2013年高考生物总复习重点精品课件:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(7)(人教版选修1).ppt
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1、专题2 微生物的培养与应用课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一 研究思路(一)筛选菌株耐高温的DNA聚合酶一 研究思路(一)筛选菌株耐高温的DNA聚合酶美国微生物学科布鲁克 1966年发现水生耐热细 菌Taq 分离到耐高温的Taq DNA聚合酶一 研究思路(一)筛选菌株自然界筛选:根据它对生存环境的要求,到相应的环境 中去寻找。一 研究思路(一)筛选菌株自然界筛选:根据它对生存环境的要求,到相应的环境 中去寻找。实验室筛选:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包 括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止 其他微生物生长。一 研究思路(一)筛选菌株选择培养基:一 研究思路(一)筛选菌株选择培养
2、基:在微生物学中,将允许特定种类的微生物 生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生 长的培养基。目的是从众多微生物中分离 所需要的微生物。一 研究思路(二)统计菌落数目1.显微镜直接计数:先将待测样品制成悬液,然后取一定量的 悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微 镜下观察到的微生物数目来计算出单位体 积内的微生物总数一 研究思路(二)统计菌落数目1.显微镜直接计数:先将待测样品制成悬液,然后取一定量的 悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微 镜下观察到的微生物数目来计算出单位体 积内的微生物总数优点:设备简单、能观察微生物的形态特征。缺点:不能区分死菌和活菌。一 研究思路(二)统计菌落数目2.稀释涂
3、布平板计数法:应用:统计样品中活菌的数目原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生 长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一 个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能 推测出样品中大约含有多少活菌。注意:一般选择菌落数在30-300的平板进行记数。一 研究思路(二)统计菌落数目2.稀释涂布平板计数法:第一位同学只涂布了一个平板,没有设置 重复组,因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置重复组的问题,涂 布了3个平板,但是,其中1个平板的计数 结果与另2个相差太远,说明在操作过程 中可能出现了错误,因此,不能简单地将 3个平板的计数值用来求平均值。一 研究思路(三)设置对照增强实验的说服力和准确性。将
4、待测样品经过一系列的稀释,然后选择 三个稀释度的菌液均匀涂布在平板上,然 后培养。注意:为了结果接近真实值,可将同一稀 释度菌液涂布到3个或3个以上的平板上,经培养,计算出菌落的平均数。一 研究思路(三)设置对照判断培养基中是否有杂菌污染:将未接种的培养基同时进行培养。判断选择培养基是否具有筛选作用:对照培养基接种后培养观察菌落数目。计算公式:每克样品中的菌株数=(CV)M某同学在稀释倍数为106 的培养基中测得 平板上菌落数的平均数为234,那么每克样 品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液 的体积为0.1ml)A.2.34108 B.2.34109 C.234 D.23.4 每克样品中的菌株
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