血浆蛋白和尿微量蛋白检测及其临床意义.ppt
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1、n n血浆蛋白的组成十分复杂,目前还不知道血浆蛋血浆蛋白的组成十分复杂,目前还不知道血浆蛋白的确切种类和数量。保守地估计组成性血浆蛋白的确切种类和数量。保守地估计组成性血浆蛋白约有白约有500500种,它们多为糖蛋白种,它们多为糖蛋白,血浆蛋白是血浆血浆蛋白是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份类化合物。占血浆固体成份90%90%左右左右,目前已经研目前已经研究的血浆蛋白质有究的血浆蛋白质有300300多种多种,分离出的纯品约分离出的纯品约100100来来种,除免疫球蛋白外,主要由肝细胞合成。血浆种,除免疫球蛋白外,主
2、要由肝细胞合成。血浆蛋白执行着人体的许多生物功能,在人类健康与蛋白执行着人体的许多生物功能,在人类健康与疾病中有着重要的意义,人类很多疾病可引起血疾病中有着重要的意义,人类很多疾病可引起血浆和体液中的蛋白质性质和含量的改变,因此,浆和体液中的蛋白质性质和含量的改变,因此,测定和分析血浆和体液中的蛋白质变化在临床上测定和分析血浆和体液中的蛋白质变化在临床上有重要价值。有重要价值。n n尿微量蛋白是指用常规定性或定量方法难以检出的一些蛋白质。尿微量蛋白的检测对早期原发肾脏病及其他相关疾病引发的早期肾脏病变的诊断和治疗 有着非常重要的价值,尿微量蛋白的检测为临床上监测肾脏及某些其他器官功能状态,提供
3、了可靠指标。目前已检出的尿微量蛋白种类、数量较多,其各自的理化特性、合成部位、生理功能都不尽相同。我们科目前已开展检测的有:尿白蛋白(AIb)、尿转铁蛋白(TRF)、尿IgG、尿轻链(、)、尿2微球蛋白(2M)、尿1微球蛋白(1 M)、尿NAG等。n n一、血浆蛋白和尿微量蛋白测定方法的进 展n n二、各种血浆蛋白和尿微量蛋白检测的临 床应用n n一、血浆蛋白和尿微量蛋白测定方法的进展n n(一)比色法、比浊法n n(二)电泳分离法n n(三)免疫测定法n n(一)比色法、比浊法n n早期人们用比色法、比浊法测定人体血浆和体液中的蛋白质,如用双缩脉法、溴甲酚绿法测定血浆中的总蛋白、白蛋白等,用
4、磺基水杨酸测定尿液中的蛋白质,这二种方法的优点是操作简单,重复性好,试剂稳定,成本低。但灵敏度和特异性较低,适用于测定人体中的常量蛋白。而对于人体中含量少的微量蛋白和一些特殊蛋白用上述方法就无法进行检测。n n(二)电泳分离法n n电泳法分离法,最初以滤纸作为支持物,后来发展为醋酸纤维膜、琼脂糖凝胶、聚丙烯胺凝胶作为支持物,对血清和体液中的蛋白质进电泳分离,早期的滤纸和醋酸纤维膜作支持物可将血清蛋白分为白蛋白,1球蛋白、2球蛋白、球蛋白和-球蛋白等。现在用聚丙烯胺作为支持物的电泳方法,可分离 100 种以上的血清蛋白质,可对尿液中的蛋白质进行分离。电泳法优点是可较好地分离血清和体液中蛋白,其缺
5、点是操作繁琐 ,试验时间长。n n(三)免疫测定法n n1 免疫扩散法 n n其存在较多缺点,如操作繁琐,试验需要时间较长(18-48小时),定量精确度差等。n n2 免疫电泳法 n n虽有较高的分辩力,但蛋白质在图谱上定位困难,且不能定量,临床应用范围不广,仅用于异常蛋白成分检测。n n3 免疫浊度法 免疫浊度测定免疫浊度测定Ag+AbAg Ab 免疫比浊测定免疫比浊测定 免疫浊度法是利用抗原、抗体在缓冲液中反应,形成抗原-抗体免疫复合物颗粒,此复合物颗粒分子量较大,在缓冲液形成沉淀析出,使反应液产生浊度,在抗体过量的前提下,通过光束时,悬浮的免疫复合物颗粒所产生的透射、散射光速率变化强弱与
6、抗原浓度成正比。速率峰值经微电脑处理转换成抗原浓度。特点是敏感、精确、快速、和简便。n n免疫浊度法根据检测器的位置及接收光信号的性质分为:n n透射比浊法n n散射比浊法n n透射比浊法和散射比浊法检测示意图n nRate NephelometryRate Nephelometryn nFixed Time KineticFixed Time Kinetic测定原理测定原理 速速 率率 散散 射射 法法 定定 时时 动动 态态 二 各种血浆蛋白和尿微量蛋白检测的 临床应用我科的西门子特定蛋白仪可我科的西门子特定蛋白仪可检测项目检测项目ADnase B ADnase B AlbuminAlbu
7、min 1-Antitrypsin1-Antitrypsin 1-acid-1-acid-glycoproteinglycoprotein 2-2-macroglobulinmacroglobulinApo A-IApo A-IApo A-IIApo A-IIApo BApo BApo EApo EASLASLAT-IIIAT-III 2-microglobulin2-microglobulin 血清血清/血浆血浆:C1-inhibitorC1-inhibitorC3C3C4C4CeruloplasminCeruloplasminHigh Sensitivity CRPHigh Sensiti
8、vity CRPCystatin CCystatin CFerritinFerritinFibrinogenFibrinogenFibronectinFibronectinHaptoglobinHaptoglobinHemopexinHemopexinIgAIgAIgEIgEIgGIgGIgG-subclasses 1-4IgG-subclasses 1-4IgMIgMIg-light chain,kappaIg-light chain,kappaIg-light chain,lambdaIg-light chain,lambdaLp(a)Lp(a)MyoglobinMyoglobinPlas
9、minogenPlasminogenPrealbuminPrealbuminRetinol binding proteinRetinol binding proteinRFRFSerum Amyloid ASerum Amyloid ATotal proteinTotal proteinsoluble Transferrin Receptorsoluble Transferrin ReceptorTransferrinTransferrin测试项目测试项目AlbuminAlbumin 1-microglobulin1-microglobulin 2-macroglobulin2-macrogl
10、obulin 2-microglobulin2-microglobulinIgGIgGIg-light chain,Ig-light chain,kappakappaIg-light chain,Ig-light chain,lambdalambdaTotal proteinTotal protein TransferrinTransferrin尿液尿液AlbuminAlbuminIgAIgAIgGIgGIgMIgMTotal proteinTotal proteinCSF 60个测试项目个测试项目IgApIgApIgMpIgMpIgEsIgEs血清血清/血浆血浆涵盖最广泛的临床检测指标涵盖最
11、广泛的临床检测指标n n免疫功能免疫功能免疫功能免疫功能:IgA IgA、IgGIgG、IgMIgM、C3C3、C4C4、KapKap、LamLam、IgG subclasses 1-4IgG subclasses 1-4、IgEIgE、C1C1抑制物抑制物抑制物抑制物n n肾脏功能肾脏功能肾脏功能肾脏功能:白蛋白、转铁蛋白、白蛋白、转铁蛋白、白蛋白、转铁蛋白、白蛋白、转铁蛋白、IgG IgG、a1-a1-微球蛋白、微球蛋白、微球蛋白、微球蛋白、B2-B2-微球蛋白、微球蛋白、微球蛋白、微球蛋白、a2-a2-巨球蛋白、巨球蛋白、巨球蛋白、巨球蛋白、Kap-Kap-轻链、轻链、轻链、轻链、Lam
12、-Lam-轻链、轻链、轻链、轻链、Cystatin CCystatin Cn n感染性疾病感染性疾病感染性疾病感染性疾病 :CRP CRP、a1-a1-酸性糖蛋白、酸性糖蛋白、酸性糖蛋白、酸性糖蛋白、触珠蛋白、触珠蛋白、触珠蛋白、触珠蛋白、a1-a1-抗胰蛋白酶、铜兰蛋白、纤维蛋白原、抗胰蛋白酶、铜兰蛋白、纤维蛋白原、抗胰蛋白酶、铜兰蛋白、纤维蛋白原、抗胰蛋白酶、铜兰蛋白、纤维蛋白原、SAASAAn n类风湿性疾病类风湿性疾病类风湿性疾病类风湿性疾病:RF RF、ASLASL、CRPCRP、ADNaseBADNaseBn n心血管疾病心血管疾病心血管疾病心血管疾病:ApoA-I ApoA-I、
13、ApoBApoB、ApoA IIApoA II、ApoEApoE、Lp(a)Lp(a)、肌红蛋白、纤维蛋白原、肌红蛋白、纤维蛋白原、肌红蛋白、纤维蛋白原、肌红蛋白、纤维蛋白原、hsCRPhsCRPn n营养监测营养监测营养监测营养监测:前白蛋白、白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、铁蛋白前白蛋白、白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、铁蛋白前白蛋白、白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、铁蛋白前白蛋白、白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、铁蛋白n n出出出出/凝血疾病凝血疾病凝血疾病凝血疾病:纤维蛋白原、纤维蛋白原、纤维蛋白原、纤维蛋白原、AT3AT3、纤溶酶原、纤溶酶原、纤溶酶原、纤溶酶原n n贫血贫血
14、贫血贫血:触珠蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、触珠蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、触珠蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、触珠蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、可溶性转铁蛋白受体可溶性转铁蛋白受体可溶性转铁蛋白受体可溶性转铁蛋白受体其他其他其他其他:CERCER、CDT CDT 我科已开展的血浆和体液特定蛋白项目我科已开展的血浆和体液特定蛋白项目:n nIgA、IgG、IgM、K-轻链、L-轻链、C3、C4、Cystatin C、ALB、TRF、IgG、1-M、2-M、TP、NAG、apoA-I、apoB、Lp(a)、肌红蛋白、肌钙蛋白I、肌钙蛋白T、HCY、纤维蛋白原、hsCRP、RF、ASO、CRP、AAG、CER、PA、RB
15、P等。感染性疾病n n在炎症和组织坏死时,血浆某些蛋白质会出现特征性的变化,称为急性时相反应。这些指标比传统的炎症指标如发热、白细胞升高及分类异常、血沉加速能更早期反映炎症和和感染情况。另外,急性时相反应蛋白增加的持续时间不一样,因此,有助于准确判断炎症的发展过程。n n急性时相反应蛋白急性时相反应蛋白n n急性时相反应蛋白定义为发生感染情况下浓度改变超过25%.n n一些急性时相反应蛋白的浓度会减少,但大多数会增高。急性时相蛋白急性时相蛋白 CRP a1-酸性糖蛋白酸性糖蛋白 触珠蛋白触珠蛋白 a1-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶 铜蓝蛋白铜蓝蛋白 纤维蛋白原纤维蛋白原 淀粉样蛋白淀粉样蛋白A敏感性比
16、较敏感性比较 CRP 特性特性 正常含量低正常含量低(1000 倍)倍)半衰期短半衰期短(24 h)CRP 临床应用临床应用炎症的诊断炎症的诊断炎症的诊断炎症的诊断炎症与非炎症的鉴别炎症与非炎症的鉴别炎症与非炎症的鉴别炎症与非炎症的鉴别炎症过程的监测炎症过程的监测炎症过程的监测炎症过程的监测疗效考核疗效考核疗效考核疗效考核预后预后预后预后CRP 参考范围参考范围 炎症炎症 50 mg/L 重度炎症重度炎症CRP 炎症炎症-抗生素治疗抗生素治疗CRP 炎症:手术后炎症:手术后-无并发症无并发症n n手术后病人手术后病人手术后病人手术后病人CRPCRP升高,术后升高,术后升高,术后升高,术后7-1
17、07-10天天天天CRPCRP降至正常降至正常降至正常降至正常水平。水平。水平。水平。CRP 炎症:手术后炎症:手术后-并发症并发症血清淀粉样蛋白血清淀粉样蛋白A(SAA)n n免疫系统激活的一个标志物免疫系统激活的一个标志物n n不像不像 CRP CRP 一样因免疫抑制物而减少一样因免疫抑制物而减少n n反应时间短,增长变化大反应时间短,增长变化大n n敏感敏感,但不特异但不特异n n受以下因素影响增加受以下因素影响增加n n急性排斥急性排斥n n病毒或细菌感染病毒或细菌感染n n其他炎症刺激因子其他炎症刺激因子n n反应于反应于 IL-1,TNF-,IL-6 IL-1,TNF-,IL-6,
18、在肝脏合成,在肝脏合成SAA 作为急性异体排斥反应的标志物作为急性异体排斥反应的标志物第一次排异发生在手术后第2天,SAA出现一个峰值。第二次排异症状出现之前,SAA又一次升高。使用抗胸腺球蛋白治疗后,排异反应得到控制,CRP变化不明显。心血管疾病心血管疾病n nhsCRPn nAPOA1n nAPOBn nLPan nHCYhsCRPn n心血管疾病风险因子心血管疾病风险因子n n 3 mg/L 高度风险高度风险CRP 单独还是和其他危险因子一起做?单独还是和其他危险因子一起做?n n肌钙蛋白(肌钙蛋白(肌钙蛋白(肌钙蛋白(Troponin Troponin)是心肌坏死的标志物)是心肌坏死的
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- 关 键 词:
- 血浆 蛋白 微量 检测 及其 临床意义
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