实验四、肝糖原的提取与鉴定.ppt

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1、实验四、肝糖原的提取与鉴定 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望一、实验目的v学习和掌握提取肝糖原的方法；学习和掌握提取肝糖原的方法；v学习和掌握肝糖的一些特殊化学性质和学习和掌握肝糖的一些特殊化学性质和鉴定方法。鉴定方法。二、实验原理二、实验原理vv糖原糖原 是一高分子化合物。微溶于水，无还原性。是一高分子化合物。微溶于水，无还原性。vv肝糖原是糖在体内的重要储存形式之一，是体肝糖原是糖在体内的重要储存形式之一，是体内糖的重要来源之一，内糖的重要来源之

2、一，vv本实验通过对动物肝脏研磨，在三氯醋酸作用本实验通过对动物肝脏研磨，在三氯醋酸作用下一使其中的蛋白质被沉淀，二使糖原磷酸化下一使其中的蛋白质被沉淀，二使糖原磷酸化酶失活，从而过滤得到糖原。酶失活，从而过滤得到糖原。三、实验步骤一、提取：一、提取：称肝脏约称肝脏约称肝脏约称肝脏约1 1g+10%g+10%三氯醋酸三氯醋酸三氯醋酸三氯醋酸1 1ml ml 研磨研磨研磨研磨 +5%+5%三氯三氯三氯三氯 醋酸醋酸醋酸醋酸2 2ml ml 研磨至肉糜状研磨至肉糜状研磨至肉糜状研磨至肉糜状 过滤（滤液收集在带刻度的过滤（滤液收集在带刻度的过滤（滤液收集在带刻度的过滤（滤液收集在带刻度的离心管中）离

3、心管中）离心管中）离心管中）加入等体积加入等体积加入等体积加入等体积95%95%乙醇乙醇乙醇乙醇 混匀、静置混匀、静置混匀、静置混匀、静置1010minmin 离心离心离心离心 弃去上清夜、留沉淀弃去上清夜、留沉淀弃去上清夜、留沉淀弃去上清夜、留沉淀 加蒸馏水加蒸馏水加蒸馏水加蒸馏水1 1mlml 搅拌溶解而得搅拌溶解而得搅拌溶解而得搅拌溶解而得 糖原溶液待用。糖原溶液待用。糖原溶液待用。糖原溶液待用。二、鉴定：二、鉴定：加入肝糖原溶液加入肝糖原溶液10滴滴 1.取试管取试管2支支 各加各加1滴滴I2液、混匀液、混匀 观察现象观察现象 加蒸馏水加蒸馏水10滴滴2.剩余肝糖原液内剩余肝糖原液内+浓浓HCL3滴滴 沸水浴沸水浴10min 冷却冷却 加入加入10%NaOH3-4滴至中滴至中 性偏碱性性偏碱性 斑氏试剂斑氏试剂2ml 沸水浴沸水浴5min 冷却冷却 观察现象。观察现象。三.实验结果四.分析讨论