酵母菌大小的测定和细胞计数优秀PPT.ppt
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1、酵母菌大小的测定和细胞计数第一页,本课件共有17页三、实验原理三、实验原理(一一)酵母菌大小的测定原理酵母菌大小的测定原理 所有微生物的大小需要用刻有一定刻度的测微尺来测量,先用绝对长度的物镜测微尺来校正不表示绝对长度的目镜测微尺,计算后者每格所代表的实际长度,然后放上待测的标本,用目镜测微尺测定标本上微生物细胞占目镜测微尺的格数,就可计算该微生物的大小。酵母菌的直径约8-10m。第二页,本课件共有17页(二二)酵母细胞计数原理酵母细胞计数原理 微生物常用的计数方法有两种,即直接计数法和间接计数法。前者利用血球计数板在显微镜下直接计数,能立即得到数值,但死活细胞都计数在内。后者是在平板上长成菌
2、落后再计数,反应较真实,但费时太长。本实验是利用血球计数板进行直接计数。计数前需对样品做适当稀释,按照规定方法及计算公式运算后,即可得出实际数值。第三页,本课件共有17页四、操作方法四、操作方法(一一)酵母菌大小测定的操作方法酵母菌大小测定的操作方法1.测微尺的构造和使用方法测微尺的构造和使用方法(1)目镜测微尺的构造 目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确的刻度,通常是将5mm划分为50格,实际每格等于100m。刻度的大小是随使用的目镜和物镜的放大倍数而改变,用前必须用物镜测微尺来标定,如图。(2)物镜测微尺的构造 物镜测微尺为一块特制的载玻片,其中央有一小圆圈。圆圈内刻有分度,将长1mm
3、的直线等分为100小格,每小格等于10m,如图。第四页,本课件共有17页2.目镜测微尺的标定目镜测微尺的标定(1)取下目镜,旋下目镜上的目透镜,将目镜测微尺放人目镜的中隔板上,使有刻度的一面朝下,再旋上目透镜,并装入镜筒内。(2)将物镜测微尺置于显微镜的载物台上,使有刻度的一面朝上,同观察标本一样,使具有刻度的小圆圈位于视野中央。(3)先用低倍镜观察,对准焦距,待看清物镜测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度与物镜测微尺的刻度相平行,并使两尺的左边第一条线相重合,再向右寻找两尺的另外一条重合线。如图(4)记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。第五页,本课件共有17页3.计
4、算方式计算方式(1)目镜测微尺每格长度=两个重叠刻度间物镜测微尺格数10两个重叠刻度间目镜测微尺格数(2)以同样方法,分别在不同倍率的物镜下测定测微尺上每格的实际长度。目镜测微尺()格=物镜测微尺()格目镜测微尺每格=()(3)如此测定后的目镜测微尺的尺度,仅适用于测定时所用的显微镜的目镜和物镜的放大倍数。若更换物镜、目镜的放大倍数时,必须再进行校正标定。第六页,本课件共有17页4.酵母菌大小的测定酵母菌大小的测定(1)取下物镜测微尺,换上酵母菌水浸制片。(2)测量菌体的长度和宽度各占目镜测微尺几格,然后换算出菌体的实际长度。(3)在同一标本上测定5-10个菌体,求其平均值。第七页,本课件共有
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