常见的肿瘤标记物临床应用与研究演示教学.ppt

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1、常见的肿瘤标记物临床应用与研究主要内容主要内容l概述概述 肿瘤标志物定义及发展史肿瘤标志物定义及发展史l肿瘤标记物评价指标及肿瘤标记物评价指标及分类及意义分类及意义人体癌症地图人体癌症地图在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞合在肿瘤发生和增殖过程中，由肿瘤细胞合 成、释放、或者是宿主对肿瘤反应产生的成、释放、或者是宿主对肿瘤反应产生的 一类生化物质一类生化物质在血液、体液及组织中肿瘤标志物的定量在血液、体液及组织中肿瘤标志物的定量 或定性检测可以作为肿瘤筛查（仅或定性检测可以作为肿瘤筛查（仅AFPAFP与与 PSAPSA用于高危人群）、鉴别诊断、用于高危人群）、鉴别诊断、治疗后治疗后 病情监测及

2、预后判断的标志与依据病情监测及预后判断的标志与依据 肿瘤标志物肿瘤标志物 【tumor markers，TM】肿瘤标志物发展概况肿瘤标志物发展概况1978年 HerbermanHerberman在美国国立癌症研究所（NCI）召开的人类肿瘤免疫诊断会上提出的1979年确认并开始使用 1845 Bence-Jones 本周蛋白本周蛋白1930 Zondek HCG1959 Markert 同工酶同工酶1963 Abelev AFP1965 Gold&Freeman CEA1969 Hubner&Todaro 癌基因癌基因1975 Kohler&Milstein 单克隆抗体单克隆抗体1978 Her

3、berman 提出肿瘤标志物概念提出肿瘤标志物概念1979 英国第英国第7届肿瘤发生生物学和医学会议届肿瘤发生生物学和医学会议 TM被确认应用临床被确认应用临床1980 Koprowski CA19-91981 Bast et al CA1251981 Colcher et al CA72-41984 Kufe et al CA15-3.肿瘤标记物发展史肿瘤标记物发展史第一阶段，1845年1928年，发现本周蛋白第二阶段，1929年1962年，发现一些激素、酶、同工酶和蛋白在肿瘤发生时异常，如：异位激素、促性腺激素、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶第三阶段，1963年1975年，发现了一些胚胎蛋白性标记

4、物，AFP、CEA第四阶段，1976年至今，单克隆抗体技术的建立，大量的肿瘤标记物涌现出来，如CA15-3、CA125、CA19-9等肿瘤标志物开发的肿瘤标志物开发的5 个阶段个阶段1.临床前实验室研究阶段2.临床验证阶段3.以回顾性研究验证标志物是否可以做为一种筛检指标并确定其诊断标准4.以前瞻性研究来进一步验证其对疾病的筛检效果确定假阳性率5.设计随机对照试验来评价这种筛检在人群中应用的价值评价肿瘤标记物的指标评价肿瘤标记物的指标这些指标的概念及含义这些指标的概念及含义敏感性(sensitivity)即某种TM 检测肿瘤患者时的阳性率特异性(specificity)某种TM 在检测非肿瘤患

5、者(包括正常人)时阴性率阳性预测价值(positive predictive value）指TM 阳性者中肿瘤患者的百分比阴性预测价值(negative predictive value)指TM阴性的人中非肿瘤患者的百分比理想的理想的TM 特异性高，对肿瘤与非肿瘤鉴别的准确性可达100%。敏感性高，能在极早期发现肿瘤，不漏诊。在体液中的浓度应与瘤体大小、临床分期密切相关，并可据此判断预后。半衰期短，可根据其水平的升降监测治疗效果及肿瘤是否复发或转移。肿瘤标记物的浓度和肿瘤转移、恶性程度相关，可通过定量或定性检测而协助肿瘤的分期和预后的判断；存在于体液特别是血液中易于检测。肿瘤标记物的分类肿瘤标

6、记物的分类 由于肿瘤标记物的来源来源和性质性质非常复杂，至今尚未有一个统一的分类方法。目前的分类方法有两种：一是按肿瘤标记物的来源二是按肿瘤标记物本身的化学性质和免疫学特性。按肿瘤标记物的来源分类按肿瘤标记物的来源分类肿瘤的特异性标记物，指仅有某一种肿瘤所产生的特异性物质。肿瘤辅助标记物，在一类组织类型相似而性质不同的肿瘤发生时，其水平都有升高。按肿瘤标记物本身的性质分类按肿瘤标记物本身的性质分类一、胚胎抗原一、胚胎抗原甲胎蛋白（甲胎蛋白（-Fetoprotein，AFP）癌胚抗原（癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）癌胚铁蛋白 胰癌胚抗原-癌胚抗原 生化特性：

7、生化特性：糖蛋白，糖蛋白，4%糖，电泳糖，电泳-1-迁移率迁移率分子量：分子量：70，000发生部位：发生部位：卵黄囊、胚胎肝卵黄囊、胚胎肝参考值范围：参考值范围：15ng/ml临床应用：临床应用：发现原发性肝细胞癌发现原发性肝细胞癌,监测治疗效果监测治疗效果;用用 于诊断生殖细胞肿瘤于诊断生殖细胞肿瘤影响因素：影响因素：肝炎疾病可使肝炎疾病可使AFP水平短暂升高水平短暂升高;AFP可通过胎盘可通过胎盘,妊娠妊娠3236周可达高峰；羊水中周可达高峰；羊水中AFP浓度与胎儿身长与孕周呈负相关（其浓度与胎儿身长与孕周呈负相关（其95%参考上限参考上限5500200ng/ml，2441孕周），于正常

8、提示胎儿畸形、死胎、无脑儿和开孕周），于正常提示胎儿畸形、死胎、无脑儿和开放性神经缺损等放性神经缺损等甲胎蛋白甲胎蛋白【AFP】肝癌细胞AFP+HCC患者外周血AFP mRNA RT-PCR（反转录）产物电泳图谱AFP升高的因素升高的因素生理条件下，AFP在卵黄囊的内胚层细胞和胚肝、新生儿肝细胞中高度表达，在胃肠道粘膜上皮细胞中也有见表达。病理状况下，见于正常成年个体的肝细胞被破坏后的再生（急、慢性肝炎，重症肝炎恢复期，肝硬化）、先天性胆管闭塞、畸形胎儿（无脑儿、脊柱裂等）以及原发性肝细胞肝癌、畸胎瘤或部分胃肠道肿瘤 AFP升高诊断价值升高诊断价值1、诊断肝癌、诊断肝癌在我国6070的肝癌病人

9、存在AFP高于正常值。正常人血清AFP值为1030g/L，凡AFP500g/L持续1个月或AFP200g/L持续2个月，应高度怀疑肝癌，同时应有医学影像学的证据参与诊断；低浓度（50200g/L）持续时间超过2个月的患者，应视为肝癌的高危人群。当谷丙转氨酶（ALT）正常，用AFP来诊断肝癌，可取性可达100。在进行肝癌诊断时，应排除由妊娠、活动性肝炎、生殖腺胚胎癌、继发性肝癌和少数消化道肿瘤等引起的AFP升高，通常由非原发性肝癌引起的AFP升高，一般都不会高于400g/L。3.65.2的胆管上皮癌、84以上的肝母细胞癌和70左右的生殖性畸胎瘤及较少比例的胰腺癌、肺癌、肾癌和白血病患者也可出现A

10、FP低浓度的异常升高。100 80 60 40 20(%)959127142293900 15 15100 1001000 100010,000 10,000100,000原发性肝细胞癌原发性肝细胞癌肝转移癌肝转移癌AFP(ng/ml)g/ml)原发性肝细胞癌原发性肝细胞癌和其他恶性肿瘤肝转移癌中和其他恶性肿瘤肝转移癌中AFP表达状况表达状况参考值范围：参考值范围：15ng g/ml巨型快多结节型介入介入缺缺 点点对原发性肝癌的敏感性只有70左右对转移性肝癌的诊断效果就更差对AFP指标阴性，临床可疑的患者应结合其他检查资料或多项指标联合检测，如同时检测-GT-、AFU、ALP等，以期优势互补，

11、减少漏诊 2、疗效观察和预后的评估、疗效观察和预后的评估 若AFP及胆红素同时明显升高，病人存活期很短。原发性肝癌在治疗过程中，如AFP含量保持在术后水平，示病情稳定；下降示病情好转，持续不降说明疗效不佳。3、良性病变中的、良性病变中的AFP升高升高 升高一般是散在的和暂时的，肝炎病人，10升高，水平50g/L肝硬化病人，30升高，水平100 kU/L 时，肯定有转移，敏感性高于CEA、TPA。80的胰腺癌、71的肺癌、68的乳腺癌、64的卵巢癌、63的直肠癌、28的肝癌中也可见到CA15-3的升高5.5的正常人、一些良性肝病和良性乳腺病（16）也可见有 CA15-3的升高 CA15-3生化特

12、性：生化特性：糖脂糖脂,Lewis()血型决定基半抗原血型决定基半抗原分子量：分子量：抗原抗原:36,000;粘蛋白粘蛋白:106D发生部位：发生部位：各种肿瘤各种肿瘤,在胎儿胃肠道上皮细胞在胎儿胃肠道上皮细胞,许多许多 粘膜细胞粘膜细胞参考值范围：参考值范围：37U/ml临床应用：临床应用：监测胰腺癌疗效监测胰腺癌疗效影响因素：影响因素：结直肠结直肠TM的第二选择的第二选择糖类抗原糖类抗原19-9【CA19-9】是是1981年由年由Koprowski从大肠腺癌细胞系和从大肠腺癌细胞系和免疫鼠杂交瘤产物分离而成免疫鼠杂交瘤产物分离而成CA19-9生化特性：生化特性：糖蛋白糖蛋白,以卵巢癌细胞系

13、免疫所获以卵巢癌细胞系免疫所获 单克隆抗体所证实单克隆抗体所证实分子量：分子量：200,000发生部位：发生部位：卵巢癌卵巢癌(膜结合物膜结合物),胎儿和成人支气胎儿和成人支气 管正常上皮细胞管正常上皮细胞参考值范围：参考值范围：35U/ml (65U/ml)临床应用：临床应用：监测卵巢癌病程及疗效，透明细胞癌，子宫内膜癌、输卵监测卵巢癌病程及疗效，透明细胞癌，子宫内膜癌、输卵 管癌及未分化卵巢癌明显升高管癌及未分化卵巢癌明显升高影响因素：影响因素：来源于体腔上皮细胞衍生物的分化抗原来源于体腔上皮细胞衍生物的分化抗原(Mller管上皮管上皮),特特 异性低；血清浓度轻微升高正常妇女，以及良性卵

14、巢疾患，异性低；血清浓度轻微升高正常妇女，以及良性卵巢疾患，怀孕前怀孕前3个月、行经期、肝硬化、子宫纤维变性、急性输卵个月、行经期、肝硬化、子宫纤维变性、急性输卵 管炎、胸膜炎和心包感染等也稍高。管炎、胸膜炎和心包感染等也稍高。糖类抗原糖类抗原125【CA125】1981年由年由Bast发现的由鼠抗人乳头状囊性卵巢上皮细胞系发现的由鼠抗人乳头状囊性卵巢上皮细胞系OC125制备而成制备而成CA125生化特性：生化特性：糖蛋白糖蛋白,即由两个单克隆抗体所识别的即由两个单克隆抗体所识别的 TAG72:1:CC49,2:B72-3分子量：分子量：400,000发生部位：发生部位：上皮细胞上皮细胞参考值

15、范围：参考值范围：3U/ml临床应用：临床应用：胃癌胃癌,卵巢粘液癌卵巢粘液癌影响因素影响因素:与与CEA联合检测胃癌联合检测胃癌,卵巢癌的卵巢癌的 第二选择标志物第二选择标志物癌抗原癌抗原72-4 【CA72-4】1989年由年由Gero首先测定首先测定糖类抗原糖类抗原242【CA242】CA242是一种唾液酸化的新型粘蛋白类糖类肿瘤抗原是一种唾液酸化的新型粘蛋白类糖类肿瘤抗原.肺鳞癌患者血清肺鳞癌患者血清CA242水平显著低于非鳞癌水平显著低于非鳞癌(腺癌和大腺癌和大细胞肺癌细胞肺癌)患者，发生远处转移者的患者，发生远处转移者的CA242浓度高于未浓度高于未转移者，且转移者，且期浓度逐渐增

16、加。期浓度逐渐增加。CA242可作为胰腺癌和结肠癌较好可作为胰腺癌和结肠癌较好TM，其灵敏度与，其灵敏度与CA19-9相仿，但特异性、诊断效率则优于相仿，但特异性、诊断效率则优于CA19-9参考值：参考值：25U/ml糖类抗原糖类抗原50 【CA50】生化特性：生化特性：糖类抗原糖类抗原CA50是一种以唾液酸酯和唾液酸糖蛋白为主是一种以唾液酸酯和唾液酸糖蛋白为主 的肿瘤标志物的肿瘤标志物参考范围：参考范围：23U/ml临床意义：临床意义：糖类抗原糖类抗原CA50是一种非特异性的广谱肿瘤标志物，与是一种非特异性的广谱肿瘤标志物，与癌抗原癌抗原19-9有一定的交叉抗原性，主要用于胰腺癌、结肠直肠有

17、一定的交叉抗原性，主要用于胰腺癌、结肠直肠癌、胃癌的辅助诊断，其中胰腺癌病人增高最明显。增高：见于癌、胃癌的辅助诊断，其中胰腺癌病人增高最明显。增高：见于胰腺癌（阳性率可达胰腺癌（阳性率可达87）、结肠直肠癌、胃癌、肺癌。肝癌。）、结肠直肠癌、胃癌、肺癌。肝癌。卵巢癌、乳腺癌等恶性肿瘤；溃疡性结肠炎、肝硬化、黑色素瘤、卵巢癌、乳腺癌等恶性肿瘤；溃疡性结肠炎、肝硬化、黑色素瘤、淋巴瘤、自身免疫性疾病等也增高淋巴瘤、自身免疫性疾病等也增高CA242、CA50和CA19-9三者的作用十分相近相关系数在0.810.95综合比较起来，CA19-9的敏感性和特异性要更好一些，因而更为常用 四、酶类标记物

18、肿瘤发生时，机体酶的活性常会发生较大的变化，这是因为：肿瘤细胞或组织本身诱导其它细胞或组织产生异常含量的酶肿瘤细胞代谢旺盛，细胞通透性增加，使得肿瘤细胞内的酶进入血液肿瘤使得某些器官功能出现障碍，从而导致各种酶的灭活及排泄障碍肿瘤组织压迫某些空腔而使得某些通过这些空腔排出的酶返流而进入血液同工酶的分辩和检测胚胎型同工酶，某些组织在肿瘤状态时，使酶的同工酶谱返祖为胚胎时期的未分化状态，而分泌出大量的胚胎时期的同工酶，这种变化往往与肿瘤的恶性程度呈正比胎盘型同工酶，有些肿瘤组织会分泌出某些原属胎盘阶段的同工酶，目前已知的胎盘型同工酶已达20余种异位同工酶，是指某些肿瘤组织改变了自身的分泌特性，而去

19、分泌表达在其它成年组织上的同工酶。酶类标记物有如下特点 酶类广泛存在特异性不高敏感性较高，但其低特异性限制了酶类标记物的应用同工酶分析的应用提高了酶类标记物的敏感性和特异性目前临床上主要测定酶的活性，酶的活性可受多种因素的影响和干扰，稳定性较差，有不少学者建议以测定酶的质量来代替测定酶的活性生化特性：生化特性：单链糖蛋白，前列腺分泌产物单链糖蛋白，前列腺分泌产物分子量：分子量：36，000发生部位：发生部位：前列腺分泌腺管前列腺分泌腺管参考值范围：参考值范围：3.7ng/ml临床应用：临床应用：监测前列腺癌监测前列腺癌影响因素：影响因素：具有组织特异性，但不是肿瘤所特异具有组织特异性，但不是肿

20、瘤所特异 的，注意：应在的，注意：应在直肠癌指诊前取血直肠癌指诊前取血，前列腺癌患者多高于前列腺癌患者多高于10ng/ml前列腺特异抗原前列腺特异抗原 【t-PSA】PCR及重叠延伸产物的琼脂糖凝胶电泳 构建抗前列腺特异抗原(PSA)单链抗体（scFv）/人羧肽酶A（hCPA）融合 基因 总PSA（t-PSA）中80%以结合形式存在，称复合PSA（c-PSA）；20%以游离形式存在，称游离PSA（f-PSA）；t-PSA及f-PSA升高，而f-PSA/t-PSA比值降低，提示前列腺癌当总PSA在3.010.0ng/ml时，f-PSA/t-PSA比值低于0.190.10时，前列腺癌的可能性较大血

21、清中总PSA（t-PSA）包括两种较少的是游离型PSA（f-PSA），半衰期0.751.2小时大量存在的是复合型PSA（c-PSA），半衰期约23天，前列腺癌成功治疗后，高浓度的PSA降到正常值约需23周。PSA在前列腺癌各期的浓度范围前列腺肥大10.028.97g/L；前列腺癌，A期9.398.09g/L、B期17.458.83g/L、C期55.1451.65g/L、D期118.9250g/L。一些分化较差的前列腺癌中PSA结果常不太可靠，与前列腺酸性磷酸酶（PACP）同时检测，以提高诊断的准确率。用ELISA法测定，血清PSA的正常值4.8g/L，良性前列腺肥大时介于两者之间，约为3.4g

22、/L。PSA对前列腺癌具有高度的特异性，总的阳性率可达8297之间，PSA测定对包膜内癌的敏感性为70、转移癌为100。临床应用 早期发现前列腺癌 临床分期和预后的判断监测前列腺癌的复发 改善PSA的早期诊断能力的措施以年龄调整参考值范围的上限，4049岁为2.5g/L，5059岁为3.5g/L，6069岁为4.5g/L，7079岁为6.5g/L；PSA升高的速率，高速增长者（0.75g/（L*y）为癌症；PSA密度，即PSA浓度/超声测量的前列腺体积，如PSA为410g/L，直肠指检阴性，但密度呈阳性，则可能是前列腺癌；f-PSA和t-PSA的比例具有重要的诊断价值。特别是当t-PSA在4.

23、010.0g/L时，血清中f-PSA/t-PSA比值为0.15可作为前列腺肥大和前列腺癌的鉴别临界点，比值0.15时前列腺癌的可能性较大。PSA浓度越高，f-PSA/t-PSA比值越小，前列腺癌的可能性就越大。临床上常用血清中f-PSA/t-PSA的比值来鉴别良、恶性前列腺肿瘤血清碱性磷酸酶血清碱性磷酸酶【alkaline phosphatase,ALP 或AKP】是一组底物特异性较低，在碱性环境中能水解很多是一组底物特异性较低，在碱性环境中能水解很多磷酸单酯化合物的酶磷酸单酯化合物的酶AKP在器官组织的含量：在器官组织的含量：肝肾胎盘小肠骨参考值：女性：参考值：女性：112岁岁500U/L；

24、15岁，岁，40150U/L 男性：男性：112岁岁500U/L；1215岁，岁，750U/L 15岁，岁，40150U/L异常可见于原发及继发性肝癌、胆管癌、前列腺癌、白血病、肉瘤、淋巴瘤可分成胎盘型、小肠型和肝型3种同工酶ALP与其同工酶相结合，可提高诊断的敏感性和特异性 酸性磷酸酶测定酸性磷酸酶测定【acidphosphatase,ACP】磷酸麝香草酚酞（YMP）ACP麝香草酚酞 +无机磷碱液终止反应麝香草酚酞 呈蓝色595nm-磷酸萘胺磷酸萘胺 ACP 酸性条件-萘胺萘胺 +磷酸磷酸固红TR盐重氮化合物重氮化合物总酸性磷酸酶活性总酸性磷酸酶活性非前列腺酸性磷酸酶活性非前列腺酸性磷酸酶活

25、性=前列腺酸性磷酸酶活性前列腺酸性磷酸酶活性酒石酸抑制405nm参考值：成人总酶活性为参考值：成人总酶活性为09U/L，前列腺酸性磷酸酶活性为，前列腺酸性磷酸酶活性为03U/LACP含量无性别差异，新生儿出生后含量无性别差异，新生儿出生后1个月血清酶活性甚高，随年龄增长而逐渐个月血清酶活性甚高，随年龄增长而逐渐下降；青春期又可出现一活性峰值，至下降；青春期又可出现一活性峰值，至20岁降至成人水平岁降至成人水平ACP主要用于前列腺癌的辅助诊断及疗效观察指标，特别是转移时，血清主要用于前列腺癌的辅助诊断及疗效观察指标，特别是转移时，血清ACP可可明显增高明显增高溶血性疾病、变形性骨炎、急性尿潴留及

26、近期做过直肠检查者，此酶也可增高溶血性疾病、变形性骨炎、急性尿潴留及近期做过直肠检查者，此酶也可增高临临床床意意义义生化特性：生化特性：烯醇化酶二聚体烯醇化酶二聚体分子量：分子量：87,000发生部位：发生部位：神经系统的神经元和神经内分泌细胞神经系统的神经元和神经内分泌细胞,红细胞红细胞,血小板血小板参考值范围：参考值范围：12.5ng/ml 临临床床应应用用：神神经经元元特特异异性性烯烯醇醇化化酶酶是是小小细细胞胞肺肺癌癌(SCLC)和和神神经经母母细细胞胞瘤瘤的的肿肿瘤瘤标标志志物物，可可用用于于鉴鉴别别诊诊断断、病病情情监监测测、疗疗效效评评价价和和复复发发预预报报。用用神神经经元元特

27、特异异性性烯烯醇醇化化酶酶监监测测小小细细胞胞肺肺癌癌的的复复发发，比比临临床床确确定定复复发发要要早早412周周。神神经经元元特特异异性性烯烯醇醇化化酶酶还还可可用用于于神神经经母母细细胞胞瘤瘤和和肾肾母母细细胞胞瘤瘤的的鉴鉴别别诊诊断断，前前者者神神经经元元特特异异性性烯烯醇醇化化酶酶异异常常增增高高而而后后者者增增高高不不明明显显。增增高高：见见于于小小细细胞胞肺肺癌癌（最最敏敏感感最最特特异异的的肿肿瘤瘤标标志志物物之之一一）、神神经经母母细细胞胞瘤瘤、神神经经内内分分泌泌细细胞胞肿肿瘤瘤（如如嗜嗜铬铬细细胞胞瘤、胰岛细胞瘤、黑色素瘤）、精原细胞瘤等瘤、胰岛细胞瘤、黑色素瘤）、精原细胞

28、瘤等影响因素：影响因素：不要将血放置太久，否则将出现假高值；一不要将血放置太久，否则将出现假高值；一 小时内离心；检测小时内离心；检测SCLC时，与时，与CEA联合应用联合应用神经特异性烯醇化酶神经特异性烯醇化酶【NSE】五、激素类标记物 激素类肿瘤标记物分类原位激素（eutopic hormone）异位激素（ectopic hormone）原位激素 由内分泌腺体的肿瘤导致相应的激素的过量分泌，往往在未检出肿瘤前，血清中相应的激素水平即可升高，导致机体出现某些功能亢进。异位激素 是指在正常情况下不产生激素的细胞恶性转化后形成的肿瘤细胞合成和分泌的激素或激素样物质。判定异位激素的条件：由非内分泌

29、腺体的细胞合成的激素某种内分泌腺体的细胞分泌的是其它内分泌腺体的激素肿瘤患者应伴有相应的内分泌异常综合征肿瘤细胞在体外培养时也能产生激素肿瘤切除或经治疗消退时，血清中激素水平下降，内分泌综合征症状改善激素类肿瘤标记物的特点：除良性肿瘤外，恶性肿瘤异位激素分泌的量较少，且不恒定，临床上应用较多的是HCG。除少数肿瘤外，大部分肿瘤和激素的关系并不固定，有时同一种肿瘤可分泌多种激素，同一激素也可有多种肿瘤分泌。肺癌分泌激素的种类最多。肿瘤发生时，激素本身并不增加，只是相应的激素受体增加。如乳腺癌病人雌激素和孕激素水平并不增加或增加很少，但其受体数量可明显增加。生化特性：生化特性：糖蛋白激素，由两个非

30、共价结合的亚单糖蛋白激素，由两个非共价结合的亚单 位组成，位组成，a a，分子量：分子量：a a：14,000；：24,000发生部位：发生部位：胎盘合体滋养层胎盘合体滋养层,滋养层组织中的胚细胞滋养层组织中的胚细胞 肿瘤肿瘤,合体滋养层巨细胞合体滋养层巨细胞(精原细胞来源精原细胞来源 许多中空器官的上皮细胞成分许多中空器官的上皮细胞成分)参考值范围：参考值范围：男性男性:05mU/ml 临床应用：临床应用：非精原细胞瘤胚芽细胞瘤非精原细胞瘤胚芽细胞瘤(4886%),睾睾 丸或胎盘绒毛膜肿瘤丸或胎盘绒毛膜肿瘤(100%),胞虫囊状胞虫囊状 痣痣(97%),精原细胞瘤精原细胞瘤(合并肿瘤合并肿瘤

31、)(714%)人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素【human chorionic gonadotrophin，HCG】RNA的甲醛变性胶电泳结果，可见清晰的18S、28S两条带及其距加样孔的距离 PCR扩增后进行PAGE电泳及放射自显影结果箭头所示条带T26只在绒癌中显示，在正常绒毛中不显示 临床意义 早孕诊断可以作为睾丸肿瘤和胎盘肿瘤即绒毛膜上皮癌或葡萄胎的标记物100滋养体瘤和绒毛膜上皮细胞癌-HCG异常升高，可达100万IU/L 70的非精原细胞性睾丸癌-HCG低度升高（常和AFP同时升高）10的精原细胞瘤-HCG也有升高。乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、肝癌、肺癌、白血病和淋巴瘤

32、患者中也可见有HCG轻度升高肝硬化、十二指肠溃疡和一些炎症中也可见有升高此外，由于-HCG无法穿过血脑屏障，所以一旦脑脊液中出现-HCG，并且和血清中-HCG的比例超过1：60，常预示着出现脑转移生化特性：生化特性：多肽（多肽（32个氨基酸）个氨基酸）分子量：分子量：3,500发生部位：发生部位：C细胞，胸腺也有分泌降钙素的机能细胞，胸腺也有分泌降钙素的机能 参考值范围：参考值范围：100pg/ml临床应用：临床应用：甲状腺髓样癌甲状腺髓样癌：此种癌起源于：此种癌起源于甲状腺甲状腺滤泡旁细胞（滤泡旁细胞（C细胞），可产生多种生物活性物质，其中以降钙素为主。患者血清细胞），可产生多种生物活性物质

33、，其中以降钙素为主。患者血清降钙素水平高于正常数十到数百倍。如经手术治疗，则降钙素水平降钙素水平高于正常数十到数百倍。如经手术治疗，则降钙素水平恢复正常恢复正常影响因素：影响因素：适用于危险人群筛查和辅助诊断；适用于危险人群筛查和辅助诊断；肺小细胞癌可产生肺小细胞癌可产生多种激素，其中包括降钙素多种激素，其中包括降钙素 降钙素降钙素儿茶酚胺类物质（catecholamines，CA）儿茶酚胺类物质是一类结构中都含有儿茶酚的物质的总称，包括肾上腺素、去甲肾上腺素、香草扁豆酸（vanillylmandelic acid，VMA）等。肾上腺素 检测尿中肾上腺素浓度可间接地了解体内儿茶酚胺的分泌香草扁

34、豆酸增多主要见于嗜铬细胞瘤患者，交感神经节细胞瘤和神经母细胞瘤 高香草酸升高可见于神经母细胞瘤和儿童交感神经瘤 促肾上腺皮质激素（ACTH）大约70的肺癌病人有ACTH的升高，升高的ACTH大多无生物活性，但可生成黑色素细胞刺激素，故肺癌病人很少合并库欣综合症，但常伴有皮肤色素沉着。P53蛋蛋白白是是一一种种由由393个个氨氨基基酸酸组组成成的的含含磷磷蛋蛋白白，位位于于细细胞胞核核。研研究究发发现现在在癌癌旁旁正正常常和和鳞鳞状状化化生生的的支支气气管管上上皮皮未未见见P53蛋蛋白白表表达达，在在轻轻中中重重度度不不典典型型增增生生、原原位位癌癌、浸浸润润癌癌中中，P53蛋蛋白白 表表 达达

35、 的的 阳阳 性性 率率 逐逐 渐渐 升升 高高，表表 明明P 5 3基基 因因 与与 肺肺 癌癌 发发生有关生有关对对P53基基因因的的不不同同类类型型肿肿瘤瘤中中突突变变频频率率检检测测结结果果，鳞鳞癌癌为为63.6%，腺腺癌癌为为65%，发发现现P53蛋蛋白白在在不不同同分分化化程程度度肺肺癌癌组组织织之之间间无无显显著著性性差差异异，但但在在肺肺鳞鳞癌癌组组织织中中随随分分化化程程度度降降低低P53表表达达却却增增强强，认认为为P53蛋蛋白白与与肺肺鳞鳞癌癌的的关关系系可可能能较较肺肺腺腺癌癌更更为为密密切切。而而且且在在肺肺鳞鳞癌癌伴伴有有和和不不伴伴有有淋淋巴巴结结转转移移病病例例

36、中中，P53表表达达无无显显著著性性差差异异，而而肺肺腺腺癌癌中中伴伴有有与与不不伴伴有有淋淋巴巴结结转转移移者者P53表表达达 具具 有有 显显 著著 性性 差差 异异，提提 示示P 5 3过过 度度 表表 达达 与与 肺肺 腺腺 癌癌 淋淋巴结转移有关巴结转移有关六六 基因类基因类-P53蛋白蛋白鳞癌鳞癌P53细胞核阳性细胞核阳性p53p21P53突变与突变与DLBCL预后预后预后分子预后分子-TP53TP53为肿瘤抑制基因：为肿瘤抑制基因：细胞周期停滞、凋亡细胞周期停滞、凋亡,分化、复制、分化、复制、DNA修复、维持基因组稳定修复、维持基因组稳定DLBCL:细胞周期调控相关预后标志TP5

37、3突变与突变与DLBCL预后预后(OS/DFS)报道不一，可能与报道不一，可能与TP53的检测方法相关。的检测方法相关。J Clin Oncol 24:995-1007.TP53突变与突变与R-CHOP治疗治疗一项一项2012年发表于年发表于BLOOD的队列研究，旨在探索的队列研究，旨在探索TP53在利在利妥昔单抗时代的预后价值。妥昔单抗时代的预后价值。来自来自29个研究中心，接受个研究中心，接受R-CHOP方案的方案的506例新发例新发DLBCL患者被纳入此研究。患者被纳入此研究。BLOOD 2012 120:3986-3996TP53突变的分布情况突变的分布情况506例患者例患者TP53突

38、变分析中：突变分析中：按蛋白序列影响情况看，按蛋白序列影响情况看，TP53错义突变发生比例最高为错义突变发生比例最高为80.45%按蛋白功能影响情况看，按蛋白功能影响情况看，TP53无功能发生比例最高为无功能发生比例最高为75%BLOOD 2012 120:3986-3996TP53突变在突变在DLBCL患者中出现率较高患者中出现率较高506例患者均接受例患者均接受R-CHOP或或R-CHOP样治疗样治疗BLOOD 2012 120:3986-3996野生型与突变型野生型与突变型TP53的基因差异的基因差异R-CHOP治疗的治疗的DLBCL患者中患者中14个基因的表达有显著性差异个基因的表达有

39、显著性差异GCB-DLBCL亚组中亚组中34个基个基因的表达有显著性差异因的表达有显著性差异BLOOD 2012 120:3986-3996MUT：突变TP53是是DLBCL的不良预后分子的不良预后分子monthmonth在接受在接受R-CHOP治疗的治疗的506例例DLBCL患者中，患者中，WT-TP53在在OS和和PFS上较上较MUT-TP53有显著地获益有显著地获益.(OS，P 0.0005；PFS，P 0.0004)BLOOD 2012 120:3986-3996TP53是是GCB的不良预后分子的不良预后分子OSPFSmonthmonth接受接受R-CHOP治疗的治疗的GCB-DLBC

40、L患者患者中，患者患者中，WT-TP53的的 OS(P0.0024;HR=0.46;95%CI,0.28-0.76)和和PFS(P0.0013;HR=0.4483;95%CI,0.28-0.73)显著优于显著优于MUT-TP53患者患者BLOOD 2012 120:3986-3996TP53是是ABC的不良预后分子的不良预后分子ABC-DLBCL 亚组中，亚组中，WT-TP53 较较MUT-TP53 具有更好的具有更好的OS和和PFSOS:P 0.0112,HR=0.5218,95%CI,0.32-0.86;PFS:0.0259 HR=0.5665,95%CI,0.34-0.9OSPFSBLO

41、OD 2012 120:3986-3996接受接受R-CHOP方案的方案的DLBCL患者患者对对OS/PFS影响的多变量分析影响的多变量分析TP53突变是继突变是继IPI2之后第二重要的独立预后分子之后第二重要的独立预后分子BLOOD 2012 120:3986-3996bcl-2蛋蛋白白是是原原癌癌基基因因bcl-2编编码码的的一一种种能能调调节节细细胞胞死死亡亡而而不不影影响响细细胞胞增增殖殖的的蛋蛋白白质质，1993年年Pezzella等等研研究究bcl-2在在NSCLC患患者者中中的的表表达达与与预预后后之之间间的的关关系系。该该实实验验采采用用bcl-2特特异异性性单单克克隆隆抗抗体

42、体及及免免疫疫组组化化染染色色测测定定80例例肺肺鳞鳞癌癌及及42例例肺肺腺腺癌癌患患者者肿肿瘤瘤组组织织中中bcl-2蛋蛋白白。结结果果25%(20/80)的的鳞鳞癌癌患患者者及及12%(5/42)的的腺腺癌癌患患者者bcl-2蛋蛋白白阳阳性性，在在邻邻近近的的正正常常呼呼吸吸道道上上皮皮中中，bcl-2蛋蛋白白仅仅存存在在于于基基底底细细胞胞。bcl-2蛋蛋白白阳阳性性患患者者的的5年年生生存存率率高高于于阴阴性性患患者者(P0.1)，年年龄龄为为60岁岁或或60岁岁以以上上bcl-2蛋蛋白白阳阳性性患患者者的的预预后后最最好好(P0.02)。该该研研究究表表明明，原原癌癌基基因因bcl-

43、2在在肺肺癌癌患患者者中中发发生生异异常常表表达达，其其表表达达与与预预后后有有一一定定关关系系原癌基因原癌基因bcl-2蛋白蛋白Bcl-2BCL-2与与DLBCL的预后的预后Iqbal J.J Clin Oncol.2006;24:961 Correlation of BCL2 protein expression with OS and EFS in R-CHOP cohort of patients with DLBCL.Iqbal J et al.Clin Cancer Res 2011;17:7785-7795Double Hit DLBCL&Triple Hit DLBCL两个重要

44、的不良预后因素：两个重要的不良预后因素：BCL-2+，MYC+Double Hit DLBCL -MYC+BCI-2+Triple Hit DLBCL -MYC+BCL-2+BCL6+对目前的标准治疗效果不好对目前的标准治疗效果不好骨髓和中枢神经侵犯发生率高，类型更为复杂骨髓和中枢神经侵犯发生率高，类型更为复杂治疗往往采用更强烈的化疗治疗往往采用更强烈的化疗年轻年轻 CR or PR 的患者可采用的患者可采用 ASCT99七、其他肿瘤标记物七、其他肿瘤标记物 多胺唾液酸抗EB病毒相关抗原的抗体 EBV+DLBCL的预后情况的预后情况八、多种肿瘤标记物联合应用八、多种肿瘤标记物联合应用 肿瘤标记

45、物的现实肿瘤标记物的现实：1.肿瘤标记物非常之多 2.单个标记物的敏感性或特异性偏低，不能满足临床要求。3.理论上和实践上都提倡一次同时测定多种标记物，以提高敏感性和特异性。肿瘤标志物的组合应用肿瘤标志物的组合应用-标志标志 CEA AFP CA19-9 CA72-4 CA125 CA15-3 SCC HCG 肿瘤肿瘤结肠结肠 胰腺胰腺 胃胃 食道食道 肝脏肝脏 胆囊胆囊 乳腺乳腺 卵巢卵巢 子宫颈子宫颈 绒毛膜绒毛膜 肿瘤标志物的组合应用肿瘤标志物的组合应用-标志标志 CEA ARP NSE SCC CYFRA21-1 HCG PSA TPA Calcitonin HTG 肿瘤肿瘤肺（肺（S

46、CLC）肺（肺（NSCLS）胚胎细胞胚胎细胞 前列腺前列腺 膀胱膀胱 甲状腺甲状腺 C-细胞细胞 耳鼻咽喉耳鼻咽喉 肺癌中肿瘤标志物的应用肺癌中肿瘤标志物的应用治疗前治疗前治疗后复查治疗后复查组织类型不明确组织类型不明确腺癌腺癌鳞状细胞癌鳞状细胞癌小细胞肺癌小细胞肺癌大细胞肺癌大细胞肺癌用用ROC曲线解读肺鳞状细胞癌曲线解读肺鳞状细胞癌TM的特异性的特异性1.00.80.60.40.2 01.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0敏感性敏感性(%)特异性特异性(%)CYFRA21-1 CEASCCNSECYFRA21-1对于鳞状细胞肺癌的敏感性可达对于鳞状细胞肺癌的敏感性可达60%，高于，高于

47、SCC，也优于，也优于其他两种其他两种TM，是非小细胞肺癌的，是非小细胞肺癌的TM下面积越大，敏感性与特异性越好胃癌单项或联合测定胃癌单项或联合测定CEA、CA19-9及及CA72-4的敏感性的敏感性80604020 0敏感性（敏感性（%）272966406672CEA（10.1）CA19-9（96）CA72-4（2.4）CA19-9（107）CEA（10.1）CA72-4（2.4）CA19-9（260）CA72-4（2.4）CEA（10.4）胃癌特异性胃癌特异性95%时时核医学核医学血清血清2-m浓度与生存时间呈反比浓度与生存时间呈反比100 80 60 40 20 00 2 4 6 8 1

48、0 122-m3.0mg/L3.0 2-m5mg/L2-m5mg/L生存率生存率(%)第一次调查后的年数第一次调查后的年数参考值范围：参考值范围：1.22.5mg/L肿瘤标志物测定的频率肿瘤标志物测定的频率首次治疗前首次治疗前(手术、放疗、化疗、激素治疗）手术、放疗、化疗、激素治疗）各种治疗后，如术后各种治疗后，如术后210天天（根据肿瘤生物周期而定）（根据肿瘤生物周期而定）首次治疗后首次治疗后12年年3个月检查一次个月检查一次首次治疗后首次治疗后35年年6个月检查一次个月检查一次任何治疗前任何治疗前怀疑有复发或转移怀疑有复发或转移重新分期重新分期肿瘤标志物明显增高后肿瘤标志物明显增高后46周

49、周临床检测肿瘤标志物试验方法进展临床检测肿瘤标志物试验方法进展临床检测肿瘤标志物试验方法进展临床检测肿瘤标志物试验方法进展单相琼脂扩散法单相琼脂扩散法双相琼脂扩散法双相琼脂扩散法血凝法血凝法对流电泳法对流电泳法火箭电泳法火箭电泳法放射免疫法放射免疫法（RIA）免疫放射法免疫放射法（IRMA）ELISA法法斑点法斑点法金标法金标法荧光免疫法荧光免疫法化学发光法化学发光法（CLIA）电化学发光法电化学发光法（ECLIA）分子生物学分子生物学影响肿瘤标志物浓度的因素影响肿瘤标志物浓度的因素肝肾功能衰竭、胆道淤积，肝肾功能衰竭、胆道淤积，CA19-9浓度可达浓度可达3000U/ml直肠指检、膀胱镜、留

50、置尿管等可导致直肠指检、膀胱镜、留置尿管等可导致PSA、PAP值增高值增高化疗药物作用使肿瘤标志物释放，影响化疗药物作用使肿瘤标志物释放，影响TM检测浓度检测浓度吸烟者血清吸烟者血清CEA可高达可高达1020ng/ml储存不当可使碱磷酶水平下降储存不当可使碱磷酶水平下降放置时间超过放置时间超过1小时，小时，NSE由于血小板释放明显增高由于血小板释放明显增高溶血时红细胞可释放溶血时红细胞可释放NSE；黄疸可使；黄疸可使PSA假阳性增加假阳性增加唾液污染标本对唾液污染标本对SCC、CA19-9的影响大的影响大顺铂、丝裂霉素、雌二醇、顺铂、丝裂霉素、雌二醇、VitC等导致等导致PSA假性增高假性增高