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1、量效关系与竞争性拮抗第1页,本讲稿共16页一、实验目的一、实验目的1.观察不同剂量观察不同剂量ACh对离体回肠平滑肌的作用对离体回肠平滑肌的作用2.观察阿托品对乙酰胆碱的拮抗效应与特点,加深观察阿托品对乙酰胆碱的拮抗效应与特点,加深对激动药、拮抗药、量效关系和竞争性拮抗的理对激动药、拮抗药、量效关系和竞争性拮抗的理解解3.了解离体肠实验方法了解离体肠实验方法第2页,本讲稿共16页药物作用的量效关系曲线第3页,本讲稿共16页激动药激动药拮抗药拮抗药竞争性拮抗竞争性拮抗非竞争性拮抗非竞争性拮抗第4页,本讲稿共16页竞争性拮抗激动药浓度激动药浓度竞争性拮抗药是指拮抗药和激动药与同一受体呈可逆性结合,
2、其效应取决于两者竞争性拮抗药是指拮抗药和激动药与同一受体呈可逆性结合,其效应取决于两者的浓度与亲和力,激动药在拮抗药的作用下,量效曲线平行右移,但最大效应不的浓度与亲和力,激动药在拮抗药的作用下,量效曲线平行右移,但最大效应不变变 第5页,本讲稿共16页非竞争性拮抗激动药浓度激动药浓度非竞争性拮抗药是指拮抗药与受体以共价键结合,呈不可逆状态,如酚苄明与非竞争性拮抗药是指拮抗药与受体以共价键结合,呈不可逆状态,如酚苄明与 1受受体的结合;或者虽不是共价键,但结合后解离很慢,这两种情况均使激动药的量效体的结合;或者虽不是共价键,但结合后解离很慢,这两种情况均使激动药的量效曲线不平行右移,最大效应降
3、低曲线不平行右移,最大效应降低 第6页,本讲稿共16页二、实验原理二、实验原理 乙乙酰酰胆胆碱碱为为M胆胆碱碱受受体体激激动动药药,能能激激动动回回肠肠平平滑滑肌肌上上的的M胆胆碱碱受受体体,使使肠肠段段收收缩缩。阿阿托托品品为为胆胆碱碱受受体体拮拮抗抗药药,能能竞竞争争性性拮拮抗抗乙乙酰酰胆胆碱碱对对回回肠肠平平滑滑肌肌M胆胆碱受体的激动作用碱受体的激动作用第7页,本讲稿共16页三、实验对象三、实验对象:豚鼠豚鼠 实验器材实验器材:BL410分析系统,机械电换能器,恒温浴槽,超级恒温水浴器,通气分析系统,机械电换能器,恒温浴槽,超级恒温水浴器,通气钩,小镊子,剪刀,培养皿,小烧杯,钩,小镊子
4、,剪刀,培养皿,小烧杯,1ml注射器,台氏液注射器,台氏液药品药品:乙酰胆碱:乙酰胆碱:10-5mol/L、10-4mol/L、10-3mol/L、10-2mol/L、10-1mol/L阿托品:阿托品:10-5mol/L 第8页,本讲稿共16页四、实验方法四、实验方法 1.准准备备灌灌流流系系统统和BL-410记录系统,预设各项参数(G:50,T:DC,F:30)。第9页,本讲稿共16页2.制备豚鼠离体回肠标本制备豚鼠离体回肠标本(示教示教)3.将离体回肠连接至张力换能器上,施以将离体回肠连接至张力换能器上,施以1-2g左右张左右张 力,力,供氧供氧(12个气泡个气泡/S)4.平衡平衡1015
5、min,依次,依次加入不同的浓度乙酰胆碱加入不同的浓度乙酰胆碱 每加一药待收缩达到最高峰后,立即给予下一剂量每加一药待收缩达到最高峰后,立即给予下一剂量(递药、(递药、加药、观察,分工合作)加药、观察,分工合作)5.换液,用新鲜台氏液冲洗换液,用新鲜台氏液冲洗3遍,加入阿托品遍,加入阿托品0.3ml,重重 复复上述操作上述操作(注意保持条件前后一致)(注意保持条件前后一致)6.记录实验结果,绘制量效曲线记录实验结果,绘制量效曲线第10页,本讲稿共16页五、注意事项五、注意事项 1.备肠段时动作轻柔,不要用镊子夹肠段中部,也不要牵备肠段时动作轻柔,不要用镊子夹肠段中部,也不要牵拉组织,以免损伤。
6、冲洗时不宜采用高压,以免组织拉组织,以免损伤。冲洗时不宜采用高压,以免组织痉挛。痉挛。2.肠段及其与换能器的连线不要触及浴槽壁,以免肠段及其与换能器的连线不要触及浴槽壁,以免增加阻力。增加阻力。3.本实验属于定量观察,每次所加液量、药量本实验属于定量观察,每次所加液量、药量 必须准必须准确。确。4.不要将药直接加到回肠上。向溶液中充气时,应尽量不要将药直接加到回肠上。向溶液中充气时,应尽量减少气泡对组织的扰动。减少气泡对组织的扰动。第11页,本讲稿共16页六、实验结果第12页,本讲稿共16页不同浓度乙酰胆碱引起肠段收缩张力(g)编号初浓度(mol/L)体积(ml)终浓度(mol/L)lgC 加
7、阿托品前回肠张力 加阿托品后回肠张力110-50.9310-7-6.5210-40.310-6-6.0310-40.9310-6-5.5410-30.310-5-5.0510-30.9310-5-4.5610-20.310-4-4.0710-20.9310-4-3.5810-10.310-3-3.0第13页,本讲稿共16页绘制量效曲线绘制量效曲线以肠段收缩张力为纵坐标,药物的对数浓度为横坐标,以肠段收缩张力为纵坐标,药物的对数浓度为横坐标,将阿托品前后不同浓度乙酰胆碱引起肠收缩的量效曲将阿托品前后不同浓度乙酰胆碱引起肠收缩的量效曲线绘入同一坐标纸。线绘入同一坐标纸。第14页,本讲稿共16页实验报告内容实验目的实验原理实验对象实验器材实验步骤实验结果实验讨论实验结论第15页,本讲稿共16页思考题思考题 1 1、本次实验是怎样在体外模拟回肠的体、本次实验是怎样在体外模拟回肠的体内环境的?内环境的?2 2、你认为体外培养回肠应注意些什么?、你认为体外培养回肠应注意些什么?3 3、结合理论知识,谈谈你对本次实验设、结合理论知识,谈谈你对本次实验设计有些什么建议,理由是什么?计有些什么建议,理由是什么?第16页,本讲稿共16页
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