基因工程学时优秀PPT.ppt
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1、基因工程学时第1页,本讲稿共26页基因工程概念:基因工程概念:应用人工方法把生物的遗传物质(应用人工方法把生物的遗传物质(DNADNA)分离出来,在)分离出来,在体外进行切割、拼接和重组。然后将重组的体外进行切割、拼接和重组。然后将重组的DNADNA导入某种宿主导入某种宿主细胞或个体,从而改变它们的遗传品性;或者使新的遗传信细胞或个体,从而改变它们的遗传品性;或者使新的遗传信息在新的宿主细胞或个体中大量表达,以获得基因产物(多息在新的宿主细胞或个体中大量表达,以获得基因产物(多肽或蛋白质)。肽或蛋白质)。第2页,本讲稿共26页2基因工程技术的一般步骤基因工程技术的一般步骤第3页,本讲稿共26页
2、3n第一节第一节 基因工程理论的研究基础基因工程理论的研究基础n第二节第二节 基因工程基本技术路线基因工程基本技术路线n第三节第三节 常用的工具酶和载体常用的工具酶和载体n第四节第四节 目的基因片段的获取目的基因片段的获取n第五节第五节 目的基因导入受体细胞目的基因导入受体细胞n第六节第六节 克隆子的筛选和鉴定克隆子的筛选和鉴定第4页,本讲稿共26页4第一节第一节 基因工程理论的研究基础基因工程理论的研究基础染色体是遗传物质的载体。染色体是遗传物质的载体。“基因基因”一词的创立:一词的创立:19091909年,丹麦遗传学家约年,丹麦遗传学家约翰逊提出了翰逊提出了“基因基因”(genegene)
3、一词。)一词。“基因型基因型”与与“表现型表现型”术语,初步阐明基因与性状的关系。术语,初步阐明基因与性状的关系。不过此时的基因仍是一个未经证实,仅靠逻辑推不过此时的基因仍是一个未经证实,仅靠逻辑推理得出的概念。理得出的概念。第5页,本讲稿共26页5基因结构示意图基因结构示意图链链5链链3上游上游 3 5第6页,本讲稿共26页6基因工程研究的理论依据:基因工程研究的理论依据:n不同基因具有相同的物质基础不同基因具有相同的物质基础n基因是可以切割的基因是可以切割的n基因是可以转移的基因是可以转移的n多肽与基因之间存在对应关系多肽与基因之间存在对应关系n遗传密码是通用的遗传密码是通用的n基因可以通
4、过复制把遗传信息传递给下一代基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代第7页,本讲稿共26页7第二节第二节 基因工程的一般步骤基因工程的一般步骤生物材料生物材料生物材料生物材料RNARNARNARNADNADNADNADNAmRNAmRNAmRNAmRNAcDNAcDNAcDNAcDNA文库文库文库文库基因组文库基因组文库基因组文库基因组文库人工合成人工合成人工合成人工合成目的基因目的基因目的基因目的基因克隆载体克隆载体克隆载体克隆载体重组重组重组重组DNADNADNADNA受体细胞受体细胞受体细胞受体细胞克隆子克隆子克隆子克隆子转基因生物转基因生物转基因生物转基因生物第8页,本讲稿共26页8第三
5、节第三节 常常用用的工具酶和载体的工具酶和载体 3.1 3.1 工具酶工具酶(一)限制性核酸内切酶:(一)限制性核酸内切酶:(二)二)DNADNA连接酶:连接酶:(三)(三)DNADNA片段末端修饰酶:片段末端修饰酶:(四四)DNA)DNA聚合酶聚合酶第9页,本讲稿共26页9(一一)限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(Restriction endonucleaseRestriction endonuclease)(1)限制性核酸内切酶定义限制性核酸内切酶定义一类以环形或线形双链一类以环形或线形双链DNADNA为底物,能识别为底物,能识别DNADNA中特定核中特定核苷酸序列,并在合适反应条件下使
6、每条链的一个磷酸二苷酸序列,并在合适反应条件下使每条链的一个磷酸二酯键断开,产生具有酯键断开,产生具有33OHOH和和55P P基团基团DNADNA片段的内片段的内脱氧核苷酸酶。脱氧核苷酸酶。第10页,本讲稿共26页10 (2 2)限制性核酸内切酶种类)限制性核酸内切酶种类I I型酶:它们在识别位点很远的地方任意切割型酶:它们在识别位点很远的地方任意切割DNADNA链链 IIII型酶:在其识别位点之中或临近的确定位点特异地切开型酶:在其识别位点之中或临近的确定位点特异地切开DNADNA链。链。它们产生确定的限制片段和跑胶条带它们产生确定的限制片段和跑胶条带 IIIIII型酶:它们在识别位点之外
7、切开型酶:它们在识别位点之外切开DNADNA链,并且要求识别位点链,并且要求识别位点是反向重复序列;它们很少能产生完全切割的片段,因而不是反向重复序列;它们很少能产生完全切割的片段,因而不具备实用价值,也没有人将其商业化。具备实用价值,也没有人将其商业化。第11页,本讲稿共26页11根据分离此酶微生物的学名,一般取根据分离此酶微生物的学名,一般取3 3个字母。个字母。第一个字母大写第一个字母大写 该微生物属名前的第一个字母该微生物属名前的第一个字母第二、三个字母小写第二、三个字母小写 该微生物种名前的该微生物种名前的2 2个字母个字母第四个字母大写第四个字母大写 有变种或品系的第一个字母有变种
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