现代生物技术在植物育种上的应用培训资料.ppt

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1、现代生物技术在植物育种上的应用生物技术生物技术 生物技术也称生物工程生物技术也称生物工程生物技术也称生物工程生物技术也称生物工程，是指以现代生命科学为基础，结合，是指以现代生命科学为基础，结合，是指以现代生命科学为基础，结合，是指以现代生命科学为基础，结合先进的工程手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设先进的工程手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设先进的工程手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设先进的工程手段和其他基础学科的科学原理，按照预先的设计，发行生物体或加工生物原料，为人类生产出所需的产品计，发行生物体或加工生物原料，为人类生产出所需的产品计，发行生物体或加工生物原料，为

2、人类生产出所需的产品计，发行生物体或加工生物原料，为人类生产出所需的产品或达到某种目的的一门或达到某种目的的一门或达到某种目的的一门或达到某种目的的一门新兴、综合性学科新兴、综合性学科新兴、综合性学科新兴、综合性学科。生物技术生物技术生物技术生物技术是在分子生物学和细胞生物学基础上结合现代工程是在分子生物学和细胞生物学基础上结合现代工程是在分子生物学和细胞生物学基础上结合现代工程是在分子生物学和细胞生物学基础上结合现代工程学的方法和原理而发展起来的一门综合性科学技术学的方法和原理而发展起来的一门综合性科学技术学的方法和原理而发展起来的一门综合性科学技术学的方法和原理而发展起来的一门综合性科学技

3、术应用范围广泛：应用范围广泛：应用范围广泛：应用范围广泛：医药卫生、农林牧渔、轻工、食品、化医药卫生、农林牧渔、轻工、食品、化医药卫生、农林牧渔、轻工、食品、化医药卫生、农林牧渔、轻工、食品、化 工和能源等领域。工和能源等领域。工和能源等领域。工和能源等领域。植物方面：植物方面：植物方面：植物方面：产量、品质、抗病虫、抗逆性等，产量、品质、抗病虫、抗逆性等，产量、品质、抗病虫、抗逆性等，产量、品质、抗病虫、抗逆性等，以细胞工程、基因工程、分子标记辅助育种为核心的生以细胞工程、基因工程、分子标记辅助育种为核心的生以细胞工程、基因工程、分子标记辅助育种为核心的生以细胞工程、基因工程、分子标记辅助育

4、种为核心的生物技术在植物育种中已得到广泛应用。物技术在植物育种中已得到广泛应用。物技术在植物育种中已得到广泛应用。物技术在植物育种中已得到广泛应用。主要涉及：主要涉及：主要涉及：主要涉及：组织与细胞培养、体细胞突变体筛选、原生质体培养与体组织与细胞培养、体细胞突变体筛选、原生质体培养与体组织与细胞培养、体细胞突变体筛选、原生质体培养与体组织与细胞培养、体细胞突变体筛选、原生质体培养与体细胞杂交、单倍体细胞培养、体细胞胚胎发生与生物反应细胞杂交、单倍体细胞培养、体细胞胚胎发生与生物反应细胞杂交、单倍体细胞培养、体细胞胚胎发生与生物反应细胞杂交、单倍体细胞培养、体细胞胚胎发生与生物反应器、基因分离

5、和转移和分子标记辅助选择育种等技术器、基因分离和转移和分子标记辅助选择育种等技术器、基因分离和转移和分子标记辅助选择育种等技术器、基因分离和转移和分子标记辅助选择育种等技术生物技术应用于育种的必要性生物技术应用于育种的必要性1 1、人类、人类、人类、人类2121世纪面临的三大问题世纪面临的三大问题世纪面临的三大问题世纪面临的三大问题 （人口、资源、环境）（人口、资源、环境）（人口、资源、环境）（人口、资源、环境）2 2、传统育种方法的局限、传统育种方法的局限、传统育种方法的局限、传统育种方法的局限3 3、生物技术的创造性、生物技术的创造性、生物技术的创造性、生物技术的创造性（1 1）打破自然生

6、殖隔离，生物可共享一个基因库）打破自然生殖隔离，生物可共享一个基因库）打破自然生殖隔离，生物可共享一个基因库）打破自然生殖隔离，生物可共享一个基因库（2 2）有目的地进行基因重组，克服不良连锁）有目的地进行基因重组，克服不良连锁）有目的地进行基因重组，克服不良连锁）有目的地进行基因重组，克服不良连锁（3 3）有效克服环境影响，选择更可靠）有效克服环境影响，选择更可靠）有效克服环境影响，选择更可靠）有效克服环境影响，选择更可靠生物技术在植物育种中应用的重要意义生物技术在植物育种中应用的重要意义 生物技术应用于植物育种，可以解决传统育种的生物技术应用于植物育种，可以解决传统育种的生物技术应用于植物

7、育种，可以解决传统育种的生物技术应用于植物育种，可以解决传统育种的一些特殊困难，扩大育种的基因来源，提高鉴定一些特殊困难，扩大育种的基因来源，提高鉴定一些特殊困难，扩大育种的基因来源，提高鉴定一些特殊困难，扩大育种的基因来源，提高鉴定和摆地摊的可靠性，加快育种进程，加速繁殖，和摆地摊的可靠性，加快育种进程，加速繁殖，和摆地摊的可靠性，加快育种进程，加速繁殖，和摆地摊的可靠性，加快育种进程，加速繁殖，提高育种效率等，对于解决人口与食物问题以及提高育种效率等，对于解决人口与食物问题以及提高育种效率等，对于解决人口与食物问题以及提高育种效率等，对于解决人口与食物问题以及生物能源问题，具有十分重要意义

8、。生物能源问题，具有十分重要意义。生物能源问题，具有十分重要意义。生物能源问题，具有十分重要意义。组织与器官培养的类别组织与器官培养的应用第一节第一节 细胞工程与育种细胞工程与育种第一节第一节 细胞工程与育种细胞工程与育种一、组织与器官培养茎尖和分生组织培养胚培养胚珠和子房培养胚乳培养离体叶的培养相关的专业术语相关的专业术语细胞全能性：细胞全能性：细胞全能性：细胞全能性：外植体：外植体：外植体：外植体：愈伤组织愈伤组织愈伤组织愈伤组织胚状体胚状体胚状体胚状体继代培养继代培养继代培养继代培养组织与器官培养过程可分四个阶段组织与器官培养过程可分四个阶段无菌培养物的建立无菌培养物的建立无菌培养物的建

9、立无菌培养物的建立营养繁殖体的增殖营养繁殖体的增殖营养繁殖体的增殖营养繁殖体的增殖生根培养生根培养生根培养生根培养植株移栽植株移栽植株移栽植株移栽各阶段在培养基、各阶段在培养基、各阶段在培养基、各阶段在培养基、生长调节剂的配生长调节剂的配生长调节剂的配生长调节剂的配比和浓度、培养比和浓度、培养比和浓度、培养比和浓度、培养方式和环境上都方式和环境上都方式和环境上都方式和环境上都有不同的要求有不同的要求有不同的要求有不同的要求组织和器官培养在育种中的作用组织和器官培养在育种中的作用 加快植物新品种和育种繁殖速度加快植物新品种和育种繁殖速度加快植物新品种和育种繁殖速度加快植物新品种和育种繁殖速度 培

10、养无病毒苗木培养无病毒苗木培养无病毒苗木培养无病毒苗木 诱发和离体筛选突变体诱发和离体筛选突变体诱发和离体筛选突变体诱发和离体筛选突变体 进行种质资源长期保存和远距离运输进行种质资源长期保存和远距离运输进行种质资源长期保存和远距离运输进行种质资源长期保存和远距离运输 获得倍性不同的植株获得倍性不同的植株获得倍性不同的植株获得倍性不同的植株 克服种子和萌发中的障碍克服种子和萌发中的障碍克服种子和萌发中的障碍克服种子和萌发中的障碍 克服远缘杂交困难克服远缘杂交困难克服远缘杂交困难克服远缘杂交困难 提供育种中间材料提供育种中间材料提供育种中间材料提供育种中间材料1.加快植物新品种和育种繁殖速度加快植

11、物新品种和育种繁殖速度2.培养无病毒苗木培养无病毒苗木3.诱发和离体筛选突变体诱发和离体筛选突变体 4.获得倍性不同的植株获得倍性不同的植株二倍体（左）二倍体（左）多倍体（右）多倍体（右）水稻水稻5.5.克服种子和萌发中的障碍克服种子和萌发中的障碍克服种子和萌发中的障碍克服种子和萌发中的障碍种子萌发全过程种子萌发全过程种子萌发全过程种子萌发全过程6.克服远缘杂交困难克服远缘杂交困难7.7.提供育种中间材料提供育种中间材料提供育种中间材料提供育种中间材料二、花药和花粉培养二、花药和花粉培养花药培养花药培养花药培养花药培养：其外植体为植物：其外植体为植物：其外植体为植物：其外植体为植物雄性器官的一

12、部分，就培养雄性器官的一部分，就培养雄性器官的一部分，就培养雄性器官的一部分，就培养方法和技术来讲于方法和技术来讲于方法和技术来讲于方法和技术来讲于器官培养器官培养器官培养器官培养的范畴的范畴的范畴的范畴花粉培养：花粉培养：花粉培养：花粉培养：将处于一定发育将处于一定发育将处于一定发育将处于一定发育阶段的花粉从花药中分离，阶段的花粉从花药中分离，阶段的花粉从花药中分离，阶段的花粉从花药中分离，再加以离体培养，有时花粉再加以离体培养，有时花粉再加以离体培养，有时花粉再加以离体培养，有时花粉培养也称为小孢子培养，从培养也称为小孢子培养，从培养也称为小孢子培养，从培养也称为小孢子培养，从培养方法和技

13、术方面讲，属培养方法和技术方面讲，属培养方法和技术方面讲，属培养方法和技术方面讲，属于于于于细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养的范围的范围的范围的范围花药培养的基本程序花药培养的基本程序花粉发育时期花粉发育时期四分体小孢子单核花粉双核花粉最适期花粉及小孢子培养花粉及小孢子培养1、取材时期的确定、取材时期的确定 花药培养与小孢子培养的花药培养与小孢子培养的花药培养与小孢子培养的花药培养与小孢子培养的目的目的目的目的一样，为获得单倍体。一样，为获得单倍体。一样，为获得单倍体。一样，为获得单倍体。单倍体单倍体单倍体单倍体（haploid):haploid):指具有配子体染色体数的孢子体（植物指具有配子

14、体染色体数的孢子体（植物指具有配子体染色体数的孢子体（植物指具有配子体染色体数的孢子体（植物个体）个体）个体）个体）单倍体在育种中的作用：单倍体在育种中的作用：加倍后可迅速获得纯合型材料，缩短育种年限加倍后可迅速获得纯合型材料，缩短育种年限加倍后可迅速获得纯合型材料，缩短育种年限加倍后可迅速获得纯合型材料，缩短育种年限 获得育种中间材料获得育种中间材料获得育种中间材料获得育种中间材料 与诱变育种相结合可以提高诱变频率，使育种途径更具有实际应用意与诱变育种相结合可以提高诱变频率，使育种途径更具有实际应用意与诱变育种相结合可以提高诱变频率，使育种途径更具有实际应用意与诱变育种相结合可以提高诱变频率

15、，使育种途径更具有实际应用意义，无籽三倍体的获得义，无籽三倍体的获得义，无籽三倍体的获得义，无籽三倍体的获得 作为遗传工程受体更为有效作为遗传工程受体更为有效作为遗传工程受体更为有效作为遗传工程受体更为有效 用于基础遗传学研究的各个领域用于基础遗传学研究的各个领域用于基础遗传学研究的各个领域用于基础遗传学研究的各个领域 获得超雄植株（获得超雄植株（获得超雄植株（获得超雄植株（YYYY）可获得异源体附加系，代换系和易位系可获得异源体附加系，代换系和易位系可获得异源体附加系，代换系和易位系可获得异源体附加系，代换系和易位系 节省田间试验的土地和劳力节省田间试验的土地和劳力节省田间试验的土地和劳力节

16、省田间试验的土地和劳力 克服远缘杂交不育性与分离的困难克服远缘杂交不育性与分离的困难克服远缘杂交不育性与分离的困难克服远缘杂交不育性与分离的困难 提高选择的正确性和效率提高选择的正确性和效率提高选择的正确性和效率提高选择的正确性和效率芦笋性染色体芦笋性染色体芦笋性染色体芦笋性染色体（XYXY）超雄植株：有性染色超雄植株：有性染色超雄植株：有性染色超雄植株：有性染色体的纯合体体的纯合体体的纯合体体的纯合体三、原生质体培养三、原生质体培养原生质体培养：原生质体培养：原生质体培养：原生质体培养：protoplast cultureprotoplast culture体细胞杂交体细胞杂交体细胞杂交体细

17、胞杂交Somatic hybridizationSomatic hybridization原生质体融合原生质体融合原生质体融合原生质体融合Protoplast fusionProtoplast fusion相关概念相关概念相关概念相关概念 原生质体：原生质体：原生质体：原生质体：指除去细胞壁的细胞或是一个被质膜所包围的指除去细胞壁的细胞或是一个被质膜所包围的指除去细胞壁的细胞或是一个被质膜所包围的指除去细胞壁的细胞或是一个被质膜所包围的裸露细胞。裸露细胞。裸露细胞。裸露细胞。亚原生质体：亚原生质体：亚原生质体：亚原生质体：在原生质体分离过程中，有时会引起细胞内在原生质体分离过程中，有时会引起细

18、胞内在原生质体分离过程中，有时会引起细胞内在原生质体分离过程中，有时会引起细胞内含物的断裂而形成一些较小的原生质体。可以具有细胞核含物的断裂而形成一些较小的原生质体。可以具有细胞核含物的断裂而形成一些较小的原生质体。可以具有细胞核含物的断裂而形成一些较小的原生质体。可以具有细胞核或没有细胞核或没有细胞核或没有细胞核或没有细胞核 核质体：核质体：核质体：核质体：由原生质膜和薄层细胞质包围细胞核形成的小原由原生质膜和薄层细胞质包围细胞核形成的小原由原生质膜和薄层细胞质包围细胞核形成的小原由原生质膜和薄层细胞质包围细胞核形成的小原生质体，即微小原生技击体生质体，即微小原生技击体生质体，即微小原生技击

19、体生质体，即微小原生技击体 胞质体：胞质体：胞质体：胞质体：不含细胞核而仅含有部分细胞质的原生质体不含细胞核而仅含有部分细胞质的原生质体不含细胞核而仅含有部分细胞质的原生质体不含细胞核而仅含有部分细胞质的原生质体原生质体的分离和培养原生质体的分离和培养 无菌试管苗叶片无菌试管苗叶片无菌试管苗叶片无菌试管苗叶片 上胚轴和子叶上胚轴和子叶上胚轴和子叶上胚轴和子叶 愈伤组织愈伤组织愈伤组织愈伤组织 培养细胞培养细胞培养细胞培养细胞酶解酶解酶解酶解纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶原生质体原生质体原生质体原生质体原生质体原生质体原生质体原生质体培养培养培养培养培培培培养养

20、养养基基基基液体浅层培养液体浅层培养液体浅层培养液体浅层培养固体平板培养固体平板培养固体平板培养固体平板培养固液双层培养固液双层培养固液双层培养固液双层培养琼脂糖珠培养琼脂糖珠培养琼脂糖珠培养琼脂糖珠培养培养方法培养方法培养方法培养方法四、体细胞杂交四、体细胞杂交 定义：定义：定义：定义：将两个不同亲本的原生质体，经人工诱导融合并将两个不同亲本的原生质体，经人工诱导融合并将两个不同亲本的原生质体，经人工诱导融合并将两个不同亲本的原生质体，经人工诱导融合并培养成植株的过程，统称为体细胞杂交（培养成植株的过程，统称为体细胞杂交（培养成植株的过程，统称为体细胞杂交（培养成植株的过程，统称为体细胞杂交

21、（A+BA+B）几种不同的表述：几种不同的表述：几种不同的表述：几种不同的表述：体细胞杂交：体细胞杂交：体细胞杂交：体细胞杂交：somatic hybridizationsomatic hybridization 细胞融合细胞融合细胞融合细胞融合:Cell fusion:Cell fusion 无性杂交无性杂交无性杂交无性杂交:asexual hybridization:asexual hybridization 原生质体融合：原生质体融合：原生质体融合：原生质体融合：Protoplast fusionProtoplast fusion 超性杂交超性杂交超性杂交超性杂交:Parasexual

22、hybridization:Parasexual hybridization 超性融合超性融合超性融合超性融合:Parasexual hybridization:Parasexual hybridization 细胞工程细胞工程细胞工程细胞工程:Cell engineering:Cell engineering 19601960年，年，年，年，KockingKocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功 19711971年，年，年，年，TakebeTakebe首次从离体烟草原

23、生质体培养中获得再生完整植株首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株 19721972年，年，年，年，CarlsonCarlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种，是第一首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种，是第一首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种，是第一首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种，是第一个植物细胞杂种个植物细胞杂种个植物细胞杂种个植物细胞杂种 19741974年，年，年，年，KaoKao将聚已二醇诱导融合法应用于植物细胞融合并取得了相将聚已二醇诱导融合法应用于植物细胞融合并取得了相将聚

24、已二醇诱导融合法应用于植物细胞融合并取得了相将聚已二醇诱导融合法应用于植物细胞融合并取得了相应的融合技术应的融合技术应的融合技术应的融合技术 19781978年，年，年，年，MelchersMelchers获得第一个属间细胞杂交（马铃薯获得第一个属间细胞杂交（马铃薯获得第一个属间细胞杂交（马铃薯获得第一个属间细胞杂交（马铃薯+蕃茄）蕃茄）蕃茄）蕃茄）19811981年，年，年，年，ZimmermanZimmerman发明电融合仪，并首次年出电融合概念发明电融合仪，并首次年出电融合概念发明电融合仪，并首次年出电融合概念发明电融合仪，并首次年出电融合概念 19871987年，年，年，年，Schwe

25、igerSchweiger建立单对原生质体电融合技术程序建立单对原生质体电融合技术程序建立单对原生质体电融合技术程序建立单对原生质体电融合技术程序体细胞和有性杂交的比较体细胞和有性杂交的比较比较内容比较内容比较内容比较内容体细胞杂交体细胞杂交体细胞杂交体细胞杂交有性杂交有性杂交有性杂交有性杂交时时时时 间间间间无季节限制无季节限制无季节限制无季节限制花期限制，特别是母本花期限制，特别是母本花期限制，特别是母本花期限制，特别是母本的花期的花期的花期的花期亲缘关系亲缘关系亲缘关系亲缘关系一定程度上可以克服有一定程度上可以克服有一定程度上可以克服有一定程度上可以克服有性性性性/嫁接不亲和性嫁接不亲和

26、性嫁接不亲和性嫁接不亲和性受亲和性影响受亲和性影响受亲和性影响受亲和性影响结结结结 果果果果细胞核、细胞质均可以细胞核、细胞质均可以细胞核、细胞质均可以细胞核、细胞质均可以重组、倍性增加重组、倍性增加重组、倍性增加重组、倍性增加双受精，一般无细胞质双受精，一般无细胞质双受精，一般无细胞质双受精，一般无细胞质重组，倍性不改变重组，倍性不改变重组，倍性不改变重组，倍性不改变理论上，任何细胞都有可能通过体细胞杂交而成理论上，任何细胞都有可能通过体细胞杂交而成理论上，任何细胞都有可能通过体细胞杂交而成理论上，任何细胞都有可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源，这对种质资源的开发和利用具为新的生物资源，这

27、对种质资源的开发和利用具为新的生物资源，这对种质资源的开发和利用具为新的生物资源，这对种质资源的开发和利用具有深远意义有深远意义有深远意义有深远意义融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制，为远缘物种间的遗传物质交换提供了有的限制，为远缘物种间的遗传物质交换提供了有的限制，为远缘物种间的遗传物质交换提供了有的限制，为远缘物种间的遗传物质交换提供了有效途径效途径效途径效途径体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外体细胞杂

28、交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统，在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶遗传系统，在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶遗传系统，在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶遗传系统，在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体绿体、线粒体绿体、线粒体绿体、线粒体DNADNA亦可发生重组，从而产生新的亦可发生重组，从而产生新的亦可发生重组，从而产生新的亦可发生重组，从而产生新的核外遗传系统核外遗传系统核外遗传系统核外遗传系统原生质体培养和体细胞杂交的应用原生质体培养和体细胞杂交的应用获得新品种获得新品种获得新品种获得新品种创造新种质创造新种质创造新种质创造新种质转移

29、有利性状和克服远缘杂交的障碍转移有利性状和克服远缘杂交的障碍转移有利性状和克服远缘杂交的障碍转移有利性状和克服远缘杂交的障碍作为基因工程的良好受体及进行突变体作为基因工程的良好受体及进行突变体作为基因工程的良好受体及进行突变体作为基因工程的良好受体及进行突变体筛选的优良原始材料筛选的优良原始材料筛选的优良原始材料筛选的优良原始材料五、植物细胞突变体的离休筛选五、植物细胞突变体的离休筛选基因组突变：基因组突变：基因组突变：基因组突变：染色体数目的改变或细胞质基因组的增减染色体数目的改变或细胞质基因组的增减染色体数目的改变或细胞质基因组的增减染色体数目的改变或细胞质基因组的增减染色体突变：染色体突

30、变：染色体突变：染色体突变：染色体较大范围的结构变化，涉及多个基因染色体较大范围的结构变化，涉及多个基因染色体较大范围的结构变化，涉及多个基因染色体较大范围的结构变化，涉及多个基因基因突变：基因突变：基因突变：基因突变：指范围在一个基因以内的分子结构的改变，按指范围在一个基因以内的分子结构的改变，按指范围在一个基因以内的分子结构的改变，按指范围在一个基因以内的分子结构的改变，按DNADNA改变方式有碱基置换、称雄突变、缺失突变和插入突变改变方式有碱基置换、称雄突变、缺失突变和插入突变改变方式有碱基置换、称雄突变、缺失突变和插入突变改变方式有碱基置换、称雄突变、缺失突变和插入突变（一）突变体的产

31、生（一）突变体的产生（一）突变体的产生（一）突变体的产生在离体培养条件下，诱发突变的突变型和自发突在离体培养条件下，诱发突变的突变型和自发突在离体培养条件下，诱发突变的突变型和自发突在离体培养条件下，诱发突变的突变型和自发突变没有本质上的差别，变没有本质上的差别，变没有本质上的差别，变没有本质上的差别，一般有三个水平的突变一般有三个水平的突变一般有三个水平的突变一般有三个水平的突变：（二）突变细胞的筛选方法直接选择法直接选择法直接选择法直接选择法正选择正选择正选择正选择/负选择负选择负选择负选择间接选择法间接选择法间接选择法间接选择法正选择正选择 用一种含有特定物质的选择培养基，在此培养基上只

32、有突用一种含有特定物质的选择培养基，在此培养基上只有突用一种含有特定物质的选择培养基，在此培养基上只有突用一种含有特定物质的选择培养基，在此培养基上只有突变细胞能够生长，非突变细胞不能生长，从而直接筛选出变细胞能够生长，非突变细胞不能生长，从而直接筛选出变细胞能够生长，非突变细胞不能生长，从而直接筛选出变细胞能够生长，非突变细胞不能生长，从而直接筛选出突变体。如除草剂、抗盐碱突变体的筛选，均可直接在培突变体。如除草剂、抗盐碱突变体的筛选，均可直接在培突变体。如除草剂、抗盐碱突变体的筛选，均可直接在培突变体。如除草剂、抗盐碱突变体的筛选，均可直接在培养基中加入一定浓度的除草剂或增加渗透压的物质。

33、目前养基中加入一定浓度的除草剂或增加渗透压的物质。目前养基中加入一定浓度的除草剂或增加渗透压的物质。目前养基中加入一定浓度的除草剂或增加渗透压的物质。目前采用这一途径已从多种植物中筛选出可利用的体细胞变异采用这一途径已从多种植物中筛选出可利用的体细胞变异采用这一途径已从多种植物中筛选出可利用的体细胞变异采用这一途径已从多种植物中筛选出可利用的体细胞变异体。体。体。体。负选择负选择 一种借助于与突变表现型有关的性状作为选择指标的筛选一种借助于与突变表现型有关的性状作为选择指标的筛选一种借助于与突变表现型有关的性状作为选择指标的筛选一种借助于与突变表现型有关的性状作为选择指标的筛选方法方法方法方法

34、 DorfflingDorffling等以等以等以等以ProPro类似物羟脯氨酸（类似物羟脯氨酸（类似物羟脯氨酸（类似物羟脯氨酸（HYP)HYP)为选择剂，获得为选择剂，获得为选择剂，获得为选择剂，获得了耐了耐了耐了耐HYPHYP的体细胞变异系，其抗寒性比供体亲本增强，且的体细胞变异系，其抗寒性比供体亲本增强，且的体细胞变异系，其抗寒性比供体亲本增强，且的体细胞变异系，其抗寒性比供体亲本增强，且能稳定遗传能稳定遗传能稳定遗传能稳定遗传 林定波等将锦橙株心细胞愈伤组织的悬浮细胞经林定波等将锦橙株心细胞愈伤组织的悬浮细胞经林定波等将锦橙株心细胞愈伤组织的悬浮细胞经林定波等将锦橙株心细胞愈伤组织的悬

35、浮细胞经 射线照射线照射线照射线照射，然后在高浓度散打脯氨酸培养基中培养筛选，获得了射，然后在高浓度散打脯氨酸培养基中培养筛选，获得了射，然后在高浓度散打脯氨酸培养基中培养筛选，获得了射，然后在高浓度散打脯氨酸培养基中培养筛选，获得了抗寒体细胞变异愈伤组织，并再生植株。鉴定显示，抗寒抗寒体细胞变异愈伤组织，并再生植株。鉴定显示，抗寒抗寒体细胞变异愈伤组织，并再生植株。鉴定显示，抗寒抗寒体细胞变异愈伤组织，并再生植株。鉴定显示，抗寒愈伤组织及其再生植株的抗寒性分别比供体提高愈伤组织及其再生植株的抗寒性分别比供体提高愈伤组织及其再生植株的抗寒性分别比供体提高愈伤组织及其再生植株的抗寒性分别比供体提

36、高1.41.4度和度和度和度和2.42.4度，突变系体内的度，突变系体内的度，突变系体内的度，突变系体内的ProPro含量比供体增加了一倍含量比供体增加了一倍含量比供体增加了一倍含量比供体增加了一倍（三）突变性状遗传基础及其稳定性鉴定（三）突变性状遗传基础及其稳定性鉴定遗传基础遗传基础遗传基础遗传基础稳定性稳定性稳定性稳定性突变性状的遗传学基础突变性状的遗传学基础 体细胞变异，除发生在染色体水平外，更多的是基因水平体细胞变异，除发生在染色体水平外，更多的是基因水平体细胞变异，除发生在染色体水平外，更多的是基因水平体细胞变异，除发生在染色体水平外，更多的是基因水平上的变异上的变异上的变异上的变异

37、 从利用体细胞变异的角度，染色体变异大多是一些畸型变从利用体细胞变异的角度，染色体变异大多是一些畸型变从利用体细胞变异的角度，染色体变异大多是一些畸型变从利用体细胞变异的角度，染色体变异大多是一些畸型变异，真正可利用的染色体变异十分有限异，真正可利用的染色体变异十分有限异，真正可利用的染色体变异十分有限异，真正可利用的染色体变异十分有限 基因水平上的变异大多只是个别性状的改变，不会影响再基因水平上的变异大多只是个别性状的改变，不会影响再基因水平上的变异大多只是个别性状的改变，不会影响再基因水平上的变异大多只是个别性状的改变，不会影响再生植株的正常生长发育。因此，从再生植株的生植株的正常生长发育

38、。因此，从再生植株的生植株的正常生长发育。因此，从再生植株的生植株的正常生长发育。因此，从再生植株的 这些变异中这些变异中这些变异中这些变异中有可能筛选有益的变异。有可能筛选有益的变异。有可能筛选有益的变异。有可能筛选有益的变异。基因水平的变异从根本上讲是基因水平的变异从根本上讲是基因水平的变异从根本上讲是基因水平的变异从根本上讲是DNADNA大项突变或修饰状态的大项突变或修饰状态的大项突变或修饰状态的大项突变或修饰状态的改变改变改变改变突变性状的稳定性突变性状的稳定性 对于单基因控制的遗传性状，大多数碱基突变可以稳定遗对于单基因控制的遗传性状，大多数碱基突变可以稳定遗对于单基因控制的遗传性状

39、，大多数碱基突变可以稳定遗对于单基因控制的遗传性状，大多数碱基突变可以稳定遗传而且符合孟德尔遗传分离规律，这一点已在水稻、烟草传而且符合孟德尔遗传分离规律，这一点已在水稻、烟草传而且符合孟德尔遗传分离规律，这一点已在水稻、烟草传而且符合孟德尔遗传分离规律，这一点已在水稻、烟草和玉米的体细胞变异中得以证实。和玉米的体细胞变异中得以证实。和玉米的体细胞变异中得以证实。和玉米的体细胞变异中得以证实。植物的许多性状特别是经济性状均由多基因控制，对于多植物的许多性状特别是经济性状均由多基因控制，对于多植物的许多性状特别是经济性状均由多基因控制，对于多植物的许多性状特别是经济性状均由多基因控制，对于多基因

40、控制性状的碱基突变可能由于技术上的复杂性，目前基因控制性状的碱基突变可能由于技术上的复杂性，目前基因控制性状的碱基突变可能由于技术上的复杂性，目前基因控制性状的碱基突变可能由于技术上的复杂性，目前还没有关于多基因控制性状的碱基突变报道。还没有关于多基因控制性状的碱基突变报道。还没有关于多基因控制性状的碱基突变报道。还没有关于多基因控制性状的碱基突变报道。第二节第二节 基因工程与育种基因工程与育种Genetic Engineering and Breeding植物基因工程：植物基因工程：植物基因工程：植物基因工程：指以类似工程设计的方法，按照指以类似工程设计的方法，按照指以类似工程设计的方法，按

41、照指以类似工程设计的方法，按照人们的意志，通过一定的程序，将具有遗传信息人们的意志，通过一定的程序，将具有遗传信息人们的意志，通过一定的程序，将具有遗传信息人们的意志，通过一定的程序，将具有遗传信息的的的的DNADNA片段，在离休条件下，用工具酶加以剪切、片段，在离休条件下，用工具酶加以剪切、片段，在离休条件下，用工具酶加以剪切、片段，在离休条件下，用工具酶加以剪切、组合和拼接，再将人工重组的基因引物适当的植组合和拼接，再将人工重组的基因引物适当的植组合和拼接，再将人工重组的基因引物适当的植组合和拼接，再将人工重组的基因引物适当的植物受体中进行复制和表达的技术。物受体中进行复制和表达的技术。物

42、受体中进行复制和表达的技术。物受体中进行复制和表达的技术。转基因植物（转基因植物（转基因植物（转基因植物（transgenic plants)transgenic plants)转基因技术转基因技术转基因技术转基因技术(transgenic technique)(transgenic technique)基因工程基因工程基因枪和基因枪和基因枪和基因枪和农杆菌介农杆菌介农杆菌介农杆菌介导基因转导基因转导基因转导基因转化示意图化示意图化示意图化示意图基因工程基本操作步骤基因工程基本操作步骤目的基因的分离与鉴定目的基因的分离与鉴定植物表达载体的构建植物表达载体的构建植物的遗传转化植物的遗传转化转化植

43、物细胞的筛选及转基因植物的鉴定转化植物细胞的筛选及转基因植物的鉴定植物基因转移的过程植物基因转移的过程基因工程在植物育种中的应用基因工程在植物育种中的应用改良品质改良品质改良品质改良品质提高抗病虫能力提高抗病虫能力提高抗病虫能力提高抗病虫能力改良抗逆性改良抗逆性改良抗逆性改良抗逆性提高光合作用和固氮效率提高光合作用和固氮效率提高光合作用和固氮效率提高光合作用和固氮效率创建雄性不育材料创建雄性不育材料创建雄性不育材料创建雄性不育材料延迟成熟与保鲜延迟成熟与保鲜延迟成熟与保鲜延迟成熟与保鲜选育抗除草剂品种选育抗除草剂品种选育抗除草剂品种选育抗除草剂品种1.提高抗病能力提高抗病能力抗真菌基因工程途径

44、抗真菌基因工程途径抗真菌基因工程途径抗真菌基因工程途径抗细菌基因工程途径抗细菌基因工程途径抗细菌基因工程途径抗细菌基因工程途径克隆并导入几丁质酶基因和克隆并导入几丁质酶基因和克隆并导入几丁质酶基因和克隆并导入几丁质酶基因和-1-1，3-3-葡聚糖酶基因葡聚糖酶基因葡聚糖酶基因葡聚糖酶基因克隆并导入抗毒素克隆并导入抗毒素克隆并导入抗毒素克隆并导入抗毒素过量表达法过量表达法过量表达法过量表达法克隆转化溶菌酶基因或杀菌克隆转化溶菌酶基因或杀菌克隆转化溶菌酶基因或杀菌克隆转化溶菌酶基因或杀菌肽基因肽基因肽基因肽基因过量表达来自番茄过量表达来自番茄过量表达来自番茄过量表达来自番茄PRPR蛋白的甜橙抗脚腐

45、病蛋白的甜橙抗脚腐病蛋白的甜橙抗脚腐病蛋白的甜橙抗脚腐病马铃薯抗菌肽基因工程马铃薯抗菌肽基因工程马铃薯抗菌肽基因工程马铃薯抗菌肽基因工程2.抗病毒基因工程向植物中导入病毒外壳蛋白（向植物中导入病毒外壳蛋白（CP)转移病毒的反义转移病毒的反义RNA，卫星，卫星RNA，病毒复，病毒复制酶基因和核酶基因等制酶基因和核酶基因等抗病毒抗病毒抗病毒抗病毒番木瓜番木瓜番木瓜番木瓜3.提高抗虫能力导入导入Bt毒蛋白基因毒蛋白基因导入蛋白酶抑制基因导入蛋白酶抑制基因利用一些昆虫毒素基因（如蜘蛛杀利用一些昆虫毒素基因（如蜘蛛杀虫肽基因，和蝎毒素基因等）虫肽基因，和蝎毒素基因等）4.改善抗逆性改善抗逆性向植物中导入

46、热休克基因，可提高其扩，抗热性向植物中导入热休克基因，可提高其扩，抗热性向植物中导入热休克基因，可提高其扩，抗热性向植物中导入热休克基因，可提高其扩，抗热性将深海鱼美洲拟鲽的抗冻基因通过柱头导入番茄，将深海鱼美洲拟鲽的抗冻基因通过柱头导入番茄，将深海鱼美洲拟鲽的抗冻基因通过柱头导入番茄，将深海鱼美洲拟鲽的抗冻基因通过柱头导入番茄，获得可耐受获得可耐受获得可耐受获得可耐受-4-4-5-5的转基因番茄的转基因番茄的转基因番茄的转基因番茄导入脯氨酸或甜菜碱合成有关的酶的基因导入脯氨酸或甜菜碱合成有关的酶的基因导入脯氨酸或甜菜碱合成有关的酶的基因导入脯氨酸或甜菜碱合成有关的酶的基因如甜菜碱醛脱氢酶（如

47、甜菜碱醛脱氢酶（如甜菜碱醛脱氢酶（如甜菜碱醛脱氢酶（BADH)BADH)基因导入烟草，草莓基因导入烟草，草莓基因导入烟草，草莓基因导入烟草，草莓和水稻后，转基因植物的耐盐性明显提高和水稻后，转基因植物的耐盐性明显提高和水稻后，转基因植物的耐盐性明显提高和水稻后，转基因植物的耐盐性明显提高深海鱼美洲拟鲽深海鱼美洲拟鲽深海鱼美洲拟鲽深海鱼美洲拟鲽转深海鱼美洲拟鲽转深海鱼美洲拟鲽转深海鱼美洲拟鲽转深海鱼美洲拟鲽的抗冻基因草莓的抗冻基因草莓的抗冻基因草莓的抗冻基因草莓5.选育抗除草剂品种选育抗除草剂品种 把除草剂作用的靶酶或靶蛋白质的基因导入植物把除草剂作用的靶酶或靶蛋白质的基因导入植物把除草剂作用的

48、靶酶或靶蛋白质的基因导入植物把除草剂作用的靶酶或靶蛋白质的基因导入植物 现已在矮牵牛、烟草、番茄、马铃薯、大豆、油菜、杨树现已在矮牵牛、烟草、番茄、马铃薯、大豆、油菜、杨树现已在矮牵牛、烟草、番茄、马铃薯、大豆、油菜、杨树现已在矮牵牛、烟草、番茄、马铃薯、大豆、油菜、杨树等植物上获得抗除草剂的转基因植株。等植物上获得抗除草剂的转基因植株。等植物上获得抗除草剂的转基因植株。等植物上获得抗除草剂的转基因植株。转移一种能以除草剂为底物的酶的基因转移一种能以除草剂为底物的酶的基因转移一种能以除草剂为底物的酶的基因转移一种能以除草剂为底物的酶的基因 如如如如barbar基因编码基因编码基因编码基因编码P

49、PTPPT乙酰转移酶，导入烟草，番茄和马铃乙酰转移酶，导入烟草，番茄和马铃乙酰转移酶，导入烟草，番茄和马铃乙酰转移酶，导入烟草，番茄和马铃薯等植物后，使作物获得抗除草剂薯等植物后，使作物获得抗除草剂薯等植物后，使作物获得抗除草剂薯等植物后，使作物获得抗除草剂PPTPPT的能力的能力的能力的能力6.延迟成熟与保鲜延迟成熟与保鲜改变果实细胞壁降解酶活性改变果实细胞壁降解酶活性改变果实细胞壁降解酶活性改变果实细胞壁降解酶活性抑制成熟激素乙烯的生成抑制成熟激素乙烯的生成抑制成熟激素乙烯的生成抑制成熟激素乙烯的生成乙烯生成减少乙烯生成减少乙烯生成减少乙烯生成减少70%70%需更长时间软化需更长时间软化需

50、更长时间软化需更长时间软化硬度：高于硬度：高于硬度：高于硬度：高于CKCK比比比比CKCK耐贮藏耐贮藏耐贮藏耐贮藏转基因苹果转基因苹果转基因苹果转基因苹果转基因耐贮藏番茄转基因耐贮藏番茄转基因耐贮藏番茄转基因耐贮藏番茄7.提高产量提高产量 目前已克降出许多种参与光合作用的基因和导致植物雄性不育的基因目前已克降出许多种参与光合作用的基因和导致植物雄性不育的基因目前已克降出许多种参与光合作用的基因和导致植物雄性不育的基因目前已克降出许多种参与光合作用的基因和导致植物雄性不育的基因 WorralWorral等报道用编码等报道用编码等报道用编码等报道用编码-1-1，3-3-葡聚糖水解酶基因转化烟草，矮