血液一般检验技术、血红蛋白测定.ppt

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1、实验一血液的一般检验技术 主讲：王翠霞【目的】1、掌握皮肤采血法，了解不同部位采血对结果的影响。2、掌握微量吸管的使用方法3、掌握改良牛鲍氏计数板的使用4、血涂片的制备血液的一般检验技术内容1、皮肤采血法2、微量吸管的使用3、牛鲍氏计数板的使用4、血涂片的制备毛细血管采血法毛细血管采血法采血部位：采血部位：手指或耳垂手指或耳垂采血器材：采血器材：三棱针或专用三棱针或专用“采血针采血针”注意事项：注意事项：一人一针制、忌挤压等一人一针制、忌挤压等采血前用75酒精棉球消毒人的指腹采血弃去第一滴血改良牛鲍计数盘的使用原理改良牛鲍计数盘的使用原理 一定倍数稀释的血液或体液，混匀一定倍数稀释的血液或体液

2、，混匀后滴入具有固定体积和精密划分刻度的后滴入具有固定体积和精密划分刻度的血细胞计数血细胞计数盘中，在显微镜下对所选择盘中，在显微镜下对所选择区域中的细胞进行计数，再乘以稀释倍区域中的细胞进行计数，再乘以稀释倍数，即可换算成单位体积内的细胞数。数，即可换算成单位体积内的细胞数。1.采血部位的皮肤应完整，严格无菌操采血部位的皮肤应完整，严格无菌操 作，防止采血部位感染作，防止采血部位感染2.拭去第拭去第1滴血；吸血量准确滴血；吸血量准确3.保证计数板和盖玻片清洁并符合标准保证计数板和盖玻片清洁并符合标准4.一次完成充池，静置计数板一次完成充池，静置计数板23min5.压线细胞按照数上不数下，数左

3、不数右压线细胞按照数上不数下，数左不数右 的原则的原则6.HiCN转化液中氰化钾是剧毒品，配制转化液中氰化钾是剧毒品，配制 转化液时要按剧毒品管理程序操作转化液时要按剧毒品管理程序操作注意事项注意事项改良改良Neubauer计数盘结构计数盘结构0.005mm1.0mmRRRRRWWWWEEEEE0.005mm1/20mm1/5 mm上页下页改良改良Neubauer计数盘结构计数盘结构计数室计数室计数室计数室正面观：正面观：计数室计数室支柱支柱支柱支柱侧面观：侧面观：盖片盖片改良改良Neubauer计数盘结构计数盘结构计数室计数室计数室计数室正面观：正面观：计数室计数室支柱支柱支柱支柱侧面观：侧

4、面观：盖片盖片上页下页改良改良Neubauer计数盘结构计数盘结构0.005mm1.0mmRRRRRWWWWEEEEE0.005mm1/20mm1/5 mm录象录象返回返回推片推片：挤出一滴血置于载玻片的右侧：挤出一滴血置于载玻片的右侧1/4处处 再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。端展开成线状。3045 两玻片的角度以两玻片的角度以3045为宜，轻轻将双凹为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成血液薄膜。片向前匀速推进，即涂成血液薄膜。【器材】一次性

5、消毒采血针一次性微量吸管、胶吸头75乙醇、脱脂棉球等1、准备材料。2、选择采血部位。3、按摩、消毒、针刺皮肤。4、取第一滴血制血涂片。5、用毛细血管采血、止血6、稀释血液【操作】二、血红蛋白测定【目的】掌握氰化高铁血红蛋白测定方法的原理及操作【原理】血液（SHb除外）转化液Fe2 Fe3HiCN稳定的棕红色换算成每升血液中的血红蛋白浓度CN高铁氰化钾 Hi吸收波峰在540nm，测定该处吸光度【器材】采血用具试管、试管架分光光度计等【试剂】HiCN转化液常用文齐液【操作】5ml转化液转化液加血加血20L静置静置5min540nm比色比色计算计算计算Hb（g/L）=A64458251 A 367.7440001、器材要干净、干燥2、采血深度要适当3、HiCN转化液中含有毒物，注意防止污染【注意事项】男性：131172g/L女性：113 151g/L新生儿：180 190g/L【参考值】