保健食品中大蒜素的测定等15个保健食品功效成分或标志bcbj.docx

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1、附件：一、保健健食品中中大蒜素素的测定定1 范范围本方法适适用于以以大蒜及及其制品品为原料料的保健健食品中中大蒜素素（三硫硫二丙烯烯，C6H10S3）的含量量测定。本方法最最低检出出浓度为为0.004300mg/mL；取取1000mg试试样，提提取定容容5.00mL时，试试样中大大蒜素最最低检出出质量浓浓度为00.200g/1000g。本方法最最佳线性性范围： 0.3200mg/mL3.000 mmg/mL。2原理：根据大大蒜素为为挥发性性油成分分，经有有机溶剂剂提取，用用气相色色谱仪分分析，采采用外标标法定量量。3试剂除特殊说说明，所所用试剂剂均为分分析纯。3.1无无水乙醇醇3.2 正己己烷

2、3.3标标准溶液液：称取0.10000g标标准品，置于于10mLL容量瓶瓶中，用用正己烷烷定容至至刻度，该该溶液中中含大蒜蒜素浓度度为100.0mmg/mmL。此此溶液可可在冰箱箱中保存存七天。取取该溶液液1.00mL，置置于100mL容量量瓶中，用用正己烷烷定容至至刻度，此此溶液含含大蒜素素浓度为为1.00mg/mL。4 仪器器4.1气气相色谱谱仪：附氢火火焰（FFID）检检测器4.2 数据处处理机或或积分仪仪4.3分分析天平平：万分分之一4.4 超声清清洗机4.5离离心机：30000r/minn5分析方方法5.1试试样提取取5.1.1固体体试样：称取试试样适量量（相当当于含大大蒜素55mg

3、，精精确至00.0001g），加加无水乙乙醇适量量，密塞塞，超声声70mmin，取取出冷却却，加正正己烷定定容（调调节大蒜蒜素含量量约为11mg/mL），振摇，静置分层后，取上层溶液进样。5.1.2液体体试样吸吸取试样样适量（相相当于含含大蒜素素5mgg，精确确至0.0011g），置于分液液漏斗中中，加55mL正己己烷振摇摇提取11minn，静置置（或离离心）分分层后，取取上层溶溶液进样样。5.2气气相色谱谱参考条条件5.2.1色谱谱柱：HHP-55(300m00.255mm)5.2.2柱箱箱温度：1000（3miin）5.2.3进样样口温度度：22205.2.4检测测器温度度：2505.2.

4、5载气气：氮气气（1mL/mmin）5.2.6氢气气：40mL/mmin；空气：400mLL/miin5.2.7进样量量：1L5.3定定性分析析：在参考考操作条条件下，以以对照品品与试样样比较保保留时间间定性。5.4定定量分析析：试样中中大蒜素素色谱峰峰面积或或峰高与与标准的的色谱峰峰面积或或峰高比比较定量量。5.5结结果计算算W=1100式中：W大蒜蒜素的含含量，gg/1000g（g/100mL）；A1试试样使用用液色谱谱峰面积积或峰高高；A2标标准使用用液峰面面积或峰峰高；C标准准使用液液浓度，mg/mL；V试样样定容体体积，mmL；m试样样量，gg（mLL）。计算结果果保留三三位有效效数

5、字。二、保健健食品中中芦荟苷苷的测定定1 范围围本方法适适用于以以芦荟及及其制品品为原料料的保健健食品中中芦荟苷苷含量的的测定。本方法的的最低检检出量110ngg。本方法的的最佳线线性范围围：01000g/mmL2 原理理：用甲醇醇+水（555+455）作为为溶剂，提提取试样样中的芦芦荟苷，经经高效液液相色谱谱仪C118 柱柱分离，在在紫外2293nnm 波波长下检检测，以以芦荟苷苷保留时时间定性性，峰面面积定量量。3试剂 除特殊说说明，所所用试剂剂均为分分析纯，实实验用水水符合GGB/TT 66682-20008一级级水要求求。3.1甲甲醇：色色谱纯3.2芦芦荟苷标标准品：纯度98%3.3芦

6、芦荟苷标标准溶液液：精确称称取芦荟荟苷标准准品100.0mgg，加流流动相甲甲醇+水（555+455）溶解解并移入入1000mL容容量瓶中中，定容容至刻度度。精密密移取55mL至至10mmL容量量瓶中，加加流动相相定容至至刻度。4 仪器器设备4.1高高效液相相色谱仪仪：附二二极管阵阵列或紫紫外检测测器4.2 色谱柱柱：C18（以以十八烷烷基键合合硅胶填填料为填填充剂）或或具同等等性能的的色谱柱柱，1550mmm6mmm，5m。4.3 超声波波清洗器器4.4CC18净化化富集柱柱C18预柱柱装量00.5gg：分配配型4.5 离心机机：30000r/minn5色谱参参考条件件5.1流流动相：甲醇+

7、水=555+4555.2 流速：1mLL/miin5.3柱柱温：4405.4检检测波长长：2993nmm5.5灵灵敏度：0.0016AAUFSS5.6进进样量：10L6 分析析步骤6.1 试样制制备：将固体体试样粉粉碎成粉粉末状，混混匀，称称取适量量试样（相相当于含含芦荟苷苷2.55mg，精精确至00.0001g）于于50mmL容量量瓶中，加加检测用用流动相相30mmL，混混匀，经经超声振振提5mmin，加加流动相相定容550mLL，离心心沉淀，上上清液经经滤膜（0.45m）过滤，芦荟汁饮料直接经0.45m 滤膜过滤。6.2测测定步骤骤：分别精精密吸取取标准溶溶液和试试样溶液液10L 注入入高

8、效液液相色谱谱仪，依依上述色色谱条件件，以保保留时间间定性，用用外标法法计算试试样中芦芦荟苷的的含量。7 结结果计算算X = 式中：X试样样中芦荟荟苷含量量，mgg/g（mg/mL）；A1试试样中芦芦荟苷的的峰面积积或峰高高；C标准准液的质质量浓度度，mgg/mLL；A2标标准液中中芦荟苷苷的峰面面积或峰峰高；V试样样定容体体积，mmL；m试样样的质量量，g（mL）。计算结果果保留三三位有效效数字。三、保健健食品中中红景天天苷的测定定1 范范围本方法适适用于以以红景天天为原料料的保健健食品中中红景天天苷的测定定。本方法的的检出限限：0.5mg/mL。本方法的的线性范范围：00.0110.50m

9、mg/mmL。2 原原理：混匀的的保健食食品试样样经700%乙醇醇超声波波提取，聚聚酰胺柱柱净化后后，以00.011moll/L NH44Ac-甲醇为为流动相相（800：200），采采用高效效液相色色谱法，紫紫外检测测器，根根据保留留时间定定性，标标准曲线线法定量量检测。3 试剂剂试验用水水为重蒸蒸水。3.1 乙酸酸铵：分析纯纯3.2 甲醇醇：色谱纯纯3.3 乙醇醇：分析纯纯3.4 柱层层析用聚聚酰胺粉粉（粒度度：30060目目）3.5 红景景天苷标准溶溶液 准确称称量红景景天苷标准品品0.002000g，加加入甲醇醇溶解并并定容至至10mmL。此此溶液每每毫升含含2.00mg红红景天苷苷。

10、4 仪仪器4.1 高效效液相色色谱仪： 附紫紫外检测测器（UUV）4.2 超声声波清洗洗器4.3 离心心机4.4 聚酰酰胺净化化柱：用用5mLL玻璃注注射器（长长75mmm，内内径为112mmm） 作作层析柱柱，底部部放少许许脱脂棉棉，内装装层析用用聚酰胺胺粉 11.0gg。5 分分析步骤骤5.1 试样样处理5.1.1固体体样品：取200粒以上上片剂或或胶囊试试样进行行粉碎、混混匀，准准确称取取适量试试样（精精确至00.0001g），用70乙醇超声波萃取30min，定容至25mL。混匀，静置后，取10.00mL上清液于蒸发皿中，于沸水浴上挥干溶剂，用3mL水（分34次）溶解残渣并转移至聚酰胺柱

11、上，待过柱后再用10mL水分数次洗脱柱中吸附的红景天苷，控制洗脱液流速为0.50.8mL/min，收集所有的洗脱液，定容至10.00mL，混匀后经0.45m滤膜过滤，供液相色谱分析用。5.1.2液体样样品：根根据样品品中红景景天苷的含量量，准确确吸取一一定量摇摇匀后的的试样（1110mLL）于蒸蒸发皿中中去除溶溶剂（若若试样中中不含乙乙醇，则则可直接接过聚酰酰胺柱），其其余步骤骤同上。5.2 色谱谱参考条条件5.2.1色谱谱柱：C188柱，4.662550mmm,5m。5.2.2柱温温：2555.2.3检测测波长：2155nm5.2.4流动动相：甲甲醇-0.001mool/LL乙酸铵铵溶液20

12、:805.2.5流速速：1.0mLL/miin5.2.6进样样量：110mL5.3标标准曲线线制备：分别配配制浓度度为0.0、00.011、0.02、00.055、0.20、00.500 mgg/mLL红景天天苷标准溶溶液,在在给定的的仪器条条件下进进行液相相色谱分分析,以以红景天天苷的浓度度为横坐坐标，相相应的色色谱峰面面积为纵纵坐标，绘绘制标准准曲线或或进行线线性回归归。6测定：取100L标标准溶液液及试样样溶液注注入色谱谱仪中，以以保留时时间定性性，以试试样峰面面积与标标准系列列比较定定量。7 结结果计算算X = m10000式中：X试样样中红景景天苷的含量量，mgg/g（mmg/mmL

13、）； C由标标准曲线线上查出出待测样样液中红红景天苷苷的浓度度（mg/mL）；V样品品的定容容体积，mL；m样品品量，gg（mLL）。计算结果果保留22位有效效数字。四、保健健食品中中肉碱的的测定1 范范围本方法适适用于以以肉碱为为主要原原料的保保健食品品中肉碱碱的测定定。本方法最最低检出出量为00.277g。本方法最最佳线性性范围：0.0050mmg/mmL2.00mg/mL。2 原理理：试样中中的肉碱碱以0.5mmmol/L的盐盐酸超声声提取，反反相色谱谱分离，与与标准品品的保留留时间比比较定性性，以峰峰面积外外标法定定量。3 试剂剂除特殊说说明，所所用试剂剂均为分分析纯，实实验用水水符合

14、GGB/TT 66682-20008一级级水要求求。3.1 磷酸氢氢二钾3.2 辛烷磺磺酸钠3.3 0.550mmmol/L盐酸酸3.4肉肉碱标准准溶液：精密称称取干燥燥至恒重重的肉碱碱标准品品（含量量98%）0.002000g，用用0.550mmmol/L盐酸酸溶解并并定容为为10.0mLL，此溶溶液浓度度为2.0mgg/mLL。4 仪器器4.1高高效液相相色谱仪仪：配有二二极管阵阵列或紫紫外检测测器和色色谱工作作站或记记录仪4.2 超声波波提取器器4.3 溶剂微微孔过滤滤器：带0.445m 水相相滤膜。5分析步步骤5.1试试样预处处理：称称取粉碎碎并混合合均匀的的试样适适量（相相当于含含肉

15、碱约约40mmg，精精确至00.0001g），液液体试样样取5.0mLL，于500mL容容量瓶中中，加入入0.550mmmol/L 盐盐酸约335mLL，超声声提取110miin，用用0.550mmmol/L 盐盐酸定容容，混匀匀，过滤滤，弃初初滤液数数毫升，收收集滤液液，过00.455m 水相相滤膜，为为试样处处理液。供供HPLLC分析析。5.2试试样分析析5.2.1色谱谱参考条条件：Shiim-pakkCLCC ODDS柱，4.662000mm，10m。5.2.2流动动相：水水相0.005mool/LL（8.77g）磷酸氢氢二钾溶溶液，00.0002mool/LL（0.443255g）辛辛

16、烷磺酸酸钠，用用磷酸调调至pHH2.55-乙腈腈=90:105.2.3流速速：0.8mLL/miin5.2.4检测测波长：2100nm5.3标标准曲线线的制备备：分别别取标准准溶液00.0、0.225、0.550、1.00、2.00、2.55、5.00mL标标准溶液液（3.4）于于5mLL容量瓶瓶中，用0.550mmmol/L盐酸酸稀释并并定容为为5.00mL，分分别进样样20mL进行色色谱分析析。用标标准浓度度峰面积积绘制标标准曲线线。5.4试试样测定定：取220mL试样处处理液（5.1）注入色谱仪中，以保留时间定性，面积定量。5.5结结果计算算CVX=m式中：X为试试样中肉肉碱的含含量，m

17、mg/gg；m为试试样质量量，g；C为试试样处理理液中肉肉碱的浓浓度，mmg/mmL；V为试试样处理理液体积积，mLL。结果保留留三位有有效数字字。五、保健健食品中中人参皂皂苷的高效液液相色谱谱测定1 适用用范围本方法适适用于以以人参为为主要原原料的保保健食品品中人参参皂苷含含量的测测定。本方法的的六种皂皂苷的最最低检出出量为 10mmg/kkg。本方法的的六种皂皂苷的最最佳线性性范围：0.11mg/mL1mgg/mLL。2 原理理：将试样样中的人人参皂苷苷溶解、提提取，经经净化处处理后，使使用梯度度洗脱反反相高效效液相色色谱进行行分离，紫紫外检测测器检测测，根据据色谱峰峰的保留留时间定定性，

18、外外标法定定量，适适用于保保健食品品中人参参皂苷RRe、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd的同同时定量量分析。3 试剂剂除特殊说说明，所所用试剂剂均为分分析纯，实实验用水水符合GGB/TT 66682-20008一级级水要求求。3.1 乙腈：色谱纯纯，2000nmm吸光度度值为00.02213.2 甲醇3.3 D1001大孔孔吸附树树脂3.4高高效液相相色谱流流动相：梯度淋淋洗A液为乙乙腈，BB液为水水。3.5 人参皂皂苷Ree、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准准品：含含量大于于98%（HPLLC）3.6人人参皂苷苷Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准准溶液的的配制：配制人人参皂

19、苷苷Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd标准准储备液液，浓度度分别为为10mmg/mmL；再再以此储储备液配配制成混混合标准准系列溶溶液，浓浓度范围围为0.1mgg/mLL1mgg/mLL；所有有标准溶溶液均用用甲醇配配制。4 仪器器设备4.1 高效液液相色谱谱仪：附附二极管管阵列或或紫外检检测器4.2 超声波波清洗器器4.3 离心心机4.4 水浴锅锅5 分析析步骤5.1固固体试样样处理：取试验研成成粉末，并并过200目筛。称取该该粉末样样适量（相相当于含含总人参参皂苷约约75mmg，精精确至00.0001g），于于50mmL具塞塞试管中中，加水水50mmL于超声声波清洗洗器中超超声提取取

20、30分钟钟，取出出，待溶溶液恢复复常温后后，准确确取出110mLL，通过过D1011大孔吸吸附树脂脂净化柱柱（大孔孔吸附树树脂使用用前先经经甲醇浸浸泡，水水洗，装装成100cm长长小柱），小小柱先用用10mmL水冲冲洗，弃弃去水液液之后，用用70%甲醇255mL洗脱脱皂苷，收集集甲醇溶溶液，水水浴上蒸蒸干，残残渣以甲甲醇溶解解并定容容至5mmL，该该样液离离心后过过0.55m膜，滤滤液进行行色谱分分析。5.2液液体试样样处理：取一定定量的试试样于水水浴上蒸蒸干，残残渣以550mLL水超声声提取330分钟钟，余下下步骤与与5.11相同。5.3测测定5.3.1液相相色谱参参考条件件5.3.1.11

21、色谱柱柱：反相相C188柱，4.62500mm，5m5.3.1.22检测波波长：2033nm5.3.1.33 梯度度淋洗条条件时间（mmin）乙腈（）水（）流速（mmL/mmin）梯度曲线线020556575801618404010016848260600841.01.01.01.01.01.01666115.3.1.44 柱温温：3555.3.2色谱谱分析5.3.2.11标准曲曲线的制制备：将混合合标准系系列溶液液均取55L进HPLLC分析析，用峰峰面积对对浓度作作各皂苷苷的标准准回归曲曲线。5.3.2.22试样测测定：取5L试样净净化液进进高效液液相色谱谱分析，以以绝对保保留时间间定性，用

22、用峰面积积通过各各皂苷的标准准曲线定定量，计算试试样中人人参皂苷苷Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd的含含量。6 结果果计算551000试样中各各人参皂皂苷的含含量（gg/1000g）= m10000式中：C试样样溶液中中各人参参皂苷的的含量，mg/mL；m试样样量，gg（mLL）。试样中总总人参皂皂苷的含含量= CRReCRgg1CRbb1CRccCRbb2CRd式中：CRe试样中中Re的含含量，g/1100gg（g/1000mL）；CRg11试样中中Rg1的含量量，g/1100gg（g/1000mL）；CRb11试样中中Rb1的含量量，g/1100gg（g/1000mL）；CRc试样

23、中中Rc的含含量，g/1100gg（g/1000mL）；CRb22试样中中Rb2的含量量，g/1100gg（g/1000mL）；CRd试样中中Rd的含含量，g/1100gg（g/1000mL）。计算结果果保留三三位有效效数字六、保健健食品中中核苷酸酸的测定定1 范围围本方法规规定了保保健食品品中核苷苷酸的高高效液相相色谱测测定方法法。本方法检检出限：胞嘧啶啶核苷（CMP）0.04g/mL、脲嘧啶核苷（UMP）0.05g/mL、腺嘌呤核苷（AMP）0.05g/mL、鸟嘌呤核苷（GMP）0.06g/mL。本方法线线性范围围：胞嘧嘧啶核苷苷（CMMP）0.999212.4g/mLL、脲嘧嘧啶核苷苷（

24、UMMP）1.11714.6g/mLL、腺嘌嘌呤核苷苷（AMMP）1.00112.6g/mLL、鸟嘌嘌呤核苷苷（GMMP）0.994812.3g/mLL。2原理：将试样样溶解、去去除蛋白白后，使使用氨基基固相萃萃取柱对对核苷酸酸进行净净化富集集，根据据高效液液相色谱谱紫外检检测器在在2544nm处处的响应应进行定定性定量量。3 试剂剂除特殊说说明，所所用试剂剂均为分分析纯，实实验用水水符合GGB/TT 66682-20008一级级水要求求。3.1 甲醇：优优级纯3.2 乙酸酸3.3 磷酸二二氢钾3.4 磷酸酸氢二钾钾3.5季季铵盐固固相萃取取柱3.6 核苷酸酸标准储储备溶液液：准确确称量经经1

25、000干燥4hh处理的的标准品品胞嘧啶啶核苷（CMP）100mg，脲嘧啶核苷（UMP）、腺嘌呤核苷（AMP）、鸟嘌呤核苷（GMP）各40mg，加水定容至100mL。3.7 核苷酸酸标准使使用液：将核苷苷酸标准准储备溶溶液用00.255moll/L，pH=33的磷酸酸二氢钾钾稀释1100倍倍。4仪器设设备：高效液液相色谱谱仪（附二极极管阵列列或紫外外检测器器）5 分析析步骤5.1 试样处处理5.1.1称取取试样适适量（相相当于含含核苷酸酸约6.5mgg，精确确至0.0011g），于于1000mL容容量瓶中中，加入入约500热水800mL，彻彻底混匀匀。当试试样液达达到室温温后用水水定容至至刻度。

26、5.1.2准确确吸取110mLL试样溶溶液至1100mmL容量量瓶中，加加入0.5乙乙酸5mmL、水水10mmL，混混匀后静静置5mmin以以沉淀蛋蛋白。用用水定容容至刻度度，混匀匀后过滤滤，弃去去数毫升升初滤液液后收集集约300mL滤滤液。5.1.3将季季铵盐固固相萃取取柱先用用10mmL甲醇醇、100mL水水活化后后，再将将20mmL试样样滤液过过滤，以以1mLL水清洗洗萃取柱柱，用00.255moll/L，pH=3.55磷酸二二氢钾溶溶液洗脱脱出5mmL滤液液。全部部过程需需要控制制流速11滴/秒。5.2 液相色色谱参考考条件5.2.1色谱谱柱：C188 柱 3.91500mm5.2.2

27、柱温温：2555.2.3检测测波长：2544nm5.2.4流动动相：00.011moll/L磷磷酸二氢氢钾-0.11moll/L磷磷酸氢二二钾=4800:205.2.5流速速：0.6mLL/miin5.2.6进样样量：110L5.2.7色谱谱分析：量取110L标准溶溶液及试试样溶液液注入色色谱仪中中，以保保留时间间定性，以以试样峰峰高或峰峰面积与与标准比比较定量量。5.3 标准曲曲线的制制备：分分别配制制浓度为为1.00、2.00、5.00、10.0、16.0g/mmL的4种核苷苷酸标准准溶液，在在给定的的仪器条条件下进进行液相相色谱分分析，以以峰高或或峰面积积对浓度度作标准准曲线。6结果计计

28、算h1CCK51000X = h2mm10000式中：X试样样中核苷苷酸的含含量，mmg/1100gg；h1试试样峰高高或峰面面积；C标准准溶液浓浓度，g/mmL；K稀释释倍数；h2标标准溶液液峰高或或峰面积积；m试样样量，gg。试样中总总核苷酸酸的含量量为胞嘧嘧啶核苷苷（CMMP）、脲嘧啶啶核苷（UMP）、腺嘌呤核苷（AMP）、鸟嘌呤核苷（GMP）含量之和。检测结果果保留三三位有效效数字。七、保健健食品中中洛伐他他汀含量量测定1 范围围本方法适适用于以以红曲为为原料的的保健食食品中洛洛伐他汀汀含量的的测定。本方法的的最低检检出量22.0mmg/kkg。本方法的的最佳线线性范围围2.00030

29、00g/mmL。2 原理理：将酸性性介质中中的试样样使用三三氯甲烷烷进行提提取，挥挥干提取取溶剂，以以流动相相定容，根根据高效效液相色色谱紫外外检测器器在2338nmm处的响响应进行行定性定定量。3试剂除特殊说说明，所所用试剂剂均为分分析纯，实实验用水水符合GGB/TT 66682-20008一级级水要求求。3.1甲甲醇：色色谱纯3.2 三氯氯甲烷3.3 磷酸3.4洛洛伐他汀汀标准储储备液：准确称称量洛伐伐他汀标标准品00.04400gg，加入入检测用用流动相相并定容容至1000mLL。此溶溶液每毫毫升含0.44mg洛洛伐他汀汀。3.5洛洛伐他汀汀标准使使用液：将洛伐伐他汀标标准储备备液用流流

30、动相稀稀释100倍。此此溶液每每毫升含40g洛伐他他汀。4 仪器器设备4.1高高效液相相色谱仪仪：附二二极管阵阵列或紫紫外检测测器（UUV）4.2 超声声波清洗洗器4.3 涡旋混混匀器4.4 离心机机4.4 真空泵泵5 分析析步骤5.1 试样样处理5.1.1将片片剂、胶胶囊或红红曲发酵酵产物试试样粉碎碎并混合合均匀，称称取试样样适量（相相当于含含洛伐他他汀约110mgg，精确确至0.0011g），于于50mmL试管管中，加加入100.0mmLpHH=3 磷酸水水溶液。超超声提取取10mmin后后再加入入10.0mLL三氯甲甲烷，置置于涡旋旋混匀器器3miin。静静置后去去掉上层层水相，将将三氯

31、甲甲烷层以以30000r/minn，离心心3miin。5.1.2准确确吸取上上清液11.0mmL至55mL试试管中，将将试管置置于500左右水水浴中使使用真空空泵减压压干燥至至挥去全全部溶剂剂。5.1.3向试试管中加加入流动动相并定定容至55.0mmL，彻彻底混匀匀，经00.455m 滤膜膜过滤后后待进样样。5.2 液相色色谱参考考条件5.2.1色谱谱柱：C18柱，4.662500mm。5.2.2柱温温：室温温5.2.3检测测波长：2388nm5.2.4流动动相：甲甲醇-水-磷酸=3855:1155:0.1145.2.5流速速：1.0mLL/miin5.2.6进样样量：110L5.2.7色谱谱

32、分析：量取110L标准溶溶液系列列及试样样溶液注注入色谱谱仪中，以以保留时时间定性性，以试试样峰高高或峰面面积与标标准比较较定量。5.3标标准曲线线制备：配制浓浓度为22.0、10、50、1000、3000g/mmL洛伐伐他汀标标准溶液液，在给给定的仪仪器条件件下进行行液相色色谱分析析，以峰峰高或峰峰面积对对浓度作作标准曲曲线。5.4 结果计计算X =式中：X试样样中洛伐伐他汀的的含量，g/100g；h1试试样峰高高或峰面面积；c标准准溶液浓浓度，mmg/mmL；50试试样稀释释倍数；h2标标准溶液液峰高或或峰面积积；m试样样量，gg。检测结果果保留三三位有效效数字。八、保健健食品中中槲皮素素

33、、山柰柰素、异异鼠李素素的高效效液相色色谱测定定1 范范围本方法适适用于以以银杏叶叶或银杏杏叶提取取物为主主要原料料的保健健食品中中槲皮素素、山柰柰素、异异鼠李素素含量的的测定。本方法的的检测限限分别为为：槲皮皮素0.0022g、山柰柰素0.0033g、异鼠鼠李素00.0005g。本方法的的最佳线线性范围围为100g/mmL100g/mL。2 原理理：试样经经提取、水水解等前前处理后后，使用用等度洗洗脱反相相高效液液相色谱谱进行分分离，紫紫外检测测，根据据色谱峰峰的保留留时间定定性，外外标法定定量，测测定试样样中苷元槲皮皮素、山山柰素、异异鼠李素素含量。3 试剂剂除特殊说说明，所所用试剂剂均为

34、分分析纯，实实验用水水符合GGB/TT 66682-20008一级级水要求求。3.1 甲醇：色谱纯纯3.2 高效液液相色谱谱流动相相：甲醇醇-水=50:50（以以磷酸调调节pHH=2.55）3.3槲槲皮素、山山柰素、异异鼠李素素标准品品：含量量大于998（HPPLC）3.4 槲皮皮素、山山柰素、异异鼠李素素标准溶溶液：分分别准确确称取1100mmg槲皮皮素、山山柰素、异异鼠李素素标准品品于1000mLL 容量量瓶中，加加入甲醇醇溶解后后，定容容至刻度度，此溶溶液浓度度为1.0mgg/mLL，将该该液稀释释成1001000g/LL的标准准系列溶溶液。4 仪器器设备4.1 高效液液相色谱谱仪：附附

35、二极管管阵列或或紫外检检测器4.2 水浴锅锅4.3 超声波波清洗器器4.4 离心机机5 分析析步骤5.1 试样处处理：取取试样适适量（相相当于含含总黄酮酮约3mg，精确确至0.0011g），用用20mmL甲醇醇于超声声波浴中中提取330分钟钟，过滤滤后滤液液加入220mLL1.55moll/L盐盐酸于水水浴上回回流水解解3小时，冷冷却后用用甲醇定定容至550mLL，该样样液过00.5m膜，滤滤液进HHPLCC分析。5.2 测定定5.2.1液相相色谱参参考条件件5.2.1.11色谱柱柱：反相相C188 柱，5m，1000，3.99mmIID1500mm5.2.1.22 检测波波长：3600nm5

36、.2.1.33流速：1.00mL/minn5.2.1.44柱温：室温5.3.1色谱谱分析：取10L标准溶溶液及试试样提取取液进高高效液相相色谱分分析，以以保留时时间定性性，用峰峰面积以以外标法法定量计计算试样样中槲皮皮素、山山柰素、异异鼠李素素的含量量。6 结果果计算X%= Q% + K% + II%式中：X%试试样中槲槲皮素、山山柰素、异异鼠李素素的总含含量；Q%试试样中槲槲皮素含含量；K%试试样中山山柰素含含量；I%试试样中异异鼠李素素含量。样品中银银杏叶总总黄酮苷苷的含量量（%）= X%2.5517 结果果表示：分析结结果保留留三位有有效数字字。九、保健健食品中中异麦芽芽低聚糖糖、低聚聚

37、果糖、大大豆低聚聚糖的测测定1 范范围本方法适适用于保保健食品品中异麦麦芽低聚聚糖、低低聚果糖糖、大豆豆低聚糖糖的含量量测定。本方法最最低检出出量：异异麦芽糖糖2g；潘糖糖5g；异麦麦芽三糖糖10g；蔗果果三糖（GF2）5g蔗果四糖（GF3）5g；蔗果五糖（GF4）10g；棉籽糖20g；水苏糖30g。2原理：试样除除去蛋白白后，离离心、脱脱色，用用液相色色谱分析析，用NNH2 柱分离离，示差差检测器器测定，外外标法定定量。3 试剂剂除特殊说说明，所所用试剂剂均为分分析纯，实实验用水水符合GGB/TT 66682-20008一级级水要求求。3.1 乙腈：色色谱纯3.2 无水乙乙醇3.3麦麦芽糖、

38、异异麦芽糖糖、潘糖糖、麦芽芽三糖、异异麦芽三三糖、棉棉籽糖、水水苏糖（含含量98%）3.4 低聚果果糖（总总含量96%，其中中GF238%，GF3 511%，GF4 7%）3.5麦麦芽糖、异异麦芽糖糖混合标标准溶液液：分别称称取麦芽芽糖100.0mmg，异异麦芽糖糖15.0mgg，潘糖糖9.00mg，麦麦芽三糖糖15.0mgg，异麦麦芽三糖糖12.0mgg，用水水溶解并并定容至至1.00mL。将将此溶液液逐级稀稀释成下下列浓度度：标准溶液液名称：麦芽糖糖、异麦麦芽糖、潘潘糖、麦麦芽三糖糖、异麦麦芽三糖糖（mg/mL）1 0.50 0.775 00.455 0.75 0.6602 1.00 1.

39、550 00.900 1.50 1.2203 2.00 3.000 11.8003.000 22.4004 100.000 155.000 9.00 15.00 12.003.6 低聚果果糖标准准溶液：精密称称取含 GF2238%、GF3 511%、GF4 7%的低聚聚果糖标标准品00.05500gg，用水水溶解并并定容至至2.550mLL。将此此液逐级级稀释成成下列浓浓度：标准溶液液名称： GFF2、 GFF3、 GFF4（mg/mL）1 1.50 2.000 00.3002 3.00 4.000 00.60034.550 66.000 0.904 6.00 8.000 11.2005 7.

40、50 10.00 1.4403.7 棉籽糖糖、水苏苏糖标准准溶液：精密称称取棉籽籽糖0.04000g、水苏糖糖0.006000g，用用水溶解解并定容容至4.0mLL。将此此液逐级级稀释成成下列浓浓度：标准溶液液名称：棉籽糖糖水苏糖糖（mgg/mLL）1 2.0 33.02 4.0 66.03 6.0 99.048.0012.05 100.0 15.0由于试样样中程度度不同的的含有葡葡萄糖、果果糖、蔗蔗糖、乳乳糖，所所以在配配制标准准应用液液时可加加入适量量的葡萄萄糖、果果糖、蔗蔗糖、乳乳糖，主主要是用用于定性性。将各标准准系列注注入高效效液相色色谱仪进进行测定定，绘制制标准工工作曲线线。4 仪

41、器器4.1 高效液液相色谱谱仪（附附带示差差检测器器）4.2 离心机机：1000000r/mmin4.3分分析天平平：1/1000004.4 分析天天平：11/100005分析步步骤5.1 试样制制备5.1.1糖浆浆和糖粉粉：称取取1.000000g糖浆浆或0.20000g糖糖粉，用用水稀释释或溶解解，并定定容置110.00mL，摇摇匀，溶溶液过00.455m 滤膜膜，滤液液用于HHPLCC测定。5.1.2不含含乳液体体饮料：饮料直直接离心心，上清清液过00.455m 滤膜膜，滤液液用于HHPLCC测定。5.1.3含乳乳液体饮饮料: 取10.0mLL 试样样放入烧烧杯中，加加无水乙乙醇300m

42、L，搅搅拌混匀匀，放置置5miin，离离心，取取上清液液20 mL 在沸水水浴上挥挥发近干干。残液液用水溶溶解并定定容至5510mLL，溶液液过0.45m滤膜，滤滤液用于于HPLLC 测测定。5.1.4奶粉粉：称取取2.0000gg试样，放放入2000mLL烧杯中中，加水水15.0mLL溶解，再再加455.0mmL无水水乙醇，搅搅匀，放放置5mmin，离离心，取取上清液液30.0mLL在沸水水浴上挥挥发近干干，残液液用水溶溶解并定定容至一一定体积积，溶液液过0.45m 滤膜膜，滤液液用于HHPLCC测定。5.2 高效液液相色谱谱参考条条件5.1.1色谱谱柱：不锈钢钢柱，内内径4.6mmm，30

43、00mm反反相氨基基柱，粒粒径5m。5.1.2柱温温：45，检测测室：405.1.3流动动相：乙乙腈-水=766:245.1.4流量量：1.5mLL/miin5.1.5灵敏敏度：6645.1.6进样样量：220L5.3 测定：在上述述色谱条条件下注注入标准准溶液和和试样溶溶液，以以保留时时间定性性，外标标法定量量。6结果计计算（注注：功能能性异麦麦芽低聚聚糖的含含量以异异麦芽糖糖、潘糖糖、异麦麦芽三糖糖计）X=式中：X试样样中某低低聚糖的的含量，g/kg（g/L）；A试样样的峰面面积或峰峰高；Ci单单一低聚聚糖标准准溶液的的浓度，mg/mL；Ai标标准溶液液的峰面面积或峰峰高；试样样质量（或或

44、体积），g（mL）；V试样样定容体体积，mmL；f稀释释倍数。结果保留留三位有效效数字。十、保健健食品中中茶氨酸酸的高效效液相色色谱测定定1 适用用范围本方法适适用于红红茶、绿绿茶等为主要要原料的的保健食食品中茶茶氨酸含含量的测测定。本方法的的最低检检出量110ng。本方法的的最佳线线性范围围：0.1mgg/mLL4.22mg/mL。2 原理理：将试样样中的茶茶氨酸用用水提取取，使用用等度洗洗脱反相相高效液液相色谱谱进行分分离，紫紫外检测测器（UUV）检检测，根根据色谱谱峰的保保留时间间定性，外外标法定定量，适适用于红红茶、绿绿茶及以以茶为原原料生产产的保健健食品中中茶氨酸酸的高效效液相色色谱测定定方法。3 试剂剂除特殊说说明，所所用试剂剂均为分分析纯，实实验用水水符合GGB/TT 66682-20008一级级水要求求。3.1 三氟乙乙酸3.2 高效液液相色谱谱流动相相：等度度淋洗3.3 茶氨酸酸标准品品：含量量大于998（HPPLC）3.4 茶氨酸酸标准溶溶液的配配制：准准确称取取3.55mg茶茶氨酸对对照品，溶溶于水中中，用110mLL容量瓶瓶定容，摇摇匀，此此标准溶溶液浓度度为0.35mmg/m