实验五血糖含量的测定.ppt

《实验五血糖含量的测定.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验五血糖含量的测定.ppt（10页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、实验五血糖含量的测定 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望二、实验原理二、实验原理血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的运输形式。是糖在体内的运输形式。本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。其本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水原理是葡萄糖在酸性介质中加热脱水反应生成反应生成5羟甲基羟甲基2呋喃甲醛，呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色的薛夫氏碱，通过比色可以

2、定量。的薛夫氏碱，通过比色可以定量。三、试剂和器材三、试剂和器材试剂试剂邻甲苯胺试剂：称取硫脲邻甲苯胺试剂：称取硫脲1.5溶于溶于750L冰醋酸中冰醋酸中,加邻甲苯胺加邻甲苯胺150L及饱和硼酸及饱和硼酸40L,混匀后加冰醋酸至混匀后加冰醋酸至1000L,置棕置棕色瓶中，冰箱保存。色瓶中，冰箱保存。葡萄糖标准溶液：葡萄糖标准溶液：0.1mg/mL。材料材料动物血清动物血清器材器材具塞试管具塞试管1.515cm（8）；分光）；分光光度计。光度计。四、操作方法四、操作方法1.制作标准曲线制作标准曲线取取6支试管编号后，按下表顺序加入试支试管编号后，按下表顺序加入试剂：剂：加毕，温和混匀，于沸水浴中

3、煮沸加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸4min取下，冷却，放置取下，冷却，放置30min，用，用1cm比色杯，试剂空白为参比，测定比色杯，试剂空白为参比，测定630nm处吸光值，绘制标准曲线。处吸光值，绘制标准曲线。管号管号0 01 12 23 34 45 5标准葡萄糖标准葡萄糖液液(mL)(mL)0.00.00.20.20.40.40.60.60.80.81.01.0蒸馏水蒸馏水(mL)(mL)1.01.00.80.80.60.60.40.40.20.20.00.0邻甲苯胺试邻甲苯胺试剂剂(mL)(mL)5.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.0A630A6302、

4、样品测定、样品测定取取3支试管编号后，分别加入试剂，与标支试管编号后，分别加入试剂，与标准曲线同时作比色测定：准曲线同时作比色测定：管号管号对照对照样品样品 样品样品稀释的未知血清样品稀释的未知血清样品(mL)(mL)0.000.000.100.100.100.10蒸馏水蒸馏水(mL)(mL)0.100.100.000.000.000.00邻甲苯胺试剂邻甲苯胺试剂(mL)(mL)5.05.05.05.05.05.0A630A630加毕，温和混匀，于沸水浴中煮加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸沸4min取下，冷却，放置取下，冷却，放置30min，用，用1cm比色杯，试剂空比色杯，试剂空白为参比，测定白为参比，测定630nm处吸光处吸光值，从标准曲线中可查出样品中血值，从标准曲线中可查出样品中血糖含量。糖含量。五、注意事项五、注意事项该法一般在浓酸高温条件下发生反该法一般在浓酸高温条件下发生反应应,在做血糖测定时须多加注意。在做血糖测定时须多加注意。六、思考题六、思考题简述测定血糖在临床上的意义简述测定血糖在临床上的意义。