生化实验基本操作.ppt

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1、 生化实验基本操作技术生化实验基本操作技术生物化学与分子生物学实验教学中心生物化学与分子生物学实验教学中心玻璃器皿的洗涤玻璃器皿的洗涤溶液的混溶液的混匀匀技技术吸量管、加吸量管、加样器的使用器的使用123基本操作基本操作技术技术内容内容2常用玻璃器皿的洗涤方法常用玻璃器皿的洗涤方法u使用过的玻璃器皿洗涤（常规洗涤方法）使用过的玻璃器皿洗涤（常规洗涤方法）倒掉内容物倒掉内容物自来水冲洗自来水冲洗温肥皂水冲洗温肥皂水冲洗自来水冲洗自来水冲洗蒸馏水蒸馏水冲洗三次冲洗三次u新购置的玻璃器皿洗涤新购置的玻璃器皿洗涤 2%2%盐酸浸泡数小时盐酸浸泡数小时自来水冲洗自来水冲洗常规洗涤常规洗涤u血清堵塞刻度吸

2、管洗涤血清堵塞刻度吸管洗涤 7.5mol/L7.5mol/L尿素清洗尿素清洗常规洗涤常规洗涤u油污烧杯试管洗涤油污烧杯试管洗涤 去油脂去油脂常规洗涤常规洗涤 （去油脂方法：将量器倒放于具有强吸水力的几层厚纸上，（去油脂方法：将量器倒放于具有强吸水力的几层厚纸上，置置100100烤箱中烘烤半小时，使油脂溶化由厚纸吸收，再置碱性烤箱中烘烤半小时，使油脂溶化由厚纸吸收，再置碱性溶液中煮沸趁热洗刷，即可除去油脂）。溶液中煮沸趁热洗刷，即可除去油脂）。3u污染玻璃器皿洗涤污染玻璃器皿洗涤 浸泡在杀菌剂（浸泡在杀菌剂（5%5%煤酚皂液）中过液煤酚皂液）中过液常规洗涤常规洗涤u染料污染玻璃器皿洗涤染料污染玻

3、璃器皿洗涤 清水清洗清水清洗3%3%盐酸乙醇溶液清洗盐酸乙醇溶液清洗常规洗涤常规洗涤u微量元素测定用玻璃器皿洗涤微量元素测定用玻璃器皿洗涤 单独清洗单独清洗稀盐酸浸泡稀盐酸浸泡去离子水冲洗去离子水冲洗常规洗涤常规洗涤u量器类玻璃器皿洗涤量器类玻璃器皿洗涤 立即清洗立即清洗晾干晾干铬酸洗液浸泡铬酸洗液浸泡4 46h6h自来水冲洗自来水冲洗蒸馏水冲洗蒸馏水冲洗u比色杯洗涤比色杯洗涤 自来水冲洗自来水冲洗蒸馏水冲洗蒸馏水冲洗 （洗不净可用（洗不净可用3.5mol/L HNO3.5mol/L HNO3 3溶液或（溶液或（0.30.30.60.6）mol/L mol/L HClHCl冲洗，禁用冲洗，禁用

4、毛刷或强氧化剂或超声波洗涤）毛刷或强氧化剂或超声波洗涤）u干燥干燥自然干燥、烘烤干燥自然干燥、烘烤干燥 量器自然凉干，容器烘干备用。量器自然凉干，容器烘干备用。常用玻璃器皿的洗涤方法常用玻璃器皿的洗涤方法4洗涤、干燥原则与判断方法洗涤、干燥原则与判断方法n玻璃器皿洗涤原则：玻璃器皿洗涤原则：对不同玻璃器皿，采用不同的洗涤方法。根据器皿对不同玻璃器皿，采用不同的洗涤方法。根据器皿污染源的不同选择合适的洗涤液。污染源的不同选择合适的洗涤液。n玻璃器皿干燥原则：玻璃器皿干燥原则：量器自然凉干，容器烘干备用。量器自然凉干，容器烘干备用。n器皿清洁的判断方法：器皿清洁的判断方法：洗涤后倒置容器，其内壁无

5、挂珠；干燥后器壁内外洗涤后倒置容器，其内壁无挂珠；干燥后器壁内外干净、无污物痕迹。干净、无污物痕迹。5溶液的混匀技术溶液的混匀技术甩动混匀甩动混匀适用于试管内液量不多的溶液混匀。适用于试管内液量不多的溶液混匀。弹打混匀弹打混匀适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物的混匀。适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物的混匀。旋转混匀旋转混匀适用于未盛满溶液的锥形瓶、试管和小口容器等内容物的混匀。适用于未盛满溶液的锥形瓶、试管和小口容器等内容物的混匀。倒转混匀倒转混匀适用于具塞容器，如容量瓶、具塞量筒和具塞离心管等内容物的混匀。适用于具塞容器，如容量瓶、具塞量筒和具塞离心管等内容物的混匀

6、。玻棒搅拌混匀玻棒搅拌混匀适用于烧杯内容物的混匀。适用于烧杯内容物的混匀。吸管混匀吸管混匀适用于样品不同浓度等级稀释的混匀。适用于样品不同浓度等级稀释的混匀。旋涡振荡器混匀旋涡振荡器混匀适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物混匀。适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物混匀。电磁搅拌混匀电磁搅拌混匀适用于酸碱自动滴定、适用于酸碱自动滴定、pHpH梯度滴定等。梯度滴定等。6刻度吸管的使用刻度吸管的使用选管（大小合适）选管（大小合适）总容量等于或稍大于取液量总容量等于或稍大于取液量执管（左球右管）执管（左球右管）取液（一下一上）取液（一下一上）插入液面下插入液面下0.5cm0.5cm

7、，吸至最高刻度上方，吸至最高刻度上方1 12cm2cm调准刻度（三点一线）调准刻度（三点一线）溶液弯月面、视线和刻度线在同一水平上溶液弯月面、视线和刻度线在同一水平上放液（贴壁放液）放液（贴壁放液）需要吹的则吹出，如要求不吹的则让吸量管尖需要吹的则吹出，如要求不吹的则让吸量管尖端停靠内壁约端停靠内壁约15s15s，同时转动吸管，重复一次。，同时转动吸管，重复一次。放置（放回吸管架）放置（放回吸管架）禁止平放在实验台面上！禁止平放在实验台面上！洗涤（操作结束后）洗涤（操作结束后）吸量管操作执管姿势吸量管操作执管姿势 放液示意图放液示意图7可调式微量加样器的使用可调式微量加样器的使用选择（大小合适

8、）选择（大小合适）设置量程设置量程(动作轻缓）动作轻缓）先确定调节轮的方向，再调至大于或小于所需值一格，最后先确定调节轮的方向，再调至大于或小于所需值一格，最后调回所需值。调回所需值。装吸嘴（套牢，避免间隙）装吸嘴（套牢，避免间隙）取液（按至第一停点，缓慢吸液）取液（按至第一停点，缓慢吸液）放液（贴壁放液）放液（贴壁放液）先按至第一停点，再按至第二停点。先按至第一停点，再按至第二停点。卸吸嘴（废物缸）卸吸嘴（废物缸）将数轮调回最大值将数轮调回最大值放置（放在固定支架上，严禁平放或倒置）放置（放在固定支架上，严禁平放或倒置）8图图A A：把按钮压至第一停点，：把按钮压至第一停点，图图B B：垂直握持加样器，使吸头浸入液面下：垂直握持加样器，使吸头浸入液面下3-53-5毫米处，然后缓慢毫米处，然后缓慢 平稳地松开按钮，吸入液体。平稳地松开按钮，吸入液体。图图C C：将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜，平稳地把按钮压到：将吸头口贴到容器内壁底部并保持倾斜，平稳地把按钮压到 第一停点第一停点 。图图D D：压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴容器壁擦过。：压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴容器壁擦过。图图E E：松开按钮，按吸头弹射器除去吸头。：松开按钮，按吸头弹射器除去吸头。9南方医科大学南方医科大学生物化学与分子生物学实验教学中心生物化学与分子生物学实验教学中心