牡蛎的化学成分及其生物活性研究进展 (2).docx

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1、牡蛎的化学成分及其生物活性研究进展摘要：牡蛎肉味鲜美，营养价值高，为药食同源。牡蛎肉中含有多种氨基酸、糖原、大量的活性微量元素及小分子化合物，其壳中含有大量碳酸钙。牡蛎具有增强免疫力、抗疲劳、抗病毒、保护肝脏、降糖、抗肿瘤、抗氧化、抑菌等作用。本文综述了近年来牡蛎肉、牡蛎壳的化学成分、生物活性研究进展，旨在为牡蛎的进一步研究和开发利用提供依据。关键词：牡蛎 化学成分 生物活性Research Progress on chemical constituents and Bioactivities of oysterAbsrtact: oyster has delicious meat and h

2、igh nutritional value. Oyster meat contains a variety of amino acids, glycogen, a large number of active trace elements and small molecular compounds, the shell contains a large number of calcium carbonate. Oyster has immune, anti-fatigue, anti-virus, liver protection, hypoglycemic, anti-tumor, anti

3、-oxidation, bacteriostasis and so on. In this paper, the recent advances in the studies on the chemical constituents and biological activities of oyster meat and oyster shell are reviewed in order to provide the basis for further research and utilization of oyster.Keyword: ostracean chemical composi

4、tion bioactivity目录目录3一、牡蛎的界定3（一）基本概念3（二）牡蛎的化学成分研究41.牡蛎肉中氨基酸的提取和分离42. 牡蛎肉中多糖的提取和分离43. 牡蛎肉中的脂溶性有毒物质4（二） 牡蛎壳的化学成分研究5（三） 牛磺酸的概念5二、 牡蛎肽的作用5（一） 抗氧化作用5（二）抗高血压作用6（三）降血糖作用6（四） 免疫作用6（五） 抗肿瘤作用7（六） 改善学习记忆功能7三、 实验方法7总结8参考文献9一、牡蛎的界定（一）基本概念牡蛎俗称牡蛎，世界上有100多种，沿海地区有20多种。目前医学中的牡蛎主要有牡蛎靠近河流，长牡蛎，大连湾牡蛎等。蚝肉味道鲜美，营养价值很高，被誉为“海

5、底牛奶”，是沿海重要的海洋经济贝类。牡蛎含有丰富的糖原，蛋白质，氨基酸，微量元素和维生素。壳是牡蛎药的一部分，具有镇静，阴，阴，软，硬等功能的重要镇，用于心悸失眠，眩晕耳等症状。牡蛎止酸止痛，用于出汗和胃痛酸。近年来，对牡蛎的化学成分和生物活性进行了大量研究，为牡蛎的进一步开发和利用提供了信息。（二）牡蛎的化学成分研究1.牡蛎肉中氨基酸的提取和分离蚝肉含有多种氨基酸。它是蛋白质的基本单位，是生物体内重要的活性物质。牛磺酸是一种含硫氨基酸，它是一种神经递质和神经调节剂。牛磺酸是人体中非常重要的营养素。陈慎如等用煮沸法从牡蛎中提取牛磺酸，用高效液相色谱法测定牡蛎中牛磺酸的含量。牛磺酸浓度在560g

6、mL（-1）之间呈良好的线性关系（r = 0 .0）。 994 6.检出限为0. 02gmL（-1），定量下限为0.。平行样品的相对标准偏差为1.7g mL-1。 314。提取温度为100时，牡蛎中牛磺酸的提取率达到2.5。 194 2 mg g -1。研究了牡蛎牛磺酸的中性蛋白酶酶解。温度40，酶的添加量为1000gg（-1）（pH 7）。 2，料液比为1：9 gL（-1）（-1），水解5 h后，牛磺酸的提取量为2. 623 mg g-1（鲜肉）获得最佳工艺条件。郑惠娜等人采用pH调节法从牡蛎中提取分离蛋白，分析其氨基酸组成。在最佳提取条件下，牡蛎蛋白质氨基酸的分离量约占总氨基酸的42.2。

7、这比粮农组织/世卫组织/粮农组织/世卫组织的建议要高。陈艳辉等用牡蛎乙酸乙酯提取牡蛎匀浆上清液，经硅胶柱层析分离，用红外光谱，核磁共振氢谱和质谱对其结构进行分析，得到三种组分：标量直径。 L，色氨酸和苯丙氨酸。程青红等用高效液相色谱法测定了牡蛎中次黄嘌呤，腺嘌呤等嘌呤的含量。2. 牡蛎肉中多糖的提取和分离在温度90，料液比1：80和时间3 h的条件下，采用苯酚 - 硫酸法测定牡蛎总糖含量。 43.田振华等人对多糖的提取温度，时间，次数和料液比进行了正交实验。提取多糖的最佳条件为：pH = 8.0,65，4h，3次，1:15（mg mL（-1），多糖含量为77. 14.高萌萌从太平洋牡蛎中提取和

8、纯化3种牡蛎，得到3种牡蛎粗多糖，经DEAE Sepharose FF阴离子交换树脂层析得到单糖成分仅为葡萄糖，得到5种纯化成分，MC -1成分经SephacrylS-400凝胶柱层析纯化，得到1种高纯度，糖成分MC-11的总糖含量为95.1，是一种葡聚糖葡聚糖。3. 牡蛎肉中的脂溶性有毒物质在牡蛎中，通过小鼠生物学方法检测到12gKg-1螺旋亚胺（GYM）毒素。 GYM是一种脂溶性多环醚生物活性物质（DSPs），可富含贝类和其他过滤饲养动物。 危害食者的健康。（二） 牡蛎壳的化学成分研究牡蛎壳是由有机物的生物矿化调节而形成的，即以少量有机物大分子（蛋白质，糖蛋白或多糖）为骨架，以碳酸钙为单元

9、分子操作，形成高度有序的多层结构。牡蛎壳组成由无机物和有机物组成：碳酸钙是主要的无机物，占壳体质量的90以上，其中钙元素占39。 780。此外，还有20多种微量元素，如铜，铁，锌，锰，锶等。有机物分为可溶性有机物质和不溶性有机物质。成长期不同。赵玉英研究了牡蛎壳与煅烧牡蛎壳的物理化学性质差异。采用原子吸收光谱法（AAS）测定牡蛎壳和煅烧牡蛎壳粉中钙的含量。 59和35。 Ca含量为86，Caco为3.48和87。 75.牡蛎壳和煅烧牡蛎壳的蛋白质提取量分别为1.19和1.8。通过凯氏定氮法测定牡蛎壳和煅烧牡蛎壳的蛋白质提取物中N的含量分别为0.037.4和0.5。 011 6.采用DDC-Ag

10、AgDDC-二乙基二硫代氨基甲酸盐法测定了辽宁大连，河北沧州，山东青岛，浙江台州，福建福州和广东湛江6个不同地区的生牡蛎和煅烧牡蛎中砷的含量。生牡蛎中检出有害元素砷，福州牡蛎中砷含量最高（1.5）。辽宁省大连地区牡蛎中砷含量为626gmg-1，含量较低（0.6gg-1）。来自其他栖息地的牡蛎中的砷含量与274gmg-1相似。生蚝煅烧其有害元素砷含量有所下降，砷含量约为40,7,8,3。七。（三） 牛磺酸的概念牛磺酸，也被称为牛胆酸，是人体非必需氨基酸之一。牛磺酸广泛存在于动物组织和游离形式的细胞中。它在海洋生物中特别丰富，在文献中报道的牛磺酸约为每千克新鲜牡蛎4g。牛磺酸具有广泛的生理功能，如

11、参与渗透调节，抗氧化，解毒和刺激糖酵解，维持机体，中枢神经系统，心血管系统，视觉系统，血液的正常生长和发育等等。免疫系统和生殖系统的功能起着重要的作用4-6。目前，国内外牛磺酸的制备大都采用化学合成法，但化学结合从天然产物中提取牛磺酸是非常值得关注的问题。牡蛎是中国四大经济贝类之一。它们营养丰富，富含氨基酸，蛋白质，维生素和微量元素。近年来，牡蛎中的牛磺酸提取物大多煮沸。以牛磺酸提取量为指标，确定中性蛋白酶的最佳酶解参数。二、 牡蛎肽的作用生物活性肽是指有利于生命活动或具有特殊生理活性的肽复合物，也称为功能肽。 一般认为蛋白质只有在被完全消化并吸收到氨基酸中后才能在体内被吸收。 然而，根据目前

12、的研究，小肽比多肽和氨基酸，特别是二肽更容易被身体吸收和利用。 并且三肽，体内小肽的吸收速度比相应的游离氨基酸快，当小分子肽进入血液时，它将以更快的速度被身体的细胞组织使用，并且高渗性 的小分子肽比氨基酸低。 因此，可以提高吸收率。 （一） 抗氧化作用自由基是具有非配对电子的原子或基团，例如超氧阴离子自由基，羟基自由基和一氧化氮自由基，并且它们的活性非常高。为了使自己稳定的化合物，他们将争夺其他化合物的电子无处不在。一旦发生反应，自由基就是身体的氧气。随着年龄的增加，体内产生的有害化合物越多，自由基积累越多，能够去除体内自由基的酶（SOD酶）和非酶系统的功能正在下降，这严重损害DNA在体内的氧

13、化并使身体的细胞和组织受到损害。该效应甚至会引发体内的连锁反应，导致免疫系统紊乱。因此，寻找安全无毒的天然抗氧化剂已引起国内外科学家的关注。牡蛎含有丰富的蛋白质，糖原，微量元素和维生素，近年来有关牡蛎提取物和牡蛎肽抗氧化性能的报道很多。肽的抗氧化活性与其氨基酸组成有关。许多氨基酸都具有抗氧化活性，如赖氨酸，色氨酸，精氨酸。（二）抗高血压作用高血压是一种全身性疾病，其特征在于血压升高和潜伏期较长，可导致心脏，血管，肾脏和大脑的各种器官和结构发生损伤。血管紧张素转化酶作用于底物血管紧张素I的羧基末端，导致紧张的血管张苏，其可以升高血压并导致血管舒缓激肽的丧失。 ACE活性的抑制作用是评价牡蛎肽抗高

14、血压作用的主要指标。高血压病是一种潜伏期较长，早期症状不明显的慢性病，随后症状逐渐加重，直至心脏病发作，且发病率高。血压往往与各种并发症有关，如血管，脑和肾脏器官以及结构系统性病变。高血压人群分布广泛，不仅老年人，中老年人患病率高，连小孩也有高血压;高血压由于发病率高，并发症高，致残率高，严重影响了人体的健康，直接威胁着人的生命。目前，高血压的治疗只能依靠长期用药，但药物有副作用，对人体健康有害。牡蛎活性肽对源自牡蛎蛋白的ACE具有良好的抑制作用。煮熟，安全性高，是开发抗高血压药物的新方向。（三）降血糖作用糖尿病是以高血糖症为特征的一组代谢性疾病。高血糖症是由胰岛素分泌受损或其生物学效应或两者

15、兼而有之，并且其危害在于高血糖引起的各种慢性并发症，如心血管和脑血管疾病，动脉粥样硬化氧化等。对于继肿瘤之后的第三种主要慢性非传染性疾病近年来发现从深海青蛙中分离出的苦瓜种子和果实提取物，南瓜提取物和海洋胶原蛋白肽的种子可以降低糖尿病动物的血糖含量并改善胰岛的胰岛小岛。在现代医学中，牡蛎活性肽对胰岛细胞具有保护和修复作用，能促进胰岛组织的恢复和恢复其分泌功能，并能显着降低糖尿病患者的血糖水平。可以找到牡蛎肽。四嘧啶诱导小鼠的抑制作用血糖和丙二醛升高，超氧化物歧化酶和胰岛素降低，肿瘤坏死因子异常表达。采用酶法和分光光度法测定牡蛎酶活性肽（胰蛋白酶酶解牡蛎）能显着降低四氧嘧啶所致小鼠血糖水平，具有

16、良好的降血糖作用。牡蛎活性肽能够显着降低四氧嘧啶对小鼠的血糖水平，这可能是由于抑制动物体内四氧嘧啶的吸收和胰岛B细胞的破坏，对四氧嘧啶所致的高血糖具有明显的拮抗作用。（四） 免疫作用免疫反应肽在调节动物免疫力方面发挥重要作用。它不仅可以增强机体免疫力，还可以刺激淋巴细胞的增殖，增强免疫器官的免疫应答和巨噬细胞的吞噬能力，提高机体抵御外界致病物质的能力。并减少癌症的发病率。有学者用体外抑制小鼠脾淋巴细胞增量试验，小鼠脾脏混合淋巴细胞体外增殖活性和MTT法检测发现，牡蛎活性肽在抑制脾淋巴细胞增殖的同时抑制了脾淋巴细胞的增殖，并抑制了小鼠脾淋巴细胞上清液。细胞因子IFN-分泌减少表明牡蛎活性肽可能通

17、过抑制细胞因子的分泌而起到免疫抑制作用。牡蛎肽能增加小鼠免疫器官重量和血清溶血素含量，并能显着增加抗体产生细胞和延缓过敏反应，表明牡蛎肽具有良好的免疫功能。（五） 抗肿瘤作用癌症是世界上威胁人类健康的三种最严重的疾病之一。据估计，中国每年约有260万癌症病例和180万人死亡，已成为威胁公民健康的头号杀手。从海洋生物天然活性物质，特别是海洋蛋白水解物中寻找具有特殊结构组成和低毒性的抗肿瘤药物，具有高效抗肿瘤活性的活性肽是开发新型抗肿瘤药物的有效途径之一 - 肿瘤药物。近年来，对牡蛎活性肽的抗肿瘤作用进行了许多研究。有学者利用细胞生物学，生物化学等手段进行了研究。结果表明，牡蛎中提取的牡蛎天然活性

18、多肽能有效抑制人胃腺癌BGC-823细胞增殖，抑制细胞生长，降低有丝分裂指数，诱导凋亡高峰BGC-823细胞的细胞周期。失去原有的恶性表型。总之，牡蛎活性肽对肿瘤细胞具有一定的抑制作用。其机制可能是用牡蛎活性肽处理的肿瘤细胞的细胞增殖受到抑制，使其无法进行正常的细胞分裂，有丝分裂指数降低，细胞周期被阻断。肿瘤细胞的凋亡有利于筛选抗肿瘤药物的开发。（六） 改善学习记忆功能学习和记忆是大脑中先进的神经功能之一。随着环境的恶化和人口的加重，学习，记忆，认知衰退等神经退行性疾病的发病率逐年增加，如阿尔茨海默病等。由于成因复杂，机制复杂，寻找天然活性物质来预防和治疗这些疾病具有重要意义。目前，有许多报道

19、认为牡蛎活性肽可以提高小鼠的学习记忆能力。它可以改善小鼠的记忆障碍。 Morris水迷宫法研究小鼠牡蛎活性肽记忆改善和导航实验表明，牡蛎活性肽的潜伏期明显短于空白组，空间搜索策略的比例明显增加，表明牡蛎活性肽可以改善小鼠的空间。学习和记忆能力也通过Morris水迷宫行为在由D-半乳糖诱导的记忆障碍的小鼠中评估。发现在牡蛎活性肽干预后可以在空间记录牡蛎活性肽。在采集阶段的最后3天，潜伏期显着缩短，目标象限以及小鼠在太空探索阶段穿越平台的次数显着减少。它能有效改善D-半乳糖所致的记忆障碍。三、 实验方法牛磺酸是一种存在于牡蛎肉中的小水溶性分子。它可以通过简单的热水提取方法直接从新鲜牡蛎中提取。工艺

20、流程如图1所示。除水煮提取牛磺酸外，提取物中仍含有大量蛋白质，强电解质盐和多糖等杂质，因此有必要进一步分离纯化样品。牛磺酸的结构比较特殊，分子中有一个磺酸基和一个位氨基，因此很难在树脂上交换。阳离子交换树脂提取液对杂质去除效果好。当洗脱液缓慢流过离子树脂柱时，蛋白质和其他杂质会相互分离。种子保留在树脂上，牛磺酸被洗脱和纯化。 732强阳离子树脂用于分离纯化，然后用蒸馏水洗脱。强电解质盐首先比牛磺酸出现，牛磺酸成分用二硝基氟苯方法检测。将乙醇加入浓缩物中。乙醇含量分别为40，60和70，然后置于4冰箱中2h，得到粗牛磺酸晶体。当发现60乙醇浓度时，牛磺酸的产量很高。将产物再次溶于水中，过滤，然后

21、加入乙醇。纯牛磺酸可以通过在4重结晶，固液分离并重复3次来获得。牛磺酸的纯度在98.5以上。均质牡蛎肉后，在40,60,80,80,95温度下提取牛磺酸。结果表明，牛磺酸的产量在60，3次，每次1小时较高。在以下步骤中，使用阳离子交换柱色谱法将样品的pH分别调节至3.05.09.0。结果表明，当pH为3.0时，得到了最佳的分离纯化效果。牡蛎从牡蛎中分离和纯化。天然牛磺酸由熔点（322U 324）和标准样品（单点R f F 0.415C）进行TLC分析确定，表明产物纯度较高。与标准牛磺酸的红外光谱图（图2）相比，含-NH_2的-NH_2吸收峰分别为3209.78U 3050.121.2969.4

22、8cm（-1），-SO_3H吸收峰为1182C （1223）15111185N为1616cm（-1），符合标准样品的红外特征吸收峰。 3C-NMR显示两个信号，C1信号为50.5，C2吸收信号28.5，H 2为3.32和H 2为3.48的1H-NMR图谱。这些数据与10，表明作者获得的纯产品是牛磺酸。那就是NH_2CH_2CH_2SO_3H。长牡蛎是一种适应性强，个体大，繁殖期短，产肉量高，脂肪丰富的优良贝类。它被称为“海洋牛奶”，是一个值得开发的好新品种。种类。牡蛎载于本草纲目：“其性质温馨，无毒。”煮食，治虚损伤，调整，释放丹毒;艾灸令肌肤细腻美丽。 “牡蛎中的牛磺酸含量丰富，提取过程简单

23、可行，作者探索了牛磺酸的热水提取工艺（根据湿质量，计算产率0.8，离子交换法分离纯化工艺，采用薄层色谱法对其纯度进行了分析，结构经红外核磁共振分析证实，由于牡蛎产量高，牛磺酸含量丰富，为大规模提取天然牛磺酸提供了参考数据。总结评估酶水解牡蛎多肽的降血糖活性和抗氧化活性。以-淀粉酶抑制率为指标时，牡蛎肽能抑制-淀粉酶，其中以风味蛋白酶水解牡蛎多肽活性最高（67.13）。结果表明，牡蛎多肽具有较强的降血糖活性，牡蛎多肽以DPPH清除率为指标可清除DPPH，其中以食糜蛋清酶解牡蛎多肽的牡蛎多肽活性最高（58.09）。为了抑制超氧化物阴离子，牡蛎多肽可以抑制仍为食糜的超氧阴离子。蛋白酶水解得到的牡蛎多

24、肽活性最高（53.64）。结果表明，不同蛋白酶酶解得到的牡蛎肽的降血糖和抗氧化活性在体外存在差异，这可能与蛋白酶类型有关，因为不同的蛋白酶具有不同的肽键位点。可以通过水解获得具有不同特征的肽，因此酶是影响牡蛎多肽活性的重要因素之一。通过实验筛选出最佳的酶，获得最活跃的多肽，为牡蛎多肽的开发和生物活性研究提供理论参数。参考文献1王海澍.高效液相色谱法测定牡蛎中牛磺酸含量J.食品安全导刊,2017(03):90.2徐成,卢虹玉,章超桦,金飞.超高压法提取牡蛎中牛磺酸的工艺研究J.食品工业科技,2016,37(19):192-196.3钱炳俊,李平,刘小兵,徐思捷.干制牡蛎营养成分分析及其提取工艺的

25、建立J.河南农业科学,2016,45(07):152-156.4常格. 牡蛎蛋白酶解产物抗疲劳作用研究及新产品研发D.广东海洋大学,2016.5徐成. 牡蛎肉对东莨菪碱诱导学习记忆障碍的改善作用及其活性组分的研究D.广东海洋大学,2016.6徐莉,陈文慧,符灵梅,庄鹏.近海养殖牡蛎中牛磺酸含量检测方法研究J.食品研究与开发,2015,36(18):151-153.7赵思远,吴楠,孙佳明,张辉.近10年牡蛎化学成分及药理研究J.吉林中医药,2014,34(08):821-824.8张欣彩. 牡蛎酶解口服液加工工艺研究D.河北农业大学,2014.9李超柱,潘珍凤,陈艳辉,张艳秋,黄学仁,黄金秀.牡蛎软体活性物质的研究进展J.食品工业科技,2012,33(08):412-415.