杂环类药物的.ppt

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1、第七章第七章 杂环类药物的分析杂环类药物的分析 第一节第一节 吡啶类药物的分析吡啶类药物的分析异烟肼异烟肼（isoniazid）吡啶吡啶（pyridine）尼可刹米尼可刹米（nikethamide）异烟腙异烟腙（ftivazide）丙硫异烟胺（丙硫异烟胺（protionamide）一、结构与性质一、结构与性质 1.吡啶环 弱弱碱碱性性 pKb8.8，非非水水碱碱量量法法含量测定或沉淀反应鉴别含量测定或沉淀反应鉴别 吡吡啶啶环环可可发发生生开开环环反反应应，可可用用于于吡啶类药物的鉴别吡啶类药物的鉴别 2.取代基：（1）异烟肼 位上酰肼基 弱酸性弱酸性 非水酸量法非水酸量法 还还原原性性 鉴鉴别

2、别或或氧氧化化还还原原滴滴定定法法含含量测定量测定 可可与与某某些些羰羰基基试试剂剂发发生生缩缩合合反反应应 鉴别或比色法含量测定鉴别或比色法含量测定 酰胺键易水解酰胺键易水解引入特殊杂质引入特殊杂质游离肼游离肼 （2）尼可刹米 位上酰胺基 易易水水解解，遇遇碱碱水水解解后后，释释放放出出具具有有碱碱性性的的二二乙乙胺胺，能能使使湿湿润润的的红红色色石石蕊蕊试纸变蓝色，故可以此进行鉴别。试纸变蓝色，故可以此进行鉴别。（3）丙硫异烟胺 位上硫代甲酰胺基 易易水水解解，加加酸酸水水解解后后，释释放放出出硫硫化化氢氢，能能使使湿湿润润的的醋醋酸酸铅铅试试纸纸显显黑黑色色，故可以此进行鉴别。故可以此进

3、行鉴别。3.UV和IR 二、鉴别试验二、鉴别试验（一）吡啶环的反应 1.沉淀反应 （1）与氯化汞的反应）与氯化汞的反应 （2）与铜盐的反应）与铜盐的反应尼可刹米尼可刹米 ChP（2000）【鉴鉴别别】（3）取取本本品品 2 滴滴，加加水水 1 ml，摇摇匀匀，加加硫硫酸酸铜铜试试液液 2 滴滴与与硫硫氰氰酸酸胺试液胺试液 3 滴，即生成草绿色沉淀。滴，即生成草绿色沉淀。2.吡啶环的开环反应 适适用用于于吡吡啶啶 、未未取取代代，以以及及 、为烷基或羧基的衍生物为烷基或羧基的衍生物（1）戊烯二醛反应（Knig反应）尼可刹米尼可刹米 ChP（2000）【鉴鉴别别】（2）取取本本品品 1 滴滴，加加

4、水水 50 ml，摇摇匀匀，分分取取 2 ml，加加溴溴化化氰氰试试液液 2 ml与与 2.5%苯苯胺胺溶溶液液 3 ml，摇摇匀匀，溶液渐显黄色。溶液渐显黄色。异烟肼：异烟肼：（2）二硝基氯苯反应 异烟腙异烟腙 ChP（2000）【鉴鉴别别】取取异异烟烟腙腙约约50 mg，加加2,4二二硝硝基基氯氯苯苯50 mg与与乙乙醇醇3 m1，置置水水浴浴中中煮煮沸沸23 min，加加10氢氢氧氧化化钠钠溶液溶液2滴，静置后，即显鲜明的红色。滴，静置后，即显鲜明的红色。异烟肼不经处理的反应异烟肼不经处理的反应：（二）酰肼基团的反应 1.还原反应 异烟肼异烟肼 ChP（2000）【鉴别】【鉴别】（2）取

5、异烟肼约）取异烟肼约10 mg，置试管中，加水置试管中，加水2 ml溶解后，加氨制溶解后，加氨制硝酸银试液硝酸银试液1 m1，即发生气泡与黑色，即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。浑浊，并在试管壁上生成银镜。2.缩合反应 异烟肼异烟肼 ChP（2000）【鉴别】【鉴别】（1）取本品约）取本品约0.1 g，加水，加水5 ml溶解后，加溶解后，加10香草醛的乙醇溶香草醛的乙醇溶液液1 m1，摇匀，微热，放冷，即析出，摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，在在105干燥后，测定熔点，其熔点干燥后，测定熔点，其熔点为为228231，熔融时同时分

6、解。，熔融时同时分解。（三）分解产物的反应 1.尼可刹米尼可刹米 ChP（2000）【鉴鉴别别】（1）取取本本品品 10 滴滴，加加氢氢氧氧化化钠钠试试液液 3 ml，加加热热，即即发发生生二二乙乙胺胺的的臭臭气气，能能使使湿湿润润的的红红色色石石蕊蕊试试纸纸变蓝色。变蓝色。2.丙硫异烟胺丙硫异烟胺 ChP（2000）【鉴鉴别别】（1）取取本本品品约约 50 mg，加加盐盐酸酸溶溶液液（9100）3 ml，缓缓缓缓加加热热，发发生生的的气气体体可可使使湿湿润润的的醋醋酸酸铅铅试试纸纸显显黑色。黑色。（四）紫外吸收光谱特征 丙硫异烟胺丙硫异烟胺 ChP（2000）【鉴鉴别别】（1）取取本本品品，

7、加加乙乙醇醇制制成成每每1 ml 中中含含 20 g 的的溶溶液液，照照分分光光光光度度法法（附附录录A）测测定定，在在 291 nm 的的波波长处有最大吸收，吸收度约为长处有最大吸收，吸收度约为0.78。（五）（五）IR尼可刹米尼可刹米 ChP（2000）【鉴鉴别别】（4）本本品品的的红红外外吸吸收收图图谱谱应应与对照的图谱（光谱集与对照的图谱（光谱集 135 图）一致。图）一致。三、杂质检查三、杂质检查 杂质来源杂质来源 原料引入、降解产生原料引入、降解产生 （一）异烟肼中游离肼的检查（一）异烟肼中游离肼的检查 1.薄层色谱法（薄层色谱法（TLC）（1）ChP（2000）杂质对照品法杂质对

8、照品法 取本品，加水制成每取本品，加水制成每 1ml 中含中含 50mg的的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加水溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加水制成每制成每 1ml中含中含 0.20mg（相当于游离肼（相当于游离肼50g 的溶液，作为对照溶液。吸取供试品的溶液，作为对照溶液。吸取供试品溶液溶液 10l 与对照溶液与对照溶液 2l 分别点于同一硅分别点于同一硅胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）胶薄层板（用羧甲基纤维素钠溶液制备）上，以异丙醇丙酮（上，以异丙醇丙酮（3 2）为展开剂，）为展开剂，展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯展开后，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，甲醛试液，15m

9、in后检视，后检视，在供试品主斑在供试品主斑点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得点前方与硫酸肼斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。显黄色斑点。（2）BP（1998）游离肼游离肼 杂质对照品法杂质对照品法 有关物质有关物质 高低浓度对比法高低浓度对比法2.比浊法比浊法 JP（13）检查方法检查方法 灵敏度法灵敏度法 反应原理反应原理 游离肼游离肼+水杨醛水杨醛水杨醛腙水杨醛腙 优点：优点：不用对照品，价廉、简单易不用对照品，价廉、简单易行行 缺点：缺点：准确度差准确度差3.差示分光光度法差示分光光度法 游游离离肼肼+对对二二甲甲氨氨基基苯苯甲甲醛醛黄黄色色缩缩合合物物 于于456nm波长处有最大吸

10、收波长处有最大吸收 异异烟烟肼肼+对对二二甲甲氨氨基基苯苯甲甲醛醛缩缩合合物物 于于456nm波长处波长处无无吸收吸收 游游离离肼肼+3%丙丙酮酮无无色色的的二二甲甲基基甲甲酮酮连连氮氮 参参比比：异异烟烟肼肼+游游离离肼肼+对对二二甲甲氨氨基基苯苯甲甲醛醛+3%丙酮丙酮 样样品品：异异烟烟肼肼+游游离离肼肼+对对二二甲甲氨氨基基苯苯甲甲醛醛 测定，对照法定量测定，对照法定量（二）尼可刹米中有关物质的检查（二）尼可刹米中有关物质的检查 ChP（2000）TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法 配制两种不同浓度的对照溶液配制两种不同浓度的对照溶液四、含量测定四、含量测定（一）异烟肼的含量测定 1.

11、氧化还原滴定法（1）溴酸钾法）溴酸钾法 ChP（2000）原料及制剂）原料及制剂反应摩尔比反应摩尔比 3 2 取取本本品品约约 0.2g，精精密密称称定定，置置 100ml量量瓶瓶中中，加加水水使使溶溶解解并并稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀；精精密密量量取取25m1，加加水水50m1、盐盐酸酸20ml与与甲甲基基橙橙指指示示剂剂1滴滴，用用溴溴酸酸钾钾滴滴定定液液（0.01667mo1/L）缓缓缓缓滴滴定定（温温度度保保持持在在1825）至至粉粉红红色色消消失失。每每1ml的的溴溴酸酸钾钾滴滴定定液液（0.01667mol/L）相相当当于于3.429mg的的C6H7N3O。（2）溴量法 反应摩

12、尔比 14（3）剩余碘量法 反应摩尔比 142.非水溶液滴定法（1）非水酸量法（2）非水碱量法（二）尼可刹米的含量测定 1.非水溶液滴定法非水溶液滴定法 ChP（2000）原料）原料 2.紫外分光光度法紫外分光光度法 ChP（2000）注射液）注射液 内容量移液管内容量移液管 用用内内容容量量移移液液管管精精密密量量取取本本品品1m1，置置 100ml 量量瓶瓶中中，用用 0.5 硫硫酸酸溶溶液液分分次次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加0.5硫硫酸酸溶溶液液稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀，精精密密量量取取适适量量，加加0.5硫硫酸酸溶溶液液稀稀释释成成每每1

13、ml中中约约含含尼尼可可刹刹米米20g的的溶溶液液，在在263nm的的波波长长处处测测定定吸吸收收度度，按按C10H14N2O的的吸吸收收系数（系数（）为）为292计算，即得。计算，即得。（三）异烟腙的含量测定 非非水水溶溶液液滴滴定定法法 电电位位法法指指示示终终点点 ChP（2000）原料及片剂）原料及片剂（四）丙硫异烟胺的含量测定 1.非水溶液滴定法非水溶液滴定法 ChP（2000）原料）原料 2.银量法银量法 ChP（2000）片剂）片剂 取取本本品品20片片，精精密密称称定定，研研细细，精精密密称称取取适适量量（约约相相当当于于丙丙硫硫异异烟烟胺胺0.3g）置置具具塞塞锥锥形形瓶瓶中

14、中，加加丙丙酮酮20ml使使丙丙硫硫异异烟烟胺胺溶溶 解解，精精 密密 加加 入入 硝硝 酸酸 银银 滴滴 定定 液液（0.1mo1/L）50m1，摇摇匀匀，放放置置15min，加加水水50m1、硝硝酸酸3m1、硝硝基基苯苯5ml与与硫硫酸酸铁铁铵铵指指示示液液2m1，用用硫硫氰氰酸酸铵铵滴滴定定液液（0.1mo1/L）滴滴定定，并并将将滴滴定定的的结结果果用用空空白白 试试 验验 校校 正正。每每 lml的的 硝硝 酸酸 银银 滴滴 定定 液液（0.1mo1/L）相当于）相当于9.014mg的的C9H12N2S。99：79.下列药物中，哪一个药物加氨制硝酸银能产生银镜反应A.地西泮B.阿司匹

15、林C.异烟肼D.苯佐卡因E.苯巴比妥 97：132用于吡啶类药物鉴别的开环反应有A.茚三酮反应B戊烯二醛反应C坂口反应D.硫色素反应E二硝基氯苯反应 例1.ChP（2000）异烟肼的测定方法为A.溴酸钾滴定法B.溴量法C.TCLD.NaNO2E.比色法 例2.能和2,4一二硝基氯苯发生呈色反应的药物是A.异烟腙B.硫酸奎宁C.阿莫西林D.四环素E.炔孕酮 例3.能和硫酸铜及硫氰酸铵反应，生成草绿色沉淀的药物为A.对乙酰氨基酚B.异烟肼C.尼可刹米D.地西泮E.维生素E 例4.经高锰酸钾或溴水氧化后，可发生开环形成戊烯二醛反应的药物为A.葡萄糖B.皮质酮C.维生素CD.土酶素E.异烟肼 例5.溴

16、酸钾法测定异烟肼含量的方法是 A.属于氧化还原滴定法 B.lmol溴酸钾相当于3/2mol的异烟肼 C.采用永停滴定法指示终点 D.在HCl酸性条件下进行滴定 E.还可以用于异烟肼制剂的含量测定 例6.异烟肼可由原料反应不完全或贮藏中的降解反应而引入哪种杂质A.间氨基酚B.水杨酸C.对氨基苯甲酸D.游离肼E.其他甾体 例7.可用于异烟肼鉴别的反应有A.与氨制硝酸银的反应B.戊烯二醛反应C.坂口反应D.硫色素反应E.二硝基氯苯反应 第二节第二节 吩噻嗪类药物的分析吩噻嗪类药物的分析 吩噻嗪类药物的基本结构 奋乃静奋乃静癸氟奋乃静癸氟奋乃静盐酸氟奋乃静盐酸氟奋乃静盐酸三氟拉嗪盐酸三氟拉嗪盐酸二氧丙

17、嗪盐酸二氧丙嗪一、结构与性质一、结构与性质（一）结构分析 1.硫氮杂蒽母核（1）含S、N的三环共轭的大体系，S、N与苯环形成p-共轭具有紫外吸收光谱特征 （2）硫氮杂蒽环上硫原子为-2价，具有还原性，易氧化呈色 （3）硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色 2.取代基 R：脂烃胺基、哌嗪基，具碱性 R：卤素（二）性质 1.紫紫外外与与红红外外吸吸收收光光谱谱 本本类类药药物物的的紫紫外外特特征征吸吸收收，主主要要由由母母核核三三环环的的系系统统所所产产生生，一一般般具具有有三三个个峰峰值值。即即在在 204209nm（205nm附附近近）、250265nm（254nm附附近近）

18、和和300325nm（300nm附附近近）。最最强强峰峰多多在在 250265nm。2位位上上的的取取代代基基（R）不不同同，会会引引起吸收峰发生位移。起吸收峰发生位移。其其结结构构中中-2 价价的的硫硫，易易氧氧化化，氧氧化产物砜及亚砜有四个吸收峰。化产物砜及亚砜有四个吸收峰。吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物随随取取代代基基 R 和和R的的不同，产生不同的红外吸收光谱。不同，产生不同的红外吸收光谱。2.易被氧化呈色易被氧化呈色 3.易与金属离子络合呈色易与金属离子络合呈色 4.碱性碱性二、鉴别试验二、鉴别试验（一）（一）UV和和IR奋乃静奋乃静 ChP（2000）鉴鉴别别 （2）取取本本品品，加加无

19、无水水乙乙醇醇制制成成每每1ml 中中含含 7 g 的的溶溶液液，照照分分光光光光度度法法（附附录录A）测测定定，在在 258nm 的的波长处有最大吸收，吸收度约为波长处有最大吸收，吸收度约为0.65。（3）本品的红外吸收图谱应与对照）本品的红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集的图谱（光谱集 243 图）一致图）一致（二）显色反应 1.氧化剂氧化显色氧化剂氧化剂 硫酸、硝酸、过氧化氢硫酸、硝酸、过氧化氢奋乃静奋乃静 ChP（2000）鉴鉴别别（1）取取本本品品 5mg，加加盐盐酸酸与与水水各各 1ml，加加热热至至80，加加入入过过氧氧化化氢氢溶溶液液数数滴滴，即即显显深深红红色色；放放置置后后

20、，红色渐褪去。红色渐褪去。盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪 ChP（2000）鉴别鉴别（1）取本品约）取本品约 5mg，加硫酸，加硫酸5ml 溶解后，溶液显樱桃红色；放置溶解后，溶液显樱桃红色；放置后，色渐变深。后，色渐变深。（2）取本品约）取本品约 0.1g，加水，加水 3ml 溶解溶解后，加硝酸后，加硝酸 1ml，即生成红色沉淀；，即生成红色沉淀；加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变为橙黄色。为橙黄色。癸氟奋乃静癸氟奋乃静 ChP（2000）鉴别鉴别（2）取本品约）取本品约 5mg，加甲醇，加甲醇2ml 溶解后，加溶解后，加 0.1%氯化钯溶液氯化钯溶液 3ml，即有沉淀生

21、成，并显红色，再，即有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深。加过量的氯化钯溶液，颜色变深。2.与钯离子络合显色（三）分解产物的反应癸氟奋乃静癸氟奋乃静 ChP（2000）鉴别鉴别（1）取本品）取本品 15 20mg，加碳，加碳酸钠与碳酸钾各约酸钠与碳酸钾各约0.1g，混匀，在，混匀，在 600 炽灼炽灼 1520分钟，放冷，加水分钟，放冷，加水2ml 使溶解，加盐酸溶液（使溶解，加盐酸溶液（12）酸）酸化，滤过，滤液加茜素锆试液化，滤过，滤液加茜素锆试液 0.5ml，应显黄色。，应显黄色。（四）氯化物的反应盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪 ChP（2000）鉴别鉴别（3）本品的水溶液显氯化物

22、）本品的水溶液显氯化物的鉴别反应（附录的鉴别反应（附录）。）。三、有关物质检查三、有关物质检查 1.癸氟奋乃静及其注射液癸氟奋乃静及其注射液 TLC 参比杂质对照品法参比杂质对照品法 以盐酸氟奋乃静为对照品以盐酸氟奋乃静为对照品 2.其他药物其他药物 TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法四、含量测定（一）（一）非水溶液滴定法非水溶液滴定法 原料药原料药 HClO4在在冰冰醋醋酸酸溶溶液液中中，具具强强氧氧化化性性，可可氧氧化化吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物产产生生红红色色的的氧氧化化物物，干干扰扰指指示示剂剂终终点点的的观观察察。排排除方法：除方法：（1）改用中性溶剂）改用中性溶剂（2）加抗坏血酸）

23、加抗坏血酸（3）电位法指示终点）电位法指示终点 （二）紫外分光光度法1.直接分光光度法直接分光光度法 盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪：片剂测定波长为：片剂测定波长为249nm（为为910）；注射液为了）；注射液为了消除抗氧剂维生素消除抗氧剂维生素C（max 243nm）对测定的干扰，测定波长改为对测定的干扰，测定波长改为299nm（为为108）。）。同理，同理，盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪片剂测定波长片剂测定波长为为254nm（为为915）；注射液测定）；注射液测定波长改为波长改为306nm（为为115）。2.萃取后分光光度法萃取后分光光度法 盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪注射液3.二阶导数分光光度法二阶导数分光光

24、度法 盐酸氯丙嗪注射液盐酸氯丙嗪注射液 抗氧剂维生素抗氧剂维生素C的二阶导数光谱近的二阶导数光谱近似为接近基线的一条直线，不干扰盐似为接近基线的一条直线，不干扰盐酸氯丙嗪的测定酸氯丙嗪的测定 因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数光谱量取峰光谱量取峰266nm谷谷254nm距离，标准距离，标准曲线法定量曲线法定量4.萃取双波长分光光度法（1）原理）原理 在在待待测测组组分分（a）的的最最大大吸吸收收波波长长（测测定定波波长长，1）处处测测定定待待测测组组分分和和干干扰扰组组分分（b）吸吸收收度度的的总总和和；另另选选一一适适当当波波长长（参参比比波波长长，2）测测定定吸吸收收

25、度度，并并使使干干扰扰组组分分在在测测定定波波长长和和参参比比波波长长处处的的吸吸收收度度相相等等，即即 ，而而待待测测组组分分在这两个波长处吸收度的差值足够大。在这两个波长处吸收度的差值足够大。（2）定量依据 样品在二波长下吸收度差值（A）：即，吸收度差值（A）仅与待测组分的浓度有关，而与干扰组分无关，干扰组分的干扰被消除。（3）必要条件 干扰组分在两个波长处吸收度相等 待测组分在两个波长处吸收度相差足够大（4）应用 萃取 除去抗氧剂的干扰 双波长分光光度法测定 排除氧化产物的干扰排除氧化产物的干扰 测定波长测定波长 254nm 参比波长参比波长 277nm 对照法定量对照法定量（三）铈量法

26、 自身指示终点或电位法、永停自身指示终点或电位法、永停法指示终点法指示终点 优点：优点：硫酸铈作滴定剂具有高的氧化硫酸铈作滴定剂具有高的氧化电位，且为一价还原；不存在对环电位，且为一价还原；不存在对环取代基的副反应，专属性高。取代基的副反应，专属性高。本法既可用于原料，亦可用于本法既可用于原料，亦可用于片剂的测定片剂的测定 （四）比色法 1.钯离子比色法 反应在反应在 pH20.1 的缓冲液中进行的缓冲液中进行优点：优点：钯钯离离子子比比色色法法可可选选择择性性地地用用于于未未被氧化的吩噻嗪类药物的测定被氧化的吩噻嗪类药物的测定 2.铁盐比色法铁盐比色法95：131盐酸氯丙嗪的含量测定方法有A

27、.中和法B.非水滴定法C.紫外法 D.旋光法E.铈量法 99x：87.中国药典（1995年版）对盐酸异丙嗪注射液的含量测定，选用299nm波长处测定，其原因是 A.299nm处是它的最大吸收波长 B.为了排除其氧化产物的干扰 C.为了排除抗氧剂的干扰 D在299nm处，它的吸收系数最大 E.在其他波长处，因其无明显吸收 99x：78.有氧化产物存在时，吩噻嗪类药物的鉴别或含量测定方法为A.非水溶液滴定法B.紫外分光光度法C.荧光分光光度法D.钯离子比色法E.pH指示剂吸收度比值法 例1.中国药典(2000年版)中地西泮原料药中2-甲氨基-5-氯二苯酮的检查法为A.TLCB.HPLCC.GCD.

28、沉淀法E.显色法 例2.检查盐酸氯丙嗪中“有关物质”时，采用的对照溶液为A.杂质的标准溶液B.标准“有关物质”溶液C.供试品溶液D.供试液的稀释溶液E.对照溶液 例3.某药物于酸性溶液中，加硫酸铈试液则产生红色，继续滴加硫酸铈试液，红色由浅变深，继由深又变浅直至红色消失，该药物应为A.雌二醇B.氯丙嗪C.诺氟沙星D.硫酸镁E.苯巴比妥钠 例4.吩噻嗪类药物与钯离子反应，需在以下哪种酸性条件下进行A.pH4B.pH33.5C.pH20.1D.pH1E.pH5 第三节第三节 苯并二氮杂卓苯并二氮杂卓类药物的分析类药物的分析 环庚三烯环庚三烯草草卓卓硝西泮硝西泮氯硝西泮氯硝西泮奥沙西泮奥沙西泮盐酸氟

29、西泮盐酸氟西泮艾司唑仑艾司唑仑阿普唑仑阿普唑仑一、结构与性质一、结构与性质 1.苯并二氮杂卓母核苯并二氮杂卓母核 弱碱性，弱碱性，UV 2.结构中的环一般比较稳定，但在酸结构中的环一般比较稳定，但在酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮衍生物。衍生物。3.含卤素含卤素二、鉴别试验二、鉴别试验（一）化学反应 1.沉淀反应沉淀反应 氯氮卓氯氮卓 ChP（2000）【鉴别】【鉴别】（2）取本品约）取本品约 10mg，加盐，加盐酸溶液（酸溶液（91000）10ml 溶解后，加溶解后，加碘化铋钾试液碘化铋钾试液 1 滴，即生成橙红色沉滴，即生成橙红色沉淀。淀。阿普唑仑阿普

30、唑仑 ChP（2000）鉴别鉴别（1）取本品约）取本品约 5mg，加盐酸，加盐酸溶液（溶液（91000）2ml 溶解后，分为两溶解后，分为两份：一份加硅钨酸试液份：一份加硅钨酸试液 1 滴，即生成滴，即生成白色沉淀；另一份加碘化铋钾试液白色沉淀；另一份加碘化铋钾试液 1 滴，即生成橙红色沉淀。滴，即生成橙红色沉淀。2.水解后重氮化水解后重氮化偶合反应偶合反应 氯氮卓、艾司唑仑、奥沙西泮氯氮卓、艾司唑仑、奥沙西泮 氯氮卓氯氮卓 ChP（2000）鉴别鉴别（1）取本品约）取本品约 10mg，加盐酸，加盐酸溶液（溶液（12）15ml，缓缓煮沸，缓缓煮沸 15 分分钟，放冷，溶液显芳香第一胺类的鉴钟，

31、放冷，溶液显芳香第一胺类的鉴别反应（附录别反应（附录）。）。3.水解后呈茚三酮反应水解后呈茚三酮反应 地西泮地西泮 4.硫酸硫酸荧光反应荧光反应地西泮地西泮 ChP（2000）鉴别鉴别（1）取本品约）取本品约 10mg，加硫酸，加硫酸3ml，振摇使溶解，在紫外灯，振摇使溶解，在紫外灯（365nm）下检视，显黄绿色荧光。）下检视，显黄绿色荧光。氯氮卓氯氮卓黄色黄色艾司唑仑艾司唑仑亮绿色亮绿色硝西泮硝西泮淡蓝色淡蓝色5.分解产物的反应分解产物的反应 地西泮地西泮 ChP（2000）鉴别鉴别（2）取本品）取本品 20mg，用氧瓶燃，用氧瓶燃烧法（附录烧法（附录 C）进行有机破坏，）进行有机破坏，以以

32、 5%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 5ml 为吸收液，为吸收液，燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓煮沸煮沸 2 分钟，溶液显氯化物的鉴别反分钟，溶液显氯化物的鉴别反应（附录应（附录）。）。（二）（二）UV 和和 IR（三）（三）TLC三、特殊杂质的检查（一）（一）有关物质的检查有关物质的检查 1.地西泮中有关物质的检查地西泮中有关物质的检查 地西泮的原料及片剂地西泮的原料及片剂 TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法 2.氯氮卓中有关物质的检查氯氮卓中有关物质的检查 USP（24）TLC 氧化物、氨基物氧化物、氨基物 杂质对照品法杂质对照品法 有关物质有关物质 参比杂质

33、对照品法参比杂质对照品法 BP（1998）TLC 高低浓度对比法高低浓度对比法 3.氯氯氮氮卓卓中中有有关关物物质质的的反反相相高高效效液液相相色谱法色谱法 （二）降解产物的检查（二）降解产物的检查 地西泮注射液地西泮注射液 分解产生分解产生2-甲氨基甲氨基-5-氯二苯甲酮氯二苯甲酮 HPLC 主成分自身对照法主成分自身对照法 1.峰面积归一化法 取一定量供试品溶液进样，测定各杂质及药物的峰面积，计算各杂质峰面积及其总和占总峰面积的百分率，不能超过限量。注意溶剂峰不应计算在总峰面积内。优点：不需杂质对照品，简便易行。缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能有差异，控制杂质峰面积百分率不一定

34、就是杂质限量，准确度差。2.主成分自身对照法 杂质峰面积与主成分峰面积相差悬殊时应用。方法 分别进样，测定供试品溶液中各杂质峰面积及其总和，与对照溶液主成分峰面积比较，控制供试品中杂质的量。缺点：检测波长处，各杂质和药物的吸收强度可能有差异，准确度差 优点：不需杂质对照品，可同时控制各个杂质及其总量限度 3.内标法测定供试品中杂质的总量限度方法 供试品供试品溶液1 图1供试品+内标供试品溶液2 图2 判断 若图1无与内标峰保留时间相同的杂质峰，则图2中各杂质峰面积之和应小于内标物质峰面积（溶剂峰不计在内）若图1有与内标峰保留时间相同的杂质峰，则将图2上的内标峰面积减去图1中此杂质峰面积，得内标

35、物质峰的校正面积；图2中各杂质峰面积加上图1此杂质峰面积，得各杂质峰的校正总面积；各杂质峰校正总面积应小于内标物质峰的校正面积。4.内标法加校正因子测定供试品中某个杂质的含量 准确测定杂质含量 方法 内标+杂质对照品溶液，进样，测定，计算校正因子 供试品+内标供试品溶液，进样，测定杂质和内标峰面积或峰高，计算杂质量 5.外标法测定供试品中某个杂质的量供试品供试品溶液 杂质对照品对照品溶液进样，测定，计算杂质的含量 缺点：不易准确控制进样量，宜用定量环进样 四、含量测定四、含量测定（一）非水溶液滴定法 原料（二）紫外分光光度法（三）比色法 1.地地西西泮泮经经水水解解后后氯氯仿仿提提取取液液的的

36、比比色测定法色测定法 2.地地西西泮泮水水解解产产物物甘甘氨氨酸酸与与茚茚三三酮酮反应后比色测定法反应后比色测定法 3.氯氯氮氮卓卓经经酸酸水水解解后后的的重重氮氮化化偶偶合比色测定法合比色测定法（四）HPLC 1.地西泮注射液的地西泮注射液的 HPLC 法法 内标法加校正因子定量内标法加校正因子定量 2.三唑仑的三唑仑的 HPLC 法法 内标法加校正因子定量内标法加校正因子定量97：116120 A.氯氮卓（利眠宁）B地西泮（安定）C两者均能 D.两者均不能 97：116分子母核属于苯并二氮杂卓 97：117用氧瓶燃烧法破坏后，显氯化物反应 97：118水解后呈芳伯胺反应 97：119与三氯化锑反应生成紫红色 97：120溶于硫酸后，在紫外光下显黄绿色荧光(C)（C）（A）（D）（B）99：85.硫酸荧光反应为地西泮的特征鉴别反应之一。地西泮加硫酸溶解后，在紫外光下显A.红色荧光 B.橙色荧光C.黄绿色荧光 D.淡蓝色荧光E.紫色荧色 例1.某药物经酸水解后呈茚三酮反应，溶液显紫色，该药为A.氯氮卓B.地西泮C.盐酸普鲁卡因D.阿司匹林E.尼可刹米 例2.某药物经酸水解后可用重氮化偶合反应鉴别，此药物是A.盐酸氯丙嗪B.氯氮卓C.地西泮D.醋酸氢化可的松E.维生素C