血清学反应的概念与类型.ppt

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1、 第一节第一节 血清学反应的概念与类型血清学反应的概念与类型一、血清学反应的概念二、血清学反应的类型 血清学反应的概念血清学反应的概念 体外抗原抗体反应中的抗体主要来源于血清，其检测多以血清为实验材料，故体外体外抗原抗体反应亦称为血清学反应（serologic reaction）。经典血清学反应的类型经典血清学反应的类型类型 抗原 抗体 辅助物 敏感度（g抗体氮）凝集反应 颗粒性 凝集素 0.01沉淀反应 可溶性 沉淀素 5-10溶血（菌）红细胞 溶血素 补体 反应 G-细菌 溶菌素 补体 （同上）补体结合 固定补 补体反应 体抗体 SRBC 溶血素 0.1中和反应 外毒素 抗毒素 靶细胞 0

2、.01 病毒 中和抗体 靶细胞 （同上）第二节第二节 凝集反应凝集反应一、直接凝集反应二、间接凝集反应三、特殊的凝集反应颗粒性抗原凝集素 直接凝集反应直接凝集反应 间接凝集反应间接凝集反应1、正向间接凝集反应2、反向间接凝集反应3、凝集抑制反应正向间接凝集反应正向间接凝集反应可溶性抗原载体颗粒反向间接凝集反应反向间接凝集反应抗体可溶性抗原载体颗粒间接凝集抑制反应间接凝集抑制反应凝集凝集抑制待检样品待检样品 特殊的凝集反应特殊的凝集反应1、Coombs试验2、自身红细胞凝集反应直接直接Coombs试验试验抗人免疫球蛋白自身抗体间接间接Coombs试验试验抗人免疫球蛋白同种异型抗体自身红细胞凝集试

3、验（一）自身红细胞凝集试验（一）双功能抗体自身红细胞凝集试验（二）自身红细胞凝集试验（二）双功能抗体抗原交联物 第三节第三节 沉淀反应沉淀反应一、液相沉淀反应二、凝胶内沉淀反应液相沉淀反应液相沉淀反应1、絮状试验2、环状试验3、免疫浊度测定液相内沉淀反应液相内沉淀反应絮状沉淀反应环状沉淀反应+抗血清抗原抗原抗体微量免疫沉淀测定微量免疫沉淀测定1、方法：免疫透射浊度测定法 免疫速率散射浊度测定法2、原理：检测器检测器散射光透射光入射光 凝胶内沉淀反应凝胶内沉淀反应1、扩散试验2、免疫电泳技术免疫扩散技术免疫电泳技术单向扩散试验双向扩散试验火箭电泳对流电泳免疫电泳 扩散试验扩散试验单向扩散试验双向

4、扩散试验单向扩散试验单向扩散试验Mancini曲线Fahey曲线T1T2T1T3T2T3Mancini曲线：K=C/d2适用于大分子抗原，长时间扩散Fahey曲线：K=logC/d适用于小分子抗原，短时间扩散单向扩散试验的适用对象单向扩散试验的适用对象有特异性单价抗血清有已知含量的标准品待检标本抗原蛋白质含量大于1.25g双向扩散试验双向扩散试验双向扩散试验的用途双向扩散试验的用途1、抗原、抗体相对含量测定2、抗原、抗体相对分子量分析3、抗原性质分析抗原、抗体相对含量测定抗原、抗体相对含量测定抗原、抗体相对分子量分析抗原、抗体相对分子量分析抗原分子量抗体分子量抗原分子量=抗体分子量抗原分子量抗

5、体分子量抗原性质分析抗原性质分析 免疫电泳技术免疫电泳技术对流免疫电泳火箭电泳免疫电泳对流对流免疫电泳免疫电泳火箭电泳火箭电泳免疫电泳免疫电泳免疫电泳技术的用途免疫电泳技术的用途对流免疫电泳快速、半定量测定火箭电泳快速、定量测定免疫电泳抗原分析 第四节第四节 溶血反应与补体结合试验溶血反应与补体结合试验一、溶血反应二、补体结合试验溶血反应溶血反应1、溶血反应原理2、溶血反应应用溶血反应的应用溶血反应的应用1、总补体活性测定2、C4活性测定3、B因子活性测定1009080706050403020100（ml）1 2 3 4CH50示意示意补体结合试验补体结合试验1、补体结合试验原理2、补体结合试

6、验应用补体结合试验原理补体结合试验原理待检系统指示系统补体补体结合试验原理（结果阳性）补体结合试验原理（结果阳性）待检系统指示系统（不溶血）补体消耗补体结合试验原理（结果阴性）补体结合试验原理（结果阴性）待检系统指示系统（溶血）补体未消耗 第五节第五节 血清学反应的应用血清学反应的应用一、病原生物学检测二、同种异型反应检测三、自身免疫反应检测四、生物活性物质检测五、药物血浓度检测本章小结本章小结1、凝集反应的类型、原理与应用2、沉淀反应的类型、原理与应用3、溶血反应与补体结合试验的原理与应用思考题思考题1、应用血清学反应时的选择依据有哪些？2、单向扩散试验与双向扩散试验有哪些区别？3、补体溶血反应有哪些应用？4、补体结合试验的设计原理如何？