专题1基因工程教学内容.ppt

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1、专题1基因工程2、DNA连接酶连接酶来源来源粘性末端粘性末端粘性末端和平末端粘性末端和平末端Ecoli DNAcoli DNA连接酶连接酶T4 DNAT4 DNA连接酶连接酶与与DNA聚合酶、热稳定聚合酶、热稳定DNA聚合酶有什么异同？聚合酶有什么异同？3、载体、载体种类：种类：条件：条件：质粒、质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒等噬菌体的衍生物、动植物病毒等能在细胞中稳定存在并复制能在细胞中稳定存在并复制11多个限制酶切位点多个限制酶切位点标记基因标记基因无害无害组成：组成：目的基因、标记基因目的基因、标记基因启动子、终止子启动子、终止子三、过程三、过程1、获取目的基因、获取目的基因从基因文库

2、中获取目的基因从基因文库中获取目的基因PCR技术扩增技术扩增人工合成人工合成序列、功能、位置、转序列、功能、位置、转录产物录产物mRNA、表达产、表达产物蛋白质等物蛋白质等如何利用如何利用PCR技术扩增目的基因？技术扩增目的基因？条件：条件：缓冲液缓冲液模板模板两种引物两种引物热稳定热稳定DNA聚合酶聚合酶4种脱氧核苷酸种脱氧核苷酸过程：过程：变性：变性：复性：复性：延伸：延伸：加热至加热至9095冷却至冷却至5560 加热至加热至7075 2、构建基因表达载体（核心）、构建基因表达载体（核心）3、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞植物细胞植物细胞农杆菌转化法农杆菌转化法基因枪法基

3、因枪法花粉管通道法花粉管通道法双子叶植物和裸子植物双子叶植物和裸子植物单子叶植物单子叶植物我国独创我国独创动物细胞动物细胞显微注射法（受精卵）显微注射法（受精卵）微生物细胞微生物细胞Ca 2+处理法处理法4、目的基因的检测与鉴定、目的基因的检测与鉴定分子水平分子水平个体水平个体水平DNA分子杂交技术分子杂交技术抗原抗原抗体杂交技术抗体杂交技术DNA 、mRNA四、应用四、应用植物植物动物动物基因治疗：基因治疗：抗性植物（抗虫、病、逆性等）抗性植物（抗虫、病、逆性等）改良品质（番茄延熟、提高营养、控制花色等）改良品质（番茄延熟、提高营养、控制花色等）改善品质（提高生长速率、营养成分等）改善品质（

4、提高生长速率、营养成分等）生产药物（乳腺生物反应器等）生产药物（乳腺生物反应器等）作为器官移植的供体作为器官移植的供体五、蛋白质工程五、蛋白质工程根据人们对蛋白质功能的特定根据人们对蛋白质功能的特定需求需求，以蛋白质分子的结构规律与生物功能的关系为以蛋白质分子的结构规律与生物功能的关系为基础基础，通过通过基因修饰或基因合成，基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行对现有蛋白质进行改造改造或或制造制造一种新的蛋白质的过程。一种新的蛋白质的过程。预期蛋白质的功能预期蛋白质的功能设计蛋白质的结构设计蛋白质的结构推测其氨基酸序列推测其氨基酸序列推测其脱氧核苷酸序列（基因、推测其脱氧核苷酸序列（基因、DNA）此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！此课件下载可自行编辑修改，仅供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢感谢您的支持，我们努力做得更好！谢谢