酶的分离纯化过程中要注意什么问题.docx
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1、酶别离纯化过程中的问题以及进行酶活力等测定的意义班级:生物技术133组别:第六组 姓名:董冰夏 学号:2013013906酶的别离纯化一般包括三个基本步骤:即抽提、纯化、结晶或制剂。首先将所需的酶从 原料中引入溶液,此时不可防止地夹带着一些杂质,然后再将此酶从溶液中选择性地别离出 来,或者从此溶液中选择性地除去杂质,然后制成纯化的酶制剂。酶的来源多为生物细胞。生物细胞内产生的总的酶量虽然是很高的,但每一种酶的含量 却很低,如胰脏中期消化作用的水解酶种类很多,但各种酶的含量却差异很大。因此,在提 取某一种酶时,首先应当根据需要,选择含此前最丰富的材料,如胰脏是提取胰蛋白酶、胰 凝乳蛋白酶、淀粉酶
2、和脂酶的好材料。由于从动物内脏或植物果实中提取酶制剂受到原料的 限制,如不能综合利用,本钱又很大。目前工业上大多采用培养微生物的方法来获得大量的 酶制剂。从微生物中来生产酶制剂的优点有很多,既不受气候地理条件限制,而且动植物体 内酶大都可以在微生物中找到,微生物繁殖快,产酶量又丰富,还可以通过选育菌种来提高 产量,用廉价原料可以大量生产。生物细胞产生的酶有两类:一类由细胞内产生后分泌到细胞外进行作用的酶,称为细胞 外酶。这类酶大都是水解酶,如酶法生产葡萄糖所用的两种淀粉酶,就是由枯草杆菌和根酶 发酵过程中分泌的。这类酶一般含量较高,容易得到;另一类酶在细胞内产生后并不分泌到 细胞外,而在细胞内
3、起催化作用,称为细胞内酶,如柠檬酸、肌甘酸、味精的发酵生产所进 行的一系列化学反响,就是在多种酶催化下在细胞内进行的,在类酶在细胞内往往与细胞结 构结合,有一定的分布区域,催化的反响具有一定的顺序性,使许多反响能有条不紊地进行。由于在生物组织中,除了我们所需要的某一种酶之外,往往还有许多其它酶和一般蛋白 质以及其他杂质,因此为制取某酶制剂时,必须经过分纯化的手续。因为酶是具有催化活性 的蛋白质,蛋白质很容易变性,所以在酶的提纯过程中应防止用强酸强碱,保持在较低的温 度下操作。酶是一种特殊的蛋白质,在别离纯化过程中需要注意温度以及PH值等的控制,注意在 纯化过程中所使用的缓冲溶液的离子强度的控制
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