定规章制制度和标标准操作作规程，从从各个环环节采取取消毒和和卫生措措施来防防止微生生物污染染，使产产品达到到所要求求的卫生生学质量量，包括括稳定性性及各种种微生物物参数。2. 进进行微生生物监测测在药品生生产过程程中，应应按GMMP要求求不断进进行各项项微生物物卫生学学监测。例例如：对对洁净室室空气中中的浮游游菌、沉沉降菌的的监测；对无菌菌设备清清洁灭菌

34、菌的验证证；对非非无菌药药品进行行细菌和和活菌数数测定和和病原菌菌的限制制性检查查等。四. 药药品生产产人员卫卫生注意意事项1. 新新进人员员的健康康检查药品生产产企业在在招收新新职工时时，一定定要对新新职工进进行全面面的健康康检查，要要确保新新进厂的的职工不不患有急急性或慢慢性传染染病。另另外还要要根据新新进职工工安排的的具体岗岗位性质质再确定定其它具具体检查查的项目目。 2. 建建立生产产人员健健康档案案药品生产产企业应应建立职职工个人人健康档档案，以以便于检检查、了了解、追追踪个人人健康状状况。 3. 培培养药品品生产人人员良好好的个人人卫生习习惯 勤洗手、勤勤剪指甲甲；定期期洗澡、勤勤

35、理发；勤换衣衣服、勤勤洗工作作服；在生产区区内做到到三个禁禁止：禁禁止吃东东西、禁禁止吸烟烟、禁止止大声喧喧哗。4. 洁洁净区生生产人员员要求洁净区工工作人员员要尽可可能少而而精，只只有工作作需要时时才能进进入；操操作人员员在洁净净区动作作要避免免剧烈运运动，以以减少人人的发尘尘量；洁洁净区的的门应关关紧，避避免不必必要的移移动，以以保持洁洁净区的的风速、风风量、风风型和风风压；如如果是无无菌区的的话，操操作人员员的自我我约束就就更多，要要严格按按无菌操操作规程程执行。 5. 药药品生产产防污染染控制措措施（1）划划分洁净净级别：1000级、1100000级、11000000级级、300000

36、00级（2）严严格更衣衣程序：一更、二二更、三三更（3）消消毒和灭灭菌药品生产产洁净室室（区）空空气洁净净度级别别洁净度级级别尘粒最大大允许数数/个m-33微生物最最大允许许数0.55m5mm浮游菌/个mm-3沉降菌/个皿皿-1100级级35000051100000级3500002000010031000000级级350000000200000500103000000级级105000000060000015消毒和灭灭菌消毒：杀杀灭有害害微生物物常用消毒毒剂：新新洁尔灭灭、石炭炭酸、酒酒精灭菌：杀杀灭所有有微生物物常用灭菌菌方法：物理法法（干热热、湿热热、紫外外）、化化学法（甲甲醛熏蒸蒸等）常用

37、消毒毒剂浓度度及用途途消毒液名名称浓度用途石炭酸1%用于设备备、墙壁壁等消毒毒5%用于地面面的清洁洁消毒酒精75%用于各岗岗位、工工用具、设设备表面面及人员员洗手新洁尔灭灭0.4%用于三更更洗手、更更衣柜擦擦洗来苏尔1.5%用于一般般生产区区清洁3%用于地面面、墙及及工具消消毒6. 日日常工作作（1）生生产结束束后岗位位人员的的工作：彻底清清洁生产产现场和和设备表表面；（2）生生产结束束后灭菌菌人员的的工作：用消毒毒剂擦拭拭房顶（包包括高效效送风口口）、墙墙壁、地地面等，并并开启紫紫外灯；（3）每每月定期期进行一一次大消消毒。第二模块块微生生物显微微技术和和染色技技术一、光学学显微镜镜结构普通

38、光学学显微镜镜的构造造主要分分为三部部分：机机械部分分、照明明部分和和光学部部分。 机械部部分显微镜结结构图（1）镜镜座：是是显微镜镜的底座座，用以以支持整整个镜体体。 （2）镜镜柱：是是镜座上上面直立立的部分分，用以以连接镜镜座和镜镜臂。 （3）镜镜臂：一一端连于于镜柱，一一端连于于镜筒，是是取放显显微镜时时手握部部位。 （4）镜镜筒：连连在镜臂臂的前上上方，镜镜筒上端端装有目目镜，下下端装有有物镜转转换器。 （5）物物镜转换换器(旋旋转器)简称“旋旋转器”：接于棱棱镜壳的的下方，可可自由转转动，盘盘上有334个个圆孔，是是安装物物镜部位位，转动动转换器器，可以以调换不不同倍数数的物镜镜，当

39、听听到碰叩叩声时，方方可进行行观察，此此时物镜镜光轴恰恰好对准准通光孔孔中心，光光路接通通。转换换物镜后后，不允允许使用用粗调节节器，只只能用细细调节器器，使像像清晰。 （6）镜镜台(载载物台)：在镜镜筒下方方，形状状有方、圆圆两种，用用以放置置玻片标标本，中中央有一一通光孔孔，我们们所用的的显微镜镜其镜台台上装有有玻片标标本推进进器(推推片器)，推进进器左侧侧有弹簧簧夹，用用以夹持持玻片标标本，镜镜台下有有推进器器调节轮轮，可使使玻片标标本作左左右、前前后方向向的移动动。 （7）调调节器：是装在在镜柱上上的大小小两种螺螺旋，调调节时使使镜台作作上下方方向的移移动。 粗调节节器(粗粗准焦螺螺旋

40、)：大螺旋旋称粗调调节器，移移动时可可使镜台台作快速速和较大大幅度的的升降，所所以能迅迅速调节节物镜和和标本之之间的距距离使物物象呈现现于视野野中，通通常在使使用低倍倍镜时，先先用粗调调节器迅迅速找到到物象。 细调节节器(细细准焦螺螺旋)：小螺旋旋称细调调节器，移移动时可可使镜台台缓慢地地升降，多多在运用用高倍镜镜时使用用，从而而得到更更清晰的的物象，并并借以观观察标本本的不同同层次和和不同深深度的结结构。 照明部部分 装在镜台台下方，包包括反光光镜,集集光器。 （1）反反光镜：装在镜镜座上面面，可向向任意方方向转动动，它有有平、凹凹两面，其其作用是是将光源源光线反反射到聚聚光器上上，再经经通

41、光孔孔照明标标本，凹凹面镜聚聚光作用用强，适适于光线线较弱的的时候使使用，平平面镜聚聚光作用用弱，适适于光线线较强时时使用。 （2）集集光器(聚光器器)位于于镜台下下方的集集光器架架上，由由聚光镜镜和光圈圈组成，其其作用是是把光线线集中到到所要观观察的标标本上。 聚光镜镜：由一一片或数数片透镜镜组成，起起汇聚光光线的作作用，加加强对标标本的照照明，并并使光线线射入物物镜内，镜镜柱旁有有一调节节螺旋，转转动它可可升降聚聚光器，以以调节视视野中光光亮度的的强弱。 光圈(虹彩光光圈)：在聚光光镜下方方，由十十几张金金属薄片片组成，其其外侧伸伸出一柄柄，推动动它可调调节其开开孔的大大小，以以调节光光量

42、。 光学部部分 （1）目目镜：装装在镜筒筒的上端端，通常常备有223个个，上面面刻有55、110或或15符号以以表示其其放大倍倍数，一一般装的的是100的目目镜。 （2）物物镜：装装在镜筒筒下端的的旋转器器上，一一般有334个个物镜，其其中最短短的刻有有“100”符符号的为为低倍镜镜，较长长的刻有有“400”符符号的为为高倍镜镜，最长长的刻有有“1000”符符号的为为油镜，此此外，在在高倍镜镜和油镜镜上还常常加有一一圈不同同颜色的的线，以以示区别别。 显微镜的的放大倍倍数是物物镜的放放大倍数数与目镜镜的放大大倍数的的乘积，如如物镜为为10，目镜镜为100，其其放大倍倍数就为为1010=1000

43、。 显微镜目目镜长度度与放大大倍数呈呈负相关关，物镜镜长度与与放大倍倍数呈正正相关。即即目镜长长度越长长，放大大倍数越越低；物物镜长度度越长，放放大倍数数越高。二、光学学显微镜镜的使用用： 1.显微微镜的取取送：右手握握镜臂；左手托托镜座；置于胸胸前。2.显微微镜的旋旋转：镜筒朝朝前，镜镜臂朝后后；置于观观察者座座位前的的桌子上上，偏向向身体左左侧，便便于左眼眼向目镜镜内观察察；置于桌桌子内侧侧，距桌桌沿5ccm左右右。 3.对光光：转动粗粗准焦螺螺旋，使使镜筒徐徐徐上升升，然后后转动转转换器，使使低倍物物镜对准准通光孔孔；用手指指转动遮遮光器（或或片状光光圈），使使最大光光圈对准准通光孔孔，

44、左眼眼向目镜镜内注视视，同时时转动反反光镜，使使其朝向向光源，使使视野内内亮度均均匀合适适。 4.低倍倍物镜的的使用：用手转转动粗准准焦螺旋旋，使镜镜筒徐徐徐下降，同同时两眼眼从侧面面注视物物镜镜头头，当物物镜镜头头与载物物台的玻玻片相距距233mm时时停止。用左眼眼向目镜镜内注视视（注意意右眼应应该同时时睁着），并并转动粗粗准焦螺螺旋，使使镜筒徐徐徐上升升，直到到看清物物象为止止。如果果不清楚楚，可调调节细准准焦螺旋旋，至清清楚为止止。 5.高倍倍物镜的的使用：使用高倍倍物镜之之前，必必须先用用低倍物物镜找到到观察的的物象，并并调到视视野的正正中央，然然后转动动转换器器再换高高倍镜。换换用高

45、倍倍镜后，视视野内亮亮度变暗暗，因此此一般选选用较大大的光圈圈并使用用反光镜镜的凹面面，然后后调节细细准焦螺螺旋。观观看的物物体数目目变少，但但是体积积变大。6.油镜镜的使用用方法： （1）原原理：使使用油镜镜观察时时，需加加香柏油油，因为为油镜需需要进入入镜头的的光线多多，但油油镜的透透气孔最最小，这这样进入入的光线线就少，物物体不易易看清楚楚。同时时又因自自玻片透透过的光光线，由由于介质质（玻片片空气气接物物镜）密密度（玻玻片：nn=1.52，空空气：nn=1.0）不不同而发发生了折折射散光光，因此此射入镜镜头的光光线就更更少，物物体更看看不清楚楚。于是是采用一一种和玻玻片折光光率相接接近

46、的介介质如香香柏油，加加于标本本与玻片片之间，使使光线不不通过空空气，这这样射入入镜头的的光线就就较多，物物象就看看得清楚楚（图22）。 （2）油油镜的使使用： a将光光线调至至最强程程度（聚聚光器提提高，光光圈全部部开放）。 b转动动粗调节节器使镜镜筒上升升，滴香香柏油11小滴（不不要过多多，不要要涂开）于于接物镜镜正下方方标本上上。 c转动动接物镜镜转换盘盘，使油油镜头于于镜筒下下方。 d俯身身镜旁侧侧面在肉肉眼的观观察下，转转动粗调调节器使使油镜头头徐徐下下降浸入入香柏油油内，轻轻轻接触触玻片为为止。 e慢慢慢转动粗粗调节器器，使油油镜头徐徐徐上升升至见到到标本的的物象为为止。 f转动动微调节节器，使使视野物物象达到到最清晰晰的程度度。 g左手手徐徐移移动推进进器，并并转动微微调节器器以观察察标本。 h标本本观察完完毕后，转转动粗调调节器将将镜筒升升起，取取下标本本玻片。立立即用擦擦镜纸将将镜头上上的香柏柏油擦净净。7.反光光镜的使使用：反光镜通通常与遮遮光器（或或光圈）配配合使用用，以调调节视野野内的亮亮度。反反光镜有有平面和和凹面。对对光时，如如果视野野光线太