实验诊断骨髓细胞学和化学染色理论.ppt

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1、实验诊断骨髓细胞学和化学染色理论 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望血血 细细 胞胞 的的 生生 成成 与与 发发 育育全能干细胞全能干细胞 多能干细胞阶段多能干细胞阶段 祖细胞阶段祖细胞阶段 阶段阶段 1.BFU-E 髓系髓系 2.CFU-GM全能干细胞全能干细胞 3.CFU-EO 4.CFU-Meg CFU-TL 淋巴系淋巴系 CFU-BL血血细细胞胞分分化化过过程程 血血 细细 胞胞 形形 态态 发发 育育 规规 律律 图图 造血干细胞造血干细胞

2、 髓性干细胞髓性干细胞 淋巴干细胞淋巴干细胞 原粒原粒 原单原单 原红原红 原巨核原巨核 原浆原浆 原淋巴原淋巴(B/T)(B/T)早幼早幼 早幼早幼 幼巨核幼巨核 中性中性 嗜酸嗜酸 嗜碱嗜碱 中幼中幼 中幼中幼 中幼中幼 中幼中幼 颗粒巨颗粒巨 幼浆幼浆 中性中性 嗜酸嗜酸 嗜碱嗜碱 幼单幼单 幼淋巴幼淋巴(B/T)(B/T)晚幼晚幼 晚幼晚幼 晚幼晚幼 晚幼晚幼 产板巨产板巨 成浆成浆 中性中性 嗜酸嗜酸 嗜碱嗜碱 杆核杆核 杆核杆核 杆核杆核 网织网织 中性中性 嗜酸嗜酸 嗜碱嗜碱 分叶分叶 分叶分叶 分叶分叶 单核单核 成红成红 血小板血小板 淋巴淋巴(大大/小小)骨骨髓髓内内血血液

3、液内内 血细胞发育过程中的形态演变规律血细胞发育过程中的形态演变规律 血细胞的发育成熟实际上是一个连续的过血细胞的发育成熟实际上是一个连续的过程。我们根据血细胞在各阶段所表现出的形态程。我们根据血细胞在各阶段所表现出的形态特点，人为地将各系细胞划分成几个阶段。为特点，人为地将各系细胞划分成几个阶段。为使在辨认的时候有一个相对统一的标准。但在使在辨认的时候有一个相对统一的标准。但在细胞分类中必然会碰到中间阶段的细胞，一般细胞分类中必然会碰到中间阶段的细胞，一般可划入下一阶段。可划入下一阶段。血细胞发育形态演变规律要点血细胞发育形态演变规律要点 原始原始 成熟成熟胞体胞体：大大 小小胞质胞质:量量

4、 少少 多多 色色 深蓝深蓝 浅蓝或灰（红）浅蓝或灰（红）颗粒颗粒 无无 有（特异或非特异）有（特异或非特异）胞核胞核:量量 大大 小小 形态形态 圆圆 不规则（或消失）不规则（或消失）染色质染色质 疏松细致疏松细致 紧密粗糙紧密粗糙 色色 淡紫色淡紫色 深紫色深紫色核仁核仁:可见可见 消失消失 血细胞的分化、发育、成熟具有一定的血细胞的分化、发育、成熟具有一定的规律性，我们在辨认细胞时需要掌握下列几规律性，我们在辨认细胞时需要掌握下列几个方面：个方面：细胞大小细胞大小 核质比例核质比例 胞质胞质 量、颜色、内含物、量、颜色、内含物、胞核胞核 大小、形状、结构、颜色、核膜、大小、形状、结构、颜

5、色、核膜、核仁。核仁。胞体胞体：血细胞随着分化发育其体积逐渐变小：血细胞随着分化发育其体积逐渐变小 （巨核细胞系除外）（巨核细胞系除外）早期红细胞早期红细胞成熟红细胞成熟红细胞胞质胞质(浆浆):):血细胞随着分化发育其胞质血细胞随着分化发育其胞质 量量 由少到多由少到多 色色 由深蓝到浅蓝或灰（红）由深蓝到浅蓝或灰（红）颗粒颗粒 由无到有（特异或非特异），但红细胞系由无到有（特异或非特异），但红细胞系 除外除外,小淋巴细胞可没有颗粒。小淋巴细胞可没有颗粒。原始细胞原始细胞幼稚细胞幼稚细胞成熟细胞成熟细胞胞核胞核:血细胞随着分化发育其胞核血细胞随着分化发育其胞核 体积体积由大到小由大到小 形态形

6、态由圆到不规则（或消失），淋巴细胞的由圆到不规则（或消失），淋巴细胞的 核型改变不明显核型改变不明显 染色质染色质由疏松细致到紧密粗糙由疏松细致到紧密粗糙 颜色颜色由染淡紫色到深紫色由染淡紫色到深紫色成熟细胞成熟细胞幼稚细胞幼稚细胞原始细胞原始细胞 核仁核仁:血细胞随着分化发育其胞核内的核仁血细胞随着分化发育其胞核内的核仁 从有到无。从有到无。原始细胞原始细胞早期幼稚细胞早期幼稚细胞中晚期幼稚细胞中晚期幼稚细胞核仁核仁核仁核仁血细胞形态分析要点血细胞形态分析要点 涂片质量：涂片质量：a a厚薄厚薄 b b染色染色 c c部位选取部位选取 细胞发育连贯性：细胞发育连贯性：注意细胞发育过程中各阶段

7、的主要特征注意细胞发育过程中各阶段的主要特征 结合细胞功能：结合细胞功能：细胞发育与细胞功能具密切关系细胞发育与细胞功能具密切关系 正正 常常 血血 细细 胞胞 形形 态态 检检 查查 一、一、红红 细细 胞胞 系系 统（统（2025%）二、二、粒粒 细细 胞胞 系系 统（统（5055%）三、三、巨巨 核核 细细 胞胞 系系 统统 四、四、单单 核核 细细 胞胞 系系 统统 五、五、淋淋 巴巴 细细 胞胞 系系 统（统（2025%）六、六、浆浆 细细 胞胞 系系 统统 七、七、其其 他他 细细 胞胞骨骨 髓髓 细细 胞胞 检检 查查结结 果果 分分 析析 与与 临临 床床 意意 义义 骨髓象检

8、验的临床应用骨髓象检验的临床应用 1.1.适应症适应症临床上通常出现下列情况时，可作骨髓细胞学检查：临床上通常出现下列情况时，可作骨髓细胞学检查：a.a.外周血数量、成分、形态等异常者外周血数量、成分、形态等异常者 b.b.经一定检查原因不明的发热、肝脾及淋巴结肿大经一定检查原因不明的发热、肝脾及淋巴结肿大 c.c.出现原因不明的骨痛、骨质破坏、黄疸、紫癜等出现原因不明的骨痛、骨质破坏、黄疸、紫癜等 d.d.需作治疗观察和其他检查者需作治疗观察和其他检查者 f.f.其他（活检、标记检测、染色体检查等）其他（活检、标记检测、染色体检查等）2.2.禁忌症禁忌症 a.a.血友病或凝血因子重度缺陷者血

9、友病或凝血因子重度缺陷者 b.b.穿刺部位有炎症或畸形穿刺部位有炎症或畸形 c.c.晚期妊娠的孕妇晚期妊娠的孕妇骨髓穿刺方法：骨髓穿刺方法：（一）部位的选择和条件（一）部位的选择和条件 穿刺部位通常选择穿刺部位通常选择髓液丰富、浅表髓液丰富、浅表 易定位、避开重要器官。如髂后上棘、髂前易定位、避开重要器官。如髂后上棘、髂前上棘、胸骨、胫骨等。上棘、胸骨、胫骨等。被穿刺部位的体表皮肤应无破损和炎症被穿刺部位的体表皮肤应无破损和炎症及畸型及畸型穿穿 刺刺 要要 求：求：1 1耐心解释。耐心解释。2 2严格无菌操作。严格无菌操作。3 3髓液应控制髓液应控制0.2ml0.2ml以内。以内。4 4骨质疏

10、松或骨质疏松或MMMM患者需小心。患者需小心。5 5血小板减少等患者，穿刺后应予压迫。血小板减少等患者，穿刺后应予压迫。6.6.了解病史注意禁忌症。了解病史注意禁忌症。结果的计算和填写检验报告单：结果的计算和填写检验报告单：首先计算各系统各阶段细胞所占百分比。然后将各阶首先计算各系统各阶段细胞所占百分比。然后将各阶 段粒细胞百分率的总和除以各阶段有核红细胞白分率，段粒细胞百分率的总和除以各阶段有核红细胞白分率，得出粒红比值（得出粒红比值（G/EG/E）。据实填写取材、涂片、染色。）。据实填写取材、涂片、染色。检测结果分析与报告方式：检测结果分析与报告方式：（一）结合临床分析（一）结合临床分析

11、1 1一般资料一般资料 2 2症状症状 3 3体征体征（二）结合血象分析（二）结合血象分析 三系数量和质量三系数量和质量（三）骨髓象分析（三）骨髓象分析 1 1小粒、油滴、色泽小粒、油滴、色泽 2 2有核细胞增生程度有核细胞增生程度 3 3细胞数量分析细胞数量分析 4 4细胞形态分析（粒、红、巨、淋、细胞形态分析（粒、红、巨、淋、单、浆、其他异常细胞）单、浆、其他异常细胞）（四）骨髓象与血象结合分析（四）骨髓象与血象结合分析1 1骨髓象相似，而血象有区别骨髓象相似，而血象有区别（溶贫、急性失血等）（溶贫、急性失血等）2 2骨髓象有区别骨髓象有区别,而血象相似而血象相似（传淋与慢淋、白血病与类白

12、）（传淋与慢淋、白血病与类白）3 3骨髓象无变化骨髓象无变化,而血象有变化而血象有变化（传单、部分淋巴瘤）（传单、部分淋巴瘤）4 4骨髓象有变化骨髓象有变化,而血象无变化而血象无变化（多发性骨髓瘤、戈谢病）（多发性骨髓瘤、戈谢病）5 5骨髓象细胞难以辨认骨髓象细胞难以辨认,而血象细胞易辨认而血象细胞易辨认 （白血病、血液寄生虫、淋巴瘤）（白血病、血液寄生虫、淋巴瘤）(五五)报告方式：报告方式：1.1.独立性和肯定性结论独立性和肯定性结论 2.2.符合性诊断符合性诊断 3.3.须依赖细胞化学染色的诊断须依赖细胞化学染色的诊断 4.4.疑似性诊断疑似性诊断 5.5.简明报告特征所见而不下结论简明报

13、告特征所见而不下结论 6.6.血液病治疗后复查报告血液病治疗后复查报告a.a.有效有效 b.b.无效无效临临 床床 意意 义义粒细胞系粒细胞系 增多增多-原粒、早幼粒、中幼粒、晚幼粒和杆状核原粒、早幼粒、中幼粒、晚幼粒和杆状核 急急性性白白血血病病等等急性急性早幼早幼白血白血病病M2、慢慢 性性粒粒 细细胞胞 白白血血 病病等等慢慢性性粒粒细细胞胞白白血血病、病、类类白、白、中中毒毒等等减少减少-再障、粒缺、急性造血停滞等。再障、粒缺、急性造血停滞等。红细胞系红细胞系 增多增多-原红和早幼红、原红和早幼红、中幼红和晚幼红中幼红和晚幼红 减少减少-巨核细胞系巨核细胞系 增多增多-减少减少-急性红

14、血病、急急性红血病、急性红白血病性红白血病增生性贫血真红、铅增生性贫血真红、铅中毒、红白血病等中毒、红白血病等纯红再障、急性白血病未分化型、化疗后等纯红再障、急性白血病未分化型、化疗后等MPD、ITP、急性巨核细胞白血病、脾亢、急性巨核细胞白血病、脾亢、慢粒慢粒等等再障、急性白血病、慢粒、化疗后等再障、急性白血病、慢粒、化疗后等 单核系细胞单核系细胞 增多增多-原单及幼单原单及幼单 成熟单核成熟单核 淋巴系细胞淋巴系细胞 增多增多-原淋及幼淋原淋及幼淋 成熟淋巴成熟淋巴急性单核或粒急性单核或粒-单细胞血病、慢单细胞血病、慢粒急单变粒急单变急性急性单核细胞白血单核细胞白血病病病、慢性粒单细病、慢

15、性粒单细胞白血病胞白血病急性淋巴细胞白急性淋巴细胞白血病、慢粒急淋血病、慢粒急淋变、淋巴瘤等变、淋巴瘤等慢性淋巴细胞白慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤、血病、淋巴瘤、巨球蛋白血症等巨球蛋白血症等再障、病毒感染再障、病毒感染等等 骨髓细胞形态学检查报告单骨髓细胞形态学检查报告单 姓 名：王某某 年 龄：30 岁 科 别：血液 病 区：内四 床 号：541 病历号：Z050492 抽取部位：右髂后上棘 抽取日期：2005-4-12 临床诊断：贫血待查 检查号：05412 骨髓小粒：丰 富 涂片张数：10 张 涂片质量：较 佳 染色质量：好 附带血片：3 张 细 胞 名 称 血片 骨髓片%正常值%原始细胞

16、 原始粒细胞 0.42 0.42 0.5早幼粒细胞 1.27 0.81 1.0中性中幼粒细胞 7.23 2.77 4.0晚幼粒细胞 11.36 2.93 7.0杆状核细胞 2.0 2 0.01 4.47 15.0分叶核细胞 52.0 12.85 4.38 7.0嗜酸中幼粒细胞 0.5 0.49晚幼粒细胞 0.8 0.64杆状核细胞 1.06 0.95分叶核细胞 3.0 1.90 1.48 1.0嗜碱中幼粒细胞 0.01 0.03晚幼粒细胞 0.02 0.03杆状核细胞 0.03 0.07分叶核细胞 0.16 0.24原始红细胞 0.37 0.36 1.0早幼红细胞 1.34 0.88 3.0中

17、幼红细胞 9.45 3.33 30.5晚幼红细胞 9.64 3.50 20.0原始淋巴细胞 0.01 0.01幼稚淋巴细胞 0.08 0.15成熟淋巴细胞 40.0 18.90 5.46 9.0原始单核细胞 0.01 0.02幼稚单核细胞 0.06 0.07成熟单核细胞 3.0 1.45 0.88 1.0原始浆细胞 0.002 0.01幼稚浆细胞 0.03 0.07成熟浆细胞 0.54 0.38组织细胞 0.20组织嗜碱细胞 0.03吞噬细胞 0.19内皮细胞 0.04脂肪细胞成骨细胞破骨细胞共计数有核细胞数 200 个粒红比例 0.65：1原始巨核细胞 幼稚巨核细胞 4.20%颗粒巨核细胞

18、58.30%产板巨核细胞 37.50%裸 核 1个1.骨髓增生明显活跃，粒红比例倒置。2.红系增生明显活跃占54.5%，以中晚幼阶 段为主。幼红细胞胞体较小、边缘不整齐，胞质量少、偏蓝。核浆发育失衡呈核老浆幼 状。成熟红细胞体积较小、中央淡染区明显 扩大，多色性红细胞可见。红系分裂象较易 见。铁染色：外铁()内铁幼红细胞阳性率 3%，3.粒系增生活跃，比例相对减低占35.5%，各阶段粒细胞比例和形态未见明显异常。4.巨核细胞全片计数见76个（增生明显活 跃），成蔟血小板可见，形态未见明显异 常。5.淋巴细胞比例相对减少，形态未见明显异常。6.单核细胞比例未见改变，形态未见明显异常。7.未见其他

19、异常细胞和寄生虫。意见和建议：意见和建议：请结合临床及其他铁代谢检查，考虑小细胞 低色素性贫血。检 验 者：李XX 检验日期：2007-6-11粒细胞系红细胞系淋巴系单核系浆细胞其 他巨核细胞系常常用用血血液液细细胞胞化化学学染染色色 细胞化学染色是将形态和功能相结合的科学。他细胞化学染色是将形态和功能相结合的科学。他在在保持完整的细胞形态和细胞结构的前提下，应用化学保持完整的细胞形态和细胞结构的前提下，应用化学反应将被检细胞内的各类化学成分和细胞结构及生理反应将被检细胞内的各类化学成分和细胞结构及生理活性物质原位的显示。从而对分析细胞化学成分、生活性物质原位的显示。从而对分析细胞化学成分、生

20、理功能、新陈代谢及细胞生理和病理改变有着重要的理功能、新陈代谢及细胞生理和病理改变有着重要的意义。意义。细胞内染色的范围通常是：蛋白类、多糖类、脂细胞内染色的范围通常是：蛋白类、多糖类、脂类、盐类和金属类等。类、盐类和金属类等。采用的方法通常为：化学结合、物理溶解及酶采用的方法通常为：化学结合、物理溶解及酶-底底物反应。物反应。应用：应用：a a对各类白血病的确诊对各类白血病的确诊b b对许多血液疾病鉴别诊断对许多血液疾病鉴别诊断c c对各种良、恶性血液系统疾病疗效和预对各种良、恶性血液系统疾病疗效和预 后估计提供一定的信息后估计提供一定的信息 一过氧化物酶（一过氧化物酶（POXPOX）血细胞

21、中的过氧化物酶主要为髓过氧化物酶（嗜酸血细胞中的过氧化物酶主要为髓过氧化物酶（嗜酸粒细胞内为乳过氧化物酶）。在血液和骨髓细胞中，粒细胞内为乳过氧化物酶）。在血液和骨髓细胞中，粒细胞系和单核细胞系的嗜苯胺蓝颗粒（粒细胞系和单核细胞系的嗜苯胺蓝颗粒（A A-颗粒）内颗粒）内的溶酶体中存在有过氧化物酶。此酶的活性和多少与的溶酶体中存在有过氧化物酶。此酶的活性和多少与溶酶体的数量有关，而与溶酶体的数量有关，而与A A-颗粒的多少无关。虽然淋颗粒的多少无关。虽然淋巴细胞浆中也有嗜苯胺蓝颗粒，但因为此颗粒中不存巴细胞浆中也有嗜苯胺蓝颗粒，但因为此颗粒中不存在溶酶体，所以淋巴细胞过氧化物酶染色呈阴性反在溶酶

22、体，所以淋巴细胞过氧化物酶染色呈阴性反应。另外巨核细胞、红细胞等也为阴性反应。应。另外巨核细胞、红细胞等也为阴性反应。（一）原理（一）原理 过氧化物酶过氧化物酶 H H2 2O O2 2 H H2 2O O O O 无色联苯胺无色联苯胺 蓝色联苯胺蓝色联苯胺 （二）方法（二）方法 根据各公司产品说明书进行根据各公司产品说明书进行（三）正常阳性细胞（三）正常阳性细胞 1.1.中性粒细胞中性粒细胞 强阳性强阳性 2.2.嗜酸粒细胞嗜酸粒细胞 强阳性强阳性 3.3.单核细胞单核细胞 弱阳性或阳性（弥散状）弱阳性或阳性（弥散状）4.4.淋巴细胞、红细胞、浆细胞、组织细胞、巨核细胞等均为淋巴细胞、红细胞

23、、浆细胞、组织细胞、巨核细胞等均为 阴性阴性（四）临床评价（四）临床评价病理变化病理变化 1 1增高增高-再生障碍性贫血、感染、急慢性淋巴细胞白血病、再生障碍性贫血、感染、急慢性淋巴细胞白血病、2.2.减低减低-急慢性粒细胞白血病、急慢性粒细胞白血病、MDSMDS、风湿热、放射病等、风湿热、放射病等 3.3.缺乏缺乏先天性髓过氧化物酶缺乏症。先天性髓过氧化物酶缺乏症。过氧化物酶染色在急性白血病分型中的意义过氧化物酶染色在急性白血病分型中的意义 临床上通常将临床上通常将POXPOX染色阳性率染色阳性率3 3%作为淋巴与非淋巴的分界标作为淋巴与非淋巴的分界标 准若能结合其他化学染色、细胞免疫标记、

24、遗传学和分子生准若能结合其他化学染色、细胞免疫标记、遗传学和分子生 物学检测则更好物学检测则更好二糖原染色（二糖原染色（PASPAS）此试验中能被过碘酸此试验中能被过碘酸-雪夫反应呈阳性的多糖类物雪夫反应呈阳性的多糖类物质有糖原、粘多糖、糖蛋白、糖脂、还包括一些磷脂质有糖原、粘多糖、糖蛋白、糖脂、还包括一些磷脂类物质等，因此类物质等，因此PASPAS阳性不能简单地就表明有糖原的阳性不能简单地就表明有糖原的存在，只是在对血细胞的组织化学研究中通常习惯于存在，只是在对血细胞的组织化学研究中通常习惯于将将PASPAS阳性认同于糖原。阳性认同于糖原。PAS PAS染色虽然不完全代表糖原，但在血液系统疾

25、病染色虽然不完全代表糖原，但在血液系统疾病特别在各类型急性白血病中却有相当大的应用价值。特别在各类型急性白血病中却有相当大的应用价值。PASPAS染色若结合其他化学染色和细胞免疫表型检测可染色若结合其他化学染色和细胞免疫表型检测可对部分疾病的诊断和鉴别对部分疾病的诊断和鉴别诊断提供一定的价值。诊断提供一定的价值。（一）原理（一）原理 过碘酸过碘酸 乙二醇乙二醇 双醛基双醛基 +无色品红无色品红 紫红色化合物紫红色化合物（二）方法（二）方法（三）正常阳性细胞（三）正常阳性细胞 1.1.粒系粒系阳性（且随细胞的成熟逐渐增强）阳性（且随细胞的成熟逐渐增强）.2.2.单核单核-阳性（且随细胞的成熟逐渐

26、增强）阳性（且随细胞的成熟逐渐增强）.3.3.淋巴淋巴大部分阴性大部分阴性,少数呈阳性少数呈阳性.4.4.巨核巨核强阳性强阳性(粗颗粒或块状粗颗粒或块状).).5.5.浆系浆系-大部分阴性大部分阴性,少数呈阳性少数呈阳性.6.6.红系红系阴性阴性.（四）临床评价（四）临床评价 红系红系 红（白）血病、红（白）血病、MDSMDS等幼红细胞等幼红细胞 可呈阳性。可呈阳性。各类急性白血病的辅助鉴别：淋淋 粗颗粒或块状粗颗粒或块状 单单 细颗粒弥散状细颗粒弥散状 粒粒 细颗粒或均匀红色细颗粒或均匀红色 巨巨 粗颗粒或块状强阳性粗颗粒或块状强阳性 三碱性磷酸酶（三碱性磷酸酶（NAPNAP）中性粒细胞碱性

27、磷酸酶是中性粒细胞碱性磷酸酶是中性粒细胞中的特异性颗中性粒细胞中的特异性颗粒（粒（S颗粒）所释放的一种酶，存在于细胞浆内的三级颗粒）所释放的一种酶，存在于细胞浆内的三级颗粒中呈不规则形的管状结构，该酶的活力与积分受到颗粒中呈不规则形的管状结构，该酶的活力与积分受到体内许多因素的影响。如中性粒细胞的成熟度、体内许多因素的影响。如中性粒细胞的成熟度、HbF、内分内分 泌功能等均可使泌功能等均可使NAP的积分产生一定的差异，但的积分产生一定的差异，但正常人群中性粒细胞的阳性程度一般很少到正常人群中性粒细胞的阳性程度一般很少到三三分，绝对分，绝对达不到达不到四四分。分。若结合染色体检查可协助慢粒的诊断

28、。若结合染色体检查可协助慢粒的诊断。（一）原理（一）原理 pH9.6pH9.6-磷酸萘酚磷酸萘酚+H+H2 2O O -萘酚萘酚 +磷酸磷酸 碱性磷酸酶碱性磷酸酶 +重氮盐重氮盐 有色沉淀物有色沉淀物（二）方法（二）方法（三）正常阳性细胞（三）正常阳性细胞 在血细胞中除成熟中性粒细胞阳性外，其他细胞基本 呈阴性。（四）临床评价（四）临床评价 1.1.生理变化：生理变化：年龄、应激、妊娠可见增高或降低年龄、应激、妊娠可见增高或降低 2.2.病理变化：病理变化：（1 1）增高）增高 感染、感染、AAAA、类白血病、急淋、其它、类白血病、急淋、其它（2 2）减低）减低 粒缺、脾亢、感染（粒缺、脾亢、

29、感染（G G）、病毒、）、病毒、白血病白血病 五氯化醋酸五氯化醋酸AS-DAS-D萘酚酯酶染色萘酚酯酶染色 （A S D C E A S D C E）此酶主要分布在粒细胞和肥大细胞中。通常从原粒此酶主要分布在粒细胞和肥大细胞中。通常从原粒细胞后期即可见有弱阳性反应，而到早幼粒细胞就可细胞后期即可见有弱阳性反应，而到早幼粒细胞就可见强阳性反应。且酶的活性不随细胞分化成熟而增见强阳性反应。且酶的活性不随细胞分化成熟而增强。此酶的阳性产物比强。此酶的阳性产物比POXPOX更为特异。更为特异。单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞等均为阴性，所以单核细胞、淋巴细胞、巨核细胞等均为阴性，所以在临床上将在临床上将A

30、S-DCEAS-DCE染色作为是粒细胞的标志性酶。染色作为是粒细胞的标志性酶。（一）原理一）原理 氯化醋酸氯化醋酸AS-DAS-D萘酚酯酶萘酚酯酶氯化醋酸氯化醋酸AS-DAS-D萘酚萘酚 AS-D AS-D萘酚萘酚 +醋酸醋酸 +重氮盐重氮盐 有色沉淀物有色沉淀物（二）方法（二）方法（三）阳性细胞（三）阳性细胞 中性粒细胞阳性外，其他血液细胞均为阴性。中性粒细胞阳性外，其他血液细胞均为阴性。（四）临床评价（四）临床评价 粒细胞及肥大细胞的标志酶粒细胞及肥大细胞的标志酶四非特异性酯酶四非特异性酯酶 非特异性酯酶是属水解酶非特异性酯酶是属水解酶,通常可分为中性酯酶通常可分为中性酯酶(NAENAE)

31、、酸性、酸性酯酶（酯酶（ANAEANAE）和丁酸酯酶（）和丁酸酯酶（NBENBE）。由较多的同工酶所组成，在不）。由较多的同工酶所组成，在不同的细胞内存在有不同的同工酶。电泳分析证明人血细胞含有九种同的细胞内存在有不同的同工酶。电泳分析证明人血细胞含有九种酯酶同工酶，如中性粒细胞含同工酶酯酶同工酶，如中性粒细胞含同工酶1 1、2 2、7 7、9 9；单核细胞和血小；单核细胞和血小板含有同工酶板含有同工酶4 4、5 5。淋巴细胞含有同工酶。淋巴细胞含有同工酶1 1和和6 6等。其中同工酶等。其中同工酶4 4、5 5 能被能被NaFNaF所抑制，所以对染色呈阳性的细胞作所抑制，所以对染色呈阳性的细

32、胞作NaFNaF抑制试验可鉴别中抑制试验可鉴别中性粒细胞和单核细胞。性粒细胞和单核细胞。非特异性酯酶检测通常应用于白血病的鉴别诊断，而白血病细非特异性酯酶检测通常应用于白血病的鉴别诊断，而白血病细胞的高度异型性或异质性使酶活性的表达出现紊乱，所以组合酯酶胞的高度异型性或异质性使酶活性的表达出现紊乱，所以组合酯酶检测比单一检测更具价值和意义。检测比单一检测更具价值和意义。在临床上非特异性酯酶一般选用：在临床上非特异性酯酶一般选用：-醋酸萘酚酯酶（醋酸萘酚酯酶（-NAE-NAE）-丁酸萘酚酯酶（丁酸萘酚酯酶（NBE NBE）醋酸醋酸AS-DAS-D萘酚酯酶（萘酚酯酶（AS-DAE AS-DAE）若

33、将上述任何一个酶与若将上述任何一个酶与POXPOX或或AS-DCEAS-DCE染色于染色于同一张标本片上，就被称为双酶（双酯）染色。同一张标本片上，就被称为双酶（双酯）染色。可使粒细胞系和单核细胞系分辨得更清楚。可使粒细胞系和单核细胞系分辨得更清楚。（一）原理（一）原理（-NAE-NAE、AS-DAEAS-DAE、-NBE-NBE）-醋酸萘酚 -萘酚 +醋酸 -醋酸萘酚酯酶 +重氮盐重氮盐 有色沉淀物有色沉淀物（二）方法（二）方法（三）正常阳性细胞（三）正常阳性细胞（四）临床评价（四）临床评价 此组合酶类染色，主要运用于各种急性白血病的此组合酶类染色，主要运用于各种急性白血病的鉴别诊断，特别在

34、急非淋（鉴别诊断，特别在急非淋（ANLLANLL）中的分型和亚型分）中的分型和亚型分型提供重要依据。型提供重要依据。六铁染色六铁染色 骨髓铁包括细胞内铁和细胞外铁。细胞内铁为骨髓铁包括细胞内铁和细胞外铁。细胞内铁为 幼红细胞合成血红蛋白时的利用形式，而细胞幼红细胞合成血红蛋白时的利用形式，而细胞外铁是骨髓以含铁血黄素形式存在的储存铁。骨外铁是骨髓以含铁血黄素形式存在的储存铁。骨髓铁染色可了解骨髓中幼红细胞对铁利用的功能髓铁染色可了解骨髓中幼红细胞对铁利用的功能和铁原料在机体内的吸受与储存情况，若将铁染和铁原料在机体内的吸受与储存情况，若将铁染色与血清、总铁结合力等检测综合观察，可了解色与血清、

35、总铁结合力等检测综合观察，可了解机体内铁的动态变化。所以铁染色是诊断缺铁性机体内铁的动态变化。所以铁染色是诊断缺铁性贫血最重要且较早期的指标之一。贫血最重要且较早期的指标之一。细胞内外的铁与酸性亚铁氰化钾反应形细胞内外的铁与酸性亚铁氰化钾反应形 成蓝色的亚铁氰化铁，定位于含铁的部位。成蓝色的亚铁氰化铁，定位于含铁的部位。正常值：细胞外铁正常值：细胞外铁-（+）-（+）细胞内铁细胞内铁19-44%19-44%（-）意义：意义：1 1、缺铁性贫血明显降低甚至阴性。、缺铁性贫血明显降低甚至阴性。2 2、铁粒幼细胞贫血明显增多。、铁粒幼细胞贫血明显增多。3 3、MDSMDS可见环形铁粒幼细胞增多（可见

36、环形铁粒幼细胞增多（15%15%）常常 见见 血血 液液 病病 血血 细细 胞胞 特特 征征骨骨 髓髓 增增 生生 异异 常常 综综 合合 症症 本病是一组骨髓造血干细胞克隆性疾病。本病是一组骨髓造血干细胞克隆性疾病。外周血象外周血象-主要表现在三系呈不同程度的主要表现在三系呈不同程度的改变，可见到各类细胞在数量、质量上的异改变，可见到各类细胞在数量、质量上的异常。常。骨髓象骨髓象-主要以各系病态造血为突出表现。主要以各系病态造血为突出表现。分型；（分型；（-型）型）RA RA；RASRAS；RAEBRAEB；RAEB-tRAEB-t；CMMLCMML。WHOWHO在在 1997 1997年年

37、1111月修订了月修订了MDSMDS的分型的分型 难治性贫血难治性贫血:伴有环行铁粒幼细胞伴有环行铁粒幼细胞(RARS)(RARS)不伴有环行铁粒幼细胞不伴有环行铁粒幼细胞(RA)(RA)难治性血细胞减少伴有多系增生异常难治性血细胞减少伴有多系增生异常(RCMD)(RCMD)难治性血细胞减少伴有多系增生异常和环行铁粒幼细难治性血细胞减少伴有多系增生异常和环行铁粒幼细 胞胞(RCMD-RS)(RCMD-RS)难治性贫血伴有原始细胞过多难治性贫血伴有原始细胞过多(RAEB)(RAEB)5q-5q-综合征综合征(原始细胞大于原始细胞大于20%20%的的AMLAML且有细胞遗传学异且有细胞遗传学异 常

38、常)骨髓增生异常综合征骨髓增生异常综合征,不能分类不能分类 白白 血血 病病 白血病是一种造血系统的恶性疾病，其特白血病是一种造血系统的恶性疾病，其特点是大量原始和幼稚或异常细胞出现在骨髓、点是大量原始和幼稚或异常细胞出现在骨髓、外周血和其他器官或组织。外周血和其他器官或组织。根据白血病细胞的分化程度和白血病的根据白血病细胞的分化程度和白血病的自然病程，可分成急性白血病和慢性白血病自然病程，可分成急性白血病和慢性白血病二大类。二大类。急急 性性 白白 血血 病病 急性白血病的骨髓和外周血中主要的白急性白血病的骨髓和外周血中主要的白血病细胞是以原始和早期细胞为主（骨髓血病细胞是以原始和早期细胞为

39、主（骨髓中达到或超过中达到或超过3030%以上）。以上）。根据白血病细胞的种类可将其分为急根据白血病细胞的种类可将其分为急性淋巴细胞性白血病和急性非淋巴细胞性性淋巴细胞性白血病和急性非淋巴细胞性白血病白血病。急性淋巴细胞性白血病急性淋巴细胞性白血病 原始或幼稚淋巴细胞为主，依据形态可原始或幼稚淋巴细胞为主，依据形态可分为三型：分为三型：L L1 1-以小细胞型；以小细胞型；L2L2-大小细胞混合型；大小细胞混合型；L3L3-空泡型；空泡型；按照免疫学特点可分成按照免疫学特点可分成T-T-细胞和细胞和B-B-细胞细胞二大类，再分成多种亚型。二大类，再分成多种亚型。形态学分型和免疫学分型目前二者无

40、相形态学分型和免疫学分型目前二者无相关性。关性。急性非淋巴细胞白血病急性非淋巴细胞白血病 急性非淋巴细胞性白血病根据发病细胞种类的急性非淋巴细胞性白血病根据发病细胞种类的 不同可分为：不同可分为：M M0 0-极微分化型；极微分化型；M M1 1-粒细胞（未分化）型；粒细胞（未分化）型；M M2 2-粒细胞（部分分化）型；粒细胞（部分分化）型；M M2a2a、M M2b2b。M M3 3-早幼粒细胞型；早幼粒细胞型；M M3a3a、M M3b3b。M M4 4-粒粒-单细胞型；单细胞型；M M4a4a、M M4b4b、M M4c4c、M M4EOS4EOS。M M5 5-单核细胞型；单核细胞型

41、；M M5a5a、M M5b5b。M M6 6-红红-白细胞型；白细胞型；M M7 7-巨核细胞型；巨核细胞型；慢慢 性性 白白 血血 病病 根据白血病细胞的种类可分为根据白血病细胞的种类可分为慢性粒细胞性白血病慢性粒细胞性白血病和和慢性淋巴细胞性白血病慢性淋巴细胞性白血病二种。二种。外周血和骨髓中可见血细胞数量明显增多并见大量各外周血和骨髓中可见血细胞数量明显增多并见大量各阶段幼稚和成熟细胞。阶段幼稚和成熟细胞。慢性粒细胞性白血病慢性粒细胞性白血病中、晚幼粒细胞明显增多，杆中、晚幼粒细胞明显增多，杆核与分叶核及嗜酸、嗜碱均增多。染色体检查可见核与分叶核及嗜酸、嗜碱均增多。染色体检查可见PhP

42、h1 1染色体染色体t t（9 9；2222）（）（q34q34；q11q11）慢性淋巴细胞性白血病慢性淋巴细胞性白血病以小淋巴细胞增多为突出表以小淋巴细胞增多为突出表现，在早期此类细胞可占现，在早期此类细胞可占65-75%65-75%，而到晚期则可达到，而到晚期则可达到90-98%90-98%。其其 他他 恶恶 性性 血血 液液 病病 淋巴瘤淋巴瘤-起源于淋巴结或其他淋巴组织的恶性肿瘤，起源于淋巴结或其他淋巴组织的恶性肿瘤，可分为何杰金病与非何杰金淋巴瘤两大类。在后期可可分为何杰金病与非何杰金淋巴瘤两大类。在后期可累及全身各个器官或组织包括血液与骨髓。累及全身各个器官或组织包括血液与骨髓。多

43、发性骨髓瘤多发性骨髓瘤是一种浆细胞异常增生所至的恶性是一种浆细胞异常增生所至的恶性肿瘤。骨髓内可见大量异常浆细胞（骨髓瘤细胞）。肿瘤。骨髓内可见大量异常浆细胞（骨髓瘤细胞）。若外周血中见有较多这类细胞既为浆细胞白血病。若外周血中见有较多这类细胞既为浆细胞白血病。恶性组织细胞病恶性组织细胞病是一种单核是一种单核-巨噬细胞系统的恶性巨噬细胞系统的恶性疾病，在骨髓中可见体积较大、畸形且成熟程度很不疾病，在骨髓中可见体积较大、畸形且成熟程度很不一致的异常细胞。一致的异常细胞。急性白血病的急性白血病的MICMMICM分型分型 即对急性白血病进行形态学、免疫学、细胞即对急性白血病进行形态学、免疫学、细胞遗传学和分子生物学的分型。遗传学和分子生物学的分型。形态学形态学-包括细胞形态和细胞化学染色。包括细胞形态和细胞化学染色。免疫学免疫学-细胞标志检测可使白血病分类准确性细胞标志检测可使白血病分类准确性 得到极大的提高。得到极大的提高。细胞遗传学细胞遗传学-分析染色体有否改变，对疾病的分析染色体有否改变，对疾病的 疗效和预后有所帮助。疗效和预后有所帮助。分子生物学分子生物学-同上。同上。