免疫荧光试剂盒临床应用.ppt
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1、免疫荧光试剂盒在生殖道感染免疫荧光试剂盒在生殖道感染病原体检测中的临床应用病原体检测中的临床应用深圳市迈科龙生物技术有限公司深圳市迈科龙生物技术有限公司免疫荧光技术免疫荧光技术 免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是标记免疫技术的一种,是在免疫学、生物化学和显微镜技术基础上建立起来的一项技术。经过不断改进发展,免疫荧光技术已成为微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中准确又快速的一种免疫学实验方法。1 免疫荧光原理 将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与样本中的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。l基本反应原理为
2、抗原抗体间的反应2 2 免疫荧光特点免疫荧光特点 特异性强、敏感性高、检测速度快特异性强、敏感性高、检测速度快(单个样本处理时间约(单个样本处理时间约4040分钟,批量样本报告时分钟,批量样本报告时间以半天或隔天最佳)间以半天或隔天最佳)直接免疫荧光法(DFA)将标记的特异荧光抗体直接加在抗原标本上,经一定温度和时间的染色,在荧光显微镜下便可观察到被检抗原与荧光抗体形成的特异性结合物所发出的荧光。直接免疫荧光示意图直接免疫荧光示意图免疫荧光技术的应用免疫荧光技术的应用 免疫荧光技术应用范围极其广泛,可以应用于生物学的各个领域。尤其适用病原微生物的快速鉴定检测,具有形态学形态学和免疫学免疫学的双
3、重优点。临床实验室改进组织(CLIA)指出直接免疫荧光法最适合用于日常临床和参考实验室检测。迈科龙免疫荧光法生殖道病原体迈科龙免疫荧光法生殖道病原体检测试剂盒检测试剂盒免疫荧光试剂盒免疫荧光试剂盒注册证号注册证号适用范围适用范围沙眼衣原体 C.T.国食药监械(准)字2010第3401154号宫颈感染、尿路感染、产前筛查、不孕不育奈瑟氏淋球菌 N.G.国食药监械(准)字2010第3401157号宫颈感染、尿路感染、产前筛查、不孕不育阴道加德纳菌 G.V.国食药监械(准)字2010第3401155号BV、复发性BV、产前筛查、不孕不育白色念珠菌 C.A.国食药监械(准)字2010第3401153号
4、霉菌性阴道病单纯疱疹病毒II型 HSV-II国食药监械(准)字2010第3401156号生殖器疱疹阴道毛滴虫 T.V.国食药监械(准)字2010第3401158号滴虫性阴道病造成非淋菌性尿道炎的重要病原体,其感染已超过淋球菌感染而造成非淋菌性尿道炎的重要病原体,其感染已超过淋球菌感染而位居性传播疾病之首位居性传播疾病之首可致尿道炎、宫颈炎、子宫内膜炎及盆腔炎可致尿道炎、宫颈炎、子宫内膜炎及盆腔炎对怀孕可致早产、流产、胎膜早破、胚胎停育等严重妊娠并发症对怀孕可致早产、流产、胎膜早破、胚胎停育等严重妊娠并发症产道感染可致婴儿急性结膜炎产道感染可致婴儿急性结膜炎母婴传播可致新生儿眼炎或肺炎母婴传播可
5、致新生儿眼炎或肺炎引起不孕不育引起不孕不育沙眼衣原体沙眼衣原体1.临床意义临床意义潜伏期潜伏期,平均为平均为1 13 3周周 男性男性患者临床患者临床表现表现:尿痛尿痛,或尿频、尿道刺痒和不适,阴体局部疼痛,或尿频、尿道刺痒和不适,阴体局部疼痛尿道分泌物常为浆液性或粘液脓性,较稀薄,量少尿道分泌物常为浆液性或粘液脓性,较稀薄,量少 女女性性患者临床患者临床表现表现:尿道有分泌物,呈浆液性或浆液脓性,尿痛,尿频尿道有分泌物,呈浆液性或浆液脓性,尿痛,尿频白带增多,色黄或带血性,或有异味白带增多,色黄或带血性,或有异味非经期或性交后出血非经期或性交后出血宫颈品可见粘液脓性分泌物,宫颈充血、消肿,触
6、之易出血宫颈品可见粘液脓性分泌物,宫颈充血、消肿,触之易出血2.临床表现临床表现近年来国际上已将免疫荧光法作为一项近年来国际上已将免疫荧光法作为一项“扩大的金标准扩大的金标准”来鉴定沙眼衣原体培养和非培养结果相异的标本,其来鉴定沙眼衣原体培养和非培养结果相异的标本,其敏感性为敏感性为80%-90%,特异性则在,特异性则在95%以上。以上。卫生部颁布的卫生部颁布的非淋菌性尿道炎诊断标准及处理原则非淋菌性尿道炎诊断标准及处理原则(WS2382003)中,直接免疫荧光法为沙眼衣原体)中,直接免疫荧光法为沙眼衣原体推荐检测方法。推荐检测方法。沙眼衣原体临床检验方法沙眼衣原体临床检验方法临临床床检验检验
7、方方法法灵敏性灵敏性(%)特异性特异性(%)优优缺点缺点胶体金法胶体金法52.7852.78差差98.8698.86方方法法简简便便、快快捷捷,适适于于短短时时内内大大批批量量标标本本的的测测定定,特特异异性性低低,灵灵敏敏度度不不高高,易易造造成成假假阴阴性性,阳阳性性检检出率出率5 5%,临临床床实际检实际检出率多出率多仅仅1-2%1-2%漏漏检检率太高,不适用于率太高,不适用于妇产妇产等低感染人群等低感染人群筛查筛查免疫免疫荧荧光法光法92.7292.7297.8997.89操操作作简简便便,检检测测时时间间短短,可可检检出出标标本本中中存存在在的的原原体体和和包包涵涵体体。具具有有专专
8、一一性性好好、特特异异性性强强、灵灵敏敏度度高高等等特特点点,在在衣衣原原体体感感染染早早期期就就可可被被发发现现,对对衣衣原体感染的早期原体感染的早期诊诊断具有特殊意断具有特殊意义义。沙眼衣原体沙眼衣原体检测检测“金金标标准准”沙眼衣原体阳性图片沙眼衣原体阳性图片治疗方案治疗方案初发病例初发病例多西环素多西环素100mg100mg,口服,口服,2 2次次/日,连服日,连服7 71010天天阿奇霉素阿奇霉素1g1g,一次顿服,饭前,一次顿服,饭前1 1小时或饭后小时或饭后2 2小时小时服用服用红霉素红霉素500mg500mg,口服,口服,4 4次次/日,连服日,连服7 7天天琥乙红霉素琥乙红霉
9、素800mg800mg,口服,口服,4 4次次/日,连服日,连服7 7天天氧氟沙星氧氟沙星300mg300mg,口服,口服,2 2次次/日,连服日,连服7 7天天米诺环素米诺环素100mg100mg,口服,口服,2 2次次/日日,连服连服1010天天 复发性或持续性病例复发性或持续性病例,尚无有效的治疗方案,尚无有效的治疗方案,推荐方案为推荐方案为:甲硝唑甲硝唑2g2g单次口服,加红霉素碱单次口服,加红霉素碱500mg500mg,口服,口服,4 4次次/日,共日,共7 7天天琥乙红霉素琥乙红霉素800mg800mg,口服,口服,4 4次次/日,连服日,连服7 7天天 孕妇禁用多西环素和氧氟沙星
10、,推荐方案为:孕妇禁用多西环素和氧氟沙星,推荐方案为:红霉素红霉素500mg500mg,口服,口服,4 4次次/日,共日,共7 7天天红霉素红霉素250mg250mg,口服,口服,4 4次次/日,共日,共1414天天琥乙红霉素琥乙红霉素800mg800mg,口服,口服,4 4次次/日,共日,共7 7天天阿奇霉素阿奇霉素1g1g,一次顿服,一次顿服造成细菌性阴道炎的主要病原体,在阴道分泌物中检出阴道造成细菌性阴道炎的主要病原体,在阴道分泌物中检出阴道加德纳菌可用于诊断细菌性阴道炎加德纳菌可用于诊断细菌性阴道炎引起尿道炎和阴道炎引起尿道炎和阴道炎导致早产、低体重儿、绒毛膜炎、羊膜炎、羊水感染、子宫
11、导致早产、低体重儿、绒毛膜炎、羊膜炎、羊水感染、子宫内膜炎、急性输卵管炎、手术后感染和子宫颈癌等内膜炎、急性输卵管炎、手术后感染和子宫颈癌等经性接触传播,与男性非淋菌性尿道炎有一定关系经性接触传播,与男性非淋菌性尿道炎有一定关系影响精子质量,是男性不育的重要原因之一影响精子质量,是男性不育的重要原因之一妊娠期感染,可能导致自然流产、早产妊娠期感染,可能导致自然流产、早产产前、孕早期上行感染可致胚胎停止发育产前、孕早期上行感染可致胚胎停止发育阴道加德纳菌阴道加德纳菌1.临床意义临床意义2.临床表现:阴道分泌物呈灰白色,很粘稠,甚至象面糊状,均匀一致,但不是脓性分泌物,量多少不定。分泌物中胺含量特
12、别高,故呈鱼腥味,性交时或活动后往往因促进胺释放而使气味加重,分泌物中加入10%氢氧化钾后也可释出胺味。3.临床检验方法临床检验方法临床检验方法临床检验方法灵敏性灵敏性(%)特异性特异性(%)优缺点优缺点快速快速BV试验试验758895敏敏感感性性高高、但但其其他他细细菌菌、滴滴虫虫等等都都能能对对检测产生干扰检测产生干扰,导致假阳性导致假阳性。代谢产物,间接指标,重复性差代谢产物,间接指标,重复性差革兰染色革兰染色47.3794.77598简简便便、快快速速;背背景景复复杂杂、易易漏漏检检,需需要要实实验验者者具具备备丰丰富富的的实实践践经经验验寻寻找找足足够够数数量的线索细胞量的线索细胞不
13、具备特异性不具备特异性阴道加德纳菌阴道加德纳菌免疫荧光法免疫荧光法94.5397.51操操作作简简便便,检检测测时时间间短短,可可直直接接检检测测出出主主要要致致病病菌菌,标标本本需需要要量量少少、特特异异性性强强、结果判断直观、灵敏度高等结果判断直观、灵敏度高等优点优点直接检测病原微生物,检测意义清晰直接检测病原微生物,检测意义清晰阴道加德纳菌阳性图片阴道加德纳菌阳性图片治疗方案治疗方案非孕期非孕期推荐方案推荐方案甲硝唑甲硝唑500 mg500 mg,口服,口服,2 2次次/d/d,共,共7d7d0.75%0.75%甲硝唑膏甲硝唑膏(5g)(5g),阴道上药,阴道上药,2 2次次/d/d,共
14、,共5d5d2%2%克林霉素膏克林霉素膏(5g)(5g),阴道上药,阴道上药,1 1次次/晚,共晚,共7d7d替代方案替代方案克林霉素克林霉素300mg300mg,口服,口服,2 2次次/d,/d,共共7d7d克林霉素栓克林霉素栓300g,300g,阴道上药,阴道上药,1 1次次/晚,共晚,共3d3d妊娠期甲硝唑甲硝唑500mg500mg,口服,口服,2 2次次/d/d,共,共7d7d甲硝唑甲硝唑250mg250mg,口服,口服,3 3次次/d/d,共,共7d7d氯洁霉素氯洁霉素300mg300mg,口服,口服,2 2次次/d/d,共,共7d7d哺乳期选择局部用药,尽量避免全身用药选择局部用药
15、,尽量避免全身用药奈瑟氏淋球菌奈瑟氏淋球菌造成淋病的病原微生物,引发以泌尿生殖道化脓性炎症为造成淋病的病原微生物,引发以泌尿生殖道化脓性炎症为主要临床症状的性传播疾病主要临床症状的性传播疾病淋病是常见的性传播疾病之一,且发病率呈上升趋势,已淋病是常见的性传播疾病之一,且发病率呈上升趋势,已构成威胁公众健康的重大疾病构成威胁公众健康的重大疾病妊娠期感染淋病对母婴危害极大,宫内感染易致自然流产、妊娠期感染淋病对母婴危害极大,宫内感染易致自然流产、早产及胎儿宫内发育迟缓早产及胎儿宫内发育迟缓分娩时母婴垂直传播,可致新生儿淋病性结膜炎,治疗若分娩时母婴垂直传播,可致新生儿淋病性结膜炎,治疗若不及时彻底
16、,新生儿有致盲的危险不及时彻底,新生儿有致盲的危险淋病孕妇产后易发生散播性淋病淋病孕妇产后易发生散播性淋病1.临床意义临床意义2.2.临床表现临床表现:2.1 2.1 无合并症淋病无合并症淋病2.1.12.1.1男性淋菌性尿道炎男性淋菌性尿道炎尿道口红肿、发痒、有稀薄或黏液脓性分泌物尿道口红肿、发痒、有稀薄或黏液脓性分泌物,尿痛、烧灼感,排尿痛、烧灼感,排出黏稠的深黄色脓液。出黏稠的深黄色脓液。2.1.22.1.2女性泌尿生殖系统的淋病女性泌尿生殖系统的淋病淋菌性尿道炎淋菌性尿道炎:尿频、尿急、尿痛、尿血及烧灼感。尿道口充血发尿频、尿急、尿痛、尿血及烧灼感。尿道口充血发红,有脓性分泌物;红,有
17、脓性分泌物;淋菌性宫颈炎淋菌性宫颈炎:为女性淋病的主要表现,白带增多、阴道口有黏液为女性淋病的主要表现,白带增多、阴道口有黏液脓性分泌物排出,外阴瘙痒,阴道内轻微疼痛和烧灼感脓性分泌物排出,外阴瘙痒,阴道内轻微疼痛和烧灼感,阴道口充阴道口充血,水肿,子宫颈口充血,糜烂,有黏液脓性分泌物。血,水肿,子宫颈口充血,糜烂,有黏液脓性分泌物。女童淋病女童淋病:可见阴道口、尿道口、会阴部红肿,病变部位可出现糜可见阴道口、尿道口、会阴部红肿,病变部位可出现糜烂、溃疡和疼痛。阴道有脓性分泌物,排尿困难。烂、溃疡和疼痛。阴道有脓性分泌物,排尿困难。2.2 2.2 有合并症淋病有合并症淋病2.2.1 2.2.1
18、 男性淋病合并症男性淋病合并症淋菌性附睾炎、睾丸炎淋菌性附睾炎、睾丸炎:阴囊或睾丸有牵引痛,进行性加阴囊或睾丸有牵引痛,进行性加重,且向腹股沟处扩散,体温可升高至重,且向腹股沟处扩散,体温可升高至4O4O。检查可见。检查可见附睾、睾丸肿大、压痛,病情严重时可触及肿大的精索及附睾、睾丸肿大、压痛,病情严重时可触及肿大的精索及腹股沟淋巴结腹股沟淋巴结淋菌性前列腺炎淋菌性前列腺炎:发热、尿痛、尿频、尿急,有排尿不尽发热、尿痛、尿频、尿急,有排尿不尽感和会阴胀痛,前列腺肛检有明显压痛和肿大感和会阴胀痛,前列腺肛检有明显压痛和肿大其它合并症其它合并症 :可并发尿道旁腺炎、尿道周围脓肿、海绵体可并发尿道旁
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