临床微生物学检验技术 (18).pdf

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1、需氧革兰阳性杆菌检验1炭疽芽胞杆菌2蜡样芽胞杆菌3阴道加特纳菌4棒状杆菌属目录CONTENTS1PART炭疽芽胞杆菌(B.anthracis)人畜共患病，常在牧区爆发流行 宿主广泛，传播方式多样（接触、摄食或气溶胶），可散发流行 芽孢抵抗力极强，致病力最强，致死率高 一旦患病可获持久免疫力 烈性传染病，世界五大兽疫之一，一旦发现启动报疫程序炭疽芽胞杆菌(B.anthracis)临床微生物学检验已处理标本直接涂片增菌培养分离培养革兰染色荚膜染色初步报告血平板戊烷脒琼脂平板可疑菌落菌落涂片染色镜检鉴定试验肉汤培养动物实验动物死亡分离培养噬菌体裂解串珠试验青霉素抑制试验 标本的采集：分泌物、痰、血液

2、、粪便、呕吐物、脑脊液严禁宰杀死畜 标本的处理：液体标本取沉渣分离培养；固体标本用生理盐水浸泡，水浴杀死非芽胞菌 血液、脏器、渗出液增菌或直接分离培养临床微生物学检验 革兰阳性大杆菌，两端截平 有芽胞、无鞭毛、可有荚膜（有毒株）培养后形成长链、呈竹节状排列临床微生物学检验临床微生物学检验 需氧或兼性厌氧，最适温度3035 普琼平板：灰白色、扁平、干燥的粗糙型菌落；卷发状（低倍镜下）BMP：不溶血或轻微溶血（可与其他需氧芽胞杆菌区别）肉汤培养基：絮状沉淀 明胶培养基中37、24h，明胶表面液化成漏斗状临床微生物学检验炭疽杆菌在血琼脂平板中菌落临床微生物学检验 分解葡萄糖、麦芽糖、覃糖、蔗糖 还原

3、硝酸盐 卵磷脂酶弱阳 明胶液化 触酶阳性 牛乳中生长24天，牛乳凝固后缓慢融化临床微生物学检验 串珠试验：接种待检菌于0.050.5U/ml青霉素培养基 376h 形成大而均匀的圆球状菌体临床微生物学检验青霉素抑制试验接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板，3724h生长受抑制不生长临床微生物学检验串珠和青霉素抑制联合试验青霉素纸片抑菌环兔血琼脂平板临床微生物学检验 噬菌体裂解试验（AP631炭疽噬菌体）毒力试验：毒素动物试验 重碳酸盐毒力试验（接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板，10%CO2、37、2448h）有毒株：粘液型菌落，有荚膜无毒株：粗糙型菌落，无荚膜2PAR

4、T蜡样芽胞杆菌(B.cereus)分布广泛，可从食品中分离得到 主要引起人类食物中毒，少数菌血症蜡样芽胞杆菌临床微生物学检验 标本的采集：可疑食物、腹泻粪便、呕吐物 标本的处理：无菌生理盐水制成细菌混悬液；细菌计数105/ml有诊断价值 涂片染色：革兰阳性大杆菌、两端钝圆、链状排列、长短不一 分离培养：BAP或卵黄琼脂等选择性培养基临床微生物学检验 革兰阳性大杆菌、两端钝圆或平整 有芽胞、周鞭毛、无荚膜 芽胞位于菌体中央或次极端 有时成短链状排列临床微生物学检验 需氧或兼性厌氧，营养要求不高 营养琼脂：菌落表面粗糙似白蜡状，故得名；灰白色大菌落，毛玻璃状或蜡滴状。BAP：溶血 肉汤培养基：混浊

5、生长，可形成菌膜临床微生物学检验蜡样芽胞杆菌在血琼脂平板中菌落临床微生物学检验 分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖等 液化明胶 磷脂酰胆碱酯酶阳性 VP试验阳性 DNA酶阳性3PART阴道加特纳菌（Gardnerella vaginalis）最后报告临床微生物学检验分泌物（宫颈、阴道）新鲜湿片（找线索细胞）分离培养涂片染色镜检(5%人血平板)纯培养(5%人血平板)触酶、氧化酶(-)初步报告GV的主要鉴定试验 革兰染色视菌株和菌龄而异，高浓度血清中生长呈革兰阳性 多形性，无鞭毛、无芽胞和无荚膜GV纯培养的镜下形态临床微生物学检验临床微生物学检验 兼性厌氧菌，营养要求较高，但不需要X、V因子，最适PH

6、6.0-6.5，最适生长温度35-37 5%人血平板，5%CO2 35培养48小时，形成针尖大小的菌落：圆形、光滑、不透明，人血、兔血平板上生长呈溶血环，羊血平板不溶血临床微生物学检验GV在人血平板上的菌落形态特征（48h）临床微生物学检验 氧化酶、触酶阴性 发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气 水解马尿酸和淀粉等临床微生物学检验药敏试验对氨苄西林、羧苄西林、苯唑西林、青霉素、万古霉素敏感；对磺胺类、萘啶酸、新霉素等耐药4PART棒状杆菌属（Corynebacterium）是一群革兰阳性杆菌，归属放线菌科 种类繁多，多为条件致病菌，引起人类疾病的主要是白喉棒状杆菌棒状杆菌属白喉棒状杆菌咽拭标本亚碲酸

7、钾血平板观察菌落特征直接涂片革兰染色异染颗粒染色血平板吕氏血清斜面直接涂片革兰染色异染颗粒染色毒力试验临床微生物学检验涂片染色镜检生化反应临床微生物学检验 G+棒状杆菌，一端或两端膨大，排列不规则，常呈X、V、L状 不产生芽胞、无鞭毛、无荚膜 胞浆中有异染颗粒异染颗粒染色法：Albert染色、Neisser染色临床微生物学检验 需氧或兼性厌氧 菌落特征 血平板：细小灰白、狭窄溶血环 鸡蛋斜面和吕氏血清斜面：生长迅速，灰白 色有光泽菌落 亚碲酸钾血平板：为选择培养基，菌落 呈黑色。菌落分为重型、轻型或中间型白喉杆菌亚碲酸钾血平板菌落临床微生物学检验 分解葡萄糖、麦芽糖、果糖等 不分解乳糖、多数不分解蔗糖 不液化明胶 靛基质试验阴性临床微生物学检验 是鉴定白喉杆菌为致病菌株的重要依据 方法艾立克(Elek)平板毒力试验对流电泳法SPA协同凝集试验动物试验临床微生物学检验 本菌对青霉素、红霉素、氯霉素敏感，对磺胺类耐药药敏试验谢谢！