动物生理学实验课件1.ppt

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1、山东农业大学动物生理学教研室动物生理学实验课的要求动物生理学实验课的要求遵守学习纪律，准时上、下课。实验期间不得无故外出或早退。特殊情况遵守学习纪律，准时上、下课。实验期间不得无故外出或早退。特殊情况下，应向教师请假。下，应向教师请假。爱护公共财物，注意节约各种实验用品。实验动物按组发给，如需补充使爱护公共财物，注意节约各种实验用品。实验动物按组发给，如需补充使用，须经教师同意才能补领。用，须经教师同意才能补领。实验结果存在固定的盘上，每组上课时记住带一张盘，实验结束后立即将实验结果存在固定的盘上，每组上课时记住带一张盘，实验结束后立即将结果拷出。结果拷出。切勿在电脑上设置密码，带的盘要干净，

2、免得电脑被感染病毒。切勿在电脑上设置密码，带的盘要干净，免得电脑被感染病毒。保持实验室清洁整齐，随时清除污物。实验完毕后，应将实验器材、用品保持实验室清洁整齐，随时清除污物。实验完毕后，应将实验器材、用品收拾妥当；将手术器械擦洗干净，清点数量，放回原处。经教师检查后才收拾妥当；将手术器械擦洗干净，清点数量，放回原处。经教师检查后才能离开实验室。能离开实验室。实验前必须仔细预习实验指导，了解实验的目的要求、基本原理以及简要实验前必须仔细预习实验指导，了解实验的目的要求、基本原理以及简要的操作步骤。的操作步骤。复习有关理论，以便提高实验过程中的主动性和效率，并进一步巩固有关复习有关理论，以便提高实

3、验过程中的主动性和效率，并进一步巩固有关理论知识理论知识实验报告实验报告山东农业大学动物生理学教研室动物生理学实验基本操动物生理学实验基本操作技术作技术一、常用手术器械一、常用手术器械1.蛙类实验手术器械：蛙类实验手术器械：剪刀、镊子、金剪刀、镊子、金属探针、玻璃分针、属探针、玻璃分针、铜锌弓、蛙心夹、铜锌弓、蛙心夹、蛙板等。蛙板等。2.哺乳动物手术器械：哺乳动物手术器械：手术刀、止血钳、手术刀、止血钳、咬骨钳、动脉夹、咬骨钳、动脉夹、气管插管、血管插气管插管、血管插管（包括静脉插管管（包括静脉插管和动脉插管）等。和动脉插管）等。山东农业大学动物生理学教研室止血钳止血钳山东农业大学动物生理学教

4、研室手术刀手术刀山东农业大学动物生理学教研室手术剪和手术镊手术剪和手术镊山东农业大学动物生理学教研室二、手术器械的消毒方法二、手术器械的消毒方法煮沸消毒法：一般用蒸馏水加热，水沸煮沸消毒法：一般用蒸馏水加热，水沸35min后，后，将器械放入消毒锅内，等第二次水沸后将器械放入消毒锅内，等第二次水沸后15min，对怀，对怀疑有芽孢感染的，必须煮沸疑有芽孢感染的，必须煮沸60min以上以上高压蒸汽灭菌法：高压灭菌锅，蒸汽压高压蒸汽灭菌法：高压灭菌锅，蒸汽压1520lb/in2，温度，温度121.6126.6 C，30min左右。不宜于橡胶制左右。不宜于橡胶制品和锐利器械的灭菌。品和锐利器械的灭菌。化

5、学药品消毒法：常用消毒剂有：化学药品消毒法：常用消毒剂有：LJ-强化戊二醛、强化戊二醛、70%乙醇（不适于金属器械的消毒）、乙醇（不适于金属器械的消毒）、0.1%新洁尔新洁尔灭、酶皂溶液、甲醛溶液等，金属器械应浸泡灭、酶皂溶液、甲醛溶液等，金属器械应浸泡30min以上。以上。（见下表）（见下表）烧灼灭菌法，适用于金属器械烧灼灭菌法，适用于金属器械山东农业大学动物生理学教研室山东农业大学动物生理学教研室三、常用实验动物青蛙和蟾蜍家兔大白鼠和小白鼠鱼类鸟类等山东农业大学动物生理学教研室实验动物的抓取固定方法蟾蜍蟾蜍蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固蛙类抓取方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定，

6、以中指、无名指、小指压住其左腹侧和后定，以中指、无名指、小指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左、右前肢、右手进肢，拇指和食指分别压住左、右前肢、右手进行操作。行操作。在抓取是蟾蜍时，注意勿挤压其两则耳部突起在抓取是蟾蜍时，注意勿挤压其两则耳部突起之毒腺，以免毒液射进眼中。之毒腺，以免毒液射进眼中。实验如需长时间观察，可破坏其脑脊髓（观察实验如需长时间观察，可破坏其脑脊髓（观察神经系统反应时不应破坏脑脊髓）或麻醉后用神经系统反应时不应破坏脑脊髓）或麻醉后用大头针固定在蛙板上。依实验需要采取俯卧位大头针固定在蛙板上。依实验需要采取俯卧位或仰卧位固定。或仰卧位固定。山东农业大学动物生理学教研室

7、家家兔兔抓取：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓抓取：实验家兔多数饲养在笼内，所以抓取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛取较为方便，一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其体重重量的大部分集中在左手上，这样就体重重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。抓双耳或抓提腹部。(1、2、3均为不正确均为不正确的抓取方法（的抓取方法（1可损伤两肾，可损伤两肾，2可造成可造成皮下出血，皮下出血，3可伤两耳），可伤两耳），4、5为正确为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用

8、的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓，并用手托兔体手托兔体)山东农业大学动物生理学教研室台式固定：做血压测量、呼吸等实验和手术时，则需将兔台式固定：做血压测量、呼吸等实验和手术时，则需将兔固定在兔台上，四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳固定在兔台上，四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳绑在兔台四周的固定木块上，头以固定夹固定或用一根粗绑在兔台四周的固定木块上，头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上。棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上。山东农业大学动物生理学教研室几种常用生理盐溶液的配制 生理性溶液为代替液，用于维生理性溶液为代替液，用于维持离体的组织、器官及细胞的持离体的组织、器官及细胞的

9、正常生命活动。它必须具备下正常生命活动。它必须具备下列条件：列条件：渗透压与组织也相渗透压与组织也相等；等；应含有组织、器官维持应含有组织、器官维持正常机能所必需的比例适宜的正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子；各种盐类离子；酸碱度应与酸碱度应与血浆相同，并具有充分的缓冲血浆相同，并具有充分的缓冲能力；能力；应含有氧气和营养物应含有氧气和营养物质。质。动物实验中常用的生理盐溶液动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水、任氏（有生理盐水、任氏（Ringer）溶液、乐氏（溶液、乐氏（Locke）溶液和台）溶液和台氏（氏（Tyrode）溶液四种，其成）溶液四种，其成分各异，如下表所示。分各异，如下表所

10、示。山东农业大学动物生理学教研室山东农业大学动物生理学教研室各种生理盐溶液的用途各种生理盐溶液的用途生理盐水：即与血清等渗之生理盐水：即与血清等渗之NaCl溶液，在冷血动物溶液，在冷血动物应用应用0.6%-0.65%，在温血动物应用，在温血动物应用0.85%-0.9%。任氏溶液：用于青蛙及其他冷血动物。任氏溶液：用于青蛙及其他冷血动物。乐氏溶液：用于温血动物之心脏、子宫及其它离体乐氏溶液：用于温血动物之心脏、子宫及其它离体脏器。用作灌注液者须于用前通入氧气泡脏器。用作灌注液者须于用前通入氧气泡15分钟。分钟。低钙乐氏液（含无水氯化钙低钙乐氏液（含无水氯化钙0.05g）用于离体小肠）用于离体小肠

11、及豚鼠的离体支气管灌注。及豚鼠的离体支气管灌注。台氏溶液：用于温血动物之离体小肠。台氏溶液：用于温血动物之离体小肠。山东农业大学动物生理学教研室动物的麻醉动物的麻醉在急、慢性动物实验中，手术前均应将动物麻醉，以减轻或消除动物的痛苦，保持在急、慢性动物实验中，手术前均应将动物麻醉，以减轻或消除动物的痛苦，保持安静状态安静状态,从而保证实验顺利进行。从而保证实验顺利进行。理想的麻醉药品应当是对动物麻醉完善，其毒性和对生理功能干扰最小，使用方便。理想的麻醉药品应当是对动物麻醉完善，其毒性和对生理功能干扰最小，使用方便。1常用麻醉剂的种类和用法常用麻醉剂的种类和用法局部麻醉剂：局部麻醉剂：0.5%-1

12、.0%盐酸普鲁卡因或盐酸普鲁卡因或2%盐酸可卡因用作皮肤或黏膜表面麻盐酸可卡因用作皮肤或黏膜表面麻醉。醉。全身麻醉剂：发挥性的乙醚，非挥发性的巴比妥类、氨基甲酸乙酯等，在生理全身麻醉剂：发挥性的乙醚，非挥发性的巴比妥类、氨基甲酸乙酯等，在生理学实验中，多采用全身麻醉剂。学实验中，多采用全身麻醉剂。山东农业大学动物生理学教研室2.麻醉前的准备工作麻醉前的准备工作熟悉麻醉药品的特点熟悉麻醉药品的特点根据实验内容合理选用麻醉根据实验内容合理选用麻醉药。药。麻醉前应核对药物名称；检查药品有无变质或过期麻醉前应核对药物名称；检查药品有无变质或过期失效。失效。狗、猫等手术前应禁食狗、猫等手术前应禁食12小

13、时，以减轻呕吐反应。小时，以减轻呕吐反应。需在全麻下进行手术的慢性实验动物，可适当给予需在全麻下进行手术的慢性实验动物，可适当给予麻醉辅助药。例如，皮下注射吗啡镇静止痛，注射麻醉辅助药。例如，皮下注射吗啡镇静止痛，注射阿托品减少呼吸道分泌物的产生等。阿托品减少呼吸道分泌物的产生等。山东农业大学动物生理学教研室3.给药方法给药方法1）全身性麻醉：）全身性麻醉：吸入麻醉：乙醚吸入麻醉：乙醚注射麻醉：常用乌拉坦、戊巴比妥钠及氯醛糖等。主要给药途径有：注射麻醉：常用乌拉坦、戊巴比妥钠及氯醛糖等。主要给药途径有：静脉注射、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射、皮下淋巴囊注射等静脉注射、腹腔注射、肌肉注射、皮下注

14、射、皮下淋巴囊注射等2）局部麻醉：）局部麻醉：表面麻醉：表面麻醉：药物通过点眼、喷雾或涂布作用于粘膜表面，转而透过药物通过点眼、喷雾或涂布作用于粘膜表面，转而透过粘膜接触粘膜下神经末梢而发挥作用。该药物除具有麻醉作用外，粘膜接触粘膜下神经末梢而发挥作用。该药物除具有麻醉作用外，还有较强的穿透力，如的卡因、利多卡因；还有较强的穿透力，如的卡因、利多卡因；浸润麻醉：浸润麻醉：用注射的方法将药物送到神经纤维旁。此类药物只需有用注射的方法将药物送到神经纤维旁。此类药物只需有局部麻醉作用，不一定要求有强大的穿透力，如普鲁卡因局部麻醉作用，不一定要求有强大的穿透力，如普鲁卡因(对氨苯对氨苯甲酸酯甲酸酯)、

15、可卡因、利多卡因（其效力是普鲁卡因的、可卡因、利多卡因（其效力是普鲁卡因的2倍）。用作局倍）。用作局部麻醉的药物的浓度一般为部麻醉的药物的浓度一般为1%2%，通常用，通常用0.5%1%.山东农业大学动物生理学教研室4.麻醉效果的观察麻醉效果的观察呼吸：深慢而平稳呼吸：深慢而平稳角膜反射：明显迟钝角膜反射：明显迟钝肌张力：全身肌肉松弛肌张力：全身肌肉松弛皮肤夹捏反射消失。皮肤夹捏反射消失。山东农业大学动物生理学教研室5.兔耳缘静脉注射时的注意事项麻醉前应正确选用麻醉药品、用药剂量及给药途径；进行静脉麻醉时，先将总用药量的三分之一快速注入，使动物迅速渡过兴奋期，余下的三分之二量则应缓慢注射，并密切

16、观察动物麻醉状态及反应，以便准确判断麻醉深度；如麻醉较浅，动物出现挣扎或呼吸急促等，需补充麻醉药以维持适当的麻醉。一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一；麻醉过程中，应随时保持呼吸道通畅，并注意保温；山东农业大学动物生理学教研室止血采血方法止血采血方法手术中，若遇到出血，常用的止血方法有手术中，若遇到出血，常用的止血方法有:钳夹止血法，压迫止血法，结扎止血法，钳夹止血法，压迫止血法，结扎止血法，烧烙止血法烧烙止血法兔的采（取）血方法有耳中央动脉取血，股兔的采（取）血方法有耳中央动脉取血，股动脉取血，耳缘静脉取血，心脏穿刺取血动脉取血，耳缘静脉取血，心脏穿刺取血。山东农业大学动物生理学教研室实

17、验一实验一生理机能系统的使用与生理机能系统的使用与血型测定血型测定山东农业大学动物生理学教研室一、生理机能系统的使用一、生理机能系统的使用开机顺序：贵重仪器先关后开开机顺序：贵重仪器先关后开熟悉系统操作熟悉系统操作仪器使用仪器使用操作示教操作示教操作训练操作训练山东农业大学动物生理学教研室二、血型测定二、血型测定p实验原理实验原理一、血型一、血型血型血型：指的是：指的是红细胞膜红细胞膜上特异性抗原的类型。所谓的血型，主要指上特异性抗原的类型。所谓的血型，主要指红细胞血型红细胞血型。红细胞凝集红细胞凝集：若不同血型的血液混合，会出现红细胞彼此聚集在一起，成为一簇簇的细胞团，这种现象称：若不同血型

18、的血液混合，会出现红细胞彼此聚集在一起，成为一簇簇的细胞团，这种现象称为为红细胞凝集反应红细胞凝集反应。红细胞凝集反应是一种抗原红细胞凝集反应是一种抗原抗体反应，它是免疫反应的一种形式。抗体反应，它是免疫反应的一种形式。凝集原（凝集原（agglutinogen）：红细胞膜上存在着特异的抗原。）：红细胞膜上存在着特异的抗原。凝集素（凝集素（agglutinogen）：血液中与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体。）：血液中与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体。山东农业大学动物生理学教研室血型的分类血型的分类:目前已知人类的目前已知人类的RBC除除ABO血型血型系统外系统外,还有还有Rh、P等等23

19、个血型系统。个血型系统。ABO血型是根据红细胞表面存在的血型是根据红细胞表面存在的凝集原（凝集原（A或或B）决定的，分为）决定的，分为A、B、AB、O四型。四型。山东农业大学动物生理学教研室二、人类的二、人类的Rh血型血型红细胞中含红细胞中含RhRh因子的为因子的为RhRh阳性，无为阴性阳性，无为阴性我国汉人我国汉人99%99%阳性，少数人民阴性占一定比例。白种阳性，少数人民阴性占一定比例。白种人阴性多于阳性人阴性多于阳性抗抗RhRh抗体抗体:为后天获得的免疫性抗体。是一种为后天获得的免疫性抗体。是一种IgGIgG(分分子较小子较小),),能透过胎盘。能透过胎盘。*临床意义临床意义:1.1.再

20、次输血时，可能导致凝集反应再次输血时，可能导致凝集反应 2.2.再次怀孕可能会出现死胎再次怀孕可能会出现死胎山东农业大学动物生理学教研室1.1.输血型相合的血液输血型相合的血液,最好成分输血最好成分输血;2.2.输血前必须进行血型输血前必须进行血型交叉配血试验交叉配血试验三、输血的原则三、输血的原则给给血血者者受受血血者者红细胞红细胞血清血清红细胞红细胞血清血清主侧次侧*两侧均不凝两侧均不凝:配血配血相合相合,可以输血可以输血;*主侧凝集主侧凝集,配血不配血不合合,绝对不能输！绝对不能输！*主侧不凝次侧凝集主侧不凝次侧凝集,配血基本相合，紧配血基本相合，紧急时考虑少量输。急时考虑少量输。山东农业大学动物生理学教研室总结：输血的原则总结：输血的原则1 1、准备输血时，首先必须鉴定血型、准备输血时，首先必须鉴定血型2 2、保证供血者与受血者、保证供血者与受血者ABOABO血型相合，且必须进行交血型相合，且必须进行交叉配血试验叉配血试验 配血相合：可进行输血配血相合：可进行输血 配血不合：不可输血配血不合：不可输血 基本相合：原则同基本相合：原则同O O型血输给其他血型者或型血输给其他血型者或ABAB型血型血接受其他型血接受其他型血3 3、紧急情况无同型血：少量、缓慢、紧密观察。、紧急情况无同型血：少量、缓慢、紧密观察。