重医大遗传优生学教案07细胞遗传学技术.docx

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1、教案用纸（首页）第9次课 授课时间 第9周 教案完成时间教学目的与要求:学科遗传优生学年级专业层次五年制生殖医学本科教师职称授课方式讲课4学时课题细胞遗传学技术基本教材或 主要参考书遗传优生学掌握染色体病诊断的细胞遗传学方法、原理及应用。熟悉各种显带技术的临 床应用。了解酶、蛋白质和代谢物检测。了解分子遗传学研究方法及临床应用。教学重点、难点：1、外周血细胞染色体制备技术的临床应用。2、骨髓细胞染色体直接制备及临床应用。3、羊水细胞染色体制备及其原理和临床应用。4、绒毛细胞染色体制备及其原理和临床应用。5、G、C显带及Ag-NOR带型特点及其临床应用。大体进程及教学方法：第一节课：细胞体外培养

2、的基本条件第二节课：外周血细胞染色体制备技术的临床应用。第三节课：羊水细胞染色体制备及其原理和临床应用。绒毛细胞染色体制备 及其原理和临床应用。第四节课：绒毛细胞染色体制备及其原理和临床应用。G、C显带及Ag-NOR 带型特点及其临床应用。教学方式：实施情况：已按教案的计划和进度执行。授课教案用纸（续页）基本内容辅助手段和时间分配细胞遗传学技术细胞体外培养的基本条件温度气体和氢离子浓度 基本营养物质 渗透压 生长刺激因子 无菌一、染色体制备技术（一）、外周血淋巴细胞培养制备染色体1、原理2、方法（1）培养基制备RPMI 1640 80%小牛血清20%PHA （植物血球凝集素）0. 5mg/ml

3、肝素 520u/ml双抗（青、链霉素） 各100iu/ml（2）接种全血细胞0. 30. 5ml/5ml培养基（3）细胞培养3772小时(4)秋水仙素处理终浓度0. 10. 15 口 g/ml(5)收获细胞(制片)收集一低渗一预固定一固定一滴片一染色一镜检3、应用染色体病诊断(二)、骨髓细胞直接制备染色体1、原理骨髓是高等动物的造血器官，细胞增殖旺盛，利用骨髓中本身处于分裂状态的细胞可进行染色体制备。2、方法取骨髓培养制备3、应用血液性疾患骨髓染色体分析射线接触人员的骨髓染色体检查(三)、羊水细胞培养制备染色体1、原理妊娠期羊水中含有大量处于分裂状态的胎儿脱落细 胞，收集这些细胞进行体外培养可制备染色体标本。2、方法(1)羊膜穿刺术抽取羊水 妊娠1620周(2)体外长期培养(3)制备染色体3、应用染色体病患儿的产前诊断(四)、绒毛细胞染色体制备技术1、原理绒毛膜是受精卵有丝分裂的衍生物，其本身处于旺 盛分裂状态。吸取一定量的绒毛便可用于染色体制备达 到早期产前诊断胎儿染色体病的目的。2、方法(1)绒毛吸取术吸取绒毛孕810周(2)体外培养(3)染色体制备3、应用早期产前诊断染色体病患儿二、染色体显带技术几种显带技术的带型特点及应用G显带R显带C显带核型双着丝粒Cd带双随体