艾滋病实验室检查PPT精选课件.ppt
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1、关于艾滋病实验室检查PPT第一页,本课件共有19页2实实 验验 室室 检检 查查第二页,本课件共有19页3免疫学检测免疫学检测AIDSAIDS患者患者正常正常(10109 9/L)/L)CD4CD40.20.21(0.81(0.81.2)1.2)CD4/CD8CD4/CD8111.21.22.12.1淋巴细胞总淋巴细胞总数数112 23 3流式细胞仪测定流式细胞仪测定第三页,本课件共有19页4血清学检测血清学检测()()HIV抗体的初筛试验抗体的初筛试验ELISA(酶联免(酶联免疫试验)疫试验)第四页,本课件共有19页5血清学检测血清学检测()()HIV抗体的确证试验抗体的确证试验Wester
2、n blot(免疫印迹试(免疫印迹试验)验)第五页,本课件共有19页6血清学检测()血清学检测()HIV抗原检测抗原检测ELISA夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高(敏感性很高(7 710 pg/ml10 pg/ml)特异性稍差(可有假阳性特异性稍差(可有假阳性)第六页,本课件共有19页7分子生物学检测分子生物学检测(1)HIV RNA检测检测RT-PCR(逆转录(逆转录-聚合酶链反应)聚合酶链反应)PCRPCR:高温变性:高温变性(94)(94)低温退火低温退火(55)(55)适温延伸适温延伸(72)(72);经;经25302530个个循环,成倍数扩增循环,成倍数扩增荧光定量
3、荧光定量PCRPCR:比常规:比常规PCRPCR多一个寡聚核多一个寡聚核苷酸探针(带一个荧光发光分子和一苷酸探针(带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子)个荧光淬灭分子)应用:应用:PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA;RT-PCRRT-PCR查血浆中的病毒查血浆中的病毒RNARNA第七页,本课件共有19页8分子生物学检测(分子生物学检测(2 2)淋巴细胞淋巴细胞HIV RNA检测检测Northern印迹杂交印迹杂交(Northern blot)原理:原理:RNA RNA片段经电泳分离,片段经电泳分离,从凝胶中转移到硝酸纤维从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜,再用探针杂交素滤膜
4、,再用探针杂交第八页,本课件共有19页9分子生物学检测(分子生物学检测(3)HIV变异株检测变异株检测Sanger测序法测序法 原理:核酸扩增时,核苷酸在某原理:核酸扩增时,核苷酸在某一固定点开始,随机在某一特一固定点开始,随机在某一特定的碱基处终止,产生定的碱基处终止,产生A A、T T、C C、G G四组不同长度的一系列核苷酸,四组不同长度的一系列核苷酸,通过在尿素变性的通过在尿素变性的PAGEPAGE胶上电胶上电泳,获得泳,获得DNADNA序列序列第九页,本课件共有19页10病毒检测病毒检测l血浆、单核细胞、脑脊液可分离出血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIVl操作复杂,主要用于科研操作复
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