实验三血糖测定精.ppt

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1、实验三血糖测定第1页，本讲稿共11页 血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的运输形血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的运输形式。式。目前国内医院多采用目前国内医院多采用葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法和和邻甲苯胺法邻甲苯胺法测定测定血糖。前者特异性强、价廉、方法简单血糖。前者特异性强、价廉、方法简单,其正常值：空腹全血其正常值：空腹全血为为3.63.65.35.3毫摩尔毫摩尔/升（升（65659595毫克毫克/分升），血浆为分升），血浆为3.93.96.16.1毫摩尔毫摩尔/升。后者由于血中绝大部分非糖物质及抗凝剂中升。后者由于血中绝大部分非糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来，因

2、而不易出现假性过高或过低的氧化物同时被沉淀下来，因而不易出现假性过高或过低,结果较可靠结果较可靠,其正常值：空腹全血为其正常值：空腹全血为3.33.35.65.6毫摩尔毫摩尔/升升（6060100100毫克毫克/分升），血浆为分升），血浆为3.93.96.46.4毫摩尔毫摩尔/升（升（7070115115毫克毫克/分升）。分升）。第2页，本讲稿共11页本实验采用本实验采用邻甲苯胺法邻甲苯胺法测定血糖。其原理是测定血糖。其原理是葡萄糖在葡萄糖在酸性介质酸性介质中加热脱水反应生成中加热脱水反应生成5 5羟甲基羟甲基2 2呋喃甲醛，分子中的醛基呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲苯胺缩合成青色（蓝绿色）的薛

3、夫与邻甲苯胺缩合成青色（蓝绿色）的薛夫氏碱，通过比色可以定量。氏碱，通过比色可以定量。基基 本本 原原 理理第3页，本讲稿共11页 CH CH2 2OH OH（CHOHCHOH）4 4 CHO CHOHOH2CCHO O+3H2OH+HOH2CCHO ONH2CH3+HOH2CCH=ONCH3葡萄糖葡萄糖羟甲基糠醛羟甲基糠醛邻甲苯胺邻甲苯胺Schiff Schiff 碱碱第4页，本讲稿共11页操操 作作 方方 法法1、标准曲线的制作、标准曲线的制作2、血糖浓度测定、血糖浓度测定第5页，本讲稿共11页取干燥试管取干燥试管7 7支，编号后，按下表顺序加入试剂支，编号后，按下表顺序加入试剂 管号管号

4、1 12 23 34 45 5测定测定空白空白标准葡萄糖液标准葡萄糖液(ml)(ml)0.250.250.50.51.01.01.51.52.02.0 血清（血清（mlml）0.050.05蒸馏水蒸馏水(ml)(ml)1.751.751.51.51.01.00.50.5 1.951.952.02.0邻甲苯胺试剂邻甲苯胺试剂(ml)(ml)5.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.05.0 A A630630试剂试剂加毕，混匀，于沸水浴中煮沸加毕，混匀，于沸水浴中煮沸10min10min取下，流水冷却，取下，流水冷却，在在630nm630nm波长下，以空白管调零

5、，测定各管的波长下，以空白管调零，测定各管的A A值，并值，并作好记录。作好记录。第6页，本讲稿共11页标准葡萄糖应用液浓度为：标准葡萄糖应用液浓度为：5.56mmol/L5.56mmol/L 即即1mg/ml1mg/ml第7页，本讲稿共11页结果处理结果处理1、标准曲线的绘制（、标准曲线的绘制（以以1515管绘制标准曲线）管绘制标准曲线）0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 （x，y）mg0.10.40.30.20.5第8页，本讲稿共11页2、计算结果、计算结果（1）从标准曲线上读取测定管的血糖浓度，从标准曲线上读取测定管的血糖浓度，并求出并求出1L血清中葡萄糖的含量。血清中葡萄

6、糖的含量。（2）选取一管光密度与测定管接近的标准管）选取一管光密度与测定管接近的标准管 计算计算1L血清中葡萄糖的含量。结果与血清中葡萄糖的含量。结果与 标准曲线上查找的结果进行比较标准曲线上查找的结果进行比较。第9页，本讲稿共11页邻苯甲胺法测定血糖具有操作简单邻苯甲胺法测定血糖具有操作简单,特异性较高的特异性较高的优点优点,试剂成本也较低试剂成本也较低,。但该法一般在浓酸高温。但该法一般在浓酸高温条件下发生反应条件下发生反应,因此在做血糖测定时须多加注意。因此在做血糖测定时须多加注意。注注 意意 事事 项项第10页，本讲稿共11页 思思 考考 题题血糖的来源和去路有哪些？血糖的来源和去路有哪些？简述测定血糖在临床上的意义。简述测定血糖在临床上的意义。第11页，本讲稿共11页