菊花组织培养自己.pptx

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1、专题专题3 3植物组织培养技术植物组织培养技术高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质遗传物质已分化的植物细胞，仍具有全能性已分化的植物细胞，仍具有全能性实实例例受精卵受精卵 生殖细胞生殖细胞 体细胞体细胞全全能性的比较能性的比较:植物细植物细胞胞动物细胞动物细胞可分裂的细胞可分裂的细胞不可分裂的细胞不可分裂的细胞（3 3）植物组织培养）植物组织培养细胞离体细胞离体必要条件：必要条件：

2、一定的营养物质、激素和其他外一定的营养物质、激素和其他外界条界条件（如温度、光照时间、件（如温度、光照时间、PH)PH)原理原理:细胞的全能性细胞的全能性外植体外植体：相关概念相关概念:脱分化：脱分化：再分化：再分化：愈伤组织愈伤组织:细胞排列疏松而无规则细胞排列疏松而无规则,是高度液泡是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞化的、成无定形状态的薄壁细胞2 2、影响植物组织培养、影响植物组织培养的因的因素素（1 1）植物材料的选择植物材料的选择（2 2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊件的要求相对特殊，需配置不同的培养基，需配置不同的培养基

3、讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2 2中微生物培养基的配方相比，中微生物培养基的配方相比，MSMS培养基的配方培养基的配方有哪些明显的不同？有哪些明显的不同？答：答：微量元素和大量元素提供微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必植物细胞生活所必需的无机盐；需的无机盐；蔗糖蔗糖提供碳源，同时能够维持培养提供碳源，同时能够维持培养基的渗透压；基的渗透压；甘氨酸、维生素甘氨酸、维生素等物质主要是为了等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。后所产生的特殊营养需求。微生物

4、培养基微生物培养基以以有机营养有机营养为主。与微生物的培养为主。与微生物的培养不同，不同，MSMS培养基培养基则需提供则需提供大量无机营养大量无机营养，无机盐，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。两大类。（3 3）植物激素的影响）植物激素的影响（4 4）pHpH、温度、光照、温度、光照3 3、植物组织培养过程、植物组织培养过程:离离离离体体体体组组组组织织织织或或或或细细细细胞胞胞胞植植植植物物物物体体体体脱分化脱分化脱分化脱分化细胞分细胞分细胞分细胞分裂素裂素裂素裂素生长素生长素生长素生长素愈愈愈愈伤伤伤伤组组组组织织织织芽芽芽芽

5、根根根根细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 生长素生长素生长素生长素细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 生长素生长素生长素生长素再分化再分化再分化再分化植物细胞培养植物细胞培养植物细胞培养植物细胞培养不需要光不需要光不需要光不需要光需要光需要光需要光需要光1 1、培育无病毒植株、培育无病毒植株2 2、培养紫草愈伤组织培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）4 4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法4 4、植物组织培养的应用：植物组织培养的应用：3 3、诱

6、导离体的植物组织形成具有生根发芽能力诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题或发芽率低等问题人工种子人工种子同常规的无性繁殖方法相比，组织培养快速繁殖法主要具有以下优点：（1 1）快速。）快速。采用常规的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生产几株或几十株，但用组织培养的方法则每年可以繁殖出几万甚至数百万的小植株。（2 2）周年生产。）周年生产。花卉组织培养快速繁殖是在实验室中进行，因条件可控，所以不受季节限制，可以全年

7、进行连续生产。而常规的无性繁殖则受季节限制，只能在花卉生长季节进行繁殖。（3 3）经济效益高。）经济效益高。花卉组织培养快速繁殖所需要的空间小，在一个200平方米的培养室内一年可生产试管苗上百万株。如按每株1元计算，每年产值上百万元。（4 4）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。）以组织培养繁殖的种苗与母株有著相同的遗传基因。所以使用这项技术可让优良的品种不断地延续。组织培养与常规繁殖相比优点众多组织培养与常规繁殖相比优点众多流流程：程：1、制备、制备MS固体培养基固体培养基2、外植体的消毒、外植体的消毒3、接种、接种4、培养、培养5、移栽、移栽6、栽培、栽培思考：你打算做几组重复？

8、你打算设置对照实思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？验吗？答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。培培养养1 1、愈伤组织的培养、愈伤组织的培养从接种外植体到出现愈伤组织需经过从接种外植体到出现愈伤组织需经过2 2周时间。周时间。2 2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白周之内可以看到外植体

9、上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长的更快。伤组织长的更快。2 2周后，培养基成分接近耗尽，周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养必须更换培养基，进行继代培养继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为一代为

10、20d20d。如果延长时间，培养基中营养物质。如果延长时间，培养基中营养物质减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为如果愈伤组织长到直径为1 11.5cm1.5cm时，就可以时，就可以进行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养进行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养2 2、愈伤组织的继代培养、愈伤组织的继代培养在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色绿色3 3、试管苗的培养、试管苗的培养当愈伤组织

11、长到一定大小后，可以更换培养基，当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的进行试管苗的见光培养见光培养珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培透性好，适合栽培本课题内容小结本课题内容小结菊花菊花组织组织培养培养基础知识基础知识实验操作实验操作植物体的植物体的组织培养组织培养影响组织培影响组织培养的因素养的因素细胞分化细胞分化细胞全能性细胞全能性组织培养过程组织培养过程营养营养激素激素环境条件环境条件MS固体培养基制备固体培养基制备外植体消毒外植体消毒接种接种培养培养移栽移栽栽培栽培21.下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：

12、练习练习1 1、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：（1 1）表示表示_，它能被培养成为，它能被培养成为的根本原因的根本原因是是_。（2 2）表示表示_，它与，它与相比分化程度相比分化程度_，全，全能性能性_._.（3 3）若想制成人工种子，应选用）若想制成人工种子，应选用_。（4 4）若）若是花药，则是花药，则是是_，继续对其使用，继续对其使用_处理可获得处理可获得_正常植株，该过程称为正常植株，该过程称为_。（5 5）若）若是胡萝卜根尖细胞，则培养成是胡萝卜根尖细胞，则培养成的叶片的颜色为的叶片的颜色为_，这说明，这说明_。（6 6）若利用此项

13、技术制造治疗烫伤、割伤的药物）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物紫草素，培紫草素，培养将进行到养将进行到_。脱分化再分化答案：（答案：（1 1）离体的植物组织或器官）离体的植物组织或器官 植物细胞具有全能性植物细胞具有全能性 （2 2）愈伤组织愈伤组织 低低 高高 （3 3）（4 4）单倍体植株）单倍体植株 秋水仙素秋水仙素 纯合纯合体体 单倍体育种单倍体育种 （5 5）绿色）绿色 含有表达叶绿体的基因含有表达叶绿体的基因 （6 6）练习练习2 2、基因型为基因型为AaBbAaBb的水稻（含的水稻（含2424条染色体）的花药通过无菌条染色体）的花药通过无菌操作接入试管后，在一定条件下形成试

14、管苗，问：操作接入试管后，在一定条件下形成试管苗，问：（1 1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，愈）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，愈伤组织形成过程中，必须从培养基中获得伤组织形成过程中，必须从培养基中获得_等营养物等营养物质。质。（2 2）要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有）要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有_和和_两类激素。两类激素。（3 3）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶和）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照，其原因是茎。这一过程必须给予光照，其原因是_能利用光能能利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。制造有机物，供试管苗生长发育。（4 4）试管苗的细胞核中含）试管苗的细胞核中含_条脱氧核糖核苷酸链。条脱氧核糖核苷酸链。（5 5）培育成的试管苗可能出现的基因型有）培育成的试管苗可能出现的基因型有_。答案：（答案：（1 1）水、无机盐、维生素和小分子有机物）水、无机盐、维生素和小分子有机物 （2 2）细胞分裂）细胞分裂素素 植物生长素植物生长素 （3 3）叶绿体）叶绿体 （4 4）24 24 （5 5）ABAB、aBaB、AbAb、abab