园林植物的品种退化和良种繁育.ppt

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1、第六章第六章 园林植物良种繁育园林植物良种繁育一、园林植物良种繁育的任务一、园林植物良种繁育的任务 良良种种繁繁育育是是运运用用遗遗传传育育种种的的理理论论与与技技术术，在在保保持持并并不不断断提提高高良良种种种种性性、良良种种纯纯度度与与生生活活力力的的前前提提下下迅迅速速扩扩大大良良种种数数量量的的一一套套完完整整的种苗生产技术。的种苗生产技术。良种繁育实际是育种的继续和扩大，是良种繁育实际是育种的继续和扩大，是优良品种能够继续存在和不断提高质量的保优良品种能够继续存在和不断提高质量的保证。所以它基本上属于育种学的范畴，同时证。所以它基本上属于育种学的范畴，同时它也是育种和生产之间的桥梁。

2、它也是育种和生产之间的桥梁。园林植物良种繁育的主要任务：园林植物良种繁育的主要任务：1、在保证质量的前提下迅速扩大良种数量；、在保证质量的前提下迅速扩大良种数量；2、保保持持并并不不断断提提高高良良种种种种性性，恢恢复复已已退退化化的的优良品种；优良品种；3、保持并不断提高良种的生活力。、保持并不断提高良种的生活力。二、品种退化的概念及其原因二、品种退化的概念及其原因（一）概念：（一）概念：观赏植物原有的优良品质削弱的过程和表现。观赏植物原有的优良品质削弱的过程和表现。造成观赏植物品种退化的原因：造成观赏植物品种退化的原因：基因劣变；基因劣变；基因频率和基因型频率发生改变；基因频率和基因型频率

3、发生改变；病虫害侵染；病虫害侵染；繁殖方法不当；繁殖方法不当；栽培方法不当。栽培方法不当。（二）机械与生物学混杂（二）机械与生物学混杂1、机械混杂：、机械混杂：采种、晒种、储藏、包装、调度、播种、采种、晒种、储藏、包装、调度、播种、育苗、移栽、定植等栽培的繁殖过程中，把一育苗、移栽、定植等栽培的繁殖过程中，把一个品种的种子或苗木机械地混入了另一个品种个品种的种子或苗木机械地混入了另一个品种之中，从而降低了前一个品种的纯度。之中，从而降低了前一个品种的纯度。由于纯度的降低，其丰产性，物候期的一由于纯度的降低，其丰产性，物候期的一致性都降低了，观赏价值也降低了给栽培管理致性都降低了，观赏价值也降低

4、了给栽培管理良种繁育都带来了损失，机械混杂的危害主要良种繁育都带来了损失，机械混杂的危害主要在于机械混杂以后，紧接着常发生生物学混杂，在于机械混杂以后，紧接着常发生生物学混杂，这就给栽培带来更大的损失，造成品种更严生这就给栽培带来更大的损失，造成品种更严生的退化。的退化。2 2、生物学混杂：、生物学混杂：生生物物学学混混杂杂，是是指指由由于于品品种种间间或或种种间间发发生生一一定定程程度度的的天天然然杂杂交交，造造成成一一个个品品种种的的遗遗传传组组成成上上混混入入了了另另一一些些品品种种的的遗遗传传基基础础。在在园园林林植植物物中中发发生生生生物物学学混混杂杂后后，表表现现出出花花型型紊紊乱

5、乱，花花期期不不一一，高高度度不不整整齐齐。花花色色混混杂杂，甚至各种极劣的单株都会产生。甚至各种极劣的单株都会产生。生物学混杂在异交植物与常异交植物的生物学混杂在异交植物与常异交植物的品种间或种间最易发生。自花授粉的植物中品种间或种间最易发生。自花授粉的植物中也间有发生。也间有发生。（三三）生生活活条条件件与与栽栽培培方方法法不不适适合合种种性性要要求，从而引起性状分离与变异。求，从而引起性状分离与变异。当当生生活活条条件件与与栽栽培培方方法法不不适适合合品品种种种种要要求求时时，优优良良的的种种性性就就会会被被潜潜伏伏的的野野持持性性状状所所代代替替。隐隐性性性性状状会会代代替替原原来来的

6、的的的显显性性性状，品种因而退化。性状，品种因而退化。P=G+EP=G+E （四）生活力衰退引起良种产量品种的降低（四）生活力衰退引起良种产量品种的降低1、长长期期营营养养繁繁殖殖长长期期营营养养繁繁殖殖而而得得不不到到的的有有性性复壮的机会，致使生活力降低。复壮的机会，致使生活力降低。2、长长期期自自花花授授粉粉长长期期自自花花授授粉粉，内内部部矛矛盾盾也也会会不不断断地地减减少少，生生活活力力不不断断地地降降低低，最最后后品品种种的的产产量、生长势和其他特性也要退化。量、生长势和其他特性也要退化。3、长长期期栽栽培培在在相相同同的的条条件件下下米米丘丘林林学学派派还还认认为为一一个个品品种

7、种长长期期培培育育在在同同一一地地点点并并用用同同一一栽栽培培方方法法，则久而久之会造成生活力的衰退。则久而久之会造成生活力的衰退。其其次次关关于于自自花花授授粉粉的的良良种种生生活活力力降降低低问问题题，虽虽然然在在一般的条件下如上述，但是也有例外的现象。一般的条件下如上述，但是也有例外的现象。以下两例外的现象在良种繁育的实践中最有意义：以下两例外的现象在良种繁育的实践中最有意义：1 1、在在优优良良栽栽培培条条件件下下，天天然然自自花花授授粉粉良良种种生生活活力力降降低低比在恶劣条件下显著地缓慢。比在恶劣条件下显著地缓慢。2 2、天然自花授粉的良种生活力的降低，在单株之间有、天然自花授粉的

8、良种生活力的降低，在单株之间有较大的差异，有些单株退化很快，而有些则很慢，甚较大的差异，有些单株退化很快，而有些则很慢，甚至不退化，因此在完全退化了的品种中也能用单株选至不退化，因此在完全退化了的品种中也能用单株选择法选出完全未退化的生活力很高的单株，这也就是择法选出完全未退化的生活力很高的单株，这也就是良种繁育中可以用选择的方法进行品种复壮的前提。良种繁育中可以用选择的方法进行品种复壮的前提。三、良种繁育的程序和方法三、良种繁育的程序和方法（一）品种审定（一）品种审定品种特性的评价；品种特性的评价；品种比较试验；品种比较试验；区域试验；区域试验；生产试验；生产试验；审定和登录。审定和登录。（

9、二）品种繁育程序（二）品种繁育程序1.原种（苗）生产原种（苗）生产2.超级原种：经品种审定后用超级原种：经品种审定后用作第一批繁殖的种苗。作第一批繁殖的种苗。2.生产用种（苗）的繁殖生产用种（苗）的繁殖3.以原种为繁殖材料，提供生以原种为繁殖材料，提供生产用苗的繁殖过程。产用苗的繁殖过程。（三）防止品种退化的技术措施（三）防止品种退化的技术措施（一）防止遗传性变劣与分离的技术措施（一）防止遗传性变劣与分离的技术措施1、防止混杂：、防止混杂：防防止止机机械械混混杂杂：严严格格遵遵守守良良种种繁繁育育的的制制度度，任任何混杂都应避免。何混杂都应避免。采种：专人负责及时采收；采种：专人负责及时采收；

10、晒种：晒种时各品种应间隔一定距离；晒种：晒种时各品种应间隔一定距离；播播种种育育苗苗：相相似似品品种种间间隔隔种种植植；播播种种和和定定植植地地应该合理轮作，以免隔年种子萌发造成混杂。应该合理轮作，以免隔年种子萌发造成混杂。移苗：必须严格注意去杂和插牌并画下移植定移苗：必须严格注意去杂和插牌并画下移植定植图。植图。防止生物学混杂：防止生物学混杂：防止生物学混杂的基本方法是隔离与选择。防止生物学混杂的基本方法是隔离与选择。空空间间隔隔离离 生生物物学学混混杂杂的的媒媒介介主主要要是是昆昆虫虫和和风风力力传传粉粉，因因此此隔隔离离的的方方法法和和距距离离随随风风力力大大小小，风风向向表表况况，花花

11、粉粉数数量量，花花粉粉易易飞飞散散程程度度重重瓣瓣程程度度以及播种面积等而不同。以及播种面积等而不同。时间隔离时间隔离 时间隔离是防止生物学混杂极为有效时间隔离是防止生物学混杂极为有效的方法，时间隔离可分为跨年度的与不跨年度的方法，时间隔离可分为跨年度的与不跨年度的两种，后一种是在同一年内进行分月播种，的两种，后一种是在同一年内进行分月播种，分期定植，把开花期错开，这种方法对于某些分期定植，把开花期错开，这种方法对于某些光周期不敏感的植物适用。光周期不敏感的植物适用。2、控控制制显显性性这这里里所所指指的的控控制制显显性性，主主要是指控制栽培性状成为显性，要是指控制栽培性状成为显性，1)良良种

12、种繁繁育育地地段段的的土土壤壤选选择择：应应该该具具备备良良好好的的土土壤壤结结构构，避避免免过过分分粘粘重重的的土土壤壤，应应该该排排水水良良好好，这这两两点点对对于于球球根根类类花花卉卉更为重要。更为重要。2)加强田间管理：防治病虫害发生、使植加强田间管理：防治病虫害发生、使植株生长健壮。株生长健壮。3)扩扩大大营营养养面面：与与一一般般大大田田比比起起来来适适当当加加大大株株行行距距，不不仅仅可可以以扩扩大大繁繁殖殖系系数数，而而且且可可以以提提高高种种子子的的质质量量，增增加加种种子子的的品品种典型性。种典型性。4)合合理理轮轮作作：除除了了一一般般在在优优良良（如如防防治治病病虫虫害

13、害、合合理理利利用用地地力力，促促进进植植物物生生长长发发充充）以以外外，对对于于良良种种繁繁育育特特别别有有益益的的还还能能防防止止混混杂杂和和一一定定程程度度地地防防止止球球根根花花卉卉的生活力退化。的生活力退化。5)避免砧木不良遗传性的影响，许多营养避免砧木不良遗传性的影响，许多营养繁殖的良种，尤其是木本植物中采用营繁殖的良种，尤其是木本植物中采用营养繁殖的良种，应用嫁接的方法。养繁殖的良种，应用嫁接的方法。3、经经常常进进行行选选择择：选选择择是是克克服服品品种种退退化化最最有效的方法。有效的方法。1)选择品种典型性高的单株；选择品种典型性高的单株；2)选选择择品品种种典典型型性性高高

14、的的花花序序 同同一一植植株株不不同同部部位位的的花花序序或或小小花花所所产产生生的的种种子子，其其品种典型性不同。品种典型性不同。3)选择品种典型性高的种子选择品种典型性高的种子 即使同一花即使同一花序其中不同位置的种子，它们后代的品序其中不同位置的种子，它们后代的品种典型性也不同。种典型性也不同。4、加强留种单株的处理、加强留种单株的处理 为了提高种子品为了提高种子品质，整枝和去顶等处理会有良好的效果。质，整枝和去顶等处理会有良好的效果。（二）提高良种生活力的技术措施（二）提高良种生活力的技术措施1、改变生活条件：、改变生活条件：1)改改变变播播种种时时期期 改改变变播播种种时时期期的的作

15、作用用是是使使植植物物在在幼幼苗苗和和其其他他发发育育时时期期遇遇到到与与原原来来不不同同的的生生活条件，使植物同化这些外部条件。活条件，使植物同化这些外部条件。2)换换种种 将将长长期期在在一一个个地地区区栽栽培培的的品品种种种种，定定期期地地换换到到另另一一地地区区繁繁殖殖栽栽培培，经经1-21-2年年再再拿拿回回原地栽培。原地栽培。3)特殊农业技术的处理特殊农业技术的处理 采用低温锻炼幼苗和采用低温锻炼幼苗和种子，高温和盐水处理种子，以及用萌动种子种子，高温和盐水处理种子，以及用萌动种子进行干燥处理等都能在一定程度上提高植物的进行干燥处理等都能在一定程度上提高植物的抗性和生活力，尤其最后

16、一种处理对提高抗旱抗性和生活力，尤其最后一种处理对提高抗旱性有良好效果。性有良好效果。2、选择是保持与提高良种生活力的有效的、选择是保持与提高良种生活力的有效的措施。措施。3、创造有利于生活力复壮的客观条件：、创造有利于生活力复壮的客观条件：选择易于生活力复壮的部分做繁殖材料选择易于生活力复壮的部分做繁殖材料创造有利于生活力复壮的栽培条件创造有利于生活力复壮的栽培条件 四、提高良种繁殖系数的技术措施四、提高良种繁殖系数的技术措施（一）提高种子的繁殖系数（一）提高种子的繁殖系数（二）提高自然营养繁殖器官（二）提高自然营养繁殖器官（三）提高一般营养繁殖器官的繁殖系数：（三）提高一般营养繁殖器官的繁

17、殖系数：1、充分利用园林植物巨大的再生力；、充分利用园林植物巨大的再生力；2、延长繁殖时间；、延长繁殖时间；3、节约繁殖材料。、节约繁殖材料。五、观赏植物优良品种的生产五、观赏植物优良品种的生产1.种源控制种源控制 2.生产过程的控制生产过程的控制3.采收和储运过程的控制采收和储运过程的控制良种繁育程序良种繁育程序品种审定和登录品种审定和登录原种生产原种生产种苗繁殖生产种苗繁殖生产防止品种退化防止品种退化提高良种生活力提高良种生活力种子（苗）检疫种子（苗）检疫种子（苗）质量检验种子（苗）质量检验观赏植物品种培育和品种应用观赏植物品种培育和品种应用种质资源研究种质资源研究育种技术研究育种技术研究

18、优良品种培育优良品种培育优良品种繁殖优良品种繁殖优良品种应用优良品种应用引种引种选种选种育种育种六 植物组织培养技术 及其在育种中的应用植物组织培养技术是现代植物生物植物组织培养技术是现代植物生物技术的基本技术。技术的基本技术。(一一)、植物组织培养的基本步骤、植物组织培养的基本步骤1、植物细胞的全能性（、植物细胞的全能性（Cell Totipotency）一个植物细胞能产生一个完整植株一个植物细胞能产生一个完整植株的固有能力称之为细胞的全能性。的固有能力称之为细胞的全能性。2、植物离体分化的类型、植物离体分化的类型无菌短枝型无菌短枝型丛生芽增殖型丛生芽增殖型器官发生型器官发生型胚状体发生型胚

19、状体发生型原球茎发生型原球茎发生型3、植物组织培养的特点、植物组织培养的特点培育材料经济；培育材料经济；培养条件可人为控制；培养条件可人为控制；生长周期短，繁殖率高；生长周期短，繁殖率高；管理方便，利于自动化控制。管理方便，利于自动化控制。5、植物组织培养的基本操作、植物组织培养的基本操作无菌操作技术无菌操作技术细胞培养技术细胞培养技术原生质体融合技术原生质体融合技术v接种用具的灭菌接种用具的灭菌 接种前，必须把用具放入接种室或箱内，初用接接种前，必须把用具放入接种室或箱内，初用接种室或箱时要用甲醛（一般市售分析纯的有效成份为种室或箱时要用甲醛（一般市售分析纯的有效成份为 36-38%熏蒸熏蒸

20、5小时以上再开紫外光灯照射小时以上再开紫外光灯照射40-60分钟，分钟，以后在每次接种之前，把要接种的试管或三角瓶放入以后在每次接种之前，把要接种的试管或三角瓶放入接种室（箱）内，用接种室（箱）内，用5%的煤酚瓶皂溶液即来苏尔（一的煤酚瓶皂溶液即来苏尔（一般市售的有效成份为般市售的有效成份为47-53%）或）或 5%的石灰炭酸液喷的石灰炭酸液喷雾消毒，再打开紫外光灯照雾消毒，再打开紫外光灯照20-40分钟，这样消毒后，分钟，这样消毒后，再经再经30-40分钟便可进行接种。分钟便可进行接种。v接种材料的表面灭菌接种材料的表面灭菌 接接种种前前花花蕾蕾或或穗穗的的彻彻底底灭灭菌菌是是杜杜绝绝污污染

21、染的的主主要要关关键键，先先用用70-75%的的酒酒精精浸浸泡泡10-15秒秒钟钟或或用用酒酒精精棉棉球球擦擦两两遍遍，初初步步杀杀死死表表面面所所带带的的微微生生物物，放放在在10%的的漂漂白白粉粉液液或或饱饱和和漂漂白白粉粉液液中中浸浸泡泡15-30分钟杀菌，然后用无菌水冲洗分钟杀菌，然后用无菌水冲洗2-3次。次。消消毒毒过过的的穗穗子子或或花花蕾蕾用用消消毒毒纱纱布布包包好好，待待取取花花药药接接种种，注注意意，穗穗子子或或花花蕾蕾的的操操作作要要在在无无菌菌条条件下进行。件下进行。5、植物组织培养所需营养与环境条件、植物组织培养所需营养与环境条件（1）无机营养）无机营养大量元素：大量元

22、素：一般是指浓度大于一般是指浓度大于0.5mmol/L.氮氮(N)、磷、磷(P)、钾、钾(K)、钙、钙(Ca)、镁、镁(Mg)、硫、硫(S)。微量元素：微量元素：包括铁包括铁(Fe)、铜、铜(Cu)、钼、钼(Mo)、锌、锌(Zn)、钠钠(Na)、锰、锰(Mn)、钴、钴(Co)、硼、硼(B)、碘、碘(I)。（2）有机营养）有机营养维生素、肌醇、氨基酸、有机添加物。维生素、肌醇、氨基酸、有机添加物。（3）生长调节物）生长调节物生长素生长素：2，4-D、奈乙酸奈乙酸(NAA)、吲哚丁酸（吲哚丁酸（IBA）、）、吲哚乙酸吲哚乙酸(IAA)。细胞分裂素细胞分裂素：激动素（：激动素（KT）、）、6-苄基氨

23、基嘌呤（苄基氨基嘌呤（6BA）、玉米素玉米素（ZT）。）。赤霉素赤霉素（GA）：脱落酸（脱落酸（ABA）、乙烯利（乙烯利（CEDP）。）。（4）琼脂）琼脂（5）能源和渗透压）能源和渗透压（6）其他成分）其他成分（7）温度）温度（8）光照（光强、光质）光照（光强、光质）培养基的配制：培养基的配制：培养基母液的配制培养基母液的配制；配制培养基的步骤；配制培养基的步骤；培养基的分装及灭菌。培养基的分装及灭菌。6、植物组织培养经历的五个阶段：、植物组织培养经历的五个阶段：（1）预备阶段预备阶段外植体的获得；外植体的获得；接种材料的消毒处理；接种材料的消毒处理；配制适宜的培养基；配制适宜的培养基；（2）

24、诱导去分化阶段诱导去分化阶段（3）继代增殖阶段）继代增殖阶段（4）生根成芽阶段）生根成芽阶段（5）移栽成活阶段）移栽成活阶段(二二)、植物组织培养技术在育种中的应用、植物组织培养技术在育种中的应用种质资源保护；种质资源保护；优良品种快速繁殖；优良品种快速繁殖；诱发和离体筛选突变体；诱发和离体筛选突变体；克服远缘杂交困难；克服远缘杂交困难；克服种子发育中的障碍；克服种子发育中的障碍；单倍体育种的技术环节单倍体育种的技术环节基因工程的基础技术基因工程的基础技术（一）单倍体育种（一）单倍体育种1.单倍体的概念及其特点单倍体的概念及其特点2.只含有一套染色体组的生物体；只含有一套染色体组的生物体；3.

25、被子植物的配子体世代。被子植物的配子体世代。矮小性；矮小性；不育性；不育性；全显性。全显性。2.单倍体植物在育种上的意义单倍体植物在育种上的意义1.单倍体植物的直接利用；单倍体植物的直接利用；2.克服杂种分离，缩短育种年限；克服杂种分离，缩短育种年限；3.快速获得异花授粉植物的自交系；快速获得异花授粉植物的自交系；4.单倍体植物的诱变育种；单倍体植物的诱变育种；5.克服远缘杂种不孕性与不稳定的现象；克服远缘杂种不孕性与不稳定的现象；3.单倍体植株和愈伤组织的培养单倍体植株和愈伤组织的培养（1）单倍体材料的采集）单倍体材料的采集 单单倍倍体体育育种种的的首首要要问问题题是是如如何何获获得得大大最

26、最的的单单倍倍体体植植株株。据据现现有有的的研研究究材材料料，用用花花药药培培养养产产生生单倍体植株有两个途径单倍体植株有两个途径:第第一一是是在在离离体体培培养养的的花花药药中中，花花粉粉经经过过类类似似胚胚胎胎发发育育的的过过程程直直接接形形成成单单倍倍体体植植物物，如如烟烟草草、曼陀罗等。曼陀罗等。第二是在离体培养的花药中，花粉形成愈第二是在离体培养的花药中，花粉形成愈伤组织，再从愈伤组织分化出单倍体植株。伤组织，再从愈伤组织分化出单倍体植株。（2）花药的接种）花药的接种v接种前的准备工作接种前的准备工作 接接种种和和培培养养花花药药是是在在无无菌菌条条件件下下进进行行的的，所用的一切用

27、具必须彻底灭菌。所用的一切用具必须彻底灭菌。v花粉发育时期的鉴定花粉发育时期的鉴定 适适宜宜的的花花粉粉发发育育时时期期对对于于提提高高花花粉粉诱诱导导愈愈伤伤组组织织分分化化的的频频率率是是很很重重要要的的，为为此此，进进行行花花药药培养前，要用显微镜进行花粉发育时期的鉴定。培养前，要用显微镜进行花粉发育时期的鉴定。经显微镜检查后，把花粉细胞的发育进期经显微镜检查后，把花粉细胞的发育进期与花药或花序的外部形态联系起来，找出花粉单与花药或花序的外部形态联系起来，找出花粉单核期或单核期的花蕾或花序的外部形态标志选取核期或单核期的花蕾或花序的外部形态标志选取花药进行接种培养。花药进行接种培养。（3

28、）从愈伤组织分化成苗）从愈伤组织分化成苗 诱诱导导愈愈伤伤组组织织分分化化出出根根、茎茎、叶叶的的方方法法是是在在愈愈伤伤组组织织长长到到1-3毫毫米米大大小小（如如小小米米大大）时时，即即可可转转移移到到诱诱导导分分化化培培养养基基上上，促促使使分分化化长长出出植植株株。一一般般说说来来，愈愈伤伤组组织织如如果果先先形形成成芽芽，随随后后根根自自然然会会发发生生，如如果果先先有有根根，以以后后不不一一定定会会出出芽芽。因因此此，掌握芽分化的条件是十分重要的。掌握芽分化的条件是十分重要的。愈愈伤伤组组织织转转移移培培养养工工作作是是在在无无菌菌室室或或接接种种箱箱内内进进行行的的，转转移移后后

29、愈愈伤伤组组织织培培养养在在23-28恒恒温温室室内内，每每日日光光照照9-11小小时时，可可用用日日光光灯灯作作辅辅助助光，光强度在光，光强度在2000勒克斯以上。勒克斯以上。在转移愈伤组织时，应注意其极性，原来在转移愈伤组织时，应注意其极性，原来向上的一但转移后的一但转移后仍应向上，否则向上的一但转移后的一但转移后仍应向上，否则会影响生长，同时在转移时，就避免沾带过多的会影响生长，同时在转移时，就避免沾带过多的培养基。培养基。4.染色体加倍染色体加倍处理方式：处理方式：试管内进行；试管内进行；花粉植株定植后进行；花粉植株定植后进行；药剂处理；药剂处理；植株鉴定。植株鉴定。单倍体育种程序：单

30、倍体育种程序：材料采集材料采集 接种培养接种培养 诱导愈伤组织诱导愈伤组织 获得再生植株获得再生植株 染色体加倍染色体加倍 幼苗培幼苗培育和品种选择育和品种选择（二）原生质体培养与体细胞杂交（二）原生质体培养与体细胞杂交 常规杂交育种由于物种间难以逾越常规杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。的天然屏障而举步维艰。科学家们受细科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示，胞全能性理论及组织培养成功的启示，逐渐将眼光转向细胞融合，试图通过这逐渐将眼光转向细胞融合，试图通过这种崭新的手段冲破自然界的禁锢。种崭新的手段冲破自然界的禁锢。1.原生质体的概念原生质体的概念 植物细胞原生质体是指

31、那些以去除植物细胞原生质体是指那些以去除全部细胞壁的细胞。全部细胞壁的细胞。此时，细胞外仅由此时，细胞外仅由细胞膜包裹，细胞膜包裹，呈圆形只有在高渗溶液中呈圆形只有在高渗溶液中才能相对稳定。才能相对稳定。原生质体经适当处理，可与其他细原生质体经适当处理，可与其他细胞融合成新的体细胞胞融合成新的体细胞。2.原生质体的特点原生质体的特点比完整的细胞更容易获得外来遗传物质，比完整的细胞更容易获得外来遗传物质，为实现异源遗传物质转化提供了较好的为实现异源遗传物质转化提供了较好的实验材料。实验材料。原生质体在一定条件下可以融合成杂种原生质体在一定条件下可以融合成杂种细胞，开辟了一条新的育种途径。细胞，开

32、辟了一条新的育种途径。3.发展概况发展概况1892，J.A.Klerker 用机械法获得原生质体；用机械法获得原生质体；1960，E.C.Cocking 用酶法首先从番茄根尖中分离用酶法首先从番茄根尖中分离出大量有活性的原生质体并通过培养再生出细胞出大量有活性的原生质体并通过培养再生出细胞壁形成再生植株壁形成再生植株;1960，G.Barski发现发现,题细胞原生质体能融合在一题细胞原生质体能融合在一起形成单核的、并能进行分裂的杂种细胞；起形成单核的、并能进行分裂的杂种细胞；1972，首次获得烟草体细胞种间杂种。，首次获得烟草体细胞种间杂种。80s 此项技术在我国得到发展。此项技术在我国得到发

33、展。4.原生质体的制备原生质体的制备（1）取材与灭菌）取材与灭菌（2）酶解）酶解(纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶)（3）分离）分离（沉淀法、漂洗法、滴洗法）（沉淀法、漂洗法、滴洗法）（4）洗涤）洗涤（5）鉴定（形态观测、活性鉴定）鉴定（形态观测、活性鉴定）原生质体的培养：原生质体的培养：细胞壁再生；细胞壁再生；细胞分裂；细胞分裂；植株再生。植株再生。5.原生质体的融合原生质体的融合v化学法诱导融合化学法诱导融合1)按比例混合双亲原生质体按比例混合双亲原生质体-2)滴加滴加PEG-3)滴加高钙高滴加高钙高PH值溶液值溶液-4)洗涤原生质体溶液洗涤原生质体溶液-5)离心获

34、得原生质体溶液离心获得原生质体溶液-6)筛选杂种细胞筛选杂种细胞-7)再生杂种细胞再生杂种细胞。6.融合细胞的培养鉴定与筛选融合细胞的培养鉴定与筛选杂和细胞的显微镜鉴别；杂和细胞的显微镜鉴别；互补法鉴定杂和细胞；互补法鉴定杂和细胞；细胞与分子生物学法；细胞与分子生物学法；植株形态的鉴别。植株形态的鉴别。（三）人工种子（三）人工种子 人工种子即人为制造的种子，它人工种子即人为制造的种子，它是一种含有植物胚状体或芽、营养成是一种含有植物胚状体或芽、营养成分、激素、及其他成分的人工胶囊。分、激素、及其他成分的人工胶囊。其具有种子的功能，可直接用于田间其具有种子的功能，可直接用于田间播种。播种。1、人

35、工种子的构成人工种子的构成 人工种皮人工种皮 胚胚 状状 体体 人工胚乳人工胚乳2、人工种子的特点人工种子的特点：（1）可以不受环境条件的限制，周年进行生产；）可以不受环境条件的限制，周年进行生产；（2）经人工无性繁殖产生，有利于保存该种系）经人工无性繁殖产生，有利于保存该种系 的优良性状；的优良性状；（3）成本低，适于田间机械化生产；）成本低，适于田间机械化生产；（4）可根据需要调节胚乳成分。）可根据需要调节胚乳成分。3、人工种子的制备人工种子的制备（1）胚状体的制备及其同步生长；）胚状体的制备及其同步生长；（2）人工胚乳的制备；）人工胚乳的制备；（3）配制包埋剂及人工包埋。）配制包埋剂及人工包埋。人工种子包埋示意图人工种子包埋示意图 4%海藻酸钠 体细胞胚 包埋丸 2%CaCl 人工种子 水 4、人工种子的贮存与萌发、人工种子的贮存与萌发 低温、干燥、洁净。低温、干燥、洁净。