1.3微生物的营养课件--高二上学期生物沪科版拓展型课程.pptx

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1、第3节 微生物的营养问题问题：1.微生物生微生物生长长和繁殖需要哪些和繁殖需要哪些营营养物养物质质？2.怎怎样样培养微生物？培养微生物？一、微生物需要的营养物质一、微生物需要的营养物质 微生物细胞的化学组成微生物细胞的化学组成 微生物需要的营养物质微生物需要的营养物质碳源氮源无机盐生长因子水碳源碳源为微生物提供碳素来源的营养物质有机碳源：葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉和纤维素等。（单糖优于双糖、多糖，淀粉优于纤维素）其他如蛋白质、肽等（在糖类缺乏时可利用）无机碳源：CO2碳源作用：主要用于合成微生物自身结构物质和代谢产物，在生化反应过程中，还能提供维持生命活动所需要的能量。所以，碳源物质也是能源物

2、质。自养型微生物异养型微生物必须以有机物作为原料，合成自身物质。可以进行光合作用或利用无机物获得物质和能量。氮源氮源为微生物提供氮素来源的营养物质氮源物质：蛋白质及其不同程度的降解物，如蛋白胨(多肽混合物)、氨基酸，以及铵盐、硝酸盐、嘌呤、嘧啶、尿素、胺、分子氮等。氮源作用：主要用于合成细胞中的蛋白质、核酸等含氮物质。N2（分子氮）（分子氮）自生固氮微生物可以利用；自生固氮微生物可以利用；NH4+、NO3-、尿素是自然界最常见的氮源；、尿素是自然界最常见的氮源；实验室最常用的氮源实验室最常用的氮源：牛肉浸膏牛肉浸膏：新鲜牛肉经过消化、过滤、浓缩，得到的棕褐色膏状物，：新鲜牛肉经过消化、过滤、浓

3、缩，得到的棕褐色膏状物，含有各种氨基酸、核苷酸、无机盐和维生素。含有各种氨基酸、核苷酸、无机盐和维生素。蛋白胨蛋白胨：淡黄色粉剂，是动植物蛋白经过酶初步消化的产物，含：淡黄色粉剂，是动植物蛋白经过酶初步消化的产物，含有丰富的氨基酸及各种维生素。有丰富的氨基酸及各种维生素。无机无机盐盐磷酸盐、硫酸盐、氯化物，以及含钠、钾、钙、镁等元素的化合物。微量元素（如锌、锰、钼、铁、铜等）往往混合在天然有机物、自来水中。在配制培养基时，一般不需要特别加入。无机盐作用：提供微生物必须的除碳源和氮源以外的重要元素生生长长因子因子微生物自身不能合成或合成量不足时，但又是微生物生长和代谢所必需的微量有机物。主要包括

4、：维生素、氨基酸等。能进行光合作用的微生物、某些异养微生物（如大肠杆菌）和大多数真菌不需要加生长因子。在配制培养基时，如已加入酵母浸膏、牛肉浸膏或植物组织提取液等天然物质，因其本身含有生长因子，不需要另外加入生长因子。需要生长因子的主要有乳酸杆菌，动物体的致病菌，原生动物等 水微生物生长和代谢必不可少的营养物质配置培养基时，通常用自来水（含微量元素）而不用蒸馏水。思考：水一般思考：水一般选用自来水用自来水还是蒸是蒸馏水？水？为什么？什么？由于微生物个体微小，在自然界中常常是多种微生物生活在一起，若想研究某种微生物，就必须先分离、纯化微生物，再培养微生物。二、培养基二、培养基培养基是人工配制的，

5、适合微生物生长、繁殖或产生代谢产物的营养基质。配制培养基的基本原则1、选择选择适宜适宜的的营营养物养物质质总体而言，所有微生物的培养基都要含有碳源、氮源、无机盐、生长因子和水。并不是所有微生物需要上述的并不是所有微生物需要上述的5大大类营养物养物质，不同微生物类群对营养物质的需求是不同的。1）能进行光合作用的微生物可以利用CO2作碳源，自身又能合成各种有机物无需加入有机碳源，只需简单的无机盐和水。2）异养型微生物需要4-5类营养物质。大肠杆菌培养基只需要碳源、无机盐和水酵母菌豆芽汁蔗糖培养基常见细菌牛肉膏蛋白胨培养基2、培养基配制后需要、培养基配制后需要进进行行严严格的格的灭灭菌菌高高压压蒸汽

6、蒸汽灭灭菌菌：1.05kg/cm2、121条件下，维持1530min灭菌。可以杀死细菌芽孢（休眠体）。培养基的类型琼脂凝固剂实验1.2 培养基的配制微生物实验基本原则微生物实验基本原则无菌原则无菌原则无菌技术无菌技术是微生物实验的最基本的技术。是微生物实验的最基本的技术。无菌技术围绕着如何避免杂菌污染展开，主要包括以下几个方面：无菌技术围绕着如何避免杂菌污染展开，主要包括以下几个方面：1、对实验操作的空操作的空间、操作者的手和衣着、操作者的手和衣着进行清行清洁和消毒。和消毒。2、将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等、将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行行灭菌。菌。3、为避免避免

7、环境中微生物境中微生物污染，染，实验操作操作应在酒精灯火焰附近在酒精灯火焰附近进行。行。（火焰附近是无菌区）（火焰附近是无菌区）4、实验操作操作时应避免已避免已经灭菌菌处理的材料用具与周理的材料用具与周围的物品相接触。的物品相接触。消毒与灭菌是相同的概念吗？消毒与灭菌是相同的概念吗？消毒消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。灭菌灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物，是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢

8、子。包括芽孢和孢子。实验目的：配置200ml的牛肉膏蛋白胨固体培养基1.计算根据牛肉膏蛋白根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，培养基配方的比例，计算配制算配制200ml200ml培养培养基基时各种成分的用量。各种成分的用量。2.称量、熔化、定容、调节pH准确地准确地称取称取各种原料成分，加入到各种原料成分，加入到500ml500ml烧杯的少量蒸杯的少量蒸馏水中溶解；水中溶解；牛肉膏用牛肉膏用50ml50ml烧杯称量，用少杯称量，用少许水加水加热溶解后再加到本溶解后再加到本烧杯中；杯中；加水至加水至200ml200ml，酒精灯，酒精灯加加热至至沸沸腾，加入，加入琼脂脂2 2g g，继续加加热至至琼

9、脂完脂完全熔化（全熔化（边加加热边搅拌）；拌）；用用热水水补足足蒸蒸发损失的水分，失的水分，定容定容至至200ml200ml。用用pHpH精密精密试纸测试培养基培养基pHpH，并用滴管吸取，并用滴管吸取10%10%盐酸或盐酸或10%10%氢氧化钠氢氧化钠调调节节pHpH至至7.27.27.47.4。3.分装、灭菌分装培养基：将上述培养基倒入三角分装培养基：将上述培养基倒入三角烧瓶（分装三角瓶（分装三角烧瓶的量以不瓶的量以不超超过三角三角烧瓶容瓶容积的一半的一半为宜；宜；不要把培养基沾在瓶口，可通过一不要把培养基沾在瓶口，可通过一个漏斗注入三角烧瓶中，培养基沾在瓶口容易引起杂菌污染个漏斗注入三角

10、烧瓶中，培养基沾在瓶口容易引起杂菌污染。）牛皮牛皮纸封口：在三角封口：在三角烧瓶口上塞上棉塞，用两瓶口上塞上棉塞，用两层牛皮牛皮纸扎扎紧瓶口。瓶口。高高压压蒸汽蒸汽灭灭菌菌1.05kg/cm2、121，维持1530min灭菌。培养皿、三角推棒、接种环、无菌水所有玻璃器皿一培养皿、三角推棒、接种环、无菌水所有玻璃器皿一起灭菌，千万注意不要有物品遗漏起灭菌，千万注意不要有物品遗漏 4.倒平板（培养皿）注意无菌操作将灭菌后的培养基冷却至50左右，在启动的超净工作台上打开三角烧瓶的包纸，并用酒精灯火焰烧瓶口后，将培养基分别倒入灭过菌的培养皿中备用。AB课后作业课后作业一、导测P152起第1、2节全部

11、第3节 微生物的营养【知识梳理】13 【基础检测】一、1、3、5、6、9、10、11二、一张纸：等级考目标、决心、现状和问题。夹在导测第一页。筛选筛选的微生物的微生物选择选择培养基的配置培养基的配置现现象象金黄色葡萄球菌（特点：耐_）加入高浓度盐溶液能存活蓝藻等自养型微生物（特点：_）不加入_（氮源不含_，一般选用_）能存活固氮菌（特点：_）不加入_（碳源不含_，一般选用_）能存活欲把混在真细菌中的古细菌、真菌分离出来（古细菌、真菌相较于真细菌的特点：_）加入_能存活大肠杆菌（特点：易被_染色）加入_菌落呈现_甲醛（HCOH）降解菌（特点：以_作为唯一_源）加入_作为唯一_源（源不含_，一般选

12、用_）能存活尿素降解菌（特点：以_作为唯一_源）加入_作为唯一_源（源不含_，一般选用_）能存活实验1.3 微生物的接种以及菌落和抗生素抑菌现象的观察平板划线法平板涂布法一、接种和菌落的观察（一、接种和菌落的观察（平板划线法平板划线法）【实验原理原理】平板划线法是用平板划线法是用接种环接种环将微生物转移至固体平板将微生物转移至固体平板培养基表面，通过培养基表面，通过连续划线连续划线，将聚集的菌种，将聚集的菌种逐步稀释逐步稀释分散到培养基分散到培养基的表面，从而将菌的表面，从而将菌种逐步稀释得到种逐步稀释得到独立的单个细胞。独立的单个细胞。经一段时间培经一段时间培养单个细胞繁殖形成肉眼可见的子细

13、胞群体，称养单个细胞繁殖形成肉眼可见的子细胞群体，称单菌落单菌落。单菌落。单菌落是由单个细胞分裂成的群体，因此不用担心有杂菌细胞污染。是由单个细胞分裂成的群体，因此不用担心有杂菌细胞污染。单菌落【实验目的目的】将将大大肠杆菌枯草杆菌藤黄八叠球杆菌枯草杆菌藤黄八叠球菌菌菌种分菌种分别接种、培养和菌落的接种、培养和菌落的观察。察。灼烧接种环的目的：杀死接种环上的微生物。灼烧试管口的目的：杀死管口周围杂菌，防止外界微生物进入试管。冷却的目的：避免高温杀死要接种的微生物。6、将、将平板倒置平板倒置，放入培养箱中培养，放入培养箱中培养，37，2-32-3天后观察和比较各种细菌菌天后观察和比较各种细菌菌落

14、的状态落的状态。灼烧的目的：通过灭菌，减少接种环上的微生物。不断划线的目的：稀释微生物。二、抗生素对微生物的抑制作用（二、抗生素对微生物的抑制作用（涂布法涂布法）未加抗生素圆片的培养皿无菌水圆片四种不同浓度抗生素圆片培养的细菌（布满培养皿表面的白点）测量每个原纸片周围清晰区的宽度平板划平板划线法法涂布平板法涂布平板法目的工具接种环涂布棒（玻璃刮产）分离纯化，获得单一菌落计数比较两种接种方法：小小课题：课题：用选择培养基从用选择培养基从土壤中分离土壤中分离自生固氮菌自生固氮菌1.什么是固氮微生物？什么是自生固氮菌？固氮微生物能将大气中的分子氮还原成氨。根瘤菌固氮微生物自生固氮菌共生固氮菌2.如何

15、配置选择培养基呢？该培养基必须只能使自生固氮菌存活，其他菌不能存活。该培养基不要添加_，还要保证添加的碳源不含有_元素。氮源氮阿什比无氮培养基成分成分成分KHKH2 2POPO4 4NaClNaClMgSOMgSO4 47H7H2 2O O葡萄糖葡萄糖CaSO4琼脂琼脂蒸馏水蒸馏水含量含量0.2g0.2g0.2g0.2g0.2g0.2g10.0g10.0g5.0g5.0g10g1000ml注意：琼脂含有氮，使用前需用自来水流水冲几天，再用蒸馏水浸泡，洗涤几次，以除去琼脂中的氮实验步骤土壤取样；土壤样品稀释；配置培养基；利用_ 将土壤稀释液接种到培养基中；将培养皿倒置，放在28-30恒温培养箱中

16、培养3-4天；观察菌落的形状、大小和颜色。圆褐固氮菌划线法筛选筛选的微生物的微生物选择选择培养基的配置培养基的配置现现象象金黄色葡萄球菌（特点：耐_）加入高浓度盐溶液能存活蓝藻等自养型微生物（特点：_）不加入_（氮源不含_，一般选用_）能存活固氮菌（特点：_）不加入_（碳源不含_，一般选用_）能存活欲把混在真细菌中的古细菌、真菌分离出来（古细菌、真菌相较于真细菌的特点：_）加入_能存活大肠杆菌（特点：易被_染色）加入_菌落呈现_甲醛（HCOH）降解菌（特点：以_作为唯一_源）加入_作为唯一_源（源不含_，一般选用_）能存活尿素降解菌（特点：以_作为唯一_源）加入_作为唯一_源（源不含_，一般选用_）能存活课后作业课后作业 导测P154158 全部