实验动物饲养与管理.ppt

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1、实验动物饲养与管理实验动物饲养与管理 江西中医学院江西中医学院 罗小泉罗小泉实验动物饲养管理内容实验动物饲养管理内容微生物控制及环境设施管理微生物控制及环境设施管理饲料营养管理饲料营养管理 育种繁殖管理育种繁殖管理常用实验动物的日常管理常用实验动物的日常管理 一一微生物控制及环境设施管理微生物控制及环境设施管理1、实验动物按微生物等级分类、实验动物按微生物等级分类2、普通动物的概念、普通动物的概念3、清洁级动物的概念、清洁级动物的概念4、无特定病原体动物的概念、无特定病原体动物的概念5、无菌动物的概念、无菌动物的概念6、屏障环境的管理、屏障环境的管理1 1、实验动物按微生物等级分类实验动物按微

2、生物等级分类普通动物普通动物清洁动物清洁动物无特定病原体动物无特定病原体动物(SPF(SPF动物动物)无菌动物无菌动物2、普通级动物的概念、普通级动物的概念 普通级动物普通级动物 conventional(CV)animal 是微生物和寄生虫控制级别最低的实验动物；是微生物和寄生虫控制级别最低的实验动物；是微生物和寄生虫控制级别最低的实验动物；是微生物和寄生虫控制级别最低的实验动物；要求不携带主要的要求不携带主要的要求不携带主要的要求不携带主要的人兽共患病病原人兽共患病病原人兽共患病病原人兽共患病病原、动物烈性传动物烈性传动物烈性传动物烈性传染病病原染病病原染病病原染病病原及及及及人兽共患寄生

3、虫人兽共患寄生虫人兽共患寄生虫人兽共患寄生虫，如沙门菌、结核分，如沙门菌、结核分，如沙门菌、结核分，如沙门菌、结核分枝杆菌、狂犬病病毒和兔出血症病毒等。枝杆菌、狂犬病病毒和兔出血症病毒等。枝杆菌、狂犬病病毒和兔出血症病毒等。枝杆菌、狂犬病病毒和兔出血症病毒等。普通级动物有豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等，普普通级动物有豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等，普普通级动物有豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等，普普通级动物有豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等，普通级小鼠和大鼠等级被取消。通级小鼠和大鼠等级被取消。通级小鼠和大鼠等级被取消。通级小鼠和大鼠等级被取消。3、清洁级动物的概念、清洁级动物的概念清洁动物清洁动物清洁动物清洁动物 cl

4、ean(CL)animalclean(CL)animal 是是是是根根根根据据据据我我我我国国国国国国国国情情情情而而而而设设设设立立立立的的的的等等等等级级级级动动动动物物物物，除除除除普普普普通通通通级级级级动动动动物物物物应应应应排排排排除除除除的的的的病病病病原原原原和和和和寄寄寄寄生生生生虫虫虫虫外外外外，不不不不携携携携带带带带对对对对动动动动物物物物危危危危害害害害大大大大和和和和对对对对科科科科学学学学研研研研究究究究干干干干扰扰扰扰大大大大的的的的病病病病原原原原和和和和寄寄寄寄生生生生虫虫虫虫，如如如如小鼠肝炎病毒、仙台病毒等。小鼠肝炎病毒、仙台病毒等。小鼠肝炎病毒、仙台病

5、毒等。小鼠肝炎病毒、仙台病毒等。清清清清洁洁洁洁动动动动物物物物有有有有小小小小鼠鼠鼠鼠、大大大大鼠鼠鼠鼠、豚豚豚豚鼠鼠鼠鼠、地地地地鼠鼠鼠鼠、兔兔兔兔等等等等动物。犬和猴没有清洁级。动物。犬和猴没有清洁级。动物。犬和猴没有清洁级。动物。犬和猴没有清洁级。4、无特定病原体动物的概念、无特定病原体动物的概念无特定病原体动物（无特定病原体动物（SPF动物）动物）specific pathogen free(SPF)animal 通常被称为通常被称为SPF动物，除动物，除清洁动物应清洁动物应排除的病原和寄生虫外，排除的病原和寄生虫外，不携带主要潜在不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病感

6、染或条件致病和对科学实验干扰大的病原和寄生虫。如绿脓杆菌等。原和寄生虫。如绿脓杆菌等。SPF动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、地动物包括小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等。鼠、兔、犬和猴等。5、无菌动物的概念、无菌动物的概念无菌动物无菌动物germ free(GF)animal 指无可检出一切生命体的动物。其来源是普通指无可检出一切生命体的动物。其来源是普通指无可检出一切生命体的动物。其来源是普通指无可检出一切生命体的动物。其来源是普通动物经无菌剖腹产手术，幼子在无菌隔离器中人动物经无菌剖腹产手术，幼子在无菌隔离器中人动物经无菌剖腹产手术，幼子在无菌隔离器中人动物经无菌剖腹产手术，幼子在无菌隔离器中

7、人工哺育或由其他无菌动物代乳饲育而成。工哺育或由其他无菌动物代乳饲育而成。工哺育或由其他无菌动物代乳饲育而成。工哺育或由其他无菌动物代乳饲育而成。“无菌无菌无菌无菌”只是一个相对概念，仅仅指以目前的只是一个相对概念，仅仅指以目前的只是一个相对概念，仅仅指以目前的只是一个相对概念，仅仅指以目前的技术手段未能查出微生物。技术手段未能查出微生物。技术手段未能查出微生物。技术手段未能查出微生物。6.6.屏障环境管理屏障环境管理严格规定人员、物品、动物的流向严格规定人员、物品、动物的流向 合理选择消毒方法合理选择消毒方法 积极开展各项指标的检测工作积极开展各项指标的检测工作认真做好屏障环境内外的清洁消毒

8、工作认真做好屏障环境内外的清洁消毒工作加强人员队伍建设和管理加强人员队伍建设和管理有效的检测措施有效的检测措施严格规定人员、物品、动物的流向严格规定人员、物品、动物的流向人员流向人员流向:外环境外环境第一更衣第一更衣淋浴淋浴第二第二更衣更衣洁净走廊洁净走廊实验室实验室次洁净走廊次洁净走廊缓冲间缓冲间外环境外环境动物流向动物流向:购买购买SPF 级动物级动物检疫检疫/观察室观察室实验室实验室 次洁净走廊次洁净走廊缓冲间缓冲间解剖室解剖室物品流向物品流向:洗消间洗消间高压灭菌设备高压灭菌设备/渡槽渡槽/传传递窗递窗消毒物品储存室消毒物品储存室实验室实验室次洁净次洁净走廊走廊缓冲间缓冲间外环境外环境

9、合理选择消毒方法合理选择消毒方法饲养笼盒、饮水瓶、垫料、衣服和各种实饲养笼盒、饮水瓶、垫料、衣服和各种实验用具采用高压蒸汽灭菌器消毒验用具采用高压蒸汽灭菌器消毒;动物食用饲料采用放射性照射动物食用饲料采用放射性照射(60Co)的消的消毒方法毒方法;工作人员用的拖鞋等采用渡槽浸泡的方法工作人员用的拖鞋等采用渡槽浸泡的方法(0.15%灭菌净溶液灭菌净溶液)消毒消毒;对于不耐热、不耐水、不耐酸碱和不能进对于不耐热、不耐水、不耐酸碱和不能进行放射性照射的物品采用传递窗紫外线消行放射性照射的物品采用传递窗紫外线消毒。毒。积极开展各项指标的检测工作积极开展各项指标的检测工作经常对空调通风系统进行保养经常对

10、空调通风系统进行保养,每每12 周更周更换排风口过滤膜换排风口过滤膜,每两个月更换一次初效和每两个月更换一次初效和中效过滤袋中效过滤袋,每年更换一次高效过滤膜每年更换一次高效过滤膜;每半年检测一次外购饲料的微生物指标和每半年检测一次外购饲料的微生物指标和营养成分营养成分,每半年检测一次纯净水的微生物每半年检测一次纯净水的微生物指标指标;每天对温湿度、压差等进行监测。每天对温湿度、压差等进行监测。认真做好屏障环境内外的清洁消毒工作认真做好屏障环境内外的清洁消毒工作保持屏障环境内的洁净度是保持屏障环境内的洁净度是SPF 级动物房级动物房正常运行的关键。正常运行的关键。每天的实验和饲养工作完成后每天

11、的实验和饲养工作完成后,对室内环境对室内环境进行清洁进行清洁,每周每周3 次用灭菌净消毒水对整个次用灭菌净消毒水对整个屏障系统的内环境和饲养笼架进行消毒。屏障系统的内环境和饲养笼架进行消毒。屏障系统动物实验室的管理者屏障系统动物实验室的管理者屏障系统动物实验室的使用者屏障系统动物实验室的使用者屏障系统动物实验室的管理者屏障系统动物实验室的管理者专职技术人员专职技术人员（包括实验管理人员包括实验管理人员,设施设备设施设备维护人员和试验操作人员）维护人员和试验操作人员）既要掌握对屏障系统动物实验室生物安全性防护既要掌握对屏障系统动物实验室生物安全性防护知识和维护、操作技术知识和维护、操作技术又要有

12、一种对屏障系统动物实验室的高度责任心又要有一种对屏障系统动物实验室的高度责任心,随时关注系统的安全和正常运行随时关注系统的安全和正常运行,及时发现和解决及时发现和解决问题。问题。屏障系统动物实验室的使用者屏障系统动物实验室的使用者进行项目研究的科研人员进行项目研究的科研人员：必须接受专职的管人员对其进行培训必须接受专职的管人员对其进行培训了解屏障系统的流程、路线了解屏障系统的流程、路线,人员、物品和动物进人员、物品和动物进出屏障系统动物实验室的方式方法出屏障系统动物实验室的方式方法,注意事项注意事项 有效的检测措施有效的检测措施环境设施的检测环境设施的检测日常消毒灭菌物品的检测日常消毒灭菌物品

13、的检测环境设施的检测环境设施的检测主要参数包括温度、湿度、噪音、光照、主要参数包括温度、湿度、噪音、光照、室内风速、氨浓度、室内换气次数、各区室内风速、氨浓度、室内换气次数、各区域压力差等。要根据检测的指标调整或适域压力差等。要根据检测的指标调整或适时更换维护系统的设备时更换维护系统的设备,对多项环境参数的对多项环境参数的正常维持都有着重要的作用。正常维持都有着重要的作用。温、湿度和压差需每日记录温、湿度和压差需每日记录,根据它们的变根据它们的变化化,需要对风阀或空气过滤器进行更换处理。需要对风阀或空气过滤器进行更换处理。环境指标的全面系统检测一般一个季度检环境指标的全面系统检测一般一个季度检

14、测一次。测一次。日常消毒灭菌物品的检测日常消毒灭菌物品的检测双扉高压真空灭菌器双扉高压真空灭菌器,用于所有可经高压灭用于所有可经高压灭菌的物品菌的物品;消毒液渡槽消毒液渡槽,用于可浸泡消毒的物品用于可浸泡消毒的物品;紫外线灭菌渡舱紫外线灭菌渡舱,用于不能高压用于不能高压,又不能浸泡又不能浸泡的物品。的物品。加强人员队伍建设和管理加强人员队伍建设和管理人员污染是洁净动物设施失败的重要原因。人员污染是洁净动物设施失败的重要原因。人与动物直接接触之间的防护仅仅是洗澡和穿上人与动物直接接触之间的防护仅仅是洗澡和穿上灭菌衣、戴上手套和口罩。裸露部分很容易对环灭菌衣、戴上手套和口罩。裸露部分很容易对环境造

15、成污染。境造成污染。工作人员容易出汗，偶尔也打喷嚏，但灭菌衣、工作人员容易出汗，偶尔也打喷嚏，但灭菌衣、口罩并不具备初、中、高效过滤功能，也容易对口罩并不具备初、中、高效过滤功能，也容易对环境造成污染。环境造成污染。二二.饲料营养管理饲料营养管理1 1、啮齿类实验动物的营养需要、啮齿类实验动物的营养需要2 2、实验动物饲料的质量标准、实验动物饲料的质量标准3 3、饲料的质量要求、饲料的质量要求4 4、饲料对实验结果的影响、饲料对实验结果的影响实验动物的食性与营养需要实验动物的食性与营养需要 实验动物的食性与营养需要：实验动物的食性与营养需要：*食性食性不同种动物摄取食物的习性。不同种动物摄取食

16、物的习性。*依食性将动物分为三大类：依食性将动物分为三大类：草食性动物：豚鼠、兔、羊；草食性动物：豚鼠、兔、羊；肉食性动物：狗、猫；肉食性动物：狗、猫；杂食性动物：小鼠、大鼠、金黄地鼠、猴杂食性动物：小鼠、大鼠、金黄地鼠、猴。实验动物的基本营养需要实验动物的基本营养需要实验动物对蛋实验动物对蛋白质、碳水化合物、脂类、矿物质、维生素和水白质、碳水化合物、脂类、矿物质、维生素和水等营养素的日平均需求量。等营养素的日平均需求量。1 1、啮齿类实验动物的营养需要、啮齿类实验动物的营养需要 大鼠、小鼠大鼠、小鼠大鼠、小鼠大鼠、小鼠 饲料蛋白质占饲料蛋白质占饲料蛋白质占饲料蛋白质占18%-20%18%-2

17、0%18%-20%18%-20%左右，粗左右，粗左右，粗左右，粗纤维纤维纤维纤维5%5%5%5%，粗脂肪，粗脂肪，粗脂肪，粗脂肪4%4%4%4%。维生素。维生素。维生素。维生素A A A A需求量为每公斤饲料含需求量为每公斤饲料含需求量为每公斤饲料含需求量为每公斤饲料含7000-14000IU7000-14000IU7000-14000IU7000-14000IU，通常以加入，通常以加入，通常以加入，通常以加入1%1%1%1%的清鱼肝油来满足。的清鱼肝油来满足。的清鱼肝油来满足。的清鱼肝油来满足。应适当补充维生素应适当补充维生素应适当补充维生素应适当补充维生素E E E E，每公斤饲料含，每公

18、斤饲料含，每公斤饲料含，每公斤饲料含60-120IU60-120IU60-120IU60-120IU，以提，以提，以提，以提高受孕率。高受孕率。高受孕率。高受孕率。金黄地鼠金黄地鼠金黄地鼠金黄地鼠 饲料蛋白质占饲料蛋白质占饲料蛋白质占饲料蛋白质占21%21%21%21%24%24%24%24%，动物性蛋白，动物性蛋白，动物性蛋白，动物性蛋白尚应含相当比例，主要来源于鱼粉尚应含相当比例，主要来源于鱼粉尚应含相当比例，主要来源于鱼粉尚应含相当比例，主要来源于鱼粉和鸡蛋。植物性蛋白主要来源于黄和鸡蛋。植物性蛋白主要来源于黄和鸡蛋。植物性蛋白主要来源于黄和鸡蛋。植物性蛋白主要来源于黄豆和豆粉。此外豆和

19、豆粉。此外豆和豆粉。此外豆和豆粉。此外,应喂饲一些白菜应喂饲一些白菜应喂饲一些白菜应喂饲一些白菜、萝卜、黄瓜等青饲料。、萝卜、黄瓜等青饲料。、萝卜、黄瓜等青饲料。、萝卜、黄瓜等青饲料。豚鼠豚鼠 饲料蛋白质占饲料蛋白质占17%-20%17%-20%左右，尤其左右，尤其对精氨酸的需要量较高。由于它的盲肠较发对精氨酸的需要量较高。由于它的盲肠较发达，因而对纤维素亦有较高需要，应占饲料达，因而对纤维素亦有较高需要，应占饲料总量的总量的10%-15%10%-15%左右。豚鼠体内不能合成维生左右。豚鼠体内不能合成维生素素C C，因此要在饲料中添加。一般每公斤饲料，因此要在饲料中添加。一般每公斤饲料含维生素

20、含维生素C 1500mgC 1500mg，妊娠豚鼠每公斤饲料含，妊娠豚鼠每公斤饲料含维生素维生素C 1800mgC 1800mg。实际喂养时，主要可喂饲。实际喂养时，主要可喂饲苜蓿草粉、干草粉和苜蓿草粉、干草粉和(或或)绿色蔬菜等。绿色蔬菜等。兔兔 新生家兔一般要哺乳一个月左右才新生家兔一般要哺乳一个月左右才能开始吃饲料。家兔饲料中蛋白质应占能开始吃饲料。家兔饲料中蛋白质应占14%-17%14%-17%，粗脂肪占，粗脂肪占3%3%，粗纤维占，粗纤维占10%-10%-15%15%以上。饲料中应含大量干草以上。饲料中应含大量干草,以补足以补足其对粗纤维的基本需要量，从而可防止其对粗纤维的基本需要量

21、，从而可防止家兔因粗纤维摄入不足而导致腹泻家兔因粗纤维摄入不足而导致腹泻。犬和猴的营养需要犬和猴的营养需要 犬犬 为肉食性动物，其饲料中为肉食性动物，其饲料中应含应含2020 24%24%蛋白质，蛋白质，4.5%-6.5%4.5%-6.5%粗脂粗脂肪，肪，3%3%粗纤维。注意添加维生素粗纤维。注意添加维生素A A、D D、B B1 1、B B2 2,特别是维生素特别是维生素E E。猴猴 为杂食性动物，其饲料中的蛋为杂食性动物，其饲料中的蛋白质应占白质应占16%21%，粗脂肪，粗脂肪4%5%。猴体内不能合成维生素猴体内不能合成维生素C，其需求量为，其需求量为每公斤饲料含每公斤饲料含1700-20

22、00mg，因而要注，因而要注意补充。意补充。在人工喂养时，在人工喂养时，应以应以面粉、鸡蛋、食盐、骨粉面粉、鸡蛋、食盐、骨粉制作的蛋糕或饼干作为制作的蛋糕或饼干作为主食，此外还应有苹果、主食，此外还应有苹果、香蕉、蔬菜等作为辅食。香蕉、蔬菜等作为辅食。2 2、实验动物饲料的质量标准实验动物饲料的质量标准 饲料的种类及营养特点饲料的种类及营养特点饲料的种类及营养特点饲料的种类及营养特点 *按来源按来源按来源按来源-植物性和动物性饲料。植物性和动物性饲料。植物性和动物性饲料。植物性和动物性饲料。*按物理性状按物理性状按物理性状按物理性状-粉状饲料、颗粒饲料、膨化饲料粉状饲料、颗粒饲料、膨化饲料粉状

23、饲料、颗粒饲料、膨化饲料粉状饲料、颗粒饲料、膨化饲料等。等。等。等。*按其营养特性按其营养特性按其营养特性按其营养特性-粗饲料、青绿和青贮饲料、能粗饲料、青绿和青贮饲料、能粗饲料、青绿和青贮饲料、能粗饲料、青绿和青贮饲料、能量饲料、蛋白质饲料、矿物质饲料、维生素饲料、添量饲料、蛋白质饲料、矿物质饲料、维生素饲料、添量饲料、蛋白质饲料、矿物质饲料、维生素饲料、添量饲料、蛋白质饲料、矿物质饲料、维生素饲料、添加剂。加剂。加剂。加剂。*粗饲料粗饲料粗饲料粗饲料-干苜蓿、干青草粉、稻草等。干苜蓿、干青草粉、稻草等。干苜蓿、干青草粉、稻草等。干苜蓿、干青草粉、稻草等。*青绿和青贮饲料青绿和青贮饲料青绿和

24、青贮饲料青绿和青贮饲料-天然牧草、树叶等。天然牧草、树叶等。天然牧草、树叶等。天然牧草、树叶等。*能量饲料能量饲料能量饲料能量饲料-玉米、高粱、大麦等。玉米、高粱、大麦等。玉米、高粱、大麦等。玉米、高粱、大麦等。苜蓿苜蓿 苜蓿以苜蓿以“牧草之王牧草之王”著称，著称，不仅产量高，而且草质优良，各不仅产量高，而且草质优良，各种畜禽均喜食。最适宜的条件是种畜禽均喜食。最适宜的条件是土质松软的沙质壤土土质松软的沙质壤土,在陕西、河在陕西、河北、山西、山东、天津、北京地北、山西、山东、天津、北京地区，以秋播最好。区，以秋播最好。鼠料鼠料兔料兔料犬膨化饲料犬膨化饲料*蛋白质饲料蛋白质饲料蛋白质饲料蛋白质饲

25、料-植物性蛋白饲植物性蛋白饲植物性蛋白饲植物性蛋白饲料如大豆、黑豆等料如大豆、黑豆等料如大豆、黑豆等料如大豆、黑豆等,动物性蛋白动物性蛋白动物性蛋白动物性蛋白饲料有肉粉、鱼粉、骨粉等。饲料有肉粉、鱼粉、骨粉等。饲料有肉粉、鱼粉、骨粉等。饲料有肉粉、鱼粉、骨粉等。*矿物质饲料矿物质饲料矿物质饲料矿物质饲料-食盐、石灰石食盐、石灰石食盐、石灰石食盐、石灰石、贝壳等。、贝壳等。、贝壳等。、贝壳等。*维生素饲料维生素饲料维生素饲料维生素饲料-酵母、鱼肝油、酵母、鱼肝油、酵母、鱼肝油、酵母、鱼肝油、各种人工合成或提纯的单一维生素各种人工合成或提纯的单一维生素各种人工合成或提纯的单一维生素各种人工合成或提

26、纯的单一维生素、复合维生素制剂等。、复合维生素制剂等。、复合维生素制剂等。、复合维生素制剂等。*添加剂添加剂添加剂添加剂-防腐剂、抗氧化剂防腐剂、抗氧化剂防腐剂、抗氧化剂防腐剂、抗氧化剂、着色剂、激素等非营养性添加剂。、着色剂、激素等非营养性添加剂。、着色剂、激素等非营养性添加剂。、着色剂、激素等非营养性添加剂。大豆大豆豆粕豆粕鱼粉鱼粉3、饲料的质量要求、饲料的质量要求 1.原料来源清楚，应不含化学药品，无原料来源清楚，应不含化学药品，无虫害、细菌及霉菌污染，不发生变质，农药残虫害、细菌及霉菌污染，不发生变质，农药残留不应超过国家规定的标准。留不应超过国家规定的标准。2.对于对于SPF动物，饲

27、料要求无菌：而无菌动物，饲料要求无菌：而无菌动物和悉生动物的饲料则要求完全无菌。动物和悉生动物的饲料则要求完全无菌。3.选择品质新鲜的原料进行加工。选择品质新鲜的原料进行加工。4.贮存原料的仓库要保持通风、低温、贮存原料的仓库要保持通风、低温、干燥，以防霉变产生黄曲霉素。干燥，以防霉变产生黄曲霉素。5.饲料经配制加工后，应严密包装，以饲料经配制加工后，应严密包装，以防蝇、鼠、昆虫、细菌等污染。防蝇、鼠、昆虫、细菌等污染。4 4、饲料营养素对动物实验结果的影响、饲料营养素对动物实验结果的影响影影响响动动物物采采食食量量而而影影响响实实验验结结果果 实实验验动动物物的的采采食食量量，以以其其能能达

28、达到到对对能能量量的的需需求求量量为为标标准准。饲饲料料的的原原料料组组成成影影响响饲饲料料中中能能量量的的含含量量，必必然然影影响响动动物物的的采采食食量量，而而动动物物采采食食量量多多少少又又对对某某些些实实验验结结果果产产生生影影响响。例例如如：某某些些实实验验的的药药物物是是掺掺在在饲饲料料中中给给予予的的，如如果果动动物物采采食食量量发发生生变变化化，动动物物摄摄人人药药物物的的量量也也就就会会发发生生变变化化，最最终终影影响响实实验验结果。结果。影响动物生长发育影响动物生长发育 在生物医学研究中，以在生物医学研究中，以动物生长发育动物生长发育(包括体重、体型和组织器官包括体重、体型

29、和组织器官的发育等的发育等)为指标的实验是常见的。如果日为指标的实验是常见的。如果日粮中营养素含量水平过高或过低，势必影粮中营养素含量水平过高或过低，势必影响以生长发育指标的实验结果。例如：响以生长发育指标的实验结果。例如：SD大鼠日粮蛋白水平低于大鼠日粮蛋白水平低于14时，极显著降时，极显著降低肝脏重量。低肝脏重量。影影响响动动物物生生理理生生化化指指标标而而影影响响实实验验 主主要要是是实实验验动动物物饲饲料料中中所所含含的的营营养养素素经经过过动动物物的的消消化化、吸吸收收后后对对动动物物的的生生理理状状态态产产生生影影响响。当当饲饲料料中中某某种种营营养养素素含含量量发发生生改改变变时

30、时，必必然然导导致致动动物物血血液液及及某某些些脏脏器器、组组织织中中改改种种营营养养素素含含量量的的改改变变，并并对对与与之之相相关关的的生生理理生生化化指指标标造造成成影影响响。当当这这种种改改变变加加深深或或持持续续时时间间较较长长时时，就就会会造造成成动动物物对该种营养索的缺乏或中毒。对该种营养索的缺乏或中毒。影影响响动动物物营营养养而而影影响响实实验验结结果果 与与营营养养相相关关研研究究中中动动物物日日粮粮的的控控制制问问题题日日益益受受到到重重视视，特特别别是是营营养养与与免免疫疫，营营养养与与美美容容，营营养养与与衰衰老老已已成成为研究热点。为研究热点。三三.育育 种种 繁繁

31、殖管理殖管理1、实验动物育种繁殖方法、实验动物育种繁殖方法2、近交系的育种保种繁殖方法、近交系的育种保种繁殖方法3、封闭群动物的育种繁殖方法、封闭群动物的育种繁殖方法1、实验动物繁殖主要有三种方法实验动物繁殖主要有三种方法 近亲繁殖近亲繁殖 异系杂交异系杂交 随机繁殖随机繁殖近交系动物的育种繁殖近交系动物的育种繁殖近近交交系系(inbred(inbred strain)strain)动动物物经经至至少少连连续续2020代代的的全全同同胞胞兄兄妹妹之之间间或或亲亲代代与与子子代代之之间间交交配配培培育育而而成成的的动动物物。如如BALB/cBALB/c小小鼠鼠、C57BL/6JC57BL/6J小

32、鼠等。小鼠等。近交系近交系(inbred strain)(inbred strain)动物动物育种原理育种原理是人为地使动物连续进行近亲交配，是人为地使动物连续进行近亲交配，逐代提高基因纯合率并固定目标状，逐代提高基因纯合率并固定目标状，从而获得具有目标性状的纯系群体。从而获得具有目标性状的纯系群体。保种方法保种方法单单线线法法 从从基基础础群群中中选选择择35对对全全同同胞胞兄兄妹妹进进行行交交配配，再再在在子子代代中中选选择择l对对生生育育能能力力最最好好的的同同胞胞兄兄妹妹进进行行交交配配，以以后后每每代代都都选选留留l对对。这这种种方方法法有有利利于于增增进进群群体体在在遗遗传传上上的

33、的均均一一性性，但但却却减减少少有有效效的的遗遗传传变变异异，且且难难以以在在同同时时期期繁繁殖殖出出众众多多子子代代，特特别别是是容容易易断种。断种。平平行行线线法法 从从基基础础群群中中选选择择35对对全全同同胞胞兄兄妹妹进进行行交交配配，再再在在每每对对兄兄妹妹的的子子代代中中分分别别选选留留1对对，以以后后每每对对兄兄妹妹每每一一后后代代都都选选留留l对对。这这种种方方法法保保持持的的群群体体在在遗遗传传上上的的均均一一性性比比单单线线系系统统差差，随随着着保保种种代代数数的的不不断断增增加加，群群体体中中个个体体间间的的性性状状差差异异逐渐明显，但有利于防止断种。逐渐明显，但有利于防

34、止断种。选优法选优法 从基础群从基础群(foundation colony)中选择中选择35对对全同胞兄妹进行交配，再在各兄妹的子代中比全同胞兄妹进行交配，再在各兄妹的子代中比较生育能力、模型性状，如果差异不大，则从较生育能力、模型性状，如果差异不大，则从每对兄妹的子代中选留每对兄妹的子代中选留1对作亲本；如果差异对作亲本；如果差异较大，从满意的兄妹子代中选留亲本，总数仍较大，从满意的兄妹子代中选留亲本，总数仍为为35对。一般在每过对。一般在每过47代时进行一次修饰。代时进行一次修饰。这种方法同时克服了前两种方法的缺点，既可这种方法同时克服了前两种方法的缺点，既可防止断种，又保证不发生亚系分化

35、，为保种的防止断种，又保证不发生亚系分化，为保种的最佳方法。最佳方法。繁殖生产方法繁殖生产方法 保种维持的近交系动物数量有限，要大量保种维持的近交系动物数量有限，要大量供应实验就必须扩大繁殖生产。繁殖生产供应实验就必须扩大繁殖生产。繁殖生产近交系动物的方法有多种，近交系动物的方法有多种，Lane-Petter（1961年）所发表的年）所发表的交通信号灯方交通信号灯方法法（traffic light system），就是把保种的），就是把保种的近交系动物称为基础群，在繁殖生产过程近交系动物称为基础群，在繁殖生产过程中设有血缘扩大群（中设有血缘扩大群（pedigreed expansion col

36、ony）、生产群）、生产群（production colony）。）。基础群设白色标记，血缘扩大群设绿色标基础群设白色标记，血缘扩大群设绿色标记，扩大群设黄色标记，生产群设红色标记，扩大群设黄色标记，生产群设红色标记。基础群仍按保种方法保种；血缘扩大记。基础群仍按保种方法保种；血缘扩大群来自基础群，采用近交繁殖群来自基础群，采用近交繁殖14代；扩大代；扩大群来自血缘扩大群或基础群，采用近交繁群来自血缘扩大群或基础群，采用近交繁殖殖12代；生产群来自扩大群或血缘扩大群代；生产群来自扩大群或血缘扩大群或基础群，可采用随机交配繁殖或基础群，可采用随机交配繁殖14代，繁代，繁殖生产出的动物供应实验。殖

37、生产出的动物供应实验。3、封闭群动物的育种繁殖、封闭群动物的育种繁殖封闭群(closed colony)动物又称远交群(outbred stock)动物，是指以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上的动物。如昆明种小鼠、SD大鼠等。育种方法育种方法封封闭闭群群(closed(closed colony)colony)动动物物培培育育目目的的在在于于保保持持群群体体 的的 遗遗 传传 变变 异异。其其 育育 种种 原原 理理 是是 根根 据据 Hardy-Weinberg定定律律，最最大大限限度度地地避避免免近近亲亲繁繁殖殖和和不不与与群外动物

38、杂交，使群体基因频率平衡稳定。群外动物杂交，使群体基因频率平衡稳定。四、常用实验动物的日常管理四、常用实验动物的日常管理1、实验小鼠的饲养管理要点、实验小鼠的饲养管理要点2、实验大鼠的饲养管理要点、实验大鼠的饲养管理要点3、实验豚鼠的饲养管理要点、实验豚鼠的饲养管理要点4、实验兔的饲养管理要点、实验兔的饲养管理要点5、实验犬的饲养管理要点、实验犬的饲养管理要点1 1、小鼠饲养管理要点、小鼠饲养管理要点 小鼠为杂食动物，因其喜啃咬，一般喂全价颗小鼠为杂食动物，因其喜啃咬，一般喂全价颗粒饲料，保证小鼠营养需要，但要注意有些小粒饲料，保证小鼠营养需要，但要注意有些小鼠的品系对营养的特殊要求。饲料中不

39、得加入鼠的品系对营养的特殊要求。饲料中不得加入抗菌素、防腐剂以及激素等，并要求保持相对抗菌素、防腐剂以及激素等，并要求保持相对稳定。小鼠胃容量小，随时采食，应采取少量稳定。小鼠胃容量小，随时采食，应采取少量勤添饲喂。饲料平时要放在专用容器中保存，勤添饲喂。饲料平时要放在专用容器中保存，并放于通风干燥处，一周内应用完。小鼠常用并放于通风干燥处，一周内应用完。小鼠常用饮水瓶给水，每天换水饮水瓶给水，每天换水2-3次，保证饮水不中次，保证饮水不中断。应经常清洗并消毒饮水瓶及吸水管。断。应经常清洗并消毒饮水瓶及吸水管。笼具和垫料笼具和垫料 笼具应选用国家标准笼具，一般用塑料饲养笼，笼具应选用国家标准笼

40、具，一般用塑料饲养笼，清洁级以上小鼠的笼具需消毒，清洁级以上小鼠的笼具需消毒，TPX塑料饲养盒塑料饲养盒可达到耐可达到耐120度高温的要求，一般聚丙乙烯塑料盒度高温的要求，一般聚丙乙烯塑料盒消毒时只能耐消毒时只能耐105度，过高温度可使盒体变形。垫度，过高温度可使盒体变形。垫料是直接接触动物的铺垫物，有吸湿、保暖、作料是直接接触动物的铺垫物，有吸湿、保暖、作窝的作用，故应有强吸湿性、无毒、无刺激性、窝的作用，故应有强吸湿性、无毒、无刺激性、无粉尘、不可食并舒适。一般选用以阔叶林木的无粉尘、不可食并舒适。一般选用以阔叶林木的刨花或锯末为宜，切忌用针叶林木（松、杉）刨刨花或锯末为宜，切忌用针叶林木

41、（松、杉）刨花做垫料。垫料常采用高压消毒花做垫料。垫料常采用高压消毒。工作常规工作常规 每周更换两次垫料，每日加食、换水。每周更换两次垫料，每日加食、换水。注意每天观察动物，及时作好工作记录和注意每天观察动物，及时作好工作记录和环境记录环境记录2 2、大鼠饲养管理要点、大鼠饲养管理要点 大鼠的饲养管理基本与小鼠相同。大鼠的饲养管理基本与小鼠相同。大鼠饲养室要注意避免噪音，强烈的噪音易引起大鼠饲养室要注意避免噪音，强烈的噪音易引起吃仔现象。吃仔现象。由于大鼠体形较大，排泄物多，产生的有害气体由于大鼠体形较大，排泄物多，产生的有害气体也多。因此必须控制大鼠的饲养密度，确保室内也多。因此必须控制大鼠

42、的饲养密度，确保室内通风良好，勤换垫料。通风良好，勤换垫料。大鼠饲养室的湿度不得低于大鼠饲养室的湿度不得低于40%，避免环尾症的，避免环尾症的发生。发生。4 4、豚鼠饲养管理要点、豚鼠饲养管理要点环境环境 豚鼠听觉好，胆小，易受惊吓，环境应保持安豚鼠听觉好，胆小，易受惊吓，环境应保持安静。静。笼具笼具 传统的饲养方式是水泥和木制的地池饲养，也传统的饲养方式是水泥和木制的地池饲养，也可盖成几层。现发展为抽屉式饲养箱子笼具。豚可盖成几层。现发展为抽屉式饲养箱子笼具。豚鼠需一定的活动场地。鼠需一定的活动场地。饲料饲料 豚鼠对纤维素要求量较大，在饲料配方豚鼠对纤维素要求量较大，在饲料配方中应充分注意。

43、另外必须在饲料中补加中应充分注意。另外必须在饲料中补加维生素维生素C。常规管理常规管理 每日喂料两次，喂新鲜青草或蔬菜一次。每日喂料两次，喂新鲜青草或蔬菜一次。注意定时定量。喂青菜时必须清洗干净。注意定时定量。喂青菜时必须清洗干净。注意室内温、湿度的保持。注意每天观注意室内温、湿度的保持。注意每天观察动物，并做好工作记录。察动物，并做好工作记录。4 4、兔饲养管理要点、兔饲养管理要点饲料饲料采用全价营养颗粒饲料，饲料配方应采用全价营养颗粒饲料，饲料配方应符合有关规定标准并保持相对稳定，投料符合有关规定标准并保持相对稳定，投料应定时定量，防止过食或不足。保证供应应定时定量，防止过食或不足。保证供

44、应足够的清洁饮水，饮水器具要定期消毒。足够的清洁饮水，饮水器具要定期消毒。消毒防疫消毒防疫严格执行卫生消毒防疫制度严格执行卫生消毒防疫制度,饲养饲养间或实验室必须通风干燥，笼器具要定期间或实验室必须通风干燥，笼器具要定期清洗消毒。防止噪音。清洗消毒。防止噪音。6 6、犬饲养管理要点、犬饲养管理要点饲养环境饲养环境犬饲养场所应在独立区内，室内饲养应有犬饲养场所应在独立区内，室内饲养应有隔音设备，犬场和犬舍均需有双重门设施，隔音设备，犬场和犬舍均需有双重门设施，上、下水设施要齐备。实验中的犬常笼养，上、下水设施要齐备。实验中的犬常笼养，繁殖犬常散养，犬喜运动，所以，犬舍应繁殖犬常散养，犬喜运动，所

45、以，犬舍应有犬的活动场地。有犬的活动场地。喂养与营养喂养与营养目前广泛采用犬全价营养膨化颗粒饲料，按犬目前广泛采用犬全价营养膨化颗粒饲料，按犬重的重的4%供应饲料，可保证犬的生长发育需要。供应饲料，可保证犬的生长发育需要。如需自行配制进行短期饲养，犬饲料中应保证如需自行配制进行短期饲养，犬饲料中应保证以下主要成分：粗蛋白以下主要成分：粗蛋白25%，粗脂肪，粗脂肪6%，无，无氮浸出物氮浸出物50%，粗纤维，粗纤维4%以下，灰粉以下，灰粉8%以下，以下，还应加适量的微量元素、维生素和矿物质。饲还应加适量的微量元素、维生素和矿物质。饲料要多样搭配，要选择适口性强，易消化的饲料要多样搭配，要选择适口性

46、强，易消化的饲料，适当补充动物性蛋白料。喂饲要做到定时、料，适当补充动物性蛋白料。喂饲要做到定时、定量、定温、定质、定地点。成犬一般每日定量、定温、定质、定地点。成犬一般每日2次，生产母犬、幼犬可每日次，生产母犬、幼犬可每日3次。次。清洁卫生清洁卫生每天清洗饲犬食具、犬笼和犬舍场地，夏季要每天清洗饲犬食具、犬笼和犬舍场地，夏季要常给犬洗澡，保持犬体卫生。工作人员在工作常给犬洗澡，保持犬体卫生。工作人员在工作时注意观察犬的精神状态，进食情况，口眼、时注意观察犬的精神状态，进食情况，口眼、鼻、皮肤及外阴部有无异常以及行为习性等。鼻、皮肤及外阴部有无异常以及行为习性等。按季节、气候不同，检虫、驱虫、

47、防病是犬健按季节、气候不同，检虫、驱虫、防病是犬健康的保障。康的保障。充分运动充分运动运动可使犬新陈代谢旺盛，增进食欲，抵抗力运动可使犬新陈代谢旺盛，增进食欲，抵抗力增强，日光中的紫外线通过光化学作用，可促增强，日光中的紫外线通过光化学作用，可促进维生素进维生素D的合成，促进钙磷的吸收。的合成，促进钙磷的吸收。实验动物疾病与控制实验动物疾病与控制 （一）导致人兽共患病的主要病原体（一）导致人兽共患病的主要病原体 1.1.病病毒毒：淋淋巴巴细细胞胞脉脉络络丛丛脑脑膜膜炎炎病病毒毒、狂狂犬犬病病病病毒毒、猕猕猴猴疱疱疹疹病病毒毒1 1型型（B B病病 毒毒）、流行性出血热病毒。、流行性出血热病毒。

48、2.2.细细菌菌：沙沙门门菌菌、布布鲁鲁杆杆菌菌、志志贺贺菌菌、结结核核分枝杆菌、钩端螺旋体。分枝杆菌、钩端螺旋体。3.3.真菌：真菌：皮肤病原真菌。皮肤病原真菌。4.4.寄生虫：寄生虫：弓形虫。弓形虫。（二）实验动物主要烈性传染病病原体（二）实验动物主要烈性传染病病原体 鼠痘病毒（小鼠脱脚病病毒）、兔出血鼠痘病毒（小鼠脱脚病病毒）、兔出血症（兔瘟）病毒、犬细小病毒（急性出血性肠症（兔瘟）病毒、犬细小病毒（急性出血性肠炎）、犬瘟热病毒、传染性犬肝炎病毒。炎）、犬瘟热病毒、传染性犬肝炎病毒。（三）引起实验动物一般性疾病的病原体（三）引起实验动物一般性疾病的病原体1.1.病毒病毒小鼠肝炎病毒、仙台

49、病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒、猴反转录猴反转录D D型病毒。型病毒。2.2.细菌细菌多杀巴斯德杆菌、泰泽病原体、多杀巴斯德杆菌、泰泽病原体、鼠棒状杆菌、支原体。鼠棒状杆菌、支原体。3.3.寄生虫寄生虫多种体内寄生虫。多种体内寄生虫。二、病毒性疾病二、病毒性疾病（一）（一）淋巴细胞脉络丛脑膜炎淋巴细胞脉络丛脑膜炎（LCMLCM）是是一种人兽共患病，在实验动物多呈隐一种人兽共患病，在实验动物多呈隐性感染，小鼠感染后可不出现症状，但可通过性感染，小鼠感染后可不出现症状，但可通过胎盘传给子代。感染该病毒的小鼠，是研究病胎盘传给子代。感染该病毒的小鼠，是研究病毒特异性免疫耐受性疾病的理想动物模型。毒特异

50、性免疫耐受性疾病的理想动物模型。1.1.病原学病原学 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMVLCMV）。属）。属砂粒病毒，呈圆形或椭圆形，单链砂粒病毒，呈圆形或椭圆形，单链RNARNA，有囊，有囊膜。可在鸡胚绒毛尿囊上增殖，但不产生可见膜。可在鸡胚绒毛尿囊上增殖，但不产生可见痘斑，只有适应生长后才产生细胞病变。痘斑，只有适应生长后才产生细胞病变。LCMLCM病毒对乙醚敏感，不耐热，病毒对乙醚敏感，不耐热，561h561h，紫外线或，紫外线或0.1%0.1%甲醛都可灭活。甲醛都可灭活。2.2.流行病学流行病学（1）传染源传染源：感染：感染LCM病毒的野小鼠、无症病毒的野小鼠