6.2基因工程课件--高一下学期生物人教版必修2.pptx
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1、6.2 基因工程基因工程6.2 基因工程及其应用能发光的水母能发光的水母能否能否让热能否能否让热带鱼也能发光带鱼也能发光?设想设想不能发光的热带斑马鱼不能发光的热带斑马鱼一、基因工程原理一、基因工程原理1 1、概念、概念基因工程基因工程,又叫做又叫做基因拼接技术基因拼接技术基因拼接技术基因拼接技术或或DNADNADNADNA重组重组重组重组技术技术技术技术。就。就是按照人们的意愿,是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,的细胞里,定向定向定向定向地改造生物的地改造生物的遗传性状遗传性
2、状遗传性状遗传性状。2、原理、原理:3、操作水平、操作水平:操作对象操作对象:基因重组基因重组DNA分子水平分子水平DNA分子分子5、优点:、优点:(1)克克服了远缘杂交不亲和的障碍;服了远缘杂交不亲和的障碍;(2)周周期短;期短;(3)目目的性强。的性强。4、结果:定、结果:定向向改改造生物的遗传性状,获得人类所需的基因产物。造生物的遗传性状,获得人类所需的基因产物。6、缺点:、缺点:技术复杂、操技术复杂、操作难作难度大度大水母(水母(发出绿色荧光发出绿色荧光)绿色荧光基因绿色荧光基因 重组质粒重组质粒(重组重组DNA分子分子)猫的受精卵猫的受精卵(含绿色荧光基因含绿色荧光基因)猫(猫(不能
3、发出绿色荧光不能发出绿色荧光)绿色荧光猫绿色荧光猫提取(剪切)提取(剪切)运输工具运输工具 结合(拼接)结合(拼接)导入导入例:转基因荧光猫的培育过程例:转基因荧光猫的培育过程主要存在主要存在于于原核细原核细胞胞(微生物微生物)内,内,在在300多种微生物中已发多种微生物中已发现的有现的有4000多种限制酶。多种限制酶。一种限制酶一种限制酶只能识别只能识别一种特定的核苷酸序列,并在一种特定的核苷酸序列,并在特定的切特定的切点上点上切割切割DNA分子,产生分子,产生黏性末黏性末端端(或平末端或平末端)来源来源:特点特点:作作用部位:用部位:1、基因的、基因的“剪刀剪刀”:二、基因工程的操作工具二
4、、基因工程的操作工具限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(简称限制酶简称限制酶)G A A T T CC T T A A GGC T T A AA A T T CG黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端限制性内切限制性内切酶限制性内切限制性内切酶磷酸二磷酸二酯键黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端限制性内切酶(限制性内切酶(EcoR)作用过程)作用过程黏性末端黏性末端?被被限制酶切开的限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。G A A T T CC T T A A G
5、G A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切割限制酶切割的限制酶切割的是磷是磷酸二酯酸二酯键键。2、基因的、基因的“针线针线”DNA连接酶连接酶(1)作作用用对对象:象:两个具有相同黏性末端的两个具有相同黏性末端的DNA分子分子(片段片段)。(2)位位置:置:脱氧核糖与磷酸之间的缺口脱氧核糖与磷酸之间的缺口(形成形成磷酸二酯键磷酸二酯键)。(3)催催化结果:化结果:形成重组形成重组DNA分子。分子。DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合缝合”起
6、来,即把梯子两边扶手的断口连接起来起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来(不是连接氢键不是连接氢键),这样一个重组的,这样一个重组的DNA分子就分子就形成了。形成了。G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切割生成磷酸二酯键生成磷酸二酯键DNADNA连接酶连接酶3、基因的运输工具运载体将目的基因送入受体细胞;在受体细胞中和目的基因一起大量复制和表达。(4)(4)作作为运载体必须具备的条
7、件为运载体必须具备的条件:具多个限制酶切点,以便与外源基因连接。能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。具有某些标记基因,便于进行筛选。(2)常用运载体:(1)作用:质粒、噬菌体、动植物病毒(4)作用原理:运载体对受体细胞的侵染性(3)(3)化化学本质学本质:DNA(脱氧核糖核酸)质质粒存在于许多粒存在于许多细菌和酵母菌细菌和酵母菌等生等生物的细胞中物的细胞中,是拟核或细胞核外能够是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的自主复制的很小的环状环状DNADNA分子分子。标记基因,便于标记基因,便于进行检测。进行检测。质质粒存在于许多粒存在于许多细菌和酵母菌细菌和酵母菌等生等生物的细胞中物的细胞中,是拟核或细
8、胞核外能是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的够自主复制的很小的环状环状DNADNA分子分子。三、基因工程的操作步骤三、基因工程的操作步骤目的基因:目的基因:人人人人们所需要转移或改造的基因。们所需要转移或改造的基因。们所需要转移或改造的基因。们所需要转移或改造的基因。如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因,还有植物的抗如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因,还有植物的抗如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因,还有植物的抗如苏云金芽孢杆菌的抗虫基因,还有植物的抗病病病病(抗抗抗抗病毒、抗细病毒、抗细病毒、抗细病毒、抗细菌菌菌菌)基基基基因、因、因、因、种子耐贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。种子耐贮藏蛋白的基因,以
9、及人的胰岛素基因、干扰素基因等。种子耐贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。种子耐贮藏蛋白的基因,以及人的胰岛素基因、干扰素基因等。三、基因工程的操作步骤三、基因工程的操作步骤1、步、步骤一:提取目的基因骤一:提取目的基因2、步、步骤二:目的基因与运载体结合骤二:目的基因与运载体结合 用用特定的特定的限制酶限制酶切割质切割质粒;粒;用用同种限制酶同种限制酶切割目的基因,使其产生相同的黏性末切割目的基因,使其产生相同的黏性末端;端;将将目的基因和质粒混合,再加入适量目的基因和质粒混合,再加入适量DNADNA连接酶,形成了连接酶,形成了一个重组一个重组DNADNA分分子子(重重组质组质
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