玻片标本制作技术.ppt

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1、第二章第二章 生物玻片标本制作技术生物玻片标本制作技术 第一节第一节 生物玻片标本制作方法生物玻片标本制作方法 第二节第二节 植物材料玻片标本制作技术植物材料玻片标本制作技术 第三节第三节 动物材料玻片标本制作技术动物材料玻片标本制作技术 第一节第一节第一节第一节 生物玻片标本制作方法生物玻片标本制作方法生物玻片标本制作方法生物玻片标本制作方法 从保存时间长短分，有临时玻片标本和永久玻片标本。从制作的方法从保存时间长短分，有临时玻片标本和永久玻片标本。从制作的方法来分，有涂片、压片、装片来分，有涂片、压片、装片(也叫整装法也叫整装法)、磨片和切片等、磨片和切片等。一、切片法一、切片法简单、省时

2、、容易掌握，有一定局限性，但至今在生物学教学中仍然是观简单、省时、容易掌握，有一定局限性，但至今在生物学教学中仍然是观察形态构造的一种基本切片方法察形态构造的一种基本切片方法 。（1 1）材料和夹持物）材料和夹持物 （2 2）材料的持法）材料的持法 （3 3）持刀方法）持刀方法 （4 4）切片）切片 （5 5）取片）取片 （6 6）选片、装片）选片、装片 1.1.徒手切片法徒手切片法 切片法即用刀片将材料切成薄片的方法。切片法即用刀片将材料切成薄片的方法。切取的标本材料和夹持物材料和夹持物滴水滴水放置标本放置标本加盖盖玻片加盖盖玻片叶的横切叶的横切v所使用的支持剂是石蜡，优点是切下的片子薄而匀

3、，还能作所使用的支持剂是石蜡，优点是切下的片子薄而匀，还能作连续切片，但制作手续较复杂连续切片，但制作手续较复杂。v几个重要环节步骤如下：几个重要环节步骤如下：(1)固定固定 其目的在于保存组织中各细胞的形态结构和生活时相似；必须对其目的在于保存组织中各细胞的形态结构和生活时相似；必须对固定液的选择、固定材料的性质、大小和固定的时间以及研究的目的等固定液的选择、固定材料的性质、大小和固定的时间以及研究的目的等加以注意。加以注意。(2)(2)冲洗冲洗 (3)(3)脱水脱水 酒精是最常用的脱水剂，酒精是最常用的脱水剂，把酒精配成不同梯度的把酒精配成不同梯度的浓浓度度缓慢缓慢进进行。行。(4)(4)

4、染色染色 (5)(5)浸蜡浸蜡 将已透明的材料投入熔化的石蜡中，取代透明剂，使组织中空隙将已透明的材料投入熔化的石蜡中，取代透明剂，使组织中空隙为石蜡透入而填满；为石蜡透入而填满；2.2.石蜡切片法石蜡切片法(6)(6)切片切片 用石蜡包埋块包埋的石蜡块，经修整后一般使用旋转式切片机进行用石蜡包埋块包埋的石蜡块，经修整后一般使用旋转式切片机进行切片；切片；(7)(7)透明透明 透明在两种情况下进行。透明在两种情况下进行。第一第一，透明是在组织脱水后浸蜡前进行，其目的不在于为了显微镜，透明是在组织脱水后浸蜡前进行，其目的不在于为了显微镜观察，而是作为从脱水剂进入包埋剂的桥梁。因此，透明剂必须既能

5、观察，而是作为从脱水剂进入包埋剂的桥梁。因此，透明剂必须既能与酒精混合，又能与石蜡融合无间，二甲苯即具此性质，故被选为常与酒精混合，又能与石蜡融合无间，二甲苯即具此性质，故被选为常用的透明剂。用的透明剂。第二第二，透明是在片子脱水与封藏之间进行。其目的除了作为从脱水，透明是在片子脱水与封藏之间进行。其目的除了作为从脱水剂进入封藏剂的桥梁外，尚有使标本透明而便于观察的作用。剂进入封藏剂的桥梁外，尚有使标本透明而便于观察的作用。(8)(8)封藏封藏 常用的封藏剂有树胶和甘油等。封藏的目的在于使切片能永久保存便常用的封藏剂有树胶和甘油等。封藏的目的在于使切片能永久保存便于镜检。于镜检。火棉胶切片法所

6、使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温，可以避免组织收缩及变脆，适用精细材料经高温，可以避免组织收缩及变脆，适用精细材料(如脑如脑)的切片，也因的切片，也因火棉胶有韧性，切片不致有折卷或破裂，适于大块组织及多空洞的组织火棉胶有韧性，切片不致有折卷或破裂，适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球如脑、眼球)的切片的切片。3.3.火棉胶切片法火棉胶切片法4.4.冰冻切片法冰冻切片法 冰冻切片法是将已固定或新鲜组织块不经脱水和包埋先进行冰冻，然后冰冻切片法是将已固定或新鲜组织块不经脱水和包埋先进行冰冻，然后在切片机上切片的一

7、种方法。这种方法的优点是：在切片机上切片的一种方法。这种方法的优点是：1.1.制片速度快，因此制片速度快，因此常用于临床上的病理手术诊断；常用于临床上的病理手术诊断；2.2.能保存组织内某些易被有机溶剂所溶能保存组织内某些易被有机溶剂所溶解的物质，例如脂肪和酶等。解的物质，例如脂肪和酶等。同时还可以防止组织块的收缩保持原形。缺点：所切片子较厚，又不能同时还可以防止组织块的收缩保持原形。缺点：所切片子较厚，又不能作连续切片还有易碎的毛病。作连续切片还有易碎的毛病。是一种将游离的细胞，动、植物中比较疏松的组织均匀地涂布在载玻片上的是一种将游离的细胞，动、植物中比较疏松的组织均匀地涂布在载玻片上的一

8、种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小形藻类、血液，含有细菌的培一种制片方法。涂片材料有单细胞生物、小形藻类、血液，含有细菌的培养液以及精巢、花药等养液以及精巢、花药等 二、非切片法二、非切片法1.1.涂片法涂片法将将植植物物或或动动物物比比较较疏疏松松的的材材料料，如如花花药药、根根尖尖、水水螅螅，蠕蠕虫虫的的精精巢巢、果果蝇蝇(或或其其他他双双翅翅目目)幼幼虫虫的的唾唾液液腺腺等等，用用较较小小的的压压力力压压碎碎在在载载玻玻片片上上使使成成一一薄薄层的一种制片法。层的一种制片法。2.2.压片法压片法 微小的生物如衣藻、水绵、青霉、变形虫和水螅等可以直接作为装片的微小的生物如衣藻、水绵、青霉

9、、变形虫和水螅等可以直接作为装片的材料植物的叶表皮、鳞茎表皮等；动物中如昆虫的翅、腿、口器等；人材料植物的叶表皮、鳞茎表皮等；动物中如昆虫的翅、腿、口器等；人的口腔上皮细胞等都是从整个器官上取其一部分作为装片材料，可制作的口腔上皮细胞等都是从整个器官上取其一部分作为装片材料，可制作成临时或永久装片，进行观察。成临时或永久装片，进行观察。3.3.装片法装片法 悬滴玻片是将培养在盖玻片上溶液里的活材料悬滴玻片是将培养在盖玻片上溶液里的活材料(如变形虫的运动、如变形虫的运动、细菌的活动、花粉的萌发等细菌的活动、花粉的萌发等)封闭在载玻片的小室里，供观察它封闭在载玻片的小室里，供观察它们活动的一种玻片

10、标本。们活动的一种玻片标本。4.4.悬滴法悬滴法 一些含有矿物质的比较坚硬的动物组织要作成玻片标本时，常把材料一些含有矿物质的比较坚硬的动物组织要作成玻片标本时，常把材料直接放在砂石上磨成薄片，此法即为磨片法。如珊瑚的骨骼、软体动直接放在砂石上磨成薄片，此法即为磨片法。如珊瑚的骨骼、软体动物的贝壳，脊椎动物的硬骨、角以及牙齿等都可以用此法制成玻片标物的贝壳，脊椎动物的硬骨、角以及牙齿等都可以用此法制成玻片标本。本。5.5.磨片法磨片法 第二节第二节第二节第二节 植物材料玻片标本制作技术植物材料玻片标本制作技术植物材料玻片标本制作技术植物材料玻片标本制作技术一、常用实验种子植物的制片方一、常用实

11、验种子植物的制片方法法(一一)洋葱表皮装片洋葱表皮装片(二二)洋葱根尖纵切片洋葱根尖纵切片(示细胞有丝分裂示细胞有丝分裂)洋洋葱葱表表皮皮细胞洋葱根尖洋葱根尖细胞南瓜茎纵切片南瓜茎纵切片蚕豆蚕豆幼根横切根横切(三三)蚕豆根横切片蚕豆根横切片(四四)南瓜茎纵切片及横切片南瓜茎纵切片及横切片 二、常用实验孢子植物的制片二、常用实验孢子植物的制片方法方法(一一)衣藻装片衣藻装片 (二二)团藻装片团藻装片 衣藻装衣藻装片片团藻装团藻装片片藓藓原原丝丝体体装装片片（三）细菌三型涂片（三）细菌三型涂片 （四）地钱生殖托纵切片（四）地钱生殖托纵切片 （五）藓原丝体装片（五）藓原丝体装片细细菌菌三三型型涂涂片第三节第三节 动物材料玻片标本制作技术动物材料玻片标本制作技术一、草履虫装片一、草履虫装片 二、水螅的整体装片和横切片二、水螅的整体装片和横切片 三、涡虫的整体装片及切片三、涡虫的整体装片及切片 四、蛔虫横切片四、蛔虫横切片 五、果蝇唾液腺染色体的制片五、果蝇唾液腺染色体的制片 六、脊髓的神经细胞涂片六、脊髓的神经细胞涂片 七、骨密质磨片七、骨密质磨片 草履虫草履虫接合生殖装片装片水螅水螅带芽整体装片整体装片果蝇唾液腺染色体果蝇唾液腺染色体人类脊髓神脊髓神经细胞胞