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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 抗菌肽及其在饲料中的应用抗菌肽概述1972 年,瑞典科学家 Boman 等第一在果蝇中发觉抗菌肽及其免疫功能,随后从惜古比天蚕蛹诱导分别到并命名为 cecropin;此后人们相继从细菌、真菌、两栖类、高等植物、哺乳动物乃至人类中发觉并分别获得具有类似性质的活性蛋白;抗 菌 肽 又 称 抗 微 生 物 肽 ( antimicrobial peptide ) 或 肽 抗 生 素 ( peptide antibiotics),在动植物体内分布广泛,是自然免疫防备系统的一部分;抗菌肽不仅具有广谱抗细菌才能,而且对真菌、病毒、及癌细胞也有作用;其对畜禽具
2、促生长、保健和治疗疾病的功能,属无毒副作用、无残留、无致细菌耐药性的一类环保型制剂;具有宽阔的应用前景;抗菌肽的分类抗菌肽按结构、功能大致分为四类:cecropin(天蚕素)类;富含 pro 残基 脯氨酸)的 magainin(蛙皮素);富含 gly 残基(甘氨酸)的 melittin 蜂毒素);富含cys 残基(半胱氨酸)的 defensin(防备素);抗菌肽按来源一般分为六类:哺乳动物抗菌肽、两栖动物抗菌肽、昆虫抗菌肽、植物抗菌肽、细菌抗菌肽、病毒抗菌肽抗菌肽的结构和特性通常由数十个氨基酸残基组成的碱性小分子多肽,水溶性好,分子量大约为4KD ;含有 4 个或多于 4 个带正电荷的氨基酸,
3、 N 端亲水 C 端硫水具有双亲的性质;具有热稳固性,在100加热 10-15 分钟仍能保持其活性;等电点大于7,表现出较强的阳离子特性;对较大的离子强度和较高或较低的pH 值均具有较强的抗性;具备抗击胰蛋白酶和胃蛋白酶水解的才能;抗菌肽的作用机理抗菌肽是以一端插入细菌细胞膜,通过 裂,原生质 .泄漏.而死亡;.打孔.形成一个通道,使细菌细胞膜破名师归纳总结 (对于G 阴性菌,抗菌肽易与其外膜上的带负电荷脂多糖相互作用,从而破坏第 1 页,共 13 页外膜结构以穿越内膜,而G 阳性菌不具有脂多糖,但其表面由于肽聚糖中的胞壁- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - -
4、- 酸、糖醛酸、磷壁酸和氨基酸羧基的存在而带负电电荷,抗菌肽也能破坏肽聚糖 层而穿透质膜)抗菌肽的作用机理 抗菌肽的杀菌机制模拟图抗菌肽的杀菌机制模拟图抗 菌肽细菌细胞膜 蛋白凝结内嵌蛋白+ Mg Na+ K+ 细 胞 膜 穿 孔形 成 离 子 通 道细菌细胞崩溃细胞内容物由名师归纳总结 孔道外溢第 2 页,共 13 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 抗菌肽的作用机理特点1.作用部位的有效性 传统抗生素作用是通过排除微生物生长或生存必需的功能实现的,如阻扰细菌蛋 白质的合成或者转变酶的活性来达到杀菌目的,而细菌通过转变一种基因就足以 应付抗生素的这种
5、攻击;抗菌肽作用于细菌细胞膜,导致膜的通透性增大,以此穿透、杀灭细菌,即“ 膜 机制 ”;细菌必需转变膜的结构,即转变相当部分的基因才能防备抗菌肽的攻击,而这几乎是不行能的;因此,抗菌肽极少地削减了产生耐药性的可能;2.作用对象的挑选性 抗菌肽只对原核生物细胞和真核生物病变细胞有抗菌作用,对正常的生物细胞不 起作用;缘由在于原核生物和正常真核生物的细胞膜结构不同,正常真核细胞膜 中含有大量的胆固醇,而胆固醇的存在使膜结构趋于稳固;此外高等动物存在高 度发达的细胞骨架系统,其存在也抗击了抗菌肽的作用;癌细胞的细胞骨架系统 与正常细胞相比不发达,这是抗菌肽对其产生抑制作用的缘由之一;抗菌肽作用对象
6、的挑选性广谱抗微生物:当前畜禽疾病多为混合感染 ,传统的抗生素抗菌谱一般都较窄 ,且 只对细菌有效 .而大多数抗菌肽对 G 阴阳性菌均有效 ,有些仍对真菌、病毒、寄生 虫、原生动物有抑制和杀灭作用作用快速、安全、无残留:由于分子较小,在机体受到侵害时,几分钟内就能产 生,且扩展扩散速度比体内免疫细胞更快更敏捷;抗菌肽特殊的抗菌机理更形成 了不耐药的特性,这就超越了抗生素的局限,是新一代的高效抗菌剂;动物食品 安全有赖于生产过程的各个环节,使用无污染、在动物体内无残留、无毒副作用 的添加剂是解决问题的一个关键;刺激免疫反应:抗菌肽可参加宿主自然免疫的其它反应,比如刺激单核细胞和嗜 中性白细胞的趋
7、化作用、促进肥大细胞组织胺的释放、抑制组织蛋白酶以及促进 创伤愈合;与其它抗菌物质的联合作用:抗菌肽与传统抗生素联用,可提高药效并拓宽传统 抗生素的抗菌谱;至今未发觉有关抗菌肽与其它药物相拮抗的报道,这就显示出 抗菌肽比微生态制剂等绿色添加剂更有优势;对环境有较强的抗性,适合做添加剂:抗菌肽在100加热 10-15 分钟仍能保持名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 其活性,对 PH 值有较强的适应性、水溶性好;具备抗击胰蛋白酶或胃蛋白酶水解的才能,进入动物消化道,能很好发挥抗菌功效;这补偿了其它添加剂如酶制剂、微生态制
8、剂等易受影响的缺陷,更便于在生产中应用;抗菌肽与抗生素杀菌机理对比抗菌肽在两亲性的 螺旋结构作用下使原核细胞质膜上形成离子通道,这种通道的直径经推算大约在 4nm,离子通道的形成转变了细胞内外渗透压,使细胞内物质大量外渗,起到杀菌作用;抗 菌 肽 在两亲性的 螺旋结构作 用下使原核细胞质膜上形 成离子通道,这种通道的 直径经推算大约在 4nm,离子通道的形成转变了细胞内外渗透压,使细胞内 物质大量外渗,起到杀菌赐尔健的主要成分 作用;高浓度的抗菌肽抗菌肽杀菌活力:抗 生 素1、影响细菌细胞壁的结构或抑制 其合成,如青霉素2、转变细胞膜的通透性如多粘菌 素3、影响细菌的细胞蛋白质合成,如氯霉素、
9、四环素类、链霉素、庆大霉素、卡那霉素等4、转变细菌的核酸代谢,如灰黄 素 8000u/g 丰富的生物活性酶采纳和产酶菌协同发酵的技术,产品含有高质量的木聚糖酶、果胶酶、 -葡聚糖酶、甘露聚糖酶、淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶等赐尔健中发酵过程中产生多糖、小肽及多种未知的生长因子赐尔健中酶的种类与活性(u/g)木 聚 糖 - 葡 聚 果胶酶 纤 维 素 甘露聚糖 淀粉酶 酸性蛋白酶 糖酶 酶 酶 酶250000 70000 12000 7000 8000 15 万 8000 赐尔健的功能1、抑制和杀灭有害菌,预防动物疾病的发生2、大幅度提高幼龄动物对蛋白质和淀粉的消化率3、降解饲料中的抗养分因子(非淀
10、粉多糖NSP),提高谷物类原料的养分价值4、赐尔健在发酵过程中产生多糖、小肽以及多种未知生长因子,能有效促进动 物生长,发挥更好的生产性能;赐尔健(抗菌肽)名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 1.在畜禽、水产上的应用试验赐尔健治疗鸡大肠杆菌感染的成效工程死亡率治愈率感染对比 70 30 恩诺沙星( 5mg/kg) 16 84 赐尔健(500g/吨 18 82 赐尔健 800g/吨 12 88 赐尔健 1.5kg/吨) 3 97 2.抗菌肽药敏试验致病菌试验次数1ppm 抑菌圈直径( mm)10ppm 2.5ppm 5
11、ppm 鸡沙门氏菌3 9 11 19 26 (1920)鸡沙门氏菌3 10 13 18 24 (7913)猪大肠杆菌4 7 11 12 18 猪巴氏杆菌2 12 13 15 19 (PM)禽巴氏杆菌3 14 16 17 18 (833)兔巴氏杆菌1 13 14 19 23 (898 1)注:抑菌圈直径大于 20mm 为极敏, 1520mm 为高敏, 1015mm 为中敏,小于 10mm 为低敏3.赐尔健治疗猪沙门氏菌感染的成效工程 死亡率 腹泻率 治愈率 感染对比 23 100 77 恩诺沙星 10mg/kg 10 16.6 90 赐尔健 1kg/吨) 10 16.6 90 赐尔健 1.5kg
12、/吨 6.6 13.3 93.4 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 4.赐尔健对鸡白痢预防试验组别试鸡只数发病数出栏数存活率500g/吨9704 未发觉9558 98.5%赐尔健组1508 1272 15.3% 51 83.2% 对比组使用 500g/吨赐尔健可有效预防鸡白痢,存活率提高 5.鸡白痢人工发病对比试验15.3,差异极显著组别试鸡数日龄鸡白痢菌口实成死成活率服量验活亡0.1% 60 520 91.7% 1 100倍 天数数1ml 15 55 5 赐尔健组200ppm 60 520 1ml 15 38 2
13、2 63.3% 痢特灵组接种不给药组60 520 1ml 15 10 50 16.7% 不接种不给药组60 520 0 15 60 2 96.7% 6.赐尔健与其它抗菌剂对肉仔鸡应用成效比较组别鸡数试验天数成活率平均日增重平均料肉比500g/吨2086 4249 (克)1.91 98.6 47.8 赐尔健组1032 93.2 43.6 2.11 49 100ppm 土霉素组1149 49 97.3 42.1 2.13 50ppm洛克沙胂60ppm 杆菌肽锌1236 42 96.8 45.6 1.96 5ppm 986 42 96.6 45.9 2.04 黄霉素赐尔健对肉鸡生长与存活率的影响 安
14、徽和威农业开发股份有限公司试验场名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 13 页精选学习资料 - - - - - - - - - 表 2-1-1 试验各组肉鸡成活率成活率黄霉素 5 mg/kg、硫酸抗敌素 15mg/kg、赐尔健赐尔健喹乙醇 30mg/kg;杆菌肽锌 75 mg/kg;400mg/kg 500mg/kg 21d 95.45%a 97.56%ab 99.06%b 98.64%b 42d 93.26%a 95.28%ab 97.43%b 97.63%b 表 2-1-2 试验各组平均日增重、料肉比 温氏集团养分部科研基肉鸡试验场 试验动物:矮 B 公鸡黄霉素 5 硫酸
15、抗敌素赐尔健赐尔健测试工程mg/kg、15mg/kg、400mg/kg 500mg/kg 喹乙醇杆菌肽锌614.00 11.8 626.00 15.36 30mg/kg;75mg/kg;21 日龄体重 g 586.00 12.31 605.00 02.31 42 日龄体重 g 1790 0.08 1900.00 0.06 1980.000.07 2000.00 0.25 121日龄26.00 12.36 26.90 10.25 27.33 13.53 27.90 15.36 平均日增重 g 61.67 2.69a 65.05 3.15b 65.43 2.69b 2242日龄57.33 4.36
16、a 平均日增重 g 142日龄41.67 5.23a 44.29 4.15a 46.19 6.32b 46.67 4.25b 平均日增重 g 1.45 0.36 1.42 0.25 1.39 0.56 1.38 0.25 121日龄料肉比2.00 0.89 1.95 0.59 1.90 0.25 1.89 0.69 142日龄料肉比名师归纳总结 组 别试验处理重复数重复鸡阶 段划 分第 7 页,共 13 页小鸡中鸡数(天)(只)第 1 组喹烯酮 50g/t 3 70 小鸡: 1-25 第 2 组4%安来霉素( 150g/t)3 70 中鸡: 26-第 3 组4%安来霉素 150克/吨+10%抗
17、敌素 200 克/吨3 0 745 - - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 第 4 组15%杆菌肽锌 300 克/吨+10%抗敌素 200克/吨3 70 第 5 组10%北里霉素 100 克/吨+10%抗敌素 200克/吨3 70 成活率第 6 组0.05%那西肽 400g/t 3 70 第 7 组赐尔健(小 400g/t、中鸡 300g/t)3 70 组别试初试总耗试初试末总增平均日料肉比日采食量末数料均重均重重增重数% (只(只kg (kg/kg/kg (g/只,(g/只,喹烯酮)只)只)日)日)98.46 195 179 129.75 0.0377 0
18、.4190 70.36 15.25 1.844 28.12 安来霉素195 179 131.75 0.0377 0.4235 71.08 15.43 1.853 28.60 97.95 安、抗195 183 134.05 0.0377 0.4235 71.87 15.43 1.865 28.78 98.97 杆、抗195 175 128.55 0.0377 0.4166 68.59 15.15 1.874 28.40 97.95 北、抗195 190 138.55 0.0377 0.4221 73.93 15.37 1.874 28.81 100.00 那西肽195 183 133.55 0.
19、0377 0.4208 71.44 15.32 1.869 28.64 98.97 赐尔健195 185 134.3 0.0377 0.4222 72.27 15.38 1.858 28.58 98.97 组别试初试末总耗试初试末总 增平均日料肉比 日 采 食 量成活数数料均重均重重增重率名师归纳总结 喹烯酮(只)(只)kg Kg/只Kg/只kg (g/2.528 (g/只% 第 8 页,共 13 页日)日)179 177 228.35 0.419 0.927 90.32 25.41 64.23 99.44 安来霉素179 178 247 0.423 0.970 97.3 27.34 2.53
20、9 69.40 99.44 安+抗183 183 256.9 0.423 0.979 101.6 27.76 2.529 70.19 100 杆+抗175 174 238.6 0.416 0.948 92.95 26.56 2.567 68.17 99.43 190 188 258.7 0.422 0.963 102.10 27.06 2.534 68.57 98.95 北+抗185 182 262.7 0.422 0.990 104.31 28.37 2.518 71.44 99.46 赐尔健- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 赐尔健在蛋鸡生产上的应用
21、 浙江建德蛋鸡场赐尔健对蛋鸡生产性能的影响采食量( g)对比组对比组赐尔健 400g/t 赐尔健 500g/t 118.14 7.4 118.23 5.8 119.89 8.4 120.78 7.6 产蛋率( %)75.08 4.10 75.02 5.64 80.36 5.90 80.49 5.37 平均蛋重( g)62.69 1.44 62.96 1.51 63.92 1.52 64.40 1.07 料蛋比2.50:1 2.481 2.251 2.231 破蛋率( %)4.95 0.29 4.87 0.33 2.46 0.28 2.31 0.22 反常蛋分率4.47 0.37 4.88 0.
22、29 2.60 0.36 2.57 0.49 赐尔健对蛋品质的影响蛋型指数( %)对比组对比组赐尔健 400g/t 赐尔健 500g/t 0.75 0.02 0.78 0.02 0.77 0.02 0.70 0.03 蛋比重( g/cm3)1.14 0.01 1.13 0.01 1.14 0.04 1.13 0.01 蛋壳相对重( %)11.06 0.65 11.01 1.13 12.37 1.03 12.26 0.58 蛋壳厚度( mm)0.36 0.03 0.36 0.04b 0.43 0.04 0.46 0.12 哈夫单位( U)83.68 4.32 83.95 6.77 85.52 6
23、.64 86.20 6.86 蛋黄指数( %)44.20 2.16 45.27 0.27 45.64 2.45 45.82 2.62 蛋黄相对重( %)10.19 0.76 10.81 0.82 11.72 0.54 11.71 0.62 赐尔健在生长猪上的应用 浙江省农科院海宁试验猪场 日增重与料比名师归纳总结 75mg/kg 金霉素初始重 kg 终止重 kg 平均日增重 g 料比第 9 页,共 13 页3.23 40.75 68.15 685.1 300g/t 速美肥39.19 67.71 713.0 3.09 500g/t 赐尔健39.67 70.28 765.3 2.94 - - -
24、- - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 抗菌肽在南美白对虾养殖中的应用中国水产科学讨论院珠江水产讨论所深圳海水试验基地安康素对南美白对虾生长的影响试验结果对比组平均初始体长平均初始体重平均终末体长平均终末体重(cm)(g)(cm)(g)2.87 0.530.168 0.1243.53 0.590.250 0.150试验组2.89 0.530.158 0.1383.73 0.690.308 0.182日生长速度相对增重率饵料系数成活率( %)()对比组0.003 0.000761.56 0.061.93 0.2186.55 7.99试验组0.0047 0.00119 1.
25、85 0.16 1.68 0.42 95.00 1.70 *攻毒试验结果名师归纳总结 试验天数对比组死亡数试验组死亡数第 10 页,共 13 页10020030040054261047188- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 抗菌肽在草鱼饲料中的应用成效试验 苏州高校水产系 生长速度分析各组生长速度组号初始重尾数终止重增重率 % 瞬时生长率 %.d-1 空白对比组232.5 45 627.3 170.18 1.24 5mg/kg 黄霉素组220.4 45 604.4 174.3 1.26 20mg/kg 维吉尼222.3 45 625.7 181.39
26、1.29 亚霉素组400 克/吨赐尔健225.2 45 633.6 181.50 1.29 500 克/吨赐尔健232.3 45 660.3 183.96 1.30 饲料利用效率 表 4 各组的饲料系数组号 空白对比组 黄霉素组 维吉尼亚霉素组饲料系数平均值 1.31 1.28 1.21 400克/吨赐尔健 1.25 500克/吨赐尔健 1.21 养殖成活率 表 5 各养殖试验组成活率名师归纳总结 组号死鱼条数成活率 % 第 11 页,共 13 页空白对比组9 80.00 黄霉素组8 82.22 维吉尼亚霉素组8 82.22 400 克/吨赐尔健5 88.89 5 88.89 500 克/吨赐
27、尔健- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 转氨酶活力表 6:各试验组草鱼血清和肝胰脏转氨酶活力(u/ml,u/g)GOT GPT(谷丙转氨酶)肝胰脏平组号 血清平均值 血清平均值 肝胰脏平均值均值空白对比组 74.29 186.35 363.11 741.02 黄霉素组 68.90 192.92 349.98 747.07 维吉尼亚霉素组 59.49 180.96 359.15 717.48 400 克/吨赐尔健组 60.37 188.11 357.69 728.94 500 克/吨赐尔健组 58.02 169.00 351.02 723.52 非特异免疫
28、力表 7:各试验组草鱼血清、肝胰脏和皮肤粘液(u/ml,u/g)SOD 酶(超歧化氧化酶)活力组号血清肝胰脏皮肤黏液895.52 173.97 67.98 空白对比组黄霉素组879.47 195.19 59.46 维吉尼亚霉素组936.60 199.82 76.61 400 克/吨赐尔健组928.76 202.55 71.88 950.79 218.31 88.72 400 克/吨赐尔健组表 8:各试验组草鱼血清和皮肤粘液溶菌酶活力名师归纳总结 组号血清粘液第 12 页,共 13 页空白对比组0.07 0.11 0.06 0.12 黄霉素组维吉尼亚组0.09 0.15 0.08 0.15 40
29、0g/t 组0.09 0.16 500g/t 组- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 血红蛋白 表 9:各试验组草鱼血红蛋白含量组号血红蛋白 ug/l 20mg/kg 维吉尼亚霉素能够空白对比组68.02 黄霉素组68.64 维吉尼亚霉素组72.01 400克/吨赐尔健组71.46 500克/吨赐尔健组76.85 结论400、500 克/吨赐尔健和依据本试验结果综合分析,有效提高草鱼的生长速度和对饲料的转化利用效率;可以有效保证草鱼的成活率;通过对血清转氨酶活力、SOD 酶活力和皮肤粘液中的SOD 酶活力、溶菌酶活力分析结果看,抗菌肽和维吉尼亚霉素均能够提高草鱼的免疫、防备才能,尤 其以 500 克/吨赐尔健抗菌肽成效较为明显;在草鱼饲料中可以使用抗菌肽以提高 草鱼的生长速度和免疫防备才能,对保证草鱼的成活率有重要作用和意义;适用对象 各种家禽、家畜、水产饲料 用法与用量 猪 500-1000克/吨 家禽 300-500 克/吨 一般鱼 300-500克/吨虾、蟹 800-1000克/吨名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页,共 13 页
限制150内