葡萄糖氧化酶复习进程.ppt

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1、电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 葡萄糖氧化酶电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 11.1 简要介绍简要介绍v生物传感器的发展史v定义及说明v生物传感器的基本组成和工作原理v生物传感器的分类v生物传感器的固定方法v生物传感器的特点2电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 生物传感器的发展史生物传感器的发展史(1)v最先问世的生物传

2、感器是酶电极Clark和Lyons最先提出组成酶电极的设想;v70年代中期，人们注意到酶电极的寿命一般都比较短，提纯的酶价格也较贵，而各种酶多数都来自微生物或动植物组织，因此自然地就启发人们研究酶电极的衍生型：微生物电极、细胞器电极、动植物组织电极以及免疫电极等新型生物传感器，使生物传感器的类别大大增多;v 进入本世纪80年代之后，随着离子敏场效应晶体管的不断完善，于1980年Caras和Janafa率先研制成功可测定青霉素的酶FET。年代 特点 研究内容 60 生物传感器初期 酶电极70 发展时期 微生物传感器，免疫传感器，细胞类脂质传感器，组织传感器，生物亲和传感器80进入生物电子学传感器

3、时期酶FET酶光二极管3电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 生物传感器发展的整体划分生物传感器发展的整体划分:v第一代生物传感器以将生物成分截留在膜上或结合在膜上为基础，这类器件由透析器(膜)、反应器(膜)和电化学转换器所组成，其实验设备相当简单v第二代生物传感器是指将生物成分直接吸附或共价结合在转换器的表面上，从而可略去非活性的基质膜v第三代生物传感器是把生物成分直接固定在电子元件上，例如FET的栅极上，它可直接感知和放大界面物质的变化，从而将生物识别和电信号处理集合在一起这种放大器可采用差分方式以消除

4、干扰生物传感器的发展史生物传感器的发展史(2)4电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 生物传感器定义及说明生物传感器定义及说明v生物传感器利用生物活性物质选择性的识别和测定实现测量，主要由两大部分组成：一为功功能能识识别别物物质质（分分子子识识别别元元件件），由其对被测物质进行特定识别；其二是电电、光光信信号号转转换换装装置置（换换能能器器），由其把被测物所产生的化学反应转换成便于传输的电信号或光信号。5电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程

5、组 制作制作制作制作 生物传感器的基本组成和工作原理生物传感器的基本组成和工作原理v生物传感器的基本组成v生物传感器的工作原理分类6电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 生物传感器基本构成示意图生物传感器基本构成示意图7电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 生物传感器的分子识别元件生物传感器的分子识别元件 分子识别元件 生物活性材料酶膜全细胞膜组织膜细胞器膜免疫功能膜各类酶类细菌，真菌，动植物细胞动植物组织切片线粒体，叶

6、绿体抗体，抗原，酶标抗原等8电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 生物传感器的工作原理生物传感器的工作原理1.将化学变化转变成电信号（间接型）2.将热变化转换为电信号（间接型）3.将光效应转变为电信号（间接型）4.直按产生电信号方式（直接型）化学物质 物理 热被测 化学（产生 光 ）电信号物质 变化 声生物敏感膜电化学器件热敏元件光敏元件声敏元件 9电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 将化学变化转变成电信号的生物传感器

7、将化学变化转变成电信号的生物传感器10电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 将热变化转换为电将热变化转换为电信号信号的生物传感器的生物传感器11电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 将光效应转变为电信号的生物传感器将光效应转变为电信号的生物传感器 被测物 h 电信号固定化酶光检测器12电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 例4、直按产

8、生电信号方式的生物传感器 Cass 等提出一种测定葡萄糖的传感器，是用二茂络二茂络铁铁为电子传递体。G、GL代表葡萄糖和葡萄糖内脂，代表葡萄糖和葡萄糖内脂，GODox和和GODred为为氧化型和还原型的氧化型和还原型的GOD，而，而Fecp2R和和Fecp2R+则为还原则为还原型和氧化型二茂络铁。型和氧化型二茂络铁。葡萄糖被葡萄糖被GOD氧化的同时，氧化的同时，GOD被还原成被还原成GODred，氧，氧化型的电子传递体化型的电子传递体2Fecp2R+可将可将GODred再氧化成再氧化成GODox13电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感

9、技术课程组 制作制作制作制作 生物传感器的特点生物传感器的特点1.根据生物反应的奇异和多样性，从理论上讲可以制造出测定所有生物物彻质的多种多样的生物传感器；2.这类生物传感器是在无试剂条件下工作的(缓冲液除外)，比各种传统的生物学和化学分析法操作简便、快速、准确；3.可连续测量、联机操作、直接显示与读出测试结果。14电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 生物传感器的分类生物传感器的分类v按分子识别元件分类v按换能器分类15电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术

10、课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 固定化酶 固定化 微生物 固定化免疫物质 固定化细胞器 生物组织切片微生物传感器分子识别元件酶传感器免疫传感器细胞器传感器组织传感器按分子识别元件分类16电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 按器件分类按器件分类 电化学电极 光学换能器 介体 半导体 传递系统 换能器 热敏电阻 压电晶体介体生物传感器换能器半导体生物传感器生物电极光生物传感器热生物传感器压电晶体生物传感器17电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传

11、感技术课程组 制作制作制作制作 生物传感器的生物传感器的固定方法固定方法固定方法：现已经成为生物工程中一门重要技术1.物理方法：夹心法、吸附法、包埋法；2.化学方法:共价连接法、交联法3.近年来,由于半导体生物传感器迅速发展,因而又出现了采用集成电路工艺制膜技术，如光平板印刷法、喷射法等。18电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 夹心法夹心法v将生物活性材料封闭在双层滤膜之间，形象地称为夹心法。v这种方法的特点是操作简单，不需要任何化学处理，固定生物量大，响应速度快，重复性好。19电子科技大学电子科技大学电

12、子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 吸附法吸附法v用非水溶性固相载体物理吸附或离子结合，使蛋白质分子固定化的方法v载体种类较多，如活性炭、高岭土、硅胶、玻璃、纤维素、离子交换体等。20电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 包埋法包埋法v把生物活性材料包埋并固定在高分子聚合物三维空间网状结构基质中。v此方法的持点是一般不产生化学修饰，对生物分子活性影响较小；缺点是分子量大的底物在凝胶网格内扩散较固难。21电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科

13、技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 共价连接法共价连接法v使生物活性分子通过共价键与固相载体结合固定的方法。v此方法的特点是结合牢固，生物活性分子不易脱落，载体不易被生物降解，使用寿命长；v缺点是实现固定化麻烦，酶活性可能因发生化学修饰而降低。22电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 交联法交联法v依靠双功能团试剂使蛋白质结合到惰性载体或蛋白质分子彼此交联成网状结构。v这种方法广泛用于酶膜和免疫分子膜制备，操作简单。23电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子

14、科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 11.2 酶传感器酶传感器v酶传感器信号变换方式v尿酸用固定化酶膜传感器v葡萄糖传感器24电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 信号变换方式信号变换方式(1)电位法 电位法是通过不同离子生成在不同感受体，从测得膜电位去计算与酶反应有关的各种离子的浓度。一般采用铵离子电极（氨气电极）、氢离子电极、氧化碳电极等(2)电流法 电流法是从与酶反应有关的物质的电极反应得到的电流值来计算被测物质的方法。电化学装置采用的是氧电极。燃料电

15、池型电极和过氧化氢电极等 酶电极：酶传感器由固定酶和基础电极组成，酶电极的设计主要考虑酶催化过程产生或消耗的电极活性物质，如一个酶催化反应是耗过程，就可以使用电极或电极；若酶催化反应过程产生酸，即可使用电极。25电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 尿酸用固定化酶膜传感器尿酸用固定化酶膜传感器26电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 葡萄糖传感器葡萄糖传感器v工作原理v测量氧消耗量的葡萄糖传感器v测22生成量的葡萄糖传感

16、器27电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 工作原理工作原理故葡萄糖浓度测试方法有三种：测耗量测生成量测由葡萄糖酸而产生的变化。葡萄糖氧化酶（）葡萄糖+H2O葡萄糖酸28电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 测量氧消耗量的葡萄糖传感器测量氧消耗量的葡萄糖传感器29电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 测量氧消耗量的葡萄糖传感器测量氧消

17、耗量的葡萄糖传感器1.氧电极构成：由b阳极和t阴极浸入碱溶液，阴极表面用氧穿透葡萄糖（基质）膜覆盖特氟隆，厚约mm2.氧电极测O2原理：溶液中的O2穿过特氟隆膜到达Pt阴极上，按下式有被还原的阴极电流通过，其电流值与含O2浓度成比例。3.2+2+e=30电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 测测22生成量的葡萄糖传感器生成量的葡萄糖传感器1.Pt阳极2.聚四氟乙烯膜（作用）3.固相酶膜4.半透膜多孔层5.半透膜致密层31电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课

18、程组传感技术课程组 制作制作制作制作 聚四氟乙烯膜（作用）聚四氟乙烯膜（作用）v它避免了电极与被测液直接相接触，防止了电极毒化；如电极Pt为开放式，它浸入含蛋白质的介质中，蛋白质会沉淀在电极表面上从而减小电极有效面积，使电流下降，使传感器受到毒化。32电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 v葡萄糖氧化产生，而通过选择性透气膜，在Pt电极上氧化，产生阳极电流。葡萄糖含量与电流成正比，由此可测出葡萄糖溶液浓度。v在t电极上加0.6V电压时，则产生的阳极电流为：葡萄糖氧化酶（）葡萄糖氧化酶（）葡萄糖葡萄糖+H2O

19、葡萄糖酸葡萄糖酸33电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 11.3 微生物传感器微生物传感器分类 好气性微生物传感器 厌气性微生物传感器 注：气微生物固定方式及工作原理34电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 好气性微生物传感器好气性微生物传感器v微生物的呼吸可用氧电极或二氧化碳电极来测定结构被测 氧消化变化 电信号物质 （呼吸技能）微生物固定化膜封闭式氧电极或CO2电极35电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大

20、学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 O2电极好气性微生物传感器电极好气性微生物传感器1.电解液2.O型环3.Pb阴极4.聚四氟乙烯5.固化微生物膜6.尼龙网7.Pt阳极36电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 O2电极好气性电极好气性微生物传感器响应曲线微生物传感器响应曲线37电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 厌气性微生物传感器厌气性微生物传感器v可测定微生物代谢产物，可用

21、离子选择电极可测定微生物代谢产物，可用离子选择电极来测定来测定微生物微生物固定化固定化模模电化电化学敏学敏感电感电极极被测物质被测物质新陈代谢变化新陈代谢变化（代谢机能）（代谢机能）电信号电信号38电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 甲酸传感器甲酸传感器(H2电极厌气性微生物传感器电极厌气性微生物传感器)1.圆环2.液体连接面3.电解液(100mol/m3磷酸缓冲液)4.Ag2O2电极(阴极)5.Pt电极(阳极)6.聚四氟乙烯膜39电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课

22、程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 甲酸传感器甲酸传感器原理原理v将产生氢的酪酸梭状芽菌固定在低温胶冻膜上，并把它固定在燃料电池Pt电极上；v当传感器浸入含有甲酸的溶液时，甲酸通过聚四氟乙烯膜向酪酸梭状芽菌扩散，被资化后产生H2,而H2又穿过Pt电极表面上的聚四氟乙烯膜与Pt电极产生氧化还原反应而产生电流，此电流与微生物所产生的H2含量成正比，而H2量又与待测甲酸浓度有关，因此传感器能测定发酵溶液中的甲酸浓度。40电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 11.4 免疫传感器免疫传感器v免疫传感

23、器的工作原理v免疫传感器的结构41电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 免疫传感器的工作原理免疫传感器的工作原理v利用抗体对抗原的识别功能和与抗原结合功能研制成功的。v抗原或抗体一经固定于膜上，就形成具有识别免疫反应强烈的分子功能性膜。如，抗原在乙酰纤维素膜上进行固定化，由于蛋白质为双极性电解质，（正负电极极性随值而变）所以抗原固定化膜具有表面电荷。其膜电位随膜电荷要变化。故根据抗体膜电位的变化，可测知抗体的附量。42电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程

24、组传感技术课程组 制作制作制作制作 免疫传感器的结构免疫传感器的结构43电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 11.5 半导体生物传感器半导体生物传感器v酶光敏二极管v酶FET44电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 酶光敏二极管酶光敏二极管v酶光敏二极管由催化发光反应的酶和光敏二极管(或晶体管)半导体器件构成；v在硅光敏三极管的表面透镜上涂上一层过氧化氢酶膜，即构成了检测过氧化氢的酶光敏二极管；v当二极管表面接触到过氧

25、化氢时，由于过氧化氢酶的催化作用，加速发光反应，产生的光子照射到硅光敏二极管pn结点，从而改变了二极管的导通状态。即将发光效应转换成光敏二极管的光电流，从而检测出过氧化氢及其浓度大小。45电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 酶光敏二极管的结构酶光敏二极管的结构46电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 酶酶FET47电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组

26、 制作制作制作制作 结构与工作原理结构与工作原理v结构：大多数由以有机物所制作的敏感膜与HFET(氢离子场效应管)组成。v制法：去掉FET的栅极金属，在此处固定生物敏感膜，如氮化硅膜氮化硅膜，它易于被离子和水分渗透，而且表面一旦与若干水分溶化在一起时（称为水合作用），下式中的电位与氢离子浓度倒数的对数(即PH值)成比例。48电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 11.6 生物传感器应用与未来生物传感器应用与未来v应用：发酵工业、医疗机构、军事v发展方向：1.集成化微型生物传感器的研究2.生物芯片(仿人脑)3

27、.仿生传感器(蝙蝠的超声波定位、海豚的声纳导航测距、信鸽的方向识别、狗的嗅觉)49电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 本章小结本章小结v概念:生物传感器v问题1:请问生物传感器有哪些组成部分?v问题2:生物传感器有哪些种类?v问题3:简要说明一下生物传感器的研究历史.v问题4:简要说明一下生物传感器的固定方法,并分别进行比较.50电子科技大学电子科技大学电子科技大学电子科技大学 传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组传感技术课程组 制作制作制作制作 此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢