药物分析湖南大学第03章药物的杂质检查.ppt

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1、第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查第一节第一节 药物的杂质及其来源药物的杂质及其来源 第二节第二节 药物的杂质检查法药物的杂质检查法第三节第三节 一般杂质检查一般杂质检查第四节第四节 特殊杂质检查特殊杂质检查第一节第一节 药物的杂质及其来源药物的杂质及其来源 一、药物的纯度一、药物的纯度 指指药药物物纯纯净净程程度度，反反映映了了药药物物质质量量的的优优劣劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。含有杂质是影响药物纯度的主要因素。药药物物中中杂杂质质超超过过质质量量标标准准规规定定，就就有有可可能能使使药药物物的的外外观观性性状状、物物理理常常数数发发生生变变化化，甚甚至至影影响响药物的稳

2、定性，使活性降低、毒副作用增加。药物的稳定性，使活性降低、毒副作用增加。杂质（杂质（impuritiesimpurities）是指：）是指：1.1.有毒副作用的物质。有毒副作用的物质。2.2.本本身身无无毒毒副副作作用用，但但影影响响药药物物的的稳稳定定性和疗效的物质。性和疗效的物质。3.3.本本身身无无毒毒副副作作用用，也也不不影影响响药药物物的的稳稳定定性性和和疗疗效效，但但影影响响药药物物的的科科学学管管理理的物质。的物质。二、药物中杂质的来源二、药物中杂质的来源1.1.生产过程中引入生产过程中引入a)a)原料、反应中间体及副产物原料、反应中间体及副产物b)b)试剂、溶剂、催化剂类试剂、

3、溶剂、催化剂类c)c)生生产产中中所所用用金金属属器器皿皿、装装置置以以及及其其他他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质在药物生产过程中引入杂质的途径为在药物生产过程中引入杂质的途径为a.a.原料不纯或部分未反应完全的原料造成原料不纯或部分未反应完全的原料造成b.b.合合成成过过程程中中产产生生的的中中间间体体或或副副产产物物分分离离不不净造成净造成c.c.需需加加入入的的各各种种试试剂剂产产生生吸吸附附，共共沉沉淀淀生生成成混晶等造成混晶等造成d.d.所用金属器皿及装置等引入杂质所用金属器皿及装置等引入杂质e.e.由由于于操操作作不不妥妥，日日光光曝曝晒晒而而使使

4、产产品品发发生生分分解引入的杂质解引入的杂质 易发生水解反应的结构：易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等易发生氧化反应的结构：易发生氧化反应的结构：醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等2.2.贮藏过程中产生贮藏过程中产生 水水解解、氧氧化化、分分解解、异异构构化化、晶晶形形转转变变、聚合、潮解和发霉等聚合、潮解和发霉等 三、杂质的分类三、杂质的分类 1.1.药药物物中中的的杂杂质质按按来来源源分分为为一一般般杂杂质质和特殊杂质：和特殊杂质：一一般般杂杂质质是是指指在在自自然然界界分分布布较较广广泛泛，在在多多种种

5、药药物物生生产产和和储储藏藏过过程程中中容容易易引引入入的的杂杂质质。如如：氯氯化化物物、硫硫酸酸盐盐、铁铁盐盐、重重金金属属、砷砷盐盐、酸酸、碱碱、水水分分、易易炭炭化化物物、炽炽灼灼残残渣渣等等。一一般般杂杂质质其其检检查方法收载在中国药典的附录中。查方法收载在中国药典的附录中。特特殊殊杂杂质质指指某某一一个个或或某某一一类类药药物物的的生生产产或或贮贮藏藏过过程程中中引引入入的的杂杂质质，这这类类杂杂质质随随药药物物的的不不同同而而不不同同。如如阿阿司司匹匹林林中中的的游游离离水水杨杨酸酸、异异烟烟肼肼中中的的游游离离肼肼、甾甾体体激激素素中中的的其其他他甾甾体体。特特殊殊杂杂质质检检查

6、查方方法法收收载载在在中中国国药药典典正正文文各各药药品的质量标准中。品的质量标准中。2.2.药药物物中中的的杂杂质质按按毒毒性性可可分分为为毒毒性性杂杂质和信号杂质：质和信号杂质：重重金金属属盐盐、砷砷盐盐为为毒毒性性杂杂质质；信信号号杂杂质质一一般般无无毒毒，但但其其含含量量的的多多少少可可反反映映出出药药物物的的纯纯度度情情况况，如如果果药药物物中中信信号号杂杂质质含含量量过过多多，提提示示该该药药的的生生产产工工艺艺或或生生产产控控制制有有问问题题。氯化物、硫酸盐属于信号杂质。氯化物、硫酸盐属于信号杂质。3.3.药药物物中中的的杂杂质质按按其其理理化化性性质质可可分分为为有机杂质、无机

7、杂质及残留溶剂：有机杂质、无机杂质及残留溶剂：无无机机杂杂质质可可能能来来源源于于生生产产过过程程，如如使使用用的的仪仪器器、原原料料、干干燥燥剂剂、过过滤滤辅辅助助器器、反反应应试试剂剂、重重金金属属、无无机机盐盐、活活性性炭炭等等，它们一般是已知的和确定的。它们一般是已知的和确定的。四、药物的纯度与化学试剂的纯度四、药物的纯度与化学试剂的纯度1.1.药药物物的的纯纯度度考考虑虑杂杂质质的的生生理理作作用用，药药品只有两个等级：合格或不合格。品只有两个等级：合格或不合格。2.2.化化学学试试剂剂有有很很多多等等级级，如如基基准准试试剂剂、优优级级纯纯（GRGR）、分分析析纯纯（ARAR）、化

8、化学学纯（纯（CPCP）、）、色谱纯、光谱纯。色谱纯、光谱纯。例例.临临床床所所用用药药物物的的纯纯度度与与化化学学品品及及试试剂剂纯度的主要区别是：纯度的主要区别是：A.A.所含杂质的生理效应不同所含杂质的生理效应不同B.B.所含有效成分的量不同所含有效成分的量不同 C.C.所含杂质的绝对量不同所含杂质的绝对量不同D.D.化学性质及化学反应速度不同化学性质及化学反应速度不同E.E.所含有效成分的生理效应不同所含有效成分的生理效应不同第二节第二节 药物的杂质检查法药物的杂质检查法一、杂质限量一、杂质限量指指药药物物中中允允许许杂杂质质存存在在的的最最大大量量，通通常常用用百百分分之之几几或或百

9、百万万分分之之几几（parts parts per per millionmillion，ppmppm）来表示。）来表示。杂质量杂质量 杂质限量杂质限量 杂质量杂质量药品合格药品合格药品不合格药品不合格药药物物中中杂杂质质限限量量的的控控制制方方法法一一般般分分为为两两种种：一一种种为为限限量量检检查查法法（limitlimit，testtest），另另一一种种是是对对杂杂质质进进行行定定量量测测定定。限限量量检检查查法法通通常常不不要要求求测测定定其其准准确确含含量量，只只需需检检查查杂杂质质是是否否超超过过限限量量。定量测定法则要求测定杂质的绝对含量定量测定法则要求测定杂质的绝对含量。二、

10、杂质限量检查法二、杂质限量检查法 1.1.对照法：对照法：取一定量的被检杂质标准溶取一定量的被检杂质标准溶液和一定量的供试品溶液，液和一定量的供试品溶液，在完全相在完全相同的条件下处理同的条件下处理，比较反应结果，以，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过限量。确定杂质含量是否超过限量。2.2.灵灵敏敏度度法法：指指在在供供试试品品溶溶液液中中加加入入一一定定量量的的试试剂剂，在在一一定定反反应应条条件件下下，不不得得有有正正反反应应出出现现，从从而而判判断断供供试试品品种种所所含含杂杂质质是是否否符符合合限限量量规规定定。该该法法不不需用对照品溶液对比。需用对照品溶液对比。3.3.比比较较法法

11、：指指取取供供试试品品一一定定量量依依法法检检查查，测测定定特特定定待待检检杂杂质质的的参参数数（如如吸吸光光度度等）与规定的限量比较，不得更大。等）与规定的限量比较，不得更大。三、药物中杂质限量的计算（示例）三、药物中杂质限量的计算（示例）示例示例1 1：茶苯海明：茶苯海明*中氯化物的检查中氯化物的检查取取本本品品0.30g0.30g置置于于200ml200ml量量瓶瓶中中，加加水水50ml50ml、氨氨试试液液3ml3ml和和10%10%硝硝酸酸铵铵溶溶液液6ml6ml，置置于于水水浴浴上上加加热热5min5min，加加硝硝酸酸银银试试液液25ml25ml，摇摇匀匀，再再置置于于水水浴浴上

12、上加加热热15min15min，并并时时时时振振摇摇，放放冷冷，加加水水稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀，放放置置15min15min，滤滤过过，取取滤滤液液25ml25ml置置纳纳氏氏比比色色管管中中，加加稀稀硝硝酸酸10ml10ml，加加水水稀稀释释成成50ml50ml，摇摇匀匀，在在暗暗处处放放置置5min5min，与与标标准准氯氯化化钠钠溶溶液液（1010gCl/mlgCl/ml）1.5ml1.5ml制制成成的对照液比较，求氯化物的限量。的对照液比较，求氯化物的限量。注：茶苯海明又名乘晕宁、晕海宁；为苯海拉明与茶碱的复合物，用注：茶苯海明又名乘晕宁、晕海宁；为苯海拉明与茶碱的复合物，用于

13、防治乘车、机、船引起的眩晕、恶心和呕吐，也可用于过敏性疾病。于防治乘车、机、船引起的眩晕、恶心和呕吐，也可用于过敏性疾病。示例示例2 2：谷氨酸钠中重金属的检查：谷氨酸钠中重金属的检查取取本本品品1.0g1.0g，加加水水23ml23ml溶溶解解后后，加加2ml2ml醋醋酸酸盐盐缓缓冲冲液液(pH=3.5)(pH=3.5)，依依法法检检查查，与与标标准准铅铅溶溶液液(10(10gPb/ml)gPb/ml)所所呈呈现现颜颜色色相相比比较较，不不得得更更深深，重重金金属属限限量量为为百百万万分之十，求取标准铅溶液多少毫升？分之十，求取标准铅溶液多少毫升？示例示例3 3：肾上腺素中酮体的检查：肾上腺

14、素中酮体的检查取取本本品品0.20g0.20g，置置于于100ml100ml量量瓶瓶中中，加加盐盐酸酸溶溶液液（9200092000）溶溶解解并并稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀，在在310nm310nm处处测测定定吸吸光光度度不不得得超超过过0.050.05，酮酮体体的的E1cm1%为为435435，求求酮体的限量。酮体的限量。示例示例4 4：卡比马唑片：卡比马唑片(规格：规格：5mg)5mg)中甲巯咪唑的检查中甲巯咪唑的检查取取本本品品2020片片，研研细细，加加三三氯氯甲甲烷烷适适量量，研研磨磨使使卡卡比比马马唑唑溶溶液液，滤滤过过，用用三三氯氯甲甲烷烷洗洗涤涤滤滤器器，合合并并滤滤液液与

15、与洗洗液液，置置10ml10ml量量瓶瓶中中，加加三三氯氯甲甲烷烷稀稀释释至至刻刻度度，摇摇匀匀，作作为为供供试试品品溶溶液液；另另取取甲甲巯巯咪咪唑唑对对照照品品，加加三三氯氯甲甲烷烷制制成成每每1ml1ml中中含含有有100100 g g的的溶溶液液，作作为为对对照照品品溶溶液液；分分别别吸吸取取上上述述两两溶溶液液个个10 10 l l，分分别别点点于于同同一一硅硅胶胶G G薄薄层层板板上上，以以三三氯氯甲甲烷烷-丙丙酮酮（4:14:1）为为展展开开剂剂，展展开开后后，晾晾干干，喷喷以以稀稀碘碘化化铋铋钾钾试试液液使使显显色色。供供试试品品溶溶液液如如显显与与对对照照品品相相应应的的杂杂

16、质质斑斑点点，其其颜颜色色与对照品主斑点比较，不得更深，求杂质限量。与对照品主斑点比较，不得更深，求杂质限量。注：卡比马唑片注：卡比马唑片又名甲亢平，属于抗甲状腺又名甲亢平，属于抗甲状腺第三节第三节 一般杂质的检查一般杂质的检查药品检验操作标准药品检验操作标准1.1.遵循平行操作原则遵循平行操作原则仪仪器器的的配配对对性性，如如：纳纳氏氏比比色色管管应应配配对对，刻刻度度线高低相差不超过线高低相差不超过2mm2mm。对照品与供试品的同步操作。对照品与供试品的同步操作。一、一般杂质检查规则一、一般杂质检查规则2.2.正正确确的的取取样样及及供供试试品品的的称称量量范范围围,如如:1g1g不不 超

17、过超过2%2%，1g1g不超过不超过1%1%3.3.正确的比色、比浊方法正确的比色、比浊方法4.4.检检查查结结果果不不符符合合规规定定或或在在限限度度边边缘缘时时应应对对供试管和对照管各复查二份供试管和对照管各复查二份 二、氯化物检查法二、氯化物检查法（一）原理：（一）原理：对照法对照法 除除另另有有规规定定外外，取取各各药药品品项项下下规规定定量量的的供供试试品品，加加水水溶溶解解使使成成25ml25ml（溶溶液液如如显显碱碱性性，可可滴滴加加硝硝酸酸使使成成中中性性），再再加加稀稀硝硝酸酸10m110m1；溶溶液液如如不不澄澄清清，应应滤滤过过；置置50ml50ml纳纳氏氏比比色色管管中

18、中，加水使成约加水使成约40m140m1，摇匀，即得供试溶液。，摇匀，即得供试溶液。（二）检查方法：药典附录（二）检查方法：药典附录另另取取各各药药品品项项下下规规定定量量的的标标准准氯氯化化钠钠溶溶液液，置置50ml50ml纳纳氏氏比比色色管管中中，加加稀稀硝硝酸酸10m110m1，加加水水使使成成40m140m1，摇摇匀匀，即即得得对对照照浴浴液液。于于供供试试溶溶液液与与对对照照溶溶液液中中，分分别别加加入入硝硝酸酸银银试试液液1.0m11.0m1，用用水水稀稀释释使使成成50m150m1，摇摇匀匀，在在暗暗处处放放置置5 5分分钟钟，同同置置黑黑色色背背景景上上，从从比比色色管管上上方

19、方向向下下观观察，比较，即得。察，比较，即得。（三）测定条件（三）测定条件 1.1.标标准准NaClNaCl溶溶液液 1010 gCl/mlgCl/ml，50ml50ml溶溶液液中中含含50508080 g g的的ClCl 所所显显浑浑浊浊梯梯度度明明显显，相相当当于标准于标准NaClNaCl溶液溶液5 58ml8ml。2.2.反反应应需需在在硝硝酸酸酸酸性性条条件件下下进进行行，且且以以50ml50ml供试溶液中含稀硝酸供试溶液中含稀硝酸10ml10ml为宜。为宜。加速加速AgClAgCl浑浊的形成；浑浊的形成；产生较好的乳浊；产生较好的乳浊；避避免免弱弱酸酸银银盐盐如如碳碳酸酸银银、磷磷酸

20、酸银银以以及及氧氧化化银银沉淀的形成。沉淀的形成。3.3.试剂：硝酸银试剂：硝酸银4.4.供供试试液液和和对对照照液液稀稀释释后后，再再加加硝硝酸酸银银溶溶液液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀使生成白色浑浊而不是白色沉淀 。5.5.避避光光、暗暗处处放放置置5 5分分钟钟后后比比浊浊，因因氯氯化化银银见光易分解。见光易分解。6.6.比比浊浊方方法法：同同置置于于黑黑色色背背景景上上，自自上上向向下下观察。观察。7.7.平行操作原则平行操作原则（四）干扰及排除（四）干扰及排除1.1.若若供供试试品品有有色色，需需经经处处理理后后方方可可检检查查。内内消消色色法法：倍倍量量法法，如如枸枸橼橼酸酸铁铁

21、铵铵中中氯氯化化物物的检查。的检查。外外消消色色法法：如如高高锰锰酸酸钾钾中中氯氯化化物物的的检检查查，可可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。2.2.不溶于水的有机药物不溶于水的有机药物加水振摇，过滤，取滤液进行检查。加水振摇，过滤，取滤液进行检查。溶溶于于有有机机溶溶剂剂如如稀稀乙乙醇醇、丙丙酮酮，可可加加稀稀乙乙醇醇或丙酮溶解后进行检查或丙酮溶解后进行检查1.1.药药物物中中氯氯化化物物杂杂质质检检查查，是是使使该该杂杂质质在在酸酸性性溶溶液液中中与与硝硝酸酸银银作作用用生生成成氯氯化化物物浑浑浊，所用的稀酸是（）浊，所用的稀酸是（）A.A.硫

22、酸硫酸 B.B.硝酸硝酸 C.C.盐酸盐酸 D.D.醋酸醋酸 E.E.磷酸磷酸 自测题自测题2.2.中中国国药药典典（20052005年年版版）规规定定，检检查查氯氯化化物物杂杂质质时时，一一般般取取用用标标准准氯氯化化钠钠溶溶液液（10gCl10gCl/ml/ml）5 58ml8ml的原因是（）的原因是（）A.A.使检查反应完全使检查反应完全B.B.药物中含氯化物的量均在此范围药物中含氯化物的量均在此范围C.C.加速反应加速反应D.D.所产生的浊度梯度明显所产生的浊度梯度明显E.E.避免干扰避免干扰 3.3.采采用用硝硝酸酸银银试试液液检检查查氯氯化化物物时时，加加入入硝硝酸使溶液酸化的目的

23、是（）酸使溶液酸化的目的是（）A A加速生成氯化银浑浊反应加速生成氯化银浑浊反应B B消除某些弱酸盐的干扰消除某些弱酸盐的干扰C C消除碳酸盐干扰消除碳酸盐干扰D D消除磷酸盐干扰消除磷酸盐干扰E E避免氧化银沉淀生成避免氧化银沉淀生成4.4.当当采采用用比比浊浊法法检检查查氯氯化化物物杂杂质质时时，若若药药物物本本身身有有颜颜色色而而干干扰扰检检查查的的话话，应应该该选选用的处理方法为（）用的处理方法为（）A A内消色法内消色法B B外消色法外消色法C C比色法比色法D D差示比浊法差示比浊法E E差示可见分光法差示可见分光法 5.5.若若要要进进行行高高锰锰酸酸钾钾中中氯氯化化物物的的检检

24、查查，最最佳方法是（）佳方法是（）A.A.加入一定量氯仿提取后测定加入一定量氯仿提取后测定B.B.氧瓶燃烧氧瓶燃烧C.C.倍量法倍量法D.D.加入一定量乙醇加入一定量乙醇E.E.以上都不对以上都不对6.6.下下列列哪哪些些条条件件为为药药物物中中氯氯化化物物检检查查的的必必要条件（）要条件（）A.A.所用比色管需配套所用比色管需配套B.B.稀硝酸酸性下稀硝酸酸性下(10ml/50ml)(10ml/50ml)C.C.避光放置避光放置5 5分钟分钟D.D.用硝酸银标准溶液做对照用硝酸银标准溶液做对照E.E.在白色背景下观察在白色背景下观察 三、硫酸盐检查法三、硫酸盐检查法（一）原理：（一）原理：对

25、照法对照法（二）测定条件（二）测定条件1.1.标标准准K K2 2SOSO4 4溶溶液液0.1mg/ml0.1mg/ml，50ml50ml溶溶液液中中含含0.10.10.5mg0.5mg的的所所显显浑浑浊浊梯梯度度明明显显，相相当当于于标标准准K K2 2SOSO4 4溶液溶液1 15ml5ml。2.2.反反应应需需在在盐盐酸酸酸酸性性条条件件下下进进行行，且且以以50ml50ml供试溶液中含稀盐酸供试溶液中含稀盐酸2ml2ml为宜。为宜。3.3.试剂：氯化钡试剂：氯化钡4.4.供供试试液液和和对对照照液液稀稀释释后后，再再加加氯氯化化钡钡溶溶液液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀。使生成白色浑浊

26、而不是白色沉淀。5.比比浊浊方方法法：同同置置于于黑黑色色背背景景上上，自自上上向向下下观察。观察。药物中硫酸盐检查时，所用标准对照液是（）药物中硫酸盐检查时，所用标准对照液是（）A.A.标准氯化钡标准氯化钡B.B.标准醋酸铅溶液标准醋酸铅溶液C.C.标准硝酸银溶液标准硝酸银溶液D.D.标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液E.E.以上都不对以上都不对 自测题自测题若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。（三）干扰及排除（三）干扰及排除四、铁盐检查法四、铁盐检查法(硫氰酸盐法和巯基醋酸法硫氰酸盐法和巯基醋酸法)1.1.原理原理:对照法对照法（一）硫氰酸盐法（一

27、）硫氰酸盐法2.2.检查方法检查方法（药典附录）药典附录）除除另另有有规规定定外外，取取各各药药品品项项下下规规定定量量的的供供试试品品，加加水水溶溶解解使使成成25ml25ml，移移置置50ml50ml纳纳氏氏比比色色管管中中，加加稀稀盐盐酸酸2ml2ml与与过过硫硫酸酸铵铵50mg50mg，用用水水稀稀释释使使成成35m135m1后后，加加30%30%硫硫氰氰酸酸铵铵溶溶液液3ml3ml，再再加加水水适适量量稀稀释释成成50ml50ml，摇摇匀匀；如如显显色色，立立即即与与标标准准铁铁溶溶液液一一定定量量制制成成的的对对照照溶溶液液比比较较，即得。即得。对照溶液的制备对照溶液的制备取取各各

28、药药品品项项下下规规定定量量的的标标准准铁铁溶溶液液，置置50ml50ml纳纳氏氏比比色色管管中中，加加水水使使成成25ml25ml，加加稀稀盐盐酸酸2ml2ml与与过过硫硫酸酸铵铵50mg50mg，用用水水稀稀释释使使成成35m135m1后后，加加30%30%硫硫氰氰酸酸铵铵溶溶液液3ml3ml，再再加加水水适适量量稀稀释释成成50ml50ml，摇匀。，摇匀。3.3.测定条件测定条件 用用FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4)2 212H12H2 2O O（硫硫酸酸铁铁铵铵）配配制制标标准准铁铁贮贮备备液液（加加入入硫硫酸酸防防止止FeFe3+3+的的水水解解），标标准准铁铁溶溶液液临临

29、用用前前稀稀释释而而成成，标标准准铁铁溶溶液液1010 g g FeFe3+3+/ml/ml，50ml50ml溶溶液液中中含含10105050 g g的的FeFe3+3+显显色色梯度明显，一般取标准铁溶液梯度明显，一般取标准铁溶液1.01.05.0ml 5.0ml 反反应应需需在在盐盐酸酸酸酸性性条条件件下下进进行行，且且以以50ml50ml供供试溶液中含稀盐酸试溶液中含稀盐酸2ml2ml为宜。为宜。试试剂剂：硫硫氰氰酸酸铵铵。加加过过量量硫硫氰氰酸酸铵铵，使使反反应应向正反应方向进行向正反应方向进行 检检查查FeFe2+2+和和FeFe3+3+。铁铁盐盐检检查查时时，加加氧氧化化剂剂氧氧化化

30、FeFe2+2+为为FeFe3+3+。加加过过硫硫酸酸铵铵可可氧氧化化FeFe2+2+为为FeFe3+3+，同同时时可可防防止止光光线线使使硫硫氰氰酸酸铁铁还还原原或或分分解解褪褪色色。加硝酸后加热也可氧化加硝酸后加热也可氧化FeFe2+2+为为FeFe3+3+比比色色方方法法：同同置置于于白白色色背背景景上上，自自上上向向下下观观察。察。4.4.干扰及排除干扰及排除为为了了提提高高灵灵敏敏度度或或供供试试管管与与对对照照管管色色调调不不一一致致时时，可可用用正正丁丁醇醇提提取取后后，分分取取正正丁丁醇醇层层比比色。色。具具环环状状结结构构的的有有机机药药物物，需需经经700700800800

31、炽炽灼破坏处理后再依法检查。灼破坏处理后再依法检查。（二）巯基醋酸法（二）巯基醋酸法 原理：原理：对照法对照法本法灵敏度较高，但试剂较贵！1.1.中中国国药药典典（20052005年年版版）规规定定铁铁盐盐的的检检查查方法为（）方法为（）A.A.硫氰酸盐法硫氰酸盐法B.B.巯基醋酸法巯基醋酸法C.C.普鲁士蓝法普鲁士蓝法D.D.邻二氮菲法邻二氮菲法E.E.水杨酸显色法水杨酸显色法自测题自测题2.2.中中国国药药典典（20052005年年版版）规规定定，硫硫氰氰酸酸铵铵法法检检查查铁铁盐盐时时，加加入入过过硫硫酸酸铵铵的的目目的的是是（）（）A.A.使药物中铁盐都转变为使药物中铁盐都转变为FeF

32、e3+3+B.B.防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色C.C.使产生的红色产物颜色更深使产生的红色产物颜色更深D.D.防止干扰防止干扰E.E.便于观察、比较便于观察、比较 3.3.中中国国药药典典收收载载的的铁铁盐盐检检查查，主主要要是是检检查（）查（）A.A.FeFeB.B.FeFe2+2+C.C.FeFe3+3+D.D.FeFe2+2+和和FeFe3+3+E.E.以上都不对以上都不对 五、重金属检查法五、重金属检查法（以铅为代表）（以铅为代表）（毒性杂质，须严控）（毒性杂质，须严控）中国药典（中国药典（20052005年版）共收载四法：年版）共收载四法：硫代乙酰

33、胺法硫代乙酰胺法炽灼残渣法炽灼残渣法硫化钠法硫化钠法微孔滤膜法微孔滤膜法 （一）第一法（一）第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法1.1.原理：原理：对照法对照法 适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物2.2.测定条件测定条件用用硝硝酸酸铅铅配配制制标标准准铅铅贮贮备备液液（加加硝硝酸酸防防止止PbPb2+2+水水解解），标标准准铅铅溶溶液液临临用用前前稀稀释释而而成成，标标准准硝硝酸酸铅铅溶溶液液1010 g g PbPb2+2+/ml/ml，适适宜宜比比色色范围为范围为27ml27ml溶液中含溶液中含10102020 g g的的PbPb2+2+。本本法法用用2ml 2ml

34、pH=3.5pH=3.5的的醋醋酸酸盐盐缓缓冲冲液液控控制制溶溶液液pHpH值为值为3 33.53.5。显显色色剂剂：从从Ch.PCh.P（19901990）开开始始改改用用硫硫代代乙乙酰胺做显色剂。酰胺做显色剂。供试品如有色，需经处理后方可检查。供试品如有色，需经处理后方可检查。a)a)外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。干扰的有色溶液。b)b)内消色法。内消色法。c)c)改用第四法，微孔滤膜过滤法。改用第四法，微孔滤膜过滤法。若若供供试试品品中中有有微微量量FeFe3+3+存存在在，会会氧氧化化硫硫化化氢氢生生成成单单质质硫硫，干

35、干扰扰比比色色，加加入入抗抗坏坏血血酸酸或或盐盐酸酸羟羟胺胺（0.50.51.0g1.0g）还还原原FeFe3+3+为为FeFe2+2+，可可消除干扰。消除干扰。3.3.干扰及排除干扰及排除若若供供试试品品为为铁铁盐盐，FeFe3+3+在在盐盐酸酸中中生生成成HFeClHFeCl ，用用乙乙醚醚提提取取除除去去，剩剩余余微微量量铁铁在在氨氨碱碱性性溶液中，加溶液中，加KCNKCN掩蔽，然后用第三法检查。掩蔽，然后用第三法检查。若若药药物物本本身身能能生生成成不不溶溶性性硫硫化化物物时时，可可加加入入掩掩蔽蔽剂剂消消除除干干扰扰。如如ZnSOZnSO4 4中中重重金金属属的的检检查查，要要在在碱

36、碱性性下下加加KCNKCN掩掩蔽蔽ZnZn2+2+后后，依依第第三三法检查。法检查。（二）第二法（二）第二法 炽灼残渣法炽灼残渣法适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。500500600600炽炽灼灼后后的的残残渣渣，经经处处理理后后，依一法检查。依一法检查。1.1.原理：原理：对照法对照法2.2.操作方法操作方法含含钠钠盐盐及及氟氟的的有有机机药药物物应应用用铂铂坩坩埚埚、石石英英坩坩埚埚或或硬硬质质玻玻璃璃蒸蒸发发皿皿（因因可可腐腐蚀蚀瓷瓷坩埚，带入大量重金属）。坩埚，带入大量重金属）。（三）第三法（三）第三法 硫化钠法硫化钠法适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中适用于溶

37、于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。1.1.原理原理 对照法对照法 2.2.测定条件测定条件 NaOHNaOH 碱性条件下碱性条件下显色剂：硫化钠显色剂：硫化钠 （四）第四法（四）第四法 微孔滤膜法微孔滤膜法 依依一一法法检检查查，结结果果微微孔孔滤滤膜膜过过滤滤后后比比较较色色斑斑。适适用用于于含含2 25 5 g g重重金金属属杂杂质质及及有有色色供试液的检查。供试液的检查。1.1.重重金金属属检检查查中中，加加入入硫硫代代乙乙酰酰胺胺时时溶溶液控制最佳的液控制最佳的pHpH值是（）值是（）A.1.5 A.1.5 B.3.5 B

38、.3.5 C C7.57.5D.9.5 D.9.5 E.11.5E.11.5自测题自测题2.2.微孔滤膜法是用来检查（）微孔滤膜法是用来检查（）A.A.氯化物氯化物 B.B.砷盐砷盐C.C.重金属重金属 D.D.硫化物硫化物E.E.氰化物氰化物3.3.中中国国药药典典(2005(2005年年版版)重重金金属属检检查查法法中中，所使用的显色剂是（）所使用的显色剂是（）A.A.硫化氢试液硫化氢试液B.B.硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液C.C.硫化钠试液硫化钠试液D.D.氰化钾试液氰化钾试液E.E.硫氰酸铵试液硫氰酸铵试液4.4.现现有有一一药药物物为为苯苯巴巴比比妥妥，欲欲进进行行重重金金属属检检查

39、查，应应采采用用中中国国药药典典上上收收载载的的重重金属检查的哪种方法（）金属检查的哪种方法（）A.A.硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法B.B.炽灼残渣法炽灼残渣法C.C.硫化钠法硫化钠法D.D.微孔滤膜法微孔滤膜法E.E.以上都不对以上都不对5.5.下下面面哪哪些些方方法法为为中中国国药药典典收收载载的的重金属检查方法（）重金属检查方法（）A.A.500500600600炽灼残渣后炽灼残渣后,按一法操作按一法操作B.B.pH3pH33.53.5条件下，加入硫化氢试液条件下，加入硫化氢试液C.C.碱性下，加入硫化钠试液碱性下，加入硫化钠试液D.D.按按一一法法操操作作，结结果果用用微微孔孔滤滤膜膜过过

40、滤滤后观察色斑后观察色斑 E.E.以上都对以上都对六、砷盐检查法六、砷盐检查法（毒性杂质，须严控）（毒性杂质，须严控）（一）古蔡法（一）古蔡法(ChP:2005(ChP:2005）遇遇HgBrHgBr2 2试试纸纸生生成成黄黄色色棕棕色色的的砷砷斑斑，与与2ml2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。1.1.原理：原理：对照法对照法 2.2.操作方法操作方法标准砷斑用标准砷斑用2ml2ml标准标准砷溶液制备。砷溶液制备。供供试试品品需需经经有有机机破破坏坏，则则标标准准砷砷溶溶液液应应平平行行操作。操作。滴加滴加KIKI试液试液5ml5ml和和酸性氯化

41、亚锡酸性氯化亚锡5 5滴滴醋醋酸酸铅铅棉棉花花溴化汞试纸溴化汞试纸3.3.测定条件测定条件 标准砷溶液临用新配，标准砷溶液临用新配，1 1 gAs/mlgAs/ml。醋醋酸酸铅铅棉棉花花的的作作用用是是消消除除锌锌粒粒及及供供试试品品中中少少量量硫硫化化物物的的干干扰扰，醋醋酸酸铅铅棉棉花花60mg60mg装装管管高高度度606080mm80mm。锌粒应无砷锌粒应无砷酸酸为为反反应应物物，酸酸量量应应足足够够（所所以以加加浓浓盐盐酸酸5ml5ml）。）。砷斑不稳定，应立即观察。砷斑不稳定，应立即观察。酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是：酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是：a.a.还原还原AsAs5+5+为

42、为AsAs3+3+，加快反应速度；，加快反应速度；b.b.碘碘化化钾钾被被氧氧化化生生成成的的I I2 2又又可可被被氯氯化化亚亚锡锡还还原原为为I I-，I I-与与反反应应中中生生成成的的ZnZn2+2+能能形形成成稳稳定定的的配配位位离离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；c.c.氯氯化化亚亚锡锡与与锌锌作作用用，在在锌锌表表面面形形成成锌锌锡锡齐齐，使使氢气均匀而连续地发生；氢气均匀而连续地发生；d.d.可可抑抑制制微微量量SbSb的的干干扰扰，在在实实验验条条件件下下，100 100 gSbgSb存在不干扰。存在不干扰。4.4.干扰及排除干扰及排除

43、供供试试品品若若为为硫硫化化物物、亚亚硫硫酸酸盐盐、硫硫代代硫硫酸酸盐盐时时，加加HNOHNO3 3，使使氧氧化化成成硫硫酸酸盐盐，以以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。供供试试品品若若为为铁铁盐盐，需需先先加加酸酸性性氯氯化化亚亚锡锡试试液液，将将FeFe3+3+还还原原为为FeFe2+2+。如如枸枸橼橼酸酸铁铁铵铵中中砷砷盐的检查。盐的检查。具具环环状状结结构构的的有有机机药药物物，要要先先行行有有机机破破坏坏后再进行检查后再进行检查。常用的有机破坏方法：常用的有机破坏方法：a.a.碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法b

44、.b.酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查本法适用于不含本法适用于不含SbSb或含或含SbSb量小于量小于100100 g g的的供试品。供试品。（二二）二二乙乙基基二二硫硫代代氨氨基基甲甲酸酸银银法法（Ag-Ag-DDCDDC）1.1.原理：原理：对照法对照法 砷砷化化氢氢与与Ag-DDCAg-DDC溶溶液液作作用用，还还原原Ag-DDCAg-DDC为为红红色色胶胶态态银银，直直接接比比色色或或于于510nm510nm波波长长处处测测定定吸吸收度，进行比较。收度，进行比较。AgAg（DDCDDC）的结构）的结构C2H5C2H5NCSSAg2.2.方法方法3.3.取取一

45、一定定量量的的供供试试品品溶溶液液（或或标标准准砷砷溶溶液液5.0ml5.0ml）置置于于瓶瓶A A中中，加加盐盐酸酸5ml5ml与与水水21ml21ml，再再加加碘碘化化钾钾试试液液5ml5ml与与酸酸性性氯氯化化锡锡试试液液5 5滴滴，在在室室温温放放置置10min10min后后，加加锌锌粒粒2g2g，立立即即将将导导气气管管C C与与A A瓶瓶密密塞塞，使使生生成成的的砷砷化化氢氢气气体体导导入入盛盛有有AgAg（DDCDDC）溶溶液液5.0ml5.0ml的的D D管管中中，并并将将A A瓶瓶置置25254040o oC C水水浴浴中中，反反应应45min45min后后，取取出出D D管

46、管，添添加加三三氯氯甲甲烷烷至至刻刻度度，混混匀匀。将将供供试试溶溶液液D D管管和和对对照照溶溶液液D D管管同同置置白白色色背背景景上，自管上方向下观察比色。上，自管上方向下观察比色。当当AsAs浓浓度度为为1 1g g1010g/40mlg/40ml范范围围内内，线线性性关关系系良良好好，显显色色在在2 2小小时时稳稳定定，重重现现性性好好，并可测得砷盐含量并可测得砷盐含量(测测510nm510nm处吸光度处吸光度)。可可用用于于砷砷盐盐的的限限量量检检查查，也也可可用用作作微微量量砷砷盐的含量测定。盐的含量测定。用用有有机机碱碱吸吸收收反反应应产产生生的的HDDCHDDC有有利利于于反

47、反应应的进行（的进行（ChP-2005ChP-2005：用三乙胺）。：用三乙胺）。本法适用于含本法适用于含SbSb量小于量小于500500 g g的供试品。的供试品。3.3.注意事项注意事项1.1.在在药药物物的的杂杂质质检检查查中中，其其限限量量须须严严格格控制的是（）。控制的是（）。A.A.氯化物氯化物 B.B.硫酸盐硫酸盐C.C.醋酸盐醋酸盐 D.D.砷盐砷盐 E.E.淀粉淀粉 自测题自测题2.2.在在用用古古蔡蔡法法检检查查砷砷盐盐时时，导导气气管管中中塞塞入入醋酸铅棉花的目的是（）。醋酸铅棉花的目的是（）。A.A.除去除去I I2 2 B.B.除去除去AsHAsH3 3C.C.除去除

48、去H H2 2S S D.D.除去除去HBrHBrE.E.除去除去SbHSbH3 33.3.古蔡氏法中，古蔡氏法中，SnC1SnC12 2的作用有（）。的作用有（）。A.A.使使AsAs5+5+AsAs3+3+B.B.除去除去H H2 2S SC.C.除去除去I I2 2 D.D.组成锌锡齐组成锌锡齐E.E.除去其它杂质除去其它杂质 4.4.AgAg-DDCDDC法法检检查查砷砷盐盐的的原原理理为为：砷砷化化氢氢与与AgAg-DDCDDC吡啶作用，生成的物质是（）。吡啶作用，生成的物质是（）。A.A.砷斑砷斑B.B.锑斑锑斑 C.C.胶态砷胶态砷D.D.三氧化二砷三氧化二砷 E.E.胶态银胶态

49、银5.5.中中国国药药典典收收载载的的古古蔡蔡法法检检查查砷砷盐盐的的基基本本原理是（）。原理是（）。A.A.与锌、酸作用生成与锌、酸作用生成H H2 2S S气体气体B.B.与锌、酸作用生成与锌、酸作用生成AsHAsH3 3气体气体C.C.产生的气体遇溴化汞试纸产生砷斑产生的气体遇溴化汞试纸产生砷斑D.D.比比较较供供试试品品砷砷斑斑与与标标准准品品砷砷斑斑的的面面积积大小大小E.E.比比较较供供试试品品砷砷斑斑与与标标准准品品砷砷斑斑的的颜颜色色强度强度 6.6.用用古古蔡蔡氏氏法法检检查查下下列列药药物物中中的的砷砷盐盐时时，排排除除下下列列干干扰扰的的方方法法为为：硫硫化化物物（）、亚

50、亚硫硫酸酸盐盐（）、硫硫代代硫硫酸酸盐盐（）、高高铁盐（铁盐（）。）。A.A.先用硝酸氧化先用硝酸氧化B.B.先加酸性氯化亚锑还原先加酸性氯化亚锑还原C.C.先加氰化钾掩蔽先加氰化钾掩蔽D.D.先加草酸生成沉淀先加草酸生成沉淀7.7.AgAg-DDCDDC法法检检查查砷砷盐盐时时，所所产产生生的的红红色色溶溶液为（）。液为（）。A.A.HDDCHDDC吡啶溶液吡啶溶液B.B.AgAg吡啶溶液吡啶溶液C.C.AgAg的胶态溶液的胶态溶液D.D.Ag(DDCAg(DDC)溶液溶液E.E.AsAgAsAg3 3溶液溶液8.8.葡葡萄萄糖糖中中砷砷盐盐的的检检查查，需需要要的的试试剂剂应应有有（）。（