2阶段复习课 (2).ppt

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1、专题2 阶段复习课微生物的培微生物的培养与应用养与应用微生物的实验室培养微生物的实验室培养土壤中分解尿素的细菌的土壤中分解尿素的细菌的分离与计数分离与计数分解纤维素的微分解纤维素的微生物的分离生物的分离1.(20091.(2009安徽高考安徽高考)下列是关于下列是关于“检测土壤中细菌总数检测土壤中细菌总数”实验实验操作的叙述，其中错误的是操作的叙述，其中错误的是()()A.A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板平板B.B.取取104104、105 105、106106倍的土壤稀释液和无菌水各倍的土壤稀释液和无菌水各0.1

2、 0.1 mLmL，分别，分别涂布于各组平板上涂布于各组平板上C.C.将实验组和对照组平板倒置，将实验组和对照组平板倒置，37 37 恒温培养恒温培养24 h24 h48 h48 hD.D.确定对照组无菌后，选择菌落数在确定对照组无菌后，选择菌落数在300300以上的实验组平板进以上的实验组平板进行计数行计数【解析解析】选选D D。检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋。检测土壤中细菌总数，用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，取10104 4、10105 5、10106 6倍倍的土壤稀释液和无菌水各的土壤稀释液和无菌水各0.1 0

3、.1 mLmL，分别涂布于各组平板上，将，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组平板倒置，实验组和对照组平板倒置，37 37 恒温培养恒温培养1 d1 d2 d2 d，即，即24 h24 h48 h48 h，在确定对照组无菌后，选择菌落数在，在确定对照组无菌后，选择菌落数在3030300300的一组的一组平板为代表进行计数。平板为代表进行计数。2.(20112.(2011新课标全国卷新课标全国卷)有些细菌可分解原油，从而消除由原有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

4、效降解原油的菌株。回答问题：(1)(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为惟为惟一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于_培养基。培养基。(2)(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即即_和和_。(3)(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力分解圈大说明该菌株的降解能力_。(4)(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭

5、菌方通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、法有灼烧灭菌、_和和_。无菌技术要。无菌技术要求实验操作应在酒精灯求实验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。环境中微生物的污染。【解析解析】(1)(1)实验目的是为了筛选出可以分解原油的高效菌株，实验目的是为了筛选出可以分解原油的高效菌株，因此在筛选的时候选择培养基的碳源为原油。因此在筛选的时候选择培养基的碳源为原油。(2)(2)纯化分离微生物的方法有两种：平板划线法和稀释涂布平纯化分离微生物的方法有两种：平板划线法和稀释涂布平板法；灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。板法；灭

6、菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。答案：答案：(1)(1)原油原油 选择选择(2)(2)平板划线法平板划线法 稀释涂布平板法稀释涂布平板法 (3)(3)强强(4)(4)干热灭菌干热灭菌 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌 火焰火焰3.(20103.(2010上海高考上海高考)分析有关微生物的资料，回答问题。分析有关微生物的资料，回答问题。19821982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌。年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌。(1)(1)幽门螺杆菌的遗传物质集中分布的区域称为幽门螺杆菌的遗传物质集中分布的区域称为_。(2)(2)上图上图4 4支试管分别代表支试管分别代表4 4

7、种微生物在半固体培养基种微生物在半固体培养基(琼脂含量琼脂含量3.5 g/L)3.5 g/L)中的生长状态，其中中的生长状态，其中号试管代表幽门螺杆菌的生长号试管代表幽门螺杆菌的生长状态，由图判断，该菌在状态，由图判断，该菌在_条件下不能生长。产甲条件下不能生长。产甲烷细菌的生长状态最可能由试管烷细菌的生长状态最可能由试管_代表。代表。(3)(3)下表是某培养基的配方。下表是某培养基的配方。成分成分葡萄葡萄糖糖KHKH2 2POPO4 4MgSOMgSO4 4NaClNaClCaSOCaSO4 4CaCOCaCO3 3琼脂琼脂蒸馏蒸馏水水含量含量10 g10 g0.2 g0.2 g0.2 g0

8、.2 g0.2 g0.2 g0.2 g0.2 g5 g5 g3.5 g3.5 g1 L1 L将幽门螺杆菌接种到将幽门螺杆菌接种到pHpH适宜的该培养基中，适宜的该培养基中，置于置于37 37 下培养一段时间后，在该培养基下培养一段时间后，在该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时中幽门螺杆菌的数目比刚接种时_，主要原因是：主要原因是：_。幽门螺杆菌形态如图所。幽门螺杆菌形态如图所示，该菌在人体中可引起胃溃疡等胃部疾病。示，该菌在人体中可引起胃溃疡等胃部疾病。(4)(4)幽门螺杆菌生长的最适幽门螺杆菌生长的最适pHpH为为6 67 7，人体胃腔内，人体胃腔内pHpH在在1 12 2之之间，但胃黏膜的

9、黏液层靠近上皮细胞侧间，但胃黏膜的黏液层靠近上皮细胞侧pHpH为为7.47.4左右的地方。左右的地方。若幽门螺杆菌随食物进入胃腔，结合其结构特点以及能导致胃若幽门螺杆菌随食物进入胃腔，结合其结构特点以及能导致胃溃疡的特性，推测该菌在胃内如何存活？溃疡的特性，推测该菌在胃内如何存活？_。(5)(5)依据题中信息分析幽门螺杆菌是否属于古细菌？依据题中信息分析幽门螺杆菌是否属于古细菌？_(_(是或否是或否)。原因是。原因是_。【解析解析】(1)(1)幽门螺杆菌为原核生物，没有核膜包围的细胞核，遗幽门螺杆菌为原核生物，没有核膜包围的细胞核，遗传物质集中在拟核内。传物质集中在拟核内。(2)(2)幽门螺杆

10、菌生活在半固体培养基的中部，说明它不能生活在氧幽门螺杆菌生活在半固体培养基的中部，说明它不能生活在氧气浓度过高或过低的地方；产甲烷细菌为厌氧型细菌，应生活在气浓度过高或过低的地方；产甲烷细菌为厌氧型细菌，应生活在半固体培养基的底部。半固体培养基的底部。(3)(3)培养基中缺乏氮源，幽门螺杆菌不能正常生活，数量会减少。培养基中缺乏氮源，幽门螺杆菌不能正常生活，数量会减少。(4)(4)幽门螺杆菌进入胃腔后，可以先依靠鞭毛运动至幽门螺杆菌进入胃腔后，可以先依靠鞭毛运动至pHpH较高处缓冲，较高处缓冲，然后分泌蛋白中和胃酸，提高然后分泌蛋白中和胃酸，提高pHpH，以便继续生存和繁殖。，以便继续生存和繁

11、殖。(5)(5)古细菌出现在地球上的极端环境中，而幽门螺杆菌不能生活在古细菌出现在地球上的极端环境中，而幽门螺杆菌不能生活在极端环境中。极端环境中。答案：答案：(1)(1)拟核拟核(核区核区)(2)(2)氧气浓度过高或过低氧气浓度过高或过低 (3)(3)少少 缺少氮源缺少氮源(缺少氮源和生长因子缺少氮源和生长因子)(4)(4)幽门螺杆菌进入胃腔后，首先依靠鞭毛运动至幽门螺杆菌进入胃腔后，首先依靠鞭毛运动至pHpH较高处缓较高处缓冲，然后分泌蛋白中和胃酸，提高冲，然后分泌蛋白中和胃酸，提高pHpH，以便继续生存和繁殖，以便继续生存和繁殖(5)(5)否否 幽门螺杆菌不能生活在极端环境中幽门螺杆菌不

12、能生活在极端环境中4.(20094.(2009宁夏高考宁夏高考)(1)(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行和培养皿进行_(_(消毒、灭菌消毒、灭菌)；操作者的双手需要进行；操作者的双手需

13、要进行清洗和清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能是紫外线能使蛋白质变性，还能_。(3)(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的证待测样品稀释的_。(4)(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的落特征对细菌进行初步的_。(5)(5)培养大肠杆菌

14、时，在接种前需要检测培养基是否被污染。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是对于固体培养基应采用的检测方法是_。(6)(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。【解析解析】(1)(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透

15、压等条件。条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)(2)灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以对培养基和培养皿进行灭菌。消毒是使用较为温和的物理所以对培养基和培养皿进行灭菌。消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒。紫外线能使蛋白质变性，操作者的双手需要进行清洗和消毒。紫外线能使蛋白质变性，还能损伤还能损伤DNADNA的结构。的结构。(3)(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将

16、稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，应保证样品稀释的合适比例。养，应保证样品稀释的合适比例。(4)(4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。对细菌进行初步的鉴定。(5)(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度

17、下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。(6)(6)因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。答案：答案：(1)(1)温度温度 酸碱度酸碱度 易培养易培养 生活周期短生活周期短(2)(2)灭菌灭菌 消毒消毒 损伤损伤DNADNA的结构的结构(3)(3)合适比例合适比例 (4)(4)鉴定鉴定(或分类或分类)(

18、5)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生培养基上是否有菌落产生 (6)(6)灭菌灭菌5.(20095.(2009上海高考上海高考)氯苯化合物是重要的有机化工原料，但它氯苯化合物是重要的有机化工原料，但它不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(如图如图)筛选出能高效降解氯苯的微生物筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1SP1菌，培养基配方如表。菌，培养基配方如表。表表 培养基的组成培养基的组成(1)(1)配制配制号固体培养基时，除添加号固体培养基时，除

19、添加号液体培养基成分外，号液体培养基成分外，还应添加还应添加1%1%的的_。液体液体培养培养基基蛋白蛋白胨胨牛肉牛肉膏膏氯苯氯苯氯化氯化钠钠硝酸硝酸铵铵无机无机盐盐(无碳无碳)蒸馏蒸馏水水号号10 g10 g5 g5 g5 mg5 mg5 g5 g-1 L1 L号号-50 mg50 mg5 g5 g3 g3 g适量适量1 L1 L号号-20 mg20 mg80 mg80 mg5 g5 g3 g3 g适量适量1 L1 L(2)(2)培养基配制时，灭菌与调培养基配制时，灭菌与调pHpH的先后顺序是的先后顺序是_。(3)(3)从用途上来说，从用途上来说，号培养基和号培养基和号培养基分别属于号培养基分

20、别属于_培养基和培养基和_培养基。在培养基。在号培养基中，为号培养基中，为SP1SP1菌提供氮菌提供氮源的成分是源的成分是_。(4)(4)在营养缺乏或环境恶劣时，在营养缺乏或环境恶劣时，SP1SP1的菌体会变成一个圆形的休的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为眠体，这种休眠体被称为_。(5)(5)将将SP1SP1菌接种在含不同浓度氯苯的菌接种在含不同浓度氯苯的号培养液中培养，得到号培养液中培养，得到生长曲线生长曲线(如图如图)。从图中可知。从图中可知SP1SP1菌在菌在_培养条培养条件下最早停止生长，其原因是件下最早停止生长，其原因是_。【解析解析】本题主要考查微生物相关知识。本题主要

21、考查微生物相关知识。(1)(1)固体培养基必须含有适量的琼脂。固体培养基必须含有适量的琼脂。(2)(2)配制培养基时应先调配制培养基时应先调pHpH后灭菌。后灭菌。(3)(3)号培养基是为了获得更多的菌株，属于通用培养基；号培养基是为了获得更多的菌株，属于通用培养基；号培养基是为选择出号培养基是为选择出SP1SP1菌株属于选择培养基；菌株属于选择培养基；号培养基成号培养基成分中含氮物质为硝酸铵，则应由它为分中含氮物质为硝酸铵，则应由它为SP1SP1菌株提供氮源。菌株提供氮源。(4)(4)在恶劣环境下一些菌体会形成芽孢休眠体，来抵抗不良环在恶劣环境下一些菌体会形成芽孢休眠体，来抵抗不良环境。境。(5)SP1(5)SP1菌株是以氯苯为碳源，当氯苯消耗尽菌株因缺少碳源而菌株是以氯苯为碳源，当氯苯消耗尽菌株因缺少碳源而不能继续生存，故氯苯含量越少，不能继续生存，故氯苯含量越少，SP1SP1菌株越早停止生长。菌株越早停止生长。答案：答案：(1)(1)琼脂琼脂 (2)(2)先调先调pHpH，后灭菌，后灭菌(3)(3)通用通用 选择选择 硝酸铵硝酸铵 (4)(4)芽孢芽孢(5)20 mg/L(5)20 mg/L氯苯氯苯 氯苯最早耗尽氯苯最早耗尽