转基因食品及其安全性评价技术.ppt

《转基因食品及其安全性评价技术.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《转基因食品及其安全性评价技术.ppt（46页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、转基因食品及其安全性转基因食品及其安全性评价技术评价技术内内 容容一一.转基因食品概念转基因食品概念二二.转基因食品分类转基因食品分类三三.转基因作物现状转基因作物现状四四.转基因食品安全性及其评价转基因食品安全性及其评价五五.转基因食品管理现状转基因食品管理现状六六.转基因成分的检测转基因成分的检测基因基因:是一个特定的是一个特定的DNADNA片段片段 ，编码一种特定的多肽或蛋白质，编码一种特定的多肽或蛋白质，是遗传信息的功能单位是遗传信息的功能单位一般说来，从细菌到哺乳动物的全部生命有一般说来，从细菌到哺乳动物的全部生命有机体，它们的基因都是由机体，它们的基因都是由DNADNA构成的。由于

2、构成的。由于所有生物的所有生物的DNADNA的基本结构是一致的，因此，的基本结构是一致的，因此，来自两种生命形态的基因可以融为一体。来自两种生命形态的基因可以融为一体。由此可见，基因的由此可见，基因的DNADNA共性，是进行基因工共性，是进行基因工程的重要理论基础之一。程的重要理论基础之一。DNADNA分子是遗传物质和基因的载体。基因是分子是遗传物质和基因的载体。基因是细胞中所有的细胞中所有的RNARNA及蛋白质分子的及蛋白质分子的“蓝图蓝图”。一旦基因发生突变，那么由它指导合成的蛋一旦基因发生突变，那么由它指导合成的蛋白质也将随之发生变化，甚至可能导致活白质也将随之发生变化，甚至可能导致活性

3、的丧失。为了能更加准确地反映事物的性的丧失。为了能更加准确地反映事物的本质，提出本质，提出“一种基因一种多肽链一种基因一种多肽链”的假的假说。说。基因工程技术特征基因工程技术特征1.1.利用载体系统的重组利用载体系统的重组DNADNA技术；技术；2.2.利用物理、化学和生物等方法把重组利用物理、化学和生物等方法把重组DNADNA导导入有机体的技术。入有机体的技术。使产品的基因组构成发生改变并存在使产品的基因组构成发生改变并存在外源外源DNADNA，或者产品的成分中存在外源或者产品的成分中存在外源DNADNA的表达产物及其生物活性，获得基因工程的表达产物及其生物活性，获得基因工程所设计的性状和功

4、能。所设计的性状和功能。一.概念转基因食品转基因食品(genetically modified food,GMF):(genetically modified food,GMF):利用分子生物学技术利用分子生物学技术,将某些生物的一种或几将某些生物的一种或几种外源性基因转移到其他的生物细胞中去种外源性基因转移到其他的生物细胞中去,从而从而改变其遗传物质改变其遗传物质(DNA)(DNA)并有效地表达特有的性状并有效地表达特有的性状的产物。以转基因生物为原料加工成的食品就的产物。以转基因生物为原料加工成的食品就是转基因食品。是转基因食品。BT玉米的开发玉米的开发苏云氏杆菌苏云氏杆菌 产生毒害剂的基

5、因产生毒害剂的基因 除害剂基因与质粒结合除害剂基因与质粒结合 BT 玉米玉米 含转基因的幼苗含转基因的幼苗 植物细胞与重组基因植物细胞与重组基因 重组基因在细菌中重组基因在细菌中 细菌共同培养细菌共同培养 培养扩增细菌培养扩增细菌 基因重组基因重组转基因与杂交有区别转基因技术可以将基因在不同生物间转移，转基因技术可以将基因在不同生物间转移，杂交技术只能在同种和近亲种间进行。杂交技术只能在同种和近亲种间进行。转基因生物（转基因生物（transgenic organismtransgenic organism或或 genetically modified genetically modified

6、organism,GMOorganism,GMO）转基因植物（转基因植物（transgenic planttransgenic plant或或 genetically modified genetically modified plant,GMPplant,GMP）转基因作物（转基因作物（transgenic croptransgenic crop或或 genetically modified genetically modified crop,crop,GMCGMC）二二.转基因食品分类转基因食品分类(一一)按原料分类按原料分类 1.1.植物性转基因食品植物性转基因食品 2.2.动物性转基因

7、食品动物性转基因食品 3.3.微生物转基因食品微生物转基因食品 4.4.特殊转基因食品特殊转基因食品 利用利用DNADNA重组技术将多聚半乳糖醛酸酶重组技术将多聚半乳糖醛酸酶(PG)(PG)的抗的抗敏基因导入蕃茄，敏基因导入蕃茄，PGPG抗敏基因可抑制抗敏基因可抑制PGPG的产生，的产生，使蕃茄中的果胶不易分解，从而延迟了蕃茄的软使蕃茄中的果胶不易分解，从而延迟了蕃茄的软化，有利于蕃茄的运输、贮藏。化，有利于蕃茄的运输、贮藏。将大豆中编码蛋白质的基因导入水稻，从而获得将大豆中编码蛋白质的基因导入水稻，从而获得“高蛋白高蛋白”大米。大米。把表达胡萝卜素的基因植入水稻，产生高胡萝卜把表达胡萝卜素的

8、基因植入水稻，产生高胡萝卜素的素的“黄金水稻黄金水稻”如含有人生长激素基因的转基因猪生长期明显缩如含有人生长激素基因的转基因猪生长期明显缩短，且饲料利用率及瘦肉比重大幅度提高短，且饲料利用率及瘦肉比重大幅度提高 提高肉鸡和蛋鸡的抗感染能力是转基因鸡研究的提高肉鸡和蛋鸡的抗感染能力是转基因鸡研究的主要目标主要目标 随着天然鱼种的大批灭种，利用转基因技术改良随着天然鱼种的大批灭种，利用转基因技术改良食用鱼品质的研究日益显示其重要性。食用鱼品质的研究日益显示其重要性。(二二)按功能分类按功能分类1 1、增产型、增产型 转移或修饰生长分化、肥料、抗逆、抗虫害等基因达到增产效果。转移或修饰生长分化、肥料

9、、抗逆、抗虫害等基因达到增产效果。2 2、控熟型、控熟型 转移或修饰与控制成熟期有关的基因使转移或修饰与控制成熟期有关的基因使GMO成熟期延迟、提前、成熟期延迟、提前、不易腐烂不易腐烂,好贮存。好贮存。3 3、高营养型、高营养型 改造贮藏蛋白质基因改造贮藏蛋白质基因,使其表达的蛋白质具有合理的氨基酸组成。使其表达的蛋白质具有合理的氨基酸组成。4 4、保健型、保健型 转移病原体抗原基因或毒素基因至转移病原体抗原基因或毒素基因至GMO,既补充营养又起到预防既补充营养又起到预防 疫病的作用。疫病的作用。5 5、新品种型、新品种型 不同品种间的基因重组形成新品种不同品种间的基因重组形成新品种,GMO在

10、品质、口味和色香方在品质、口味和色香方 面具有新的特点。面具有新的特点。6 6、加工型：由转基因产物作原料加工制成、加工型：由转基因产物作原料加工制成,花样最为繁多。花样最为繁多。三三.转基因作物现状转基因作物现状19831983年年:英国培育出世界上第一种含有抗生素药类抗英国培育出世界上第一种含有抗生素药类抗体的基因移植烟草体的基因移植烟草 19931993年年:美国将世界第美国将世界第1 1例例GMCGMC投入市场投入市场-保鲜延熟型保鲜延熟型西红柿西红柿目前商业种植的目前商业种植的GMC:大豆、玉米、棉花、油菜、大豆、玉米、棉花、油菜、南南瓜、木瓜、马铃薯、番茄、甜菜等几十种。瓜、木瓜、

11、马铃薯、番茄、甜菜等几十种。世界世界GMC市场份额市场份额:美国孟山都（美国孟山都（MonsantoMonsanto）农产品）农产品公司占公司占8080,德国安万特公司占德国安万特公司占7 7,德国巴斯夫公司德国巴斯夫公司和瑞士先正达公司各占和瑞士先正达公司各占5 5,美国杜邦公司占美国杜邦公司占3 3。GMC在全球市场的价值1995年年 0.75亿美元亿美元1996年年 2.35亿美元亿美元1997年年 6.70亿美元亿美元2000年年 30亿美元亿美元2004年年 47.0亿美元亿美元2005年年 预计超过预计超过50亿美元亿美元 2010年年 可望增至可望增至200亿美元亿美元 全球全球

12、GMC种植情况种植情况1996-20041996-2004年年,全球全球GMCGMC种植面积从种植面积从170170万公顷发展到万公顷发展到81008100万公万公顷顷,增长超过增长超过4747倍倍,连续以约连续以约20%20%增长率持续增长。增长率持续增长。1996-20041996-2004年年,全球全球GMCGMC种植面积累积种植面积累积3.853.85亿公顷亿公顷,相当于美国相当于美国或中国土地总面积的或中国土地总面积的40%,40%,是英国土地总面积的是英国土地总面积的1515倍。倍。20042004年年,全球全球GMCGMC种植面积占全球耕地总面积种植面积占全球耕地总面积1515亿

13、公顷的亿公顷的5%5%。2003-20042003-2004年年,发展中国家发展中国家GMCGMC种植面积种植面积增长增长720720万公顷万公顷(35%),(35%),发达国家的为发达国家的为610610万公顷万公顷(13%),(13%),增长率第一次超出。增长率第一次超出。20042004年年,对除草剂有耐性的转基因大豆、玉米、油菜和棉花对除草剂有耐性的转基因大豆、玉米、油菜和棉花,占全球占全球GMCGMC种植面积种植面积8,1008,100万公顷的万公顷的72%72%。20042004年生物技术大国转基因作物种植情况年生物技术大国转基因作物种植情况排序排序国家国家主要作物主要作物面积（万

14、面积（万公顷）公顷）占全球百分占全球百分比（）比（）年增长率年增长率（）（）备注备注1美国美国玉米、大豆、油菜、棉花玉米、大豆、油菜、棉花476059112阿根廷阿根廷大豆大豆162020173加拿大加拿大玉米、大豆、油菜玉米、大豆、油菜5406234巴西巴西大豆大豆5006665中国中国棉花棉花3705326巴拉圭巴拉圭大豆大豆1202新增新增7印度印度棉花棉花5014008南非南非玉米、大豆、棉花玉米、大豆、棉花501259乌拉圭乌拉圭大豆、玉米大豆、玉米30120010澳大利亚澳大利亚棉花棉花20110011罗马尼亚罗马尼亚大豆大豆10112墨西哥墨西哥棉花、大豆棉花、大豆101新增新增

15、13西班牙西班牙玉米玉米101新增新增14菲律宾菲律宾玉米玉米101新增新增我国转基因作物种植情况我国转基因作物种植情况19971997年至今年至今,农业部批准安全评价申请环境释放农业部批准安全评价申请环境释放243243项项,生产性试验生产性试验108108项项,生产用安全证书生产用安全证书7979个。个。已进入环境释放阶段的已进入环境释放阶段的GMPGMP有有:水稻、玉米、小麦、马铃薯、河套水稻、玉米、小麦、马铃薯、河套密瓜、番木瓜、大豆、油菜、杨树、烟草、高羊茅、黑麦草。密瓜、番木瓜、大豆、油菜、杨树、烟草、高羊茅、黑麦草。已商业化的已商业化的GMCGMC有有:棉花棉花(46(46项项)

16、、线辣椒、线辣椒(1(1项项)、甜椒、甜椒(4(4项项)、矮牵牛、矮牵牛(1(1项项)、番茄、番茄(6(6项项)，共，共5858项。项。转基因棉花是我国主要的转基因棉花是我国主要的GMCGMC。中国自。中国自19991999年进行转基因棉花的商年进行转基因棉花的商业化种植之后业化种植之后,没有再批准任何一种没有再批准任何一种GMCGMC进入商业种植。进入商业种植。20042004年年1212月、月、20052005年年6 6月月,农业部先后召开专门会议讨论转基因水稻农业部先后召开专门会议讨论转基因水稻的安全性及商业化种植。今年的安全性及商业化种植。今年1111月再次召开类似专门会议月再次召开类

17、似专门会议,若议题若议题获得通过获得通过,中国可能是世界上第一个通过转基因水稻种植的国家。中国可能是世界上第一个通过转基因水稻种植的国家。19981998年起年起,我国从美国和加拿大进口了较大数量的我国从美国和加拿大进口了较大数量的GMGM粮油。粮油。20022002年以后年以后,我国进口的转基因大豆基本维持在我国进口的转基因大豆基本维持在20002000万吨左右。万吨左右。其主要用做加工原料其主要用做加工原料,生产豆油、豆腐、豆奶等制品。其中生产豆油、豆腐、豆奶等制品。其中,在在国内用转基因大豆生产的大豆色拉油比例高达约国内用转基因大豆生产的大豆色拉油比例高达约8080。目前我国对进口转基因

18、食品原料已发放的转基因生物安全证书目前我国对进口转基因食品原料已发放的转基因生物安全证书的有转基因大豆、转基因油菜、转基因棉花和转基因玉米。的有转基因大豆、转基因油菜、转基因棉花和转基因玉米。在美国在美国,已经有超过已经有超过6060的加工食品含有转基因成分的加工食品含有转基因成分,涉及食品涉及食品原料的转基因植物种类有大豆、玉米、油菜、马铃薯、番茄、原料的转基因植物种类有大豆、玉米、油菜、马铃薯、番茄、甜椒、番木瓜、西葫芦等。甜椒、番木瓜、西葫芦等。在英国在英国,与转基因有关的食品达与转基因有关的食品达70007000种种,包括婴儿食品、巧克力、包括婴儿食品、巧克力、冷冻甜品、面包、人造奶油

19、、香肠、肉类及代肉类产品等。冷冻甜品、面包、人造奶油、香肠、肉类及代肉类产品等。1 1、19891989年美国用微生物基因工程生产的色氨酸虽然年美国用微生物基因工程生产的色氨酸虽然经分析其纯度高达经分析其纯度高达99.6%99.6%，当作为营养素补充剂投，当作为营养素补充剂投放市场后，造成放市场后，造成15001500人永久性伤残和人永久性伤残和3737人死亡。人死亡。2 2、19981998年年8 8月，英国罗威特研究所发现老鼠食用转月，英国罗威特研究所发现老鼠食用转基因土豆后免疫系统受到破坏。基因土豆后免疫系统受到破坏。3 3、20002000年德国耶拿大学研究人员发现，用转基因玉年德国耶

20、拿大学研究人员发现，用转基因玉米制成饲料喂养鸡群，结果鸡肉里存在玉米的变米制成饲料喂养鸡群，结果鸡肉里存在玉米的变异基因片段。进一步研究认为，基因可能通过食异基因片段。进一步研究认为，基因可能通过食物链在不同物种之间转移。物链在不同物种之间转移。四四.GMF安全性及其评价安全性及其评价（一）（一）GMFGMF的安全性的安全性1.GMC1.GMC对生态环境的可能影响对生态环境的可能影响 具有除草剂耐性因子的转基因作物的遗传因子可能具有除草剂耐性因子的转基因作物的遗传因子可能通过授粉和种子迁移传播给野生植物。获得这些耐性后的通过授粉和种子迁移传播给野生植物。获得这些耐性后的野生植物有可能会变成对一

21、般除草剂有耐性的野生植物有可能会变成对一般除草剂有耐性的“超级超级”杂杂草。为了清除这些杂草草。为了清除这些杂草,将不得不使用更强大的，浓度更将不得不使用更强大的，浓度更大的除草剂，这必然会引起土壤板结、土质变坏、药物残大的除草剂，这必然会引起土壤板结、土质变坏、药物残留等留等,从而对生态环境造成破坏。从而对生态环境造成破坏。2.2.标记基因的传递可能引起的抗生素耐性标记基因的传递可能引起的抗生素耐性 基因工程技术中应用的标记基因通常是一类抗生素基因工程技术中应用的标记基因通常是一类抗生素基因基因,人们担心食用含有此类标记基因的食品后人们担心食用含有此类标记基因的食品后,是否对肠是否对肠道微生

22、物产生影响或者抗生素类药物产生耐药性。道微生物产生影响或者抗生素类药物产生耐药性。3.3.转基因食品引起食物过敏的可能性转基因食品引起食物过敏的可能性 转基因食品引起食物过敏的可能性是人们关注的焦点之转基因食品引起食物过敏的可能性是人们关注的焦点之一。特别是如果转基因食品转入的蛋白质是新蛋白时一。特别是如果转基因食品转入的蛋白质是新蛋白时,这些异这些异种蛋白有可能引起食物过敏。种蛋白有可能引起食物过敏。4.4.毒性方面毒性方面 许多食品原料生物本身会产生大量的毒性物质，如蛋白酶许多食品原料生物本身会产生大量的毒性物质，如蛋白酶抑制剂、溶血剂和神经毒素等，抑制剂、溶血剂和神经毒素等，GMCGMC

23、中是否有毒素以及毒素的中是否有毒素以及毒素的含量就成为争议的重要内容之一。含量就成为争议的重要内容之一。5.5.伦理方面伦理方面 许多民族都有其独特的饮食习惯和制约，某些宗教团体禁许多民族都有其独特的饮食习惯和制约，某些宗教团体禁止食用的动物基因转入他们通常食用的动物中（如将猪的基因止食用的动物基因转入他们通常食用的动物中（如将猪的基因转入绵羊中）转入绵羊中）,这可能触犯某些民族的饮食戒律这可能触犯某些民族的饮食戒律;另外将动物基另外将动物基因转入植物中可能使素食者感到困惑。因转入植物中可能使素食者感到困惑。6.6.其他其他 (二二)GMF)GMF的安全性评价的安全性评价1.1.实质等同性原则

24、实质等同性原则(GMF与传统食品比较分析与传统食品比较分析)该原则该原则19931993年由国际经济互助开发组织（年由国际经济互助开发组织（OECDOECD）提出）提出,并已被大多数国家采用。并已被大多数国家采用。该原则认为如果导入基因后产生的该原则认为如果导入基因后产生的蛋白质蛋白质经确认是安经确认是安全的全的,或者是转基因作物和原作物在或者是转基因作物和原作物在主要营养成分主要营养成分（脂肪、（脂肪、蛋白质、碳水化合物等）、蛋白质、碳水化合物等）、形态形态和是否产生和是否产生抗营养因子抗营养因子、毒性物质毒性物质、过敏性蛋白过敏性蛋白等方面没有发生特殊的变化的话，等方面没有发生特殊的变化的

25、话，则可以认为转基因作物在安全性上和原作物是同等的则可以认为转基因作物在安全性上和原作物是同等的,对对人类的影响是相似的人类的影响是相似的,则无需对它的安全性再作进一步的则无需对它的安全性再作进一步的分析。分析。评价内容及步骤评价内容及步骤根据根据“实质同等实质同等”原则细分原则细分GMFGMF的安全性评的安全性评估估(1)(1)实质完全同等的食品实质完全同等的食品(2)(2)除引入特性其他实质同等的食品除引入特性其他实质同等的食品(3)(3)非实质同等的食品非实质同等的食品这三类的安全评估的其他方式还有这三类的安全评估的其他方式还有:基因特性研究、基因特性研究、蛋白质安全性研究、蛋白质安全性

26、研究、营养研究及营养研究及 特别安全研究特别安全研究基因特性鉴定基因特性鉴定 必须在注册档案中提供如下基本数据必须在注册档案中提供如下基本数据:基因转移术的描述基因转移术的描述(微量进微量进样枪、电泳样枪、电泳),),插入插入DNADNA序列的位置和种类序列的位置和种类,插入数量插入数量,复制数复制数,插入基因的插入基因的表达水平及基因繁殖几代后的稳定性。表达水平及基因繁殖几代后的稳定性。蛋白质安全评估蛋白质安全评估 插入蛋白质的安全评估是转基因食品安全评估的一个基石插入蛋白质的安全评估是转基因食品安全评估的一个基石,它包括它包括对已存在的蛋白质的鉴定及种族确定对已存在的蛋白质的鉴定及种族确定

27、,毒性及过敏性测定。毒性及过敏性测定。营养研究（健康研究）营养研究（健康研究）主要是检测转基因食品的营养价值的变化主要是检测转基因食品的营养价值的变化,可作为与原料作物实质可作为与原料作物实质同等的一个补充化验方式。不作为亚剧毒研究。同等的一个补充化验方式。不作为亚剧毒研究。进一步安全评估研究进一步安全评估研究 对于第三类转基因作物要求比另外两种更多的测试。这些测试包对于第三类转基因作物要求比另外两种更多的测试。这些测试包括生物利用度和啮齿类动物中蛋白质的亚慢性毒性测试。括生物利用度和啮齿类动物中蛋白质的亚慢性毒性测试。2.2.综合评价综合评价 有有关关新新食食品品的的安安全全性性考考虑虑应应

28、与与那那些些存存在在着着消消费费者者健健康康危危险险因因素素的的其其他他食食品品（如如：可可能能受受到到有有毒毒金金属属、致致病病菌菌、兽兽药药和和农农药药残留等污染的食品）相同。残留等污染的食品）相同。在安全性评估时应考虑新食品的消费在安全性评估时应考虑新食品的消费者类型、人们对潜在危害的暴露程度以及者类型、人们对潜在危害的暴露程度以及与新食品加工有关的潜在危害影响。与新食品加工有关的潜在危害影响。五五.GMF.GMF管理现状管理现状1.1.国际组织国际组织 19931993年年 “实质等同实质等同”原则原则 国际经济互助开发组织国际经济互助开发组织(OECD)(OECD)提出提出 2000

29、2000年年卡塔赫纳生物安全协定书卡塔赫纳生物安全协定书,62,62个国家签署个国家签署 20012001年年生物安全议定书生物安全议定书,130,130多个国家签署多个国家签署 20032003年年生物技术食品的风险评估草案生物技术食品的风险评估草案,226,226个国家欢迎个国家欢迎 20042004年年 FAOFAO颁布颁布植物生物风险防范纲要植物生物风险防范纲要,约约130130个国家个国家 已经采纳了这个独特的转基因生物风险评估标准。已经采纳了这个独特的转基因生物风险评估标准。2.2.美国美国GMO上市须通过食品与药品管理局上市须通过食品与药品管理局(FDA)(FDA)、农业部、农业

30、部(USDA)(USDA)和环境保护局和环境保护局(EPA)3(EPA)3个部门中的个部门中的1 1个或个或1 1个以上的个以上的部门批准。部门批准。FDAFDA负责审批所有食品的安全性负责审批所有食品的安全性,并要求生产厂家保并要求生产厂家保证上市食品的安全和质量证上市食品的安全和质量,转基因品种上市前必须经过转基因品种上市前必须经过严格的检验和监督。转基因食品上市前必须经过检验并严格的检验和监督。转基因食品上市前必须经过检验并用商标注明。用商标注明。USDAUSDA和和EPAEPA负责开发农药、除草剂和转基因实验农负责开发农药、除草剂和转基因实验农作物的安全保障和实施标准。作物的安全保障和

31、实施标准。EPAEPA负责审批检验抗病虫害农作物和动物疫苗、生负责审批检验抗病虫害农作物和动物疫苗、生物技术农作物的大田实验。物技术农作物的大田实验。19921992年美国年美国FDAFDA公布了转基因作物不需由公布了转基因作物不需由FDAFDA作市场作市场前评价前评价,除非它引起新的安全性问题。除非它引起新的安全性问题。20002000年年1 1月月美国政府对转基因玉米的种植颁布限令美国政府对转基因玉米的种植颁布限令,以防止害虫对转基因玉米中毒素形成抗药性以防止害虫对转基因玉米中毒素形成抗药性。20012001年年7 7月出台了月出台了转基因食品管理草案转基因食品管理草案规定。规定。3.3.

32、欧盟欧盟欧盟法律明确向世界宣布它对转基因产品是不欢迎的欧盟法律明确向世界宣布它对转基因产品是不欢迎的,同同时，欧盟在国际上极力主张对转基因产品采取时，欧盟在国际上极力主张对转基因产品采取“预先预预先预防态度防态度”。欧盟食品工业要经政府主管部门审批。欧盟食品工业要经政府主管部门审批,管理非管理非常严格常严格,在没有得到官方授权的情况下在没有得到官方授权的情况下,转基因产品不能转基因产品不能投放到欧盟市场。投放到欧盟市场。欧洲议会欧洲议会20032003年年9 9月月2222日通过世界最严格的转基因食品立日通过世界最严格的转基因食品立法法转基因食品及饲料管理条例转基因食品及饲料管理条例和和转基因

33、生物追溯转基因生物追溯性及标识办法以及含转基因生物物质的食品及饲料产品性及标识办法以及含转基因生物物质的食品及饲料产品的追溯性管理条例的追溯性管理条例,并于并于20032003年年1010月月1818日实施。日实施。欧盟对有关欧盟对有关GMOGMO和和GMGM食品评估和审批的法规十分清晰食品评估和审批的法规十分清晰,但各但各成员国和欧盟的职责却是相互分离的。成员国和欧盟的职责却是相互分离的。4.4.其他国家其他国家日本、澳大利亚、俄罗斯、加拿大、韩国、泰国、巴日本、澳大利亚、俄罗斯、加拿大、韩国、泰国、巴西的政策基本与国际组织的相同西的政策基本与国际组织的相同,但是巴西最近宣布但是巴西最近宣布

34、在未查清转基因作物对环境的影响之前在未查清转基因作物对环境的影响之前,暂时停止种暂时停止种植转基因大豆。植转基因大豆。发展中国家迫切需要解决粮食问题发展中国家迫切需要解决粮食问题,对于高产的转基对于高产的转基因产品表示欢迎因产品表示欢迎,这些国家技术落后这些国家技术落后,没有相关的转基没有相关的转基因成分的检测条件因成分的检测条件,对于标识问题也只能处于被动地对于标识问题也只能处于被动地位位,基本是按国际组织的要求和基本是按国际组织的要求和生物安全议定书生物安全议定书要求执行。要求执行。我国对我国对GMOGMO的管理的管理19931993年年1212月国家科委月国家科委基因工程安全管理办法基因

35、工程安全管理办法19961996年年7 7月农业部月农业部农业生物基因工程安全管理实施办法农业生物基因工程安全管理实施办法20012001年年5 5月国务院月国务院农业转基因生物安全管理条例农业转基因生物安全管理条例20022002年年1 1月农业部月农业部农业转基因生物安全评价管理办法农业转基因生物安全评价管理办法、农业转基因生物进口安全管理办法农业转基因生物进口安全管理办法和和农业转基因生物农业转基因生物标识管理办法标识管理办法三个配套规章。三个配套规章。20022002年年3 3月农业部月农业部转基因农产品安全管理临时措施公告转基因农产品安全管理临时措施公告20022002年年4 4月卫

36、生部月卫生部转基因食品卫生管理办法转基因食品卫生管理办法,要求生产或进要求生产或进口转基因食品必须向卫生部提出申请。口转基因食品必须向卫生部提出申请。20042004年年5 5月月国家质量监督检验检疫总局国家质量监督检验检疫总局进出境转基因产品检进出境转基因产品检验检疫管理办法验检疫管理办法六六.转基因成分的检测转基因成分的检测主要有两种方法主要有两种方法:1.蛋白质检测方法蛋白质检测方法:以外源结构基因表达出蛋白质为目的。以外源结构基因表达出蛋白质为目的。2.DNADNA检测方法检测方法:以非转基因植物所不拥有的启动子、终止以非转基因植物所不拥有的启动子、终止 子、标记基因等为目的。子、标记

37、基因等为目的。蛋白质检测方法对含量低及深加工的转基因产品无法检测，故蛋白质检测方法对含量低及深加工的转基因产品无法检测，故DNADNA检测方法应用范围相对要广。检测方法应用范围相对要广。目前国内外对采用转基因产品为原料目前国内外对采用转基因产品为原料,经深加工或精加工的食经深加工或精加工的食品即使采用品即使采用DNADNA检测方法检测方法,也无法检出转基因成分。例如也无法检出转基因成分。例如:酱油、酱油、色拉油的制成要经过发酵、加热和分离等工序色拉油的制成要经过发酵、加热和分离等工序,导入的外源导入的外源DNADNA及其产生的蛋白质已经分解。所以迄今为止还无有效的检及其产生的蛋白质已经分解。所

38、以迄今为止还无有效的检测方法来判断是否含转基因成分测方法来判断是否含转基因成分,这在国际生物界是一个公认这在国际生物界是一个公认的难题。的难题。GMFGMF成分检测成分检测外源蛋白质的检测外源蛋白质的检测外源基因的检测外源基因的检测蛋白蛋白质印质印迹法迹法蛋白蛋白芯片芯片试纸试纸条法条法“侧流侧流”型免疫型免疫测定测定酶联酶联免疫免疫吸附吸附试验试验PCRSouthern杂交杂交基因基因芯片芯片定性定性PCRPCR实时定量实时定量荧光荧光PCRPCR法法定量竞争性定量竞争性QC-PCRQC-PCR法法PCR-ELISA法法定量定量PCRPCR反转录反转录RT-PCRRT-PCR法法其它技术其它

39、技术(一一)基因水平的检测方法基因水平的检测方法u转基因技术将从各种生物中克隆出来的基因片断插入到靶转基因技术将从各种生物中克隆出来的基因片断插入到靶向受体中时，一般要构建启动子、终止子、选择标记基因、向受体中时，一般要构建启动子、终止子、选择标记基因、报告基因等。报告基因等。u从基因水平进行转基因的检测就是要检测受体的核酸序列、从基因水平进行转基因的检测就是要检测受体的核酸序列、目的片断的整合位点、基因多态性、目的片断的含量分析目的片断的整合位点、基因多态性、目的片断的含量分析以及启动子、终止子、选择标记基因、报告基因等。以及启动子、终止子、选择标记基因、报告基因等。u导入基因较蛋白质具热稳

40、定性导入基因较蛋白质具热稳定性,加工工序影响较小加工工序影响较小,且存在且存在GMOGMO的任何部位组织。的任何部位组织。u可直接检测启动子、终止子、标记基因片断、目的基可直接检测启动子、终止子、标记基因片断、目的基因片断。因片断。u当前约当前约75%的转基因植物中使用的转基因植物中使用Ca MV35S启动子启动子,其次是胭脂碱和章鱼碱合成酶的其次是胭脂碱和章鱼碱合成酶的NOS启动子和启动子和Ocs启启动子。常用的终止子是胭脂碱合成酶的动子。常用的终止子是胭脂碱合成酶的NOS终止子和终止子和Rubisco小亚基基因的小亚基基因的3 3端区域。端区域。u所以当前对启动子和终止子的检测实际上是对所

41、以当前对启动子和终止子的检测实际上是对Ca MV35S启动子和启动子和NOS终止子的检测。终止子的检测。GMFGMF成分检测成分检测外源蛋白质的检测外源蛋白质的检测外源基因的检测外源基因的检测蛋白蛋白质印质印迹法迹法蛋白蛋白芯片芯片试纸试纸条法条法“侧流侧流”型免疫型免疫测定测定酶联酶联免疫免疫吸附吸附试验试验PCRSouthern杂交杂交基因基因芯片芯片定性定性PCRPCR实时定量实时定量荧光荧光PCRPCR法法定量竞争性定量竞争性QC-PCRQC-PCR法法PCR-ELISA法法定量定量PCRPCR反转录反转录RT-PCRRT-PCR法法其它技术其它技术(二二)外源蛋白质的检测方法外源蛋白

42、质的检测方法 1.1.蛋白质印迹法蛋白质印迹法(Western blot)(Western blot)u把从样品中提取的蛋白质用凝胶电泳分离成大把从样品中提取的蛋白质用凝胶电泳分离成大小不同的分子作为抗原小不同的分子作为抗原,并将其转移到固体支持并将其转移到固体支持物上物上,用含有放射性标记的抗体做探针与之杂交用含有放射性标记的抗体做探针与之杂交,通过放射性自显影检测外源基因的表达产物。通过放射性自显影检测外源基因的表达产物。u灵敏度为灵敏度为1-5ng1-5ng2.2.酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(ELISA)(ELISA)u复杂基质对它的准确性和精确度有干扰复杂基质对它的准确性和精确度

43、有干扰.u只适合未加工的原材料的检测。只适合未加工的原材料的检测。3.“3.“侧流侧流”型免疫测定型免疫测定(Lateral Flow)u该法与该法与ELISAELISA相似相似.操作简单操作简单,能用于野外测试。能用于野外测试。u目标蛋白一般是水溶的且抗体具有高度专一性目标蛋白一般是水溶的且抗体具有高度专一性,样品仅需粗样品仅需粗提便达到测试要求提便达到测试要求,与与DNADNA测定比测定比,特性蛋白分析的样品处理特性蛋白分析的样品处理简单。简单。u因为抗体只识别没有变性的蛋白因为抗体只识别没有变性的蛋白,免疫蛋白实验通常仅限于免疫蛋白实验通常仅限于对植物叶、种子的分析。对植物叶、种子的分析

44、。u在外源基因并不表达蛋白情况下在外源基因并不表达蛋白情况下,无法对转基因食品进行免无法对转基因食品进行免疫学蛋白测定疫学蛋白测定,只能采用转基因只能采用转基因DNADNA的测定。的测定。4.4.试纸条法试纸条法(Lateral Flow Strip)(Lateral Flow Strip)u此法与此法与ELISAELISA相似。是将特异的抗体交联到试纸相似。是将特异的抗体交联到试纸条上和有颜色的物质上条上和有颜色的物质上,当纸上抗体和特异抗原当纸上抗体和特异抗原结合后结合后,再和带有颜色的特异抗体进行反应再和带有颜色的特异抗体进行反应,就形就形成了带有颜色的三明治机构成了带有颜色的三明治机构

45、,并且固定在试纸条并且固定在试纸条上上,如果没有抗原如果没有抗原,则没有颜色。则没有颜色。u此法操作相对简单。目前市场上也出现了一些此此法操作相对简单。目前市场上也出现了一些此类测试的试剂盒。类测试的试剂盒。5.5.蛋白芯片蛋白芯片u此法原理和操作过程与基因芯片是类似的此法原理和操作过程与基因芯片是类似的,只只是其原理是利用抗原抗体的特异性结合而不是是其原理是利用抗原抗体的特异性结合而不是碱基对的互补杂交。碱基对的互补杂交。u此方法现在仅原理上可以此方法现在仅原理上可以,实际操作过程中还实际操作过程中还有一定的困难有一定的困难,如特异外源蛋白的获得等。如特异外源蛋白的获得等。外源蛋白质检测方法

46、外源蛋白质检测方法小结小结优势优势:除蛋白芯片法外。快速除蛋白芯片法外。快速,具有一定的灵敏度具有一定的灵敏度,也能进行半定量也能进行半定量,尤其是试纸条法尤其是试纸条法,不需特殊仪器设备不需特殊仪器设备,适用于现场检验或初筛。适用于现场检验或初筛。局限性局限性:1.1.由于抗原抗体反应的专一性由于抗原抗体反应的专一性,每种转基因产品都要开发和建立每种转基因产品都要开发和建立专门的检测试剂和方法专门的检测试剂和方法,而转基因产品种类繁多而转基因产品种类繁多,要建立所有转要建立所有转基因产品的蛋白质检测法工作量很大。基因产品的蛋白质检测法工作量很大。2.2.对于加工过的转基因食品对于加工过的转基因食品,其蛋白质很容易被破坏其蛋白质很容易被破坏,从而影响检从而影响检测结果的准确性。测结果的准确性。3.3.有些插入基因还具有表达部位特异性有些插入基因还具有表达部位特异性,甚至有的插入基因根本甚至有的插入基因根本不表达或表达量很低。这些都会影响检测结果。不表达或表达量很低。这些都会影响检测结果。