消毒灭菌技术及效果监测精选课件.ppt

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1、关于消毒灭菌技术及效果监测第一页，本课件共有30页2l灭菌杀灭或除去所有微生物的繁殖体和芽胞。l消毒杀灭或除去病原微生物。l防腐抑制微生物的生长与繁殖。抑菌剂或防腐剂。l无菌不含有任何的活菌一消毒与灭菌技术 基本概念第二页，本课件共有30页3二消毒与灭菌方法 1物理灭菌法l热力灭菌法（干热灭菌、湿热灭菌）l辐射灭菌法（紫外线、电离幅射、微波）l滤过除菌法（除菌滤器、适用物品）l其他超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细胞、提取抗原）干燥与低温抑菌第三页，本课件共有30页4热力灭菌法l原理使微生物蛋白质，酶变性凝固；膜结构破坏微生物体内的DNA断裂，核蛋白解体。l方法 干热灭菌法 湿热灭菌法热力

2、灭菌法热力灭菌法第四页，本课件共有30页5焚烧焚烧-最彻底的灭菌方法最彻底的灭菌方法烧灼烧灼-直接用火焰灭菌方法直接用火焰灭菌方法 如接种环、试管口、三角瓶口如接种环、试管口、三角瓶口干烤干烤-加热加热160-1160-170 2h70 2h 玻璃器皿、陶瓷玻璃器皿、陶瓷1 1、干热灭菌法、干热灭菌法灭菌效果：可杀死营养体和芽胞灭菌效果：可杀死营养体和芽胞如尸体等如尸体等第五页，本课件共有30页62.2.湿热灭菌法湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法（高压蒸汽灭菌法（热压灭菌法）热压灭菌法）最有效的湿热灭菌法最有效的湿热灭菌法 121 121 15-20mim15-20mim（杀芽胞（杀芽胞)煮沸消毒法煮

3、沸消毒法水煮水煮100 5100 5mim(mim(杀繁殖体杀繁殖体)-2)-2h h(杀芽胞杀芽胞)流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法间歇蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法水蒸汽水蒸汽100 15-30100 15-30mimmim(杀繁殖体杀繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌(杀芽胞）杀芽胞）较低的温度较低的温度 61 3061 30mim/71 30smim/71 30s（杀致病菌）（杀致病菌）效果比干热好效果比干热好第六页，本课件共有30页7 利用化学药物（消毒防腐剂）破利用化学药物（消毒防腐剂）破坏微生物的化学组成、物理结构和生坏微生物的化学组成、物

4、理结构和生理活动，达到防腐灭菌目的。理活动，达到防腐灭菌目的。消毒与灭菌方法消毒与灭菌方法 2 2化学消毒法化学消毒法第七页，本课件共有30页 三、医院消毒效果监测范围三、医院消毒效果监测范围 日日常常监监测测重重点点科科室室（手手术术室室、层层流流洁洁净净病病房房、ICUICU、产产房房、新新生生儿儿科科、母母婴婴同同室室病病房房、透透析析室室、血血液液病病房房、烧烧伤伤病病房房、供应室、内镜室、治疗室、换药室供应室、内镜室、治疗室、换药室 发发生生医医院院内内感感染染时时应应在在发发生生感感染染的的科科室及相关科室采样监测室及相关科室采样监测 第八页，本课件共有30页四、医院消毒效果监测分

5、类四、医院消毒效果监测分类 消毒灭菌效果监测：消毒灭菌效果监测：使用中消毒液或无菌器械保存液使用中消毒液或无菌器械保存液 灭菌设备灭菌设备（压力蒸汽灭菌器、环氧乙烷灭菌器）（压力蒸汽灭菌器、环氧乙烷灭菌器）紫外线灯紫外线灯 灭菌物品灭菌物品 环境卫生学监测：环境卫生学监测：空气空气 物表物表 医务人员手医务人员手 第九页，本课件共有30页1 1、空气消毒效果监测、空气消毒效果监测 1 1、采样时间：消毒处理后、操作前进行采样。、采样时间：消毒处理后、操作前进行采样。2 2、布点及采样方法：、布点及采样方法：（1 1）类类环环境境布布点点、采采样样方方法法：依依据据医医院院洁洁净净手手术术部部建

6、建筑筑技技术术规范规范(GB50333-2002)10.3.13(GB50333-2002)10.3.13、手术区：需要特别保护的手术台及其周围区域。手术区：需要特别保护的手术台及其周围区域。级级手手术术室室的的手手术术区区是是指指手手术术台台两两侧侧边边至至少少各各外外推推0.9m0.9m、两两端端至少各外推至少各外推0.4m0.4m后（包括手术台）的区域；后（包括手术台）的区域；级级手手术术室室的的手手术术区区是是指指手手术术台台两两侧侧边边至至少少各各外外推推0.6m0.6m、两两端端至至少各外推少各外推0.4m0.4m后后(包括手术台包括手术台)的区域；的区域；级级手手术术室室的的手手

7、术术区区是是指指手手术术台台四四边边至至少少各各外外推推0.4m0.4m后后（包包括括手手术术台）的区域。台）的区域。级手术室不分手术区和周边区。级手术室不分手术区和周边区。周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。周边区：洁净手术室内除去手术区以外的其他区域。第十页，本课件共有30页 类环类环境境采样采样方法方法 将普通营养琼脂平皿（直径为将普通营养琼脂平皿（直径为9cm9cm）放在）放在室内手术区和周边区各采样点处，采样高度离室内手术区和周边区各采样点处，采样高度离地面地面0.80.8米，采样时将平皿盖打开，扣放于米，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，平皿旁，暴露暴露30 30 分钟分

8、钟，盖好，于，盖好，于3737培养培养2424小时小时，分别计数手术区和周边区的平均菌落数，分别计数手术区和周边区的平均菌落数。第十一页，本课件共有30页、类环境布点、采样方法类环境布点、采样方法 依依据据消消毒毒技技术术规规范范(卫卫生生部部20022002年年版版)3.17.83.17.8。室室内内面面积积30M30M2 2，设设内内、中中、外外对对角角线线3 3点点，内内、外外点点布布点点部部位位距距墙墙壁壁1M1M处处；室室内内面面积积30 30 M M2 2，设设4 4角角及及中中央央5 5点点（双对角线），（双对角线），4 4角的布点部位距墙壁角的布点部位距墙壁1M1M处。处。将将

9、普普通通营营养养琼琼脂脂平平皿皿(直直径径为为9cm)9cm)放放在在室室内内各各采采样样点点处处，采采样样高高度度距距地地面面1.51.5米米（GB15982-1995GB15982-1995：0.80.81.51.5米米），采采样样时时将将平平皿皿盖盖打打开开，扣扣放放于于平平皿皿旁旁，暴暴露露5 5分分钟钟，盖盖好好立立即即送送检检，于于3737培培养养4848小小时时，计计数数平平板板菌菌落数，并计算出空气细菌菌落总数。落数，并计算出空气细菌菌落总数。第十二页，本课件共有30页空气采样时的注意事项空气采样时的注意事项 1 1、（消毒前）前提将放置平皿的采样台准备好。、（消毒前）前提将放

10、置平皿的采样台准备好。2 2、开门方式：自动门、开门方式：自动门,推拉式弹簧门推拉式弹簧门,有把手的门。有把手的门。3 3、行走路线（尽可能少、行走路线（尽可能少 在室内走动）在室内走动）动作要动作要 轻。先布皿轻。先布皿 后开盖。后开盖。4 4、动态环境、动态环境 5 5、同一房间空气、物表、同一房间空气、物表 采样，先采空气，后采样，先采空气，后 采物表；最好由同一采物表；最好由同一 人操作人操作 。5 4 3 2 1第十三页，本课件共有30页2 2、物体表面消毒效果监测、物体表面消毒效果监测 1 1、采样时间：消毒处理后进行采样。、采样时间：消毒处理后进行采样。2 2、采采样样方方法法：

11、用用5cm5cm5cm5cm的的标标准准灭灭菌菌规规格格板板，放放在在被被检检物物体体表表面面，用用浸浸有有含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌洗洗脱脱液液的的棉棉拭拭子子1 1支支，在在规规格格板板内内横横竖竖往往返返均均匀匀涂涂擦擦各各5 5次次，并并随随之之转转棉棉拭拭子子，连连续续采采样样4 4个个，剪剪去去手手接接触触部部位位后后，投投入入10ml10ml含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌洗洗脱脱液液试试管管内内，进进行行细细菌菌菌菌落总数和致病菌检测。落总数和致病菌检测。门门把把手手等等不不规规则则物物体体表表面面用用棉棉拭拭子子直直接接涂涂擦采样擦采样 第十四页，本课件共有30

12、页物体表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测3 3、检测方法：、检测方法：（1 1）细细菌菌总总数数检检测测：检检测测方方法法按按消消毒毒技技术术规规范范3.17.6.3.17.6.3 3（1 1）执执行行。小小型型物物体体表表面面的的结结果果计计算算，用用cfu/cfu/件。件。（2 2）致致病病菌菌检检测测：检检测测方方法法按按消消毒毒技技术术规规范范3.17.153.17.15原则执行。原则执行。4 4、结果判定、结果判定 、类类区区域域：细细菌菌总总数数5cfu/cm5cfu/cm2 2，并并未未检检出出致病菌为消毒合格。致病菌为消毒合格。类类区区域域：细细菌菌总总数数10cfu/cm1

13、0cfu/cm2 2，并并未未检检出出致致病菌为消毒合格。病菌为消毒合格。类类区区域域：细细菌菌总总数数15cfu/cm15cfu/cm2 2，并并未未检检出出致致病菌为消毒合格。病菌为消毒合格。第十五页，本课件共有30页采样注意事项l 1 1、空气、物表采样由同一人操作。、空气、物表采样由同一人操作。2 2、物表采样应由近及远，兼顾上下中左右、物表采样应由近及远，兼顾上下中左右 3 3、母婴同室、血透室属、母婴同室、血透室属类环境类环境 4 4、样品标识一定要清楚，能朔源、追踪，以便整、样品标识一定要清楚，能朔源、追踪，以便整 改。改。5 5、致病菌包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、致病菌包

14、括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、溶血性链球菌（产房、新生儿科、母婴同室加溶血性链球菌（产房、新生儿科、母婴同室加 测沙门氏菌）测沙门氏菌）6 6、采样棉签在现场要做空白对照。、采样棉签在现场要做空白对照。第十六页，本课件共有30页3 3、手消毒效果、手消毒效果监测监测 1 1、采样时间：消毒后立即采样。、采样时间：消毒后立即采样。2 2、采采样样方方法法：被被检检人人五五指指并并拢拢，用用浸浸有有含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌洗洗脱脱液液的的棉棉拭拭子子在在双双手手指指屈屈面面从从指指根根到到指指端端往往返返涂涂擦擦2 2次次(一一只只手手涂涂擦擦面面积积约约30cm30cm2 2)，并

15、并随随之之转转动动采采样样的的棉棉拭拭子子，剪剪去去操操作作者者手手接接触触部部位位，将将棉棉拭拭子子投投入入10ml10ml含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌洗洗脱脱液液试试管管内，进行细菌菌落总数和致病菌检测。内，进行细菌菌落总数和致病菌检测。第十七页，本课件共有30页手消毒效果监测检测方法 （1 1）细细菌菌总总数数检检测测：将将采采样样管管在在混混匀匀器器上上振振荡荡2020秒秒或或用用力力振振打打8080次次，用用无无菌菌吸吸管管吸吸取取1.0ml1.0ml待待检检样样品品接接种种于于灭灭菌菌平平皿皿，每每一一样样本本接接种种2 2个个平平皿皿，内内加加入入已已溶溶化化的的4545

16、4848的的营营养养琼琼脂脂15ml15ml18 18 mlml，边边倾倾注注边边摇摇匀匀，待待琼琼脂脂凝凝固固，置置363611温箱培养温箱培养48h48h，计数菌落数。，计数菌落数。采样结果计算方法：采样结果计算方法：细菌总数（细菌总数（cfu/cmcfu/cm2 2）=（2 2）致致病病菌菌检检测测：按按消消毒毒技技术术规规范范3.17.153.17.15原原则则执行。执行。平板上菌落数平板上菌落数稀稀释释倍数倍数 采样面积（采样面积（cmcm2 2）第十八页，本课件共有30页结果判定结果判定 、类类区区域域工工作作人人员员：细细菌菌总总数数5cfu/cm5cfu/cm2 2，并并未未检

17、检出出金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、大大肠肠杆杆菌菌、铜铜绿绿假假单单胞胞菌菌为为消消毒毒合格。合格。类类区区域域：细细菌菌总总数数10cfu/cm10cfu/cm2 2，并并未未检检出出金金黄黄色色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。类类区区域域：细细菌菌总总数数15cfu/cm15cfu/cm2 2，并并未未检检出出金金黄黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。母母婴婴同同室室、婴婴儿儿室室、新新生生儿儿科科及及儿儿科科病病房房的的工工作作人人员员手手上上，不不得得检检出出沙沙门门氏氏菌菌、大大肠肠杆杆菌菌、溶溶血血性性链链球球菌菌、黄黄色

18、葡萄球菌。色葡萄球菌。第十九页，本课件共有30页 注意事项 1 1、分分清清普普通通卫卫生生洗洗手手和和外外科科洗洗手手卫卫生生手手消毒。消毒。外科洗手标准值外科洗手标准值?类类环环境境：金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、大大肠肠杆杆菌菌、铜铜绿绿假假单单胞胞菌菌(产产房房、母母婴婴同同室室、新新生生儿儿科科加加测沙门氏菌、溶血性链球菌测沙门氏菌、溶血性链球菌)类环境：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌类环境：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌 第二十页，本课件共有30页4、使用中消毒液或无菌器械保存液监测 1 1、使用中消毒液有效成分的测定、使用中消毒液有效成分的测定 2 2、使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量的测

19、定、使用中消毒液或无菌器械保存液染菌量的测定 （1 1）涂抹法：）涂抹法：（2 2）倾倾注注法法：用用无无菌菌吸吸管管吸吸取取消消毒毒液液1.0 1.0 mlml，加加入入到到9ml9ml含含相相应应中中和和剂剂的的无无菌菌生生理理盐盐水水采采样样管管中中混混匀匀，分分别别取取0.5ml0.5ml放放入入2 2只只灭灭菌菌平平皿皿内内，加加入入已已溶溶化化的的45454848的的营营养养琼琼脂脂15ml15ml18 18 mlml，边边倾倾注注边边摇摇匀匀，待待琼琼脂脂凝凝固固，一一平平板板置置2020培培养养7 7天天，观观察察霉霉菌菌生生长长情情况况；另另一一个个平平板板置置361361温

20、温箱箱培培养养72h72h，计数菌落数。同时按，计数菌落数。同时按3.17.153.17.15检测致病菌。检测致病菌。使使用用中中消消毒毒液液或或无无菌菌器器械械保保存存液液染染菌菌量量（cfu/mlcfu/ml）=每每个平板上的菌落数个平板上的菌落数2020 结结果果判判定定：消消毒毒液液染染菌菌量量100cfu/ml100cfu/ml，并并未未检检出出致致病病菌为合格。菌为合格。第二十一页，本课件共有30页注意事项：注意事项：1、必须是使用中消毒液或无菌器械保存液。、必须是使用中消毒液或无菌器械保存液。2 2、要要求求采采样样后后1h1h内内检检测测，实实际际工工作作中中由由于于各各种种原

21、原因因做做不不到到，采采5ml5ml样样品品放放在在灭灭菌菌试试管管中中（试试管管中中不不放放中中和和剂剂）带回实验室。带回实验室。3 3、样样品品名名称称一一定定要要标标识识清清楚楚，不不仅仅要要注注明明采采样样地地点点，而而且且要要注注明明消消毒毒液液的的名名称称、有有效效浓浓度度等等，例例：劲劲康康消消毒毒剂剂、0.1%0.1%健健之之素素消消毒毒液液、80%80%漂漂白白粉粉溶溶液液、0.5%0.5%洗必泰等洗必泰等标识标识都是不正确的。都是不正确的。4 4、消消毒毒液液细细菌菌菌菌落落总总数数标标准准值值100cfu/ml100cfu/ml，无无菌菌器械保存液细菌菌落总数标准值是不得

22、检出。器械保存液细菌菌落总数标准值是不得检出。5 5、致致病病菌菌检检测测包包括括金金黄黄色色葡葡萄萄球球菌菌、铜铜绿绿假假单单胞胞菌、沙门氏菌、溶血性链球菌。菌、沙门氏菌、溶血性链球菌。第二十二页，本课件共有30页5、灭菌物品消毒效果监测 1 1、采采样样时时间间：在在灭灭菌菌处处理理后后，存存放放有有效效期期内内采采样。样。2 2、采采样样方方法法：按按消消毒毒技技术术规规范范3.17.5.23.17.5.2原原则则执执行行 3 3、结结果果判判定定：阳阳性性对对照照在在2424小小时时内内应应有有菌菌生生长长，阴阴性性对对照照在在培培养养期期间间应应无无菌菌生生长长,如如需需-厌厌氧氧菌

23、菌及及霉霉菌菌培培养养管管内内均均为为澄澄清清或或虽虽显显浑浑浊浊但但经经证证明明并并非非有有菌菌生生长长，判判为为灭灭菌菌合合格格；如如需需-厌厌氧氧菌菌及及霉霉菌菌培培养养管管中中任任何何1 1管管显显浑浑浊浊并并证证实实有有菌菌生生长长，应应重重新新取取样样，分分别别同同法法复复试试2 2次次，除除阳阳性性对对照照外外，其其他他各各管管均均不不得得有有菌菌生长，否则判为灭菌不合格。生长，否则判为灭菌不合格。第二十三页，本课件共有30页灭菌物品消毒效果监测注意事项l 1 1、无无菌菌检检验验应应在在洁洁净净度度为为100100级级单单向向流流空空气气区区域域内内进进行行，最最好好把把灭灭菌

24、菌包包带带回回在在百百级级实实验验室室打打开开。应应严严格格遵遵守守无无菌菌操作，避免微生物污染。操作，避免微生物污染。l 2 2、应应采采有有效效期期内内的的样样品品（高高压压灭灭菌菌：一般是两周；还氧乙烷：两年）一般是两周；还氧乙烷：两年）第二十四页，本课件共有30页6、灭菌器灭菌效果监测l1 1、监测方法：、监测方法：l 工艺监测工艺监测l 化学监测（化学指示卡、指示胶带）化学监测（化学指示卡、指示胶带）l 生物监测生物监测l2 2、常用灭菌器种类、常用灭菌器种类l 压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器l 环氧乙烷灭菌器环氧乙烷灭菌器 l3 3、生物指示物、生物指示物l 嗜热脂肪杆菌芽胞（嗜热脂

25、肪杆菌芽胞（ATCC7953ATCC7953）,压力蒸汽灭菌器压力蒸汽灭菌器l 枯草杆菌黑色变种芽胞（枯草杆菌黑色变种芽胞（ATCC9372ATCC9372）环氧乙烷灭菌器）环氧乙烷灭菌器第二十五页，本课件共有30页7 7、压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测检测方法生物指示菌片布放方法（生物指示菌片布放方法（消毒技术规范消毒技术规范 ）（1 1）将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭菌）将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。小纸袋内，置于标准试验包中心部位。（2 2）下排气压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口）下排气压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包上方

26、放置一个标准试验包 预预真真空空和和脉脉动动真真空空压压力力蒸蒸汽汽灭灭菌菌器器灭灭菌菌柜柜室室内内，排排气气口上方放置一个标准试验包口上方放置一个标准试验包 手手提提压压力力蒸蒸汽汽灭灭菌菌器器：通通用用贮贮物物盒盒代代替替标标准准试试验验包包，贮贮物物盒盒内内盛盛满满中中试试管管，指指示示菌菌片片放放于于中中心心部部位位的的两两支支灭灭菌菌试试管管内内，贮贮物物盒盒放放于于手手提提压压力力蒸蒸汽汽灭灭菌菌器器底底部。部。第二十六页，本课件共有30页8 8、环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测l 枯枯草草杆杆菌菌黑黑色色变变种种芽芽胞胞（ATCC9372ATCC9372）菌菌

27、片片事事先先放放入入一一次次性性注注射射器器中中（每每个个注注射射器器中中放放1 1个个菌菌片片），然然后后封封装装在在一一剥剥离离式式包包装装袋袋内内。菌菌片片在在灭灭菌菌器器内内布布放放的的数数量量应应足足够够多多，应应放放在在那那些些在在性性能能鉴鉴定定时时发发现现是是最最难难灭灭菌菌的的部部位位，并并均均匀匀分分布布于于整整个个灭灭菌菌物品中。物品中。l 上上、中中、下下层层对对角角线线前前、中中、后后各各布布放放一一个个菌菌片片，排气口上方放置一个菌片，共放置排气口上方放置一个菌片，共放置1010个菌片。个菌片。第二十七页，本课件共有30页注意事项1 1、灭菌器：要注明灭菌器型号、产

28、地等、灭菌器：要注明灭菌器型号、产地等 2 2、在进行环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测时，灭菌、在进行环氧乙烷灭菌器灭菌效果监测时，灭菌 器一定要满载。器一定要满载。3 3、出现阳性结果要进行工艺监测，分析原因、出现阳性结果要进行工艺监测，分析原因4 4、监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内、监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内 使用。使用。第二十八页，本课件共有30页9、紫外线消毒效果监测l l 紫外线灯管辐照度值的测定，一般采用紫外线辐紫外线灯管辐照度值的测定，一般采用紫外线辐照计测定法。开启紫外线灯照计测定法。开启紫外线灯5 5分钟后，将测定波长为分钟后，将测定波长为253.7nm25

29、3.7nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离离1m1m的中央处，待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线的中央处，待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线灯的辐照度值。灯的辐照度值。l 结果判定：普通结果判定：普通30W30W直管型紫外线灯，新灯辐照直管型紫外线灯，新灯辐照强度强度90 W/cm90 W/cm2 2为合格；使用中紫外线灯辐照强度为合格；使用中紫外线灯辐照强度70 W/cm70 W/cm2 2为合格；为合格；30W30W高强度紫外线灯辐照强度高强度紫外线灯辐照强度180 W/cm180 W/cm2 2为合格；为合格；第二十九页，本课件共有30页感谢大家观看第三十页，本课件共有30页