[林可霉素生物合成技术分析] 林可霉素维生素b6软膏.docx
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1、林可霉素生物合成技术分析 林可霉素维生素b6软膏 R917 A 1672-3783(2010)11-0118-01 文章论述了在合成培育基中利用林可链霉菌发酵生产林可霉素。 生物合成;技术 关于提高林可霉素产量的方法比较多,可在发酵液中加入前体,也可用磷酸盐对发酵过程进行调整。在实际的大生产中,经常采纳少量多次补入玉米浆来实现发酵过程的调整。玉米浆的主要成分为每100g干物质中含生物素1mg、蛋白质43g和结合氨基酸22.8g等,随着玉米浆的补入,细菌中辅酶Q的合成量提高,细胞的呼吸强度也增加。 本文采纳合成培育基进行摇瓶发酵试验,选择玉米浆中含量较丰富的D生物素、L-谷氨酸、L-缬氨酸等15
2、个因子首先进行两水平因子设计试验,以筛选出显著影响因子,然后进行响应面设计试验,通过软件分析得到优化的发酵培育基配方。 1 材料与方法 1.1 菌种:林可链霉菌(Streptomyces lincolnensis)L427,由江西国药有限公司供应。 1.2 培育基:种子培育基(%)淀粉1.9,葡萄糖2.5,黄豆饼粉2.3,玉米浆2.6,硫酸铵0.2,硝酸铵0.14,氯化钠007,硝酸钠0.086,磷酸二氢钾0.005,碳酸钙0.68。 玉米浆购自华北制药康欣有限公司,批号20060701。 发酵培育基(%)葡萄糖3.0,硫酸铵0.1,硝酸铵0.2,氯化钠0.05,磷酸氢二钾0.25,柠檬酸钠0
3、.3,硫酸锌0.0001,硫酸亚铁0.0001,硫酸镁0.15,碳酸钙0.8。 试验设计所用D生物素和L型氨基酸购自Sigma公司。 1.3 培育条件与培育方法:种子培育种子摇瓶于30,220r/min培育48h。 摇瓶发酵培育按30%的接种量将种子液接入发酵培育基,30,220r/min,培育168h。 1.4 生物效价的测定:采纳管碟法。鉴定菌为藤黄八叠球菌Sarcina lutea,CMCC(B)28001,由江西国药有限责任公司供应。林可霉素(lincomycin)标准品购自Sigma公司。 2 结果与探讨 2.1 试验设计:本文中发酵培育基采纳化学合成培育基,通过两水平因子设计(2
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