DB37∕T 4484—2021 小麦种子活力测定 加速老化法、干旱胁迫法、盐胁迫法(山东省).pdf
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1、 ICS 65.020.20 CCS B 21 37 山东省地方标准 DB 37/T 44842021 小麦种子活力测定 加速老化法、干旱胁迫法、盐胁迫法 Wheat seed vigour test by accelerated ageing test,drought stress test,salt stress test 2021-12-29 发布 2022-01-29 实施 山东省市场监督管理局 发 布 DB 37/T 44842021 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 缩略语.2 5 测定原理.2 加速老化法.2 5.1 干旱胁迫法.
2、2 5.2 盐胁迫法.2 5.3 6 测定方案.2 总则.2 6.1 样品.2 6.2 测定平台.2 6.3 测定条件.2 6.4 7 试材和设备.3 试材.3 7.1 设备.3 7.2 8 试验步骤.3 加速老化法.3 8.1 干旱胁迫法.4 8.2 盐胁迫法.5 8.3 9 试验数据处理.6 加速老化法.6 9.1 干旱胁迫法.7 9.2 盐胁迫法.7 9.3 重新试验.8 9.4 10 结果计算和表示.9 11 结果报告.9 附录 A(资料性)小麦种子活力测定发芽试验原始记录表.11 附录 B(资料性)小麦种子活力测定结果报告单.12 参考文献.13 DB 37/T 44842021 I
3、I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省农业农村厅提出并组织实施。本文件由山东省农业标准化技术委员会种植业分技术委员会归口。DB 37/T 44842021 1 小麦种子活力测定 加速老化法、干旱胁迫法、盐胁迫法 1 范围 本文件规定了小麦(Triticum aestivum L.)种子活力测定干旱胁迫法、加速老化法、盐胁迫法的测定原则、测定方案、测定程序和结果报告。本文件适用于冬小麦和春小麦品种的种子活力测定。2 规范性引用文件 下列文件
4、中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 3543.2 农作物种子检验规程 扦样 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验 GB/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示与判定 GB/T 26462 种子发芽纸 3 术语和定义 GB/T 3543.2界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1 种子活力 seed vigour 在广泛的田间条件下,决定种子迅速整齐出苗和长成正常幼苗潜在能力的总称。3.2 种子批 seed lot 同一来源
5、、同一品种、同一年度、同一时期收获和质量基本一致、在规定数量之内的种子。来源:GB/T 3543.21995,3.1 3.3 送验样品 submitted sample 送到种子检验机构检验、规定数量的样品。来源:GB/T 3543.21995,3.4 3.4 试验样品(简称“试样”)working sample 在实验室中从送验样品中分出的部分样品,供测定某一检验项目之用。来源:GB/T 3543.21995,3.5 3.5 加速老化测定 accelerated ageing test 将试样置于高温高湿条件下进行人工老化处理,处理后进行标准发芽试验,统计正常幼苗数,计算发芽率。3.6 干旱
6、胁迫测定 drought stress test DB 37/T 44842021 2 将试样置于含高渗溶液的发芽床上进行干旱胁迫发芽试验,定期统计正常幼苗数,计算发芽率。3.7 盐胁迫测定 salt stress test 将试样置于含高盐溶液发芽床上进行盐胁迫发芽试验,定期统计正常幼苗数,计算发芽率。4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。AAT:加速老化测定(Accelerated Ageing Test)DST:干旱胁迫测定(Drought Stress Test)SST:盐胁迫测定(Salt Stress Test)5 测定原理 加速老化法 5.1 采用高温高湿处理种子,加速种子老化,其
7、劣变程度在几天内相当于数月或数年之久的自然劣变程度。高活力种子经一定条件的老化处理后仍能正常发芽,低活力种子则产生不正常幼苗甚至丧失生活力。因此,加速老化法能较好地预测田间出苗率和种子耐贮藏性。干旱胁迫法 5.2 小麦播种常遇干旱等逆境胁迫,将种子置于干旱胁迫环境中,模拟田间逆境条件,观察种子发芽成苗的能力。高活力种子耐旱、抗旱能力强,经一定条件的干旱胁迫下仍能正常发芽,而低活力则产生不正常幼苗甚至丧失生活力。因此,干旱胁迫法能较好地预测田间出苗率。盐胁迫法 5.3 小麦播种常遇到盐碱等逆境胁迫,将种子置于一定条件的盐胁迫环境中,模拟田间逆境条件,观察种子发芽成苗的能力。高活力种子细胞膜系统完
8、整且修复快,抗盐、耐盐能力强,盐胁迫下仍能正常发芽,而低活力种子则产生不正常幼苗甚至丧失生活力。因此,盐胁迫法能较好地预测田间出苗情况。6 测定方案 总则 6.1 在严格控制条件下,对试样按模拟逆境处理、标准发芽、数据分析的程序(加速老化法)和模拟逆境发芽、数据分析的程序(干旱胁迫法、盐胁迫法)进行测定。按规定要求填报测定结果,测定报告应注明测定方案所规定的条件。样品 6.2 送验样品为小麦种子,重量应不低于1 000 g。测定平台 6.3 人工气候箱、光照培养箱、发芽室或其它能够精准控温的发芽环境。测定条件 6.4 DB 37/T 44842021 3 种子活力测定应在有利于正确实施测定的控
9、制条件下进行,包括但不限于下列条件:种子检验员具备熟悉所使用测定方法的知识和技能;所有仪器与使用的技术相适应,并已经过定期维护、验证和校准。7 试材和设备 试材 7.1 7.1.1 老化盒:100 mm100 mm30 mm 等规格。7.1.2 尼龙网袋:150 mm100 mm、400 mm150 mm 等规格。7.1.3 置种板:可辅助小麦种子置床,每次可平行或交错置种 50 粒或 100 粒。7.1.4 数种板:可辅助数取一定数目的小麦种子。7.1.5 自封袋:12 号(450 mm340 mm)等规格。7.1.6 发芽盒(盘):120 mm120 mm50 mm 等规格。7.1.7 发
10、芽纸:GB/T 26462,110 mm110 mm、380 mm255 mm 等规格。7.1.8 试剂药品:次氯酸钠溶液、聚乙二醇 6000(Polyethylene Glycol-6000,PEG-6000)、氯化钠(NaCl)等。7.1.9 其它:其它发芽装置、温湿度计、玻璃棒、三角瓶、镊子、蒸馏水、标签纸、纱布、油性记号笔、酒精等。设备 7.2 7.2.1 人工老化处理设备:种子老化箱等。7.2.2 发芽设备:人工气候箱、光照培养箱、发芽室、恒温循环槽或其它能够精准控温发芽的设备。7.2.3 消毒干燥设备:高压蒸汽灭菌锅、电热鼓风干燥箱等。8 试验步骤 加速老化法 8.1 8.1.1
11、试样准备 启封后,随机数取试样净种子100粒,4次重复,共400粒。种子老化处理前用1.0%的次氯酸钠溶液浸泡消毒5 min,消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍,拭去种子表面浮水,备用。包衣种子可先柔性清洗然后消毒,或无须消毒处理。8.1.2 试验材料准备 发芽纸:将发芽纸121 1 高压蒸汽灭菌20 min后,烘干备用。发芽盒:将发芽盒清洗干净后,用75%的酒精溶液擦拭消毒,风干备用。8.1.3 加速老化测定 将种子放入老化盒或尼龙网袋中,放入种子老化箱内,控制温度在41 0.3,相对湿度不低于98%,加速老化处理72 h,取出,薄摊,回干(自然晾干或在不高于60 的条件下烘干),备用。纸上发芽:取
12、2张发芽纸(110 mm110 mm),叠放入发芽盒(120 mm120 mm50 mm)内,加入蒸馏水,充分润湿,用无菌纱布轻拭床面,除去余液和纸间气泡后,置种板辅助置种,纸边距1 cm1.5 cm。DB 37/T 44842021 4 种子置床后,盖上发芽盒盖,贴好标签并标注品种名称、样品编号、重复次数、置床时间等基本信息,后,放入人工气候箱。按照GB/T 3543.4,20 0.5 标准发芽8 d统计正常幼苗数,计算发芽率。盖纸发芽:取2张发芽纸(110 mm110 mm),叠放入发芽盒(120 mm120 mm50 mm)内,加入蒸馏水,充分润湿,用无菌纱布轻拭床面,除去余液和纸间气泡
13、后,置种板辅助置种,纸边距1 cm1.5 cm。种子置床后,加盖1张润湿的发芽纸,盖上发芽盒盖,贴好标签并标注品种名称、样品编号、重复次数、置床时间等基本信息,放入人工气候箱。按照GB/T 3543.4,20 0.5 标准发芽8 d统计正常幼苗数,计算发芽率。卷纸发芽:用75%的酒精溶液消毒操作台,将2张发芽纸(380 mm255 mm)叠放好,用油性记号笔在发芽纸一角较小区域标识样品信息(或备样品信息防水条),如:样品名称、重复编号等。发芽纸用蒸馏水充分润湿,用无菌纱布轻拭床面,除去余液和纸间气泡后,置种板辅助交错置种,种孔朝向一致,纸边距5 cm。种子置床后加盖1张润湿的发芽纸,将纸床(或
14、夹样品信息防水条)卷起,纸卷两端整平,并用皮筋扣住。将纸卷放入自封袋密封好(朝向一致),在自封袋上粘贴标签纸或用油性记号笔标识相关信息后,垂直放入人工气候箱(纸卷种孔端朝下)。按照GB/T 3543.4,20 0.5 标准发芽8 d统计正常幼苗数,计算发芽率。同时按照GB/T 3543.4,对未老化处理的试样种子进行标准发芽测定。20 0.5 发芽8 d统计正常幼苗数,计算发芽率。8.1.4 检查管理 在种子老化处理和发芽期间,应进行适当的检查管理,以维持原有老化处理及发芽条件。老化36 h和发芽4 d分别检查1次老化和发芽环境,若有问题及时进行相应维护。老化处理:温度保持在41 0.3 范围
15、内,相对湿度不低于98%。发芽床检查:发芽床始终保持湿润。发芽温度检查:温度保持在20 0.5 范围内。种子检查:发霉的种子应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5%时,应更换发芽床,以免霉菌因素影响测定结果。如发现腐烂无生活力的种子,应及时去除并做好相应记载。8.1.5 数据记录 按照GB/T 3543.4中正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实、不正常幼苗和死种子的鉴定标准进行数据统计,根据正常幼苗数,计算发芽率。干旱胁迫法 8.2 8.2.1 试样准备 启封后,随机数取试样净种子100粒,4次重复,共400粒。种子置床前用1.0%的次氯酸钠溶液浸泡消毒5 min,消毒后用无菌蒸馏水冲洗3遍,拭去种子
16、表面浮水,备用。包衣种子可先柔性清洗然后消毒,或无须消毒处理。8.2.2 试验材料准备 发芽纸:将发芽纸121 1 高压蒸汽灭菌20 min后,烘干备用。发芽盒:将发芽盒清洗干净后,用75%的酒精溶液擦拭消毒,风干备用。配制够量的15%的PEG-6000溶液。参考配制方法:称取PEG-6000溶质150 g,溶于蒸馏水中,定容至1 000 mL,备用。8.2.3 干旱胁迫测定 DB 37/T 44842021 5 采取纸上或纸间(盖纸和卷纸)置床方式对小麦种子进行干旱胁迫测定。纸上发芽:取2张发芽纸(110 mm110 mm),叠放入发芽盒(120 mm120 mm50 mm)内,加入PEG-
17、6000溶液,充分润湿,用无菌纱布轻拭床面,除去余液和纸间气泡后,置种板辅助置种,纸边距1 cm1.5 cm,盖上发芽盒盖,贴好标签并标注品种名称、样品编号、重复次数、置床时间等基本信息,放入人工气候箱,20 0.5 发芽8 d(12 h光暗交替)统计正常幼苗数,计算发芽率。盖纸发芽:取2张发芽纸(110 mm110 mm),叠放入发芽盒(120 mm120 mm50 mm)内,加入PEG-6000溶液,充分润湿,用无菌纱布轻拭床面,除去余液和纸间气泡后,置种板辅助置种,纸边距1 cm1.5 cm。种子置床后加盖1张PEG-6000溶液润湿的发芽纸,盖上发芽盒盖,贴好标签并标注品种名称、样品编
18、号、重复次数、置床时间等基本信息,放入人工气候箱,20 0.5 发芽8 d(12 h光暗交替)统计正常幼苗数,计算发芽率。卷纸发芽:用75%的酒精溶液消毒操作台,将2张发芽纸(380 mm255 mm)叠放好,用油性记号笔在发芽纸一角较小区域标识样品信息(或备样品信息防水条),如:样品名称、重复编号等。发芽纸用PEG-6000溶液充分润湿,用无菌纱布轻拭床面,除去余液和纸间气泡后,置种板辅助交错置种,种孔朝向一致,纸边距5 cm。种子置床后加盖1张PEG-6000溶液润湿的发芽纸,将纸床(或夹样品信息防水条)卷起,纸卷两端整平,并用皮筋扣住。将纸卷放入自封袋密封好(朝向一致),在自封袋上粘贴标
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