病毒感染的检查方法与防治原则1精选课件.ppt
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1、关于病毒感染的检关于病毒感染的检查方法与防治原则查方法与防治原则1第一页,本课件共有35页第一节第一节 病毒感染的检查方法病毒感染的检查方法检测内容检测内容查病毒查病毒查特异性抗体查特异性抗体查特异性抗体查特异性抗体 病毒颗粒病毒颗粒 病毒抗原病毒抗原 病毒核酸病毒核酸 病毒酶类:如逆转录酶病毒酶类:如逆转录酶 电镜直接观察电镜直接观察 光镜检查包涵体光镜检查包涵体 分离培养分离培养分离培养分离培养第二页,本课件共有35页一、标本的采集与送检一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似,还特别注意以下原则:原则基本与细菌相似,还特别注意以下原则:n n采集急性期标本采集急性期标本n n使用抗生素:使
2、用抗生素:标本用标本用标本用标本用“双抗双抗双抗双抗”或两性霉素或两性霉素或两性霉素或两性霉素B处理处理 n n冷藏保存、快速送检冷藏保存、快速送检n n采集双份血清采集双份血清第三页,本课件共有35页二、病毒的分离与鉴定二、病毒的分离与鉴定(一)病毒的分离培养(一)病毒的分离培养n n细胞培养(细胞培养(cell culture)n n鸡胚接种(鸡胚接种(egg inoculation)n n动物接种(动物接种(animal inoculation)第四页,本课件共有35页1.细胞培养细胞培养n n根据生长方式分类:根据生长方式分类:单层细胞培养(单层细胞培养(monolayer cell
3、culture)悬浮细胞培养(悬浮细胞培养(suspended cell culture)n n从细胞来源、染色体特征及传代次数分类:从细胞来源、染色体特征及传代次数分类:原代细胞(原代细胞(primary cell)二倍体细胞(二倍体细胞(diploid cell)传代细胞系(传代细胞系(continuous cell line)(一)病毒的分离培养(一)病毒的分离培养第六页,本课件共有35页病毒的细胞培养细胞培养瓶细胞培养瓶单层细胞单层细胞第七页,本课件共有35页1.1.细胞培养细胞培养(1)原代和次代细胞培养)原代和次代细胞培养组织组织组织组织 组织块组织块组织块组织块 分散的单个细胞分
4、散的单个细胞分散的单个细胞分散的单个细胞 单层细胞单层细胞单层细胞单层细胞 剪碎剪碎剪碎剪碎 培养基培养基培养基培养基(原代细胞原代细胞原代细胞原代细胞)单层细胞单层细胞单层细胞单层细胞(次代细胞次代细胞次代细胞次代细胞)传代培养传代培养传代培养传代培养蛋白酶蛋白酶蛋白酶蛋白酶 特点:特点:特点:特点:对多种病毒敏感对多种病毒敏感对多种病毒敏感对多种病毒敏感 生长能力有限生长能力有限生长能力有限生长能力有限,获取成本高获取成本高获取成本高获取成本高 可携带潜伏病毒可携带潜伏病毒可携带潜伏病毒可携带潜伏病毒第八页,本课件共有35页(2)二倍体细胞培养)二倍体细胞培养 体外分裂体外分裂50100代
5、仍保持二倍体染色体数目,代仍保持二倍体染色体数目,可用于病毒分离和疫苗生产。可用于病毒分离和疫苗生产。特点:特点:对多种病毒敏感对多种病毒敏感 不带异种蛋白不带异种蛋白(人源性人源性)不带病毒,无致瘤潜能不带病毒,无致瘤潜能 可传可传50代左右代左右1.1.细胞培养细胞培养第九页,本课件共有35页(3)传代细胞培养传代细胞培养特点特点:对多种病毒敏感性高对多种病毒敏感性高 繁殖能力高,传代时间长繁殖能力高,传代时间长 有致癌危险,不能用于疫苗生产有致癌危险,不能用于疫苗生产有致癌危险,不能用于疫苗生产有致癌危险,不能用于疫苗生产1.细胞培养细胞培养第十页,本课件共有35页病毒在培养细胞中增殖的
6、指征:病毒在培养细胞中增殖的指征:n n致细胞病变效应(致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)n n红细胞吸附(红细胞吸附(hemadsorption)n n病毒干扰作用(病毒干扰作用(viral interference)n n细胞代谢改变细胞代谢改变(一)病毒的分离培养(一)病毒的分离培养第十一页,本课件共有35页第十二页,本课件共有35页细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落(1)致细胞病变效应()致细胞病变效应(CPE)第十三页,本课件共有35页麻疹病毒感麻疹病毒感麻疹病毒感
7、麻疹病毒感染细胞染细胞染细胞染细胞呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒感染细胞感染细胞形成多核巨细胞或称融合细胞形成多核巨细胞或称融合细胞形成多核巨细胞或称融合细胞形成多核巨细胞或称融合细胞(1)致细胞病变效应()致细胞病变效应(CPE)第十四页,本课件共有35页形成包涵体形成包涵体(inclusion body)(1)致细胞病变效应()致细胞病变效应(CPE)第十五页,本课件共有35页腮腺炎病毒感染细胞腮腺炎病毒感染细胞(2)红细胞吸附()红细胞吸附(hemadsorption)病毒囊膜表面血凝素病毒囊膜表面血凝素(HA)红细胞表面红细胞表面HA受体受体第十六页,本课件共有35页(3)干扰现象()干
8、扰现象(interference)风疹病毒猴肾细胞风疹病毒猴肾细胞风疹病毒猴肾细胞风疹病毒猴肾细胞 病毒增殖,病毒增殖,病毒增殖,病毒增殖,CPECPE()埃可病毒猴肾细胞埃可病毒猴肾细胞 病毒增殖,病毒增殖,CPE()猴肾细胞猴肾细胞猴肾细胞猴肾细胞风疹病毒风疹病毒埃可病毒埃可病毒埃可病毒埃可病毒埃可病毒被抑制,埃可病毒被抑制,埃可病毒被抑制,埃可病毒被抑制,CPE(CPE()(4)细胞代谢改变)细胞代谢改变第十七页,本课件共有35页2.鸡胚培养鸡胚培养 采用孵化采用孵化914天的鸡胚天的鸡胚 绒毛尿囊膜(绒毛尿囊膜(绒毛尿囊膜(绒毛尿囊膜(allantocherionallantocher
9、ion)痘苗病毒、人类疱疹病毒痘苗病毒、人类疱疹病毒痘苗病毒、人类疱疹病毒痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔(尿囊腔(allantoic cavity)接种部位接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒流感病毒、腮腺炎病毒流感病毒、腮腺炎病毒流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔(羊膜腔(amniotic cavity)流感病毒的初次分离流感病毒的初次分离流感病毒的初次分离流感病毒的初次分离 卵黄囊(卵黄囊(卵黄囊(卵黄囊(yolk sacyolk sac)嗜神经病毒嗜神经病毒嗜神经病毒嗜神经病毒 第十八页,本课件共有35页第十九页,本课件共有35页2.鸡胚培养鸡胚培养优点:优点:易管理,不带微生物,成本较低易管理,不
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