临床生化检验应用工程师基础知识培训.docx

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1、临床生化化检验基基础知识识培训一、生化化基础知知识二、生化化仪器基基础知识识三、部分分生化项项目的临临床意义义本文档仅仅供生化化应用工工程师参参考阅览览，更多多专业知知识请查查阅后附附参考文文献。 刘伟杰杰20一三三-6-27一、 生化基础础知识1.1生生化诊断断试剂盒盒为由一一定的化化学品或或者酶类类组成的的多成分分混合试试剂（RReaggentt），最最终以水水溶液的的方式与与待测物物发生一一系列化化学或者者生化反反应，通通过生成成物或反反应物中中某物质质的吸光光度变化化，测量量待检测测物中某某种特定定物质的的含量。1.2生生化诊断断试剂用用于检测测样本，包包括：人人体血清清（主要要）、血

2、血浆及尿尿液中的的各种酶酶类和代代谢产物物，用于于预测，诊诊断以及及治疗监监测，协协助临床床医生诊诊治疾病病提供数数据参考考。1.3按按功能分分为：肝肝功、血血脂、肾肾功、心心肌、代代谢、免免疫&风湿、离子&其他。1.4试试剂性能能评价指指标：1 试剂剂外观2批间差差3准确度度4精密度度5线性（灵灵敏度）6抗干扰扰能力（特特异性）7稳定性性1.5试试剂检测测原理（朗朗伯比尔尔定律）：A=KKbc 式中，AA 为吸吸光度;K 为为吸收系系数，是是与入射射辐射的的波长及及吸收物物质的性性质有关关的常数数 ;bb为液层层厚度，单单位为ccm;cc 为吸吸收物质质的浓度度。当浓浓度的单单位为 moll

3、/L时时，K 的单位位为L/mollcm，称称为摩尔尔吸收系系数，通通常用 表示示。摩尔尔吸收系系数 表示示物质对对某一波波长的辐辐射的吸吸收特性性。愈大，表表示物质质对某波波长辐射射的吸收收力愈强强，因而而分光光光度法测测定的灵灵敏度就就愈高.1.6理理论值与与实测值值偏差的的解释：实测值值偏离了了朗伯比比尔定律律。偏离 LLambbertt-Beeer定定律的因因素：1复合光光对Beeer 定律的的偏离：吸收定定律要求求入射光光为单色色光，而而分光光光度计单单色光的的纯度主主要决定定于色散散元件及及光路设设计，即即使高精精度的仪仪器，也也得不到到纯单色色光，而而是波长长宽度的的复合光光，其

4、结结果导致致偏离LLambbertt Beeer 定律。2 杂散散光的影影响：杂杂散光(strray ligght) 是进进入检测测器待测测波长以以外的光光。主要要来源于于仪器色色散元件件表面的的散射、单色器器内壁尘尘埃等。3狭缝宽宽度的影影响：单单色器设设有进、出口狭狭缝，狭狭缝愈窄窄，单色色光愈纯纯，吸光光度增加加，但辐辐射能减减小，对对弱吸收收带的测测量有一一定影响响。定性性分析时时，为提提高分辨辨能力常常采用较较小的狭狭缝，而而定量分分析时，在在灵敏度度允许的的情况下下，宜采采用较大大狭缝。当出、入射狭狭缝宽度度相等时时，狭缝缝宽度引引起的误误差最小小。4非吸收收作用引引起的误误差：1

5、.散射射效应：光吸收收定律只只适用于于均匀的的吸收体体系，如如待测溶溶液是混混浊的，当当光通过过时，将将产生散散射效应应。其结结果使光光通过吸吸收物质质的光程程不固定定，散射射光的一一部分和和透射光光一起进进入检测测器，导导致偏离离 Beeer 定律。因此，免免疫比浊浊法常用用多点校校准来做做标准曲曲线。2. 荧荧光效应应：分子子吸收辐辐射能后后产生的的激发态态分子以以重新发发射辐射射的方式式回到基基态而发发射荧光光。由于于多数显显色体系系荧光效效应很小小，而且且荧光发发射是各各向同性性，只有有一部分分沿透射射光方向向进入检检测器，使使测量吸吸光度偏偏低。一一般情况况下，荧荧光效应应对分光光光

6、度法法产生的的影响较较小。目目前，多多数光度度计设有有两个样样品室，对对有荧光光试样可可置于离离检测器器较远的的样品室室，或在在光路中中插入适适当的滤滤光片以以消除荧荧光效应应。5测定过过程中产产生的误误差：化化学反应应引起的的误差， 人为的的误差等等，在此此不作详详细解释释。1.7生生化测定定方法：临床化化学自动动分析仪仪所涉及及的测定定方法包包括终点点测定法法、连续续监测法法、固定定时间法法等。1.8.1生化化分析基基本术语语概述：1双波长长：由主主波长和和副波长长构成的的两个波波长，测测定样品品采用双双波长可可以消除除对实验验的影响响。主波波长是指指测定某某物质时时，生成成的产物物颜色对

7、对光吸收收的特有有波长。副波长长是指测测定某物物质时，为为消除其其他干扰扰物质在在主波长长造成测测定干扰扰所设定定的波长长。2反应杯杯空白：在特定定波长下下，光通通过以蒸蒸馏水或或空气为为反应体体系所测测得的吸吸光度值值。3试剂空空白 ：在各特特定波长长下，光光通过以以蒸馏水水或生理理盐水为为样品和和相应测测定项目目试剂构构成的反反应体系系所测得得的吸光光度值。4样品空空白：在在各特定定波长下下，光通通过以生生物样品品和相应应测定项项目不含含有引起起反应的的一种或或多种成成分的试试剂构成成的反应应体系所所测得的的吸光度度值;或或由生物物样品和和相应测测定项目目试剂构构成的反反应体系系产生反反应

8、最初初时间所所测得的的吸光度度值。5终点法法 ：这这是最常常用的分分析法。因为该该法常有有标准液液，因此此又称比比例终点点法，是是经过一一定反应应时间后后，当反反应达到到平衡(终点)时做到到的一点点分析法法。一般般是在一一定温度度下，试试剂与样样品经过过一定反反应时间间，被送送人比色色系统，然然后检测测吸光度度的变化化，由微微机系统统处理计计算和打打印显示示出结果果。其中中又分一一点终点点和两点点终点法法。6续监测测法：也也叫速率率法，此此法通过过测定酶酶所催化化的反应应速度，间间接计算算出酶的的含量，称称酶活性性测定法法。在酶酶促反应应过程中中，不是是任何时时期的反反应速率率都和酶酶浓度成成

9、正比。当酶促促反应刚刚一开始始，底物物处于过过量状态态，酶与与底物开开始结合合，生成成复合物物 (EES) ，底物物浓度开开始下降降，此时时产物尚尚未生成成。当复复合物(ES)分解，生生成产物物(P) ，酶酶促反应应速度急急骤上升升，经过过很短的的作用时时间后，产产物的生生成量或或底物的的减少量量与反应应时间成成线性关关系，反反应速度度保持恒恒定不变变，这一一时期称称为零级级反应期期。随酶酶促反应应继续进进行，底底物不断断消耗，酶酶促反应应条件逐逐渐变化化，酶促促反应速速度逐渐渐减慢，产产物生成成或底物物减少量量的变化化曲线遂遂趋平坦坦，这一一时期称称为一级级反应期期。此时时的反应应速率常常常

10、不能能准确反反应酶的的含量。因此其其测光点点一般要要求取在在反应达达到平衡衡前。7两点速速率法：两点速速率法也也叫固定定时间法法，对测测定及标标准采用用两个时时间点测测定。采采用此方方法的如如肌酐（苦苦味酸法法），目目前多数数自动分分析仪还还是用 Jafffe 氏反应应测肌酐酐，即肌肌酐能同同碱性苦苦味酸盐盐生成红红橙色化化合物，这这个反应应特异性性不高，因因为维生生素 CC 、丙丙酣酸、丙酣、葡萄糖糖、乙酷酷醋酸、果糖、氨基马马尿酸、蛋白质质及其他他反应产产物亦能能与碱性性苦位酸酸盐生成成红色化化合物，血血清中的的这些假假肌酐约约含255%。但但真性肌肌酐与苦苦味酸的的反应为为快反应应，假肌

11、肌酐为慢慢反应，因因此测试试时测试试时间一一般在样样品与碱碱性苦味味酸试剂剂混合后后 255 秒和和 1 分 225 秒秒在 5500nnm 处处测吸光光度变化化。两时时间点的的吸光度度变化之之差，则则为特异异反应肌肌酐浓度度。8普通免免疫比浊浊与胶乳乳增强免免疫比浊浊法：普通免疫疫比浊法法是抗原原与相应应的抗体体直接结结合形成成的免疫疫复合物物，在反反应液中中具有一一定的浊浊度，可可由一般般分光光光度法进进行透射射比浊（ttrannsmiissiion turrbiddimeetryy）测定定，可用用于某些些蛋白质质和药物物浓度等等的测定定。该法法须做多多点校准准，再经经非线性性回归，求求出

12、抗原原或抗体体的含量量。胶乳增强强免疫比比浊法是是将抗体体吸附在在大小适适中、均均匀一致致的胶乳乳颗粒上上，制成成致敏的的胶乳颗颗粒，当当遇到相相应抗原原时，发发生交联联反应，形形成抗原原抗体复复合物，胶胶乳颗粒粒发生凝凝集。单单个胶乳乳颗粒在在入射光光波长之之内并不不阻碍光光线透过过，两个个及其两两个以上上胶乳颗颗粒凝聚聚时则使使透过的的光减少少，其减减少的程程度与胶胶乳颗粒粒凝聚的的程度呈呈正比，即即与待测测抗原量量呈正比比，由此此可检测测样本中中的特定定抗原含含量。 该法比比普通免免疫比浊浊敏感度度高，试试剂稳定定，个体体免疫复复合物对对结果影影响也小小，因此此结果稳稳定、可可靠，特特异

13、性好好，精确确度高。9参考物物的量值值溯源性性:通过一一条具有有规定不不确定度度的不间间断的比比较链,使测量量结果或或测量标标准的值值能够与与规定的的参考标标准,通通常是与与国家标标准或国国际标准准联系起起来的特特性。10检测测限： 是指检检测系统统可检测测出的最最低分析析物浓度度。又称称分析灵灵敏度。灵敏度与与线性范范围：灵灵敏度与与线性范范围有着着紧密联联系，这这也是跟跟生化仪仪的性能能有关。灵敏度度与线性性范围的的取舍就就要根据据其医学学决定水水平而定定。一般般仪器能能测的光光 密度度值最大大在3550000。假设设谋项目目的医学学决定水水平在001000，如如果1个个单位浓浓度变化化能

14、引起起仪器吸吸光度响响应量为为10000，那那么它能能测的浓浓度范围围为035，可可以看出出，虽然然其灵敏敏度很高高，但在在其检测测范围没没有达到到其医学学决定水水平，即即线性范范围太窄窄。相反反，如果果 1个个单位浓浓度变化化能引起起仪器吸吸光度响响应量为为1000，那么么它能测测的浓度度范围为为03350，这这个线性性范围是是可以的的。因此此，灵敏敏度与线线性的评评价，要要根据其其医学决决定水平平而定。 1.9常常用校准准方法：终点法或或两点速速率法，必必须通过过使用标标准液，建建立一条条标准曲曲线；速率法，采采用标准准液校正正可消除除系统误误差，也也可直接接输入FFacttor值值。校准

15、类型型：空白白定标：以水做做标准液液，消除除试剂本本身对测测试的干干扰；（酶酶类）两点定标标：以水水作为零零点，标标准液作作为另一一点，建建立标准准曲线；（Y=AX+B）多点定标标：两个个以上的的标准液液建立一一条标准准曲线；（ LLOGIIT-LLOG ）1.100参考区区间与医医学决定定水平： 临床床实验室室检验结结果对被被检验者者低正常常还是异异常，有有何临床床意义，如如何用检检验结果果协助临临床医生生诊断和和治疗，这这就涉及及到参考考区间和和医学决决定水平平了。 参考考区间大大多是采采用正态态分布的的原理制制定，以以95%的分布布区间（xx2s）即即为参考考区间的的上、下下限，少少数用

16、百百分位数数来制定定参考区区间。不不论采用用什么方方法，总总有少数数正常人人的测定定值落在在异常范范围内。因此，假假性结果果是避免免不了的的。当结结果接近近上限或或下限时时，不要要轻易下下正常或或有病的的结论，要要根据被被测者的的其他表表征综合合判断或或过一段段时间复复查后，再再做分析析。 医医学决定定水平是是由Baarneett于于19668年首首先提出出的。是是指临床床上必须须采取措措施时的的检测水水平。决决定性水水平是一一个阀值值，高于于该值或或低于该该值，应应决定对对患者采采取适当当的治疗疗措施。医学决决定水平平可在疾疾病诊断断中起着着排除或或确认的的作用，对对某些疾疾病进行行分级或或

17、分类，或或愈后做做出估计计，来提提醒医生生在临床床上做出出相应的的处理方方式。 医医学决定定水平与与参考区区间的区区别在于于，它不不仅对健健康人的的数值进进行研究究，以决决定健康康人的范范围，同同时还对对有关疾疾病的不不同病情情的数据据进行研研究，以以定出不不同的决决定性限限值，以以引导医医生采取取不同的的临床措措施。它它的应用用可以克克服只使使用参考考范围的的缺点，使使一个检检验结果果对病人人能起到到提供诊诊断，处处理依据据的作用用。1.111酶法检检测基本本知识：酶是由活活细胞产产生并能能在体内内起催化化作用的的，一类类特殊蛋蛋白质。体内几几乎所有有的代谢谢反应都都是在不不同的酶酶催化下下

18、进行的的。酶的的催化效效率高，对对底物有有严格的的选择性性，酶非非常不稳稳定，酶酶浓度的的变化是是许多疾疾病的敏敏感指针针，这是是建立和和发展诊诊断酶学学的依据据。用酶酶作试剂剂(工具具酶)测测定非酶酶物质具具有效率率高、特特异及易易于实现现自动分分析的特特点，是是目前临临床生化化检验的的主流方方法。1.111.1酶酶促反应应速度的的因素：包括:酶的浓浓度、底底物的浓浓度、激激活剂与与抑制剂剂、pHH 和温温度等。在研究究某一因因素对酶酶促反应应速度的的影响时时，反应应系统中中其他因因素不变变。酶促促反应中中所指速速度是初初速度，因因为这时时的反应应速度与与酶浓度度成正比比，可以以避免产产物及

19、其其他因素素对反应应速度的的影响。在建立立定量测测定酶活活性的方方法时，需需要研究究酶促反反应的速速度及影影响此速速度的因因素，通通常称之之为反应应动力学学。1.111.2酶酶活力测测定 酶的含含量很低低，除免免疫学方方法外，不不能直接接测定其其含量，只只能测其其催化反反应过程程中一定定时间内内物质变变化的量量，即酶酶促反应应速率，或或称酶的的活力。要保证证只有待待测酶的的量影响响反应速速率，其其他各种种影响反反应速率率的因素素都在严严格控制制之下，并并保持各各测定间间的一致致性。(一) 酶促反应应的过程程 通过过测定底底物浓度度的下降降，或测测定产物物浓度的的上升，可可以追踪踪酶反应应过程中

20、中底物转转变为产产物的过过程。通通常多测测定产物物的形成成，因为为测定产产物从零零或者从从低浓度度的增加加，比测测定高浓浓度底物物的下降降更可靠靠。典型的酶酶反应过过程曲线线分为几几个时期期。紧随随着加人人血清或或底物启启动反应应后，在在出现明明显的变变化前为为延迟期期;此期期从几秒秒到几分分钟。随随后是底底物和产产物变化化与时间间成直线线的时期期，形成成产物的的速率恒恒定，此此时期的的速率为为反应应初速度度。此此期底物物也下降降，但实实际上反反应速度度与底物物浓无关关，对底底物浓度度而言，酶酶促反应应实际上上是零级级反应。反应曲曲线的直直线期时时间长短短相差悬悬殊。紧紧跟着是是反应速速率持续

21、续下降，进进入速度度依赖于于底物浓浓度的一一级反应应期。在在这一期期中，底底物浓度度下降，逆逆反应增增加，抑抑制性产产物蓄积积，乃至至酶本身身进行性性的灭活活等因素素也起作作用。最最后，当当底物起起尽或达达到平衡衡时，反反应停止止。在零零级反应应期中，测测定一定定时间内内形成产产物的量量，是以以此期中中速率维维持恒定定为条件件。否则则表观的的反应速速率将不不正比于于酶浓度度。也就就是选择择的监测测点必须须在反应应速率恒恒定区（零零级反应应期）。在正常测测定中，为为了能缩缩短延迟迟期和延延长线性性期，不不仅要适适量的底底物浓度度，还要要在试剂剂中加入入某些激激活剂和和其他的的辅助因因子。以以改善

22、反反应进程程曲线。(二)固固定时间间法和连连续监测测法 在在我国临临床实验验室中，目目前测定定酶活性性的方法法，已从从手工操作的的固定时时间法及及两点测测定法过过渡到连连续监测测法。固固定时间间法在反反应过程程中测定定一点的的吸光度度;两点点测定法法是在反反应开始始及反应应经一定定时间后后，分别别测两点点的吸光光度，根根据两点点间吸光光度的差差值，推推算酶的的活力。固定时时间法和和两点测测定法都都是在酶酶和底物物孵育一一段时间间后测定定总的变变化。两点测定定法也应应属于酶酶动力学学测定方方法，但但动力力学测定定法这这一术语语，习惯惯上仅指指多点测测定的动动力学方方法，即即所谓速速率法或或连续监

23、监测法，不不论用手手工法或或自动法法。固定定时间法法和两点点测定法法可能会会有几种种误差:酶活力力非常高高的样品品，由于于底物消消耗速度度快，反反应很快快呈现迟迟缓或停停止；有有一些反反应类型型延迟期期长；某某些标本本的反应应曲线可可能是非非线性的的；活力力高的标标本，超超出了限限定的活活力测定定范围，若若稀释标标本可能能会引起起催化活活力不成成比例的的变化。由于光光度计及及方法学学的改进进，可以以缩短孵孵育时间间，增加加酶活力力测定范范围，缩缩短延迟迟期，增增加线性性期，使使固定时时间法仍仍发挥重重要作用用；尤其其在中小小医院实实险室中中更有实实用价值值，甚至至一部分分生化分分析仪也也采用了

24、了固定时时间法。1.111.3酶酶法分析析酶法分析析即酶作作为分析析试剂，有有利于提提高测定定结果的的特异性性;不需需要先将将测定的的物质分分离和提提纯;可可以直接接分析血血清这样样复杂的的濡合物物。具有有绝对特特异性的的酶，即即只作用用于某一一种物质质的酶，特特别适合合分析用用。尿酸酸氧化酶酶、尿素素酶、葡葡萄糖氧氧化酶特特异性高高。但实实际上不不能都如如此。因因此，必必须了解解酶对底底物的特特异性，从从而预料料可能发发生的干干扰反应应并设法法纠正。在以酶酶作分析析试剂测测定某-物质时时，也可可用偶联联反应;而且偶偶联反应应的特异异性可以以增加反反应全过过程的特特异性。如用己己糖激酶酶 (H

25、HK) 法测葡葡萄糖，HHK 也也作用于于果糖产产生相应应的 66-磷酸酸醋;但但偶联的的指示反反应是GG6PDD ，它它特异地地催化葡葡萄糖-6-磷磷酸的反反应，用用此酶测测定己糖糖激酶催催化反应应的产物物，明显显地提高高了偶联联系统的的特异性性。(一) 传统的酶酶法分析析非酶物物质方法法以酶作试试剂进行行分析的的方法有有两种。广泛应应用的第第一种方方法，是是使反应应进行到到完全，使使全部底底物转变变成产物物，称终点法。这这是最理理想的分分析类型型。但是是，在非非理想的的平衡时时，底物物远未完完全转变变。此时时需增加加酶或非非酶的反反应，以以转变或或捕获第第一个反反应的产产物，使使反应在在所

26、要求求的方向向上进行行到完全全。如用用乳酸脱脱氢酶测测定乳酸酸中，形形成的丙丙酣酸，通通过加入入硫酸阱阱形成腺腺而捕获获丙酣酸酸，使反反应达到到完全。第二种方方法是动动力学法法，即间间隔一定定的时间间测定底底物的变变化量(=速率率)。由由酶促反反应进程程曲线已已知，开开始为高高底物浓浓度由酶酶催化的的反应，首首先服从从零级反反应，然然后随着着底物浓浓度减低低，进入入一级反反应期。对于任任何一级级反应，反反应开始始后在一一给定时时间 tt 的底底物浓度度 (SS) 为为:(S) =(SSo)*e-kkt (So) 是最最初的底底物浓度度，e 是自然然对数的的底，KK 是速速率常数数。在tt1到

27、t2 的固定定时间间间隔中，底底物浓度度的变化化量 (S) 与 (Soo) 的的相互关关系为:(So)=- (S)/( e-kkt- e-kkt2)也即在一一固定时时间间隔隔中，底底物浓度度的变化化量正比比于底物物的初浓浓度。这这是一级级反应的的通性。对于酶的的反应，当当(S )KKm 时时，米氏氏方程简简化为:V=(KKmaxx/Kmm)*(S)K 为一一级速度度常数。在反应应过程中中的两个个固定时时间，测测量与底底物浓度度性质相相关的(如光吸吸收)的的方法为为两点点动力力学法。从理论论上讲，这这是用酶酶法测定定底物的的最准确确的方法法；但方方法学上上比平衡衡法要求求高，所所有影响响反应速速

28、率的因因素如 pH 、温度度及酶量量必须在在两点分分析中保保持恒定定，并准准确定时时。必须须用标准准液进行行校正。为保证证一级反反应条件件，底物物浓度必必须低至至小于 O.22xKmm 。酶酶对底物物的 KKm 要要高，以以便测出出较宽范范围的底底物浓度度。为增增加试剂剂酶的表表现 KKm 值值，可引引进竞争争性抑制制剂。此外，被被测非酶酶物质作作为酶促促反应激激活剂者者，则用用连续监监测法，如如无机离离子钾和和钙的酶酶法测定定。(二) 酶循环法法分析非非酶物质质酶循环法法 ( enzzymaaticc eyyeinng mmethhod ) ，是是利用酶酶的底物物特异性性放大靶靶物质(被测物

29、物)以提提高灵敏敏度的测测定方法法。只循循环靶物物质，减减少了样样品存在在的其他他物质对对测定的的干扰，因因此不需需要对样样品进行行预处理理或对靶靶物质进进行提取取，而且且不需要要特殊设设备，是是一种很很有前途途的测定定技术。利用酶酶循环法法测定的的项目主主要是总总胆汁酸酸（TBBA）。二、生化化仪器基基础知识识2.1检检验科常常见全自自动生化化分析仪仪：l 日立：771000、71170、70880、7一八八0、76000，l 奥林巴斯斯：AUU4000、AU6640、AU227000、AU554000l 贝克曼：CX33、4、5、7、9、LX220、DXCC8000,AUU4800，AUU

30、6800，AUU58000l 东芝：TTBA-40、TBAA-1220l 雅培：220000、C80000、AERROSEETl 拜尔：AADVIIA12200、ADVVIA116500、ADVVIA224000 2.2下下面简单单介绍几几个常用用品牌的的相关仪仪器性能能l 日立：现现在各医医院所用用日立仪仪器的型型号主要要为7一一八0、76000，除除70880为331个测测光点外外，其余余都为334点。以下为77一八00仪器主主要性能能介绍：分析速度度： 8800个个测定/小时（最最大），约约4.55秒加样样一次可分析项项目： 86项项（带IISE的的话，最最大可达达89项项），计计算项目

31、目8项样本量： 1.5335.00l，00.1l可调调试剂量： 2002770l，11l可调调总反应体体积： 12003000l, 测光光时必须须满足该该条件光源灯： 保质质期7550小时时比色杯： 200只8组共共1600只，依依据杯空空白值进进行更换换测光系统统：采用用凹面蚀蚀刻光栅栅的后分分光、双双波长测测定方式式12个波波长：3340、4055、4550、4480、5055、5446、5570、6000、6660、7700、7500、8000nmm稳定性高高且可有有效补偿偿样本混混浊、溶溶血、黄黄疸及电电源电压压变动引引发的干干扰测定过程程： 全全反应监监测，110分钟钟测定334次吸

32、吸光度值值。一五五分钟测测定533次吸光光度值依据实验验要求选选择相应应测光点点的吸光光度值计计算结果果样本容器器：样本本针有液液面探测测装置，可可使用原原始采血血管离出出血清后后直接上上机测定定试剂： 同一项项目最多多可加入入四步试试剂，两两试剂舱舱位置各各45个个，温度度5一一五。l 奥林巴斯斯：AUU4000、AU6640、AU227000、AU554000奥林巴斯斯生化仪仪已经被被贝克曼曼收购，除除AU4400、AU6640、AU227000、AU554000外，还还有一款款AU6680，其其操作界界面为贝贝克曼公公司设计计，但主主要性能能跟以往往的AUU6400基本保保持一致致。测光

33、光点为227个，RR2试剂剂在100111点加入入。以下为AAU4000/6600/6400等型号号设参数数需了解解的仪器器性能：Sampple voll（样品品量）：2550,可以按按0.55ul为单位位增减。Reaggentt 1 voll（第一一试剂量量）：225-3300,可以按按1ull为单位位增减。Dill vool(稀稀释液-吐水量量)：一一般用浓浓缩试剂剂时才用用。Reaggentt 2 voll（第二二试剂量量）：225-3300，可可以按11为单位位增减。Dill vool(稀稀释液-吐水量量)：一一般用浓浓缩试剂剂时才用用。第二二试剂是是固定的的10-11点点之间加加入的

34、。测定波长长共有一一三种：3400,3880,4410,4500,5220,5540,5700,6000,6660,7000,7550,8800nnm。Methhod（方方法学）共六种：End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1。前三种与后三种的差别为：前三种是以试剂为空白的，后三种是以比色杯为空白的。Reacctioon（反反应方向向）：-，+。Endd与Fixxed法法不起作作用，但但是Raate法法一定要要输正确确。Lineeariity（线线性）：Fstt ，Lstt，Ratte法才才输入，一一般国产产试剂330%；进口试试剂：一一五%。No-LLag-Timme

35、： Raate法法才输入入，在读读点期内内，如果果反应太太快，超超过线性性（Liineaaritty限）仪仪器会自自动用线线性比较较好的那那一段来来计算。试剂空白白OD限限：Fsst指的的是0点点，Lsst指的的是277点。只只对Raate法法有用，一一般向下下的反应应，输00.92.5，向向上的反反应-22.00.88。下图显示示屏幕上上的基本本显示模模型l 贝克曼：CX33、4、5、7、9、LX220、DXCC8000，贝克克曼仪器器是作为为急诊用用的优先先选择仪仪器，其其有较高高的准确确度，精精密度和和稳定性性，抗交交叉污染染也是一一流的，但但不适合合常规大大量样本本的检测测，其试试剂消

36、耗耗量也是是现有仪仪器中比比较大的的。贝克曼仪仪器波长长数为110个，3340,3800,4110,4470,5200,5660,6600,6500,6770,7700nnm。监监测时间间不是以以周期（点点）计，而而是以秒秒来计，每每8S测测一次吸吸光度。加样时时间为第第0s, 第二二次灌注注时间为为-一八八0s，或或97738ss。贝克克曼仪器器必须用用两个波波长测定定，否则则仪器不不运行，在在设参数数时必须须符合这这一规律律。l 拜尔（西西门子）： ADDVIAA24000 ，测试速速度24400 Tesst /小时，比比色法一一八000Tesst/小 时时，电解解质6000测试试/小时。

37、其中有波波长：3340/4100/4551/4478/5055/5445/5571/5966/6558/6694/7511/8005/8845/8844nm 14个个。测试方法法：终点点法（EEPA）、速率法法（RRRA）、两点速速率法（2PA）及多点均相免疫分析。微量取样样技术：所有的的样本按按1:55比例进进行预稀稀释处理理（300ul样样品+1120uul生理理盐水）一一般可作作一五个项项目分析析。微量技术术加试剂剂保证每每测试平平均试剂剂体积为为80uul-1120uul，理论上上1mLL的试剂剂能做112.55个测试试，最低低也能做做到8个个测试。体现了了其最大优优点就是是省试剂剂。

38、2.3不不同型号号的生化化仪每毫毫升试剂剂测试数数是不一一样的，以以下是各各品牌的的理论测测试数：n 71700：一八00-3880ull 5.55 T/mln 70600：2500-5000ull 4 TT/mlln AU4000:一一五0-3500ul 66.6 T/mml n BECKKMANN: 2200-3300ul 5 T/mln TBA-40:1200-3660ull 88.3 T/mmln TBA-1200:800-3660ull 122.5 T/mmln ADVIIA24400：80-1200ul 112.55 T/mln 进口仪器器4-55人份/毫升；国产仪仪器3-4人份份

39、/毫升三、各生生化项目目的临床床意义及及其检测测原理：3.1肝肝功能测测定项目目（一五五项）3.1.1 血血清总胆胆汁酸TTBA：胆汁酸酸是由胆胆固醇在在肝脏中中分解代代谢所生生成的，肝肝胆、肠肠、门静静脉都参参与胆汁汁酸的自自主循环环过程。胆汁酸酸主要存存在于肠肠肝循环环系统并并通过再再循环起起一定的的保护作作用。只只有一少少部分胆胆汁酸进进入外周周循环。促进胆胆汁酸肝肝肠循环环的动力力是肝细细胞的转转运系统统棗吸收收胆汁酸酸并将其其分泌入入胆汁，经经胆囊诱诱导的胆胆囊收缩缩，小肠肠的推进进蠕动，回回肠粘膜膜的主动动运输从从血液经经门静脉脉流入。血清中胆胆汁酸的的水平是是反映肝肝脏损伤伤的重

40、要要指征，一一旦肝细细胞发生生病变，血血中胆汁汁酸浓度度极易升升高。急急性肝炎炎、慢活活肝、肝肝硬化、肝癌，TBA结果明显升高。与ALT比较，急性肝炎、慢性活肝ALT、TBA都较敏感，但肝硬化、肝癌两种结果差异明显：TBA阳性率高达95%，而ALT阳性率仅为20%。因此，TBA测定用于监测慢性肝病价值很大。其测定方法简单，是一项很具实用价值的肝功能诊断指标。检验原理理:血清中中的胆汁汁酸（33-羟类固固醇）会会被3-羟类固固醇脱氢氢酶（33-HSSD）及及-硫烟酰酰胺腺嘌嘌呤二核核苷酸氧氧化型(Thiio-NNAD+)特异异性地氧氧化，生生成3 - 酮酮类固醇醇，同时时Thiio-NNAD+

41、被还还原成-硫烟酰酰胺腺嘌嘌呤二核核苷酸还还原型(Thiio-NNADHH)。新新生成的的3 -酮类固固醇在33-羟类固固醇脱氢氢酶（33-HSSD）及及-烟酰胺胺腺嘌呤呤二核苷苷酸还原原型(NNADHH)存在在下，还还原成胆胆汁酸，同同时NAADH氧氧化成-烟酰胺胺腺嘌呤呤二核苷苷酸氧化化型（NNAD+）。通通过酶的的循环反反应，微微量胆汁汁酸的量量被放大大。在4405 nm处处测定TThioo - NADDH吸光光度的变变化值，可可求得血血清中胆胆汁酸的的含量。3.1.2 谷丙转转氨酶AALT/GPTT：丙氨酸酸氨基转转移酶(ALTT)，又称谷谷丙转氨氨酶，主主要存在在于组织织细胞中中，正

42、常常状况下下只有极极少量释释放入血血液中，所所以此酶酶在血清清中活性性很低。当组织织发生病病变时，组组织细胞胞中ALLT就大大量释放放于血液液，使血血清中该该酶的活活性升高高。血清清中ALLT主要要来源于于肝脏，各各种肝炎炎活动期期、肝癌癌、肝硬硬化和阻阻塞性黄黄疸时AALT的的活性显显著增高高，心肌肌梗塞时时ALTT的活性性仅有轻轻度增高高。检验原理理:本法为IIFCCC推荐的的测定丙丙氨酸氨氨基转移移酶的动动力学方方法，在在ALTT速率法法测定中中酶偶联联反应为为：L - 丙氨酸酸+2-酮戊二二酸 AALT 丙酮酮酸+LL-谷氨氨酸丙酮酸+ NAADH + HH+LDHHL -乳酸+ NA

43、DD+在3400 nmm波长下下检测NNADHH的氧化化速率，吸吸光度的的下降速速率与AALT活活性成正正比。3.1.3 谷草转转氨酶AAST/GOTT：天门冬冬氨酸氨氨基转移移酶(ASTT)，又称称谷草转转氨酶，此此酶在组组织中分分布很广广，如心心肌、横横纹肌、肝脏，其其中心肌肌含量最最高。心心肌梗死死后6 -122小时开开始增高高，166 - 48小小时达最最高值，3 - 6天恢复正常。肝炎时，AST和ALT一样明显升高，急性期由于ALT清除率较慢，往往ALT大于AST活力。恢复时也是ALT较慢，AST/ALT比值小于1。如转氨酶升高，且比值大于1常说明有慢性肝炎的可能，肝硬化则比值明显升

44、高。因此，AST活性的增高意味着心肌或肝细胞损害的发生。检验原理理:本法为为IFCCC推荐荐的测定定天门冬冬氨酸氨氨基转移移酶的动动力学方方法，在在ASTT速率法法测定中中酶偶联联反应为为：L -天天门冬氨氨酸+ -酮戊戊二酸 ASTT 草草酰乙酸酸+ LL -谷谷氨酸草酰乙酸酸+ NNADHH + H+MDHH LL - 苹果酸酸+ NNAD+3.1.4 -谷氨氨酰转移移酶-GT：-GTT主要用用于诊断断肝胆疾疾病。-GTT明显增增高见于于原发/继发性性肝癌、阻塞性性黄疸、胆汁性性肝硬化化、胰头头癌、肝肝外胆道道癌等。轻度或或中度增增高见于于传染性性肝炎、肝硬化化、胰腺腺炎以及及嗜酒和和长期

45、服服用某些些药物（如如苯巴比比妥)者，在在解释酶酶活性增增高的原原因时应应全面考考虑。检验原理理:L-r-谷氨氨酰-3-羧基-4-硝基苯苯胺+双双甘氨肽肽 -GTT L-rr-谷氨氨酰双甘甘氨肽+5-氨基-2硝基基苯甲酸酸3.1.5 碱性磷磷酸酶AALP：骨骼系系统疾患患如纤维维骨炎、变形性性骨炎、成骨不不全症、骨质软软化症、佝偻病病、转移移性骨瘤瘤和骨折折愈合期期等可使使ALPP活性增增高。肝肝胆疾患患如阻塞塞性黄疸疸、急性性或慢性性黄疸型型肝炎、肝癌和和肝脓肿肿等，以以及甲状状腺功能能亢进、妊娠后后期等均均可使AALP活活性增高高。而重重症慢性性肾炎、儿童甲甲状腺功功能不全全、贫血血、恶病病质等则则使ALLP活性性下降。检验原理理:IFCCC推荐荐的标准准化测定定方法，其其原理是是 以磷酸对对硝基苯苯酚(44NPPP)为底底物，22氨基2甲基1丙酮(AMPP)为磷磷酸酰基基的受体体物质，增增进酶促促反应速速率。44NPPP在碱性性溶液中中为无色色，在AALP催催化下，44NPPP分裂出出磷酸基基团，生生起游离离的对硝硝基苯酚酚(4NP)，后者者在碱性性溶液中中转变成成醌式结结构，呈呈现较深深的黄色色。在波波长 4405nnm处监监测吸光光度增高高速率，计计算ALLP活性性单位。3.1.6 白蛋白白ALBB：