受激发射损耗激光共聚焦显微镜STED3X操作指南.docx

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1、受激发射损耗激光共聚焦显微镜STED 3X操作指南开机流程：(1)依次打开PC MicroscopewaScanner PowerLaser Power” 三个按钮, 将LaserEmission上的激光开关钥匙旋至(2)打开荧光激光光源(按绿色的Power按钮，如下图)I以光源亮度调节旋钮光闸一 保持在 remote1(3)计算机系统帐号选择“TCSUser，输入预约系统用户名和密码；双击桌面“LASX”图标，启动共聚焦操作软件。“LASX”图标，启动共聚焦操作软件。LASX(4)进入配置选择界面后，按下图选择配置，点击“OK”，继续启动系统。注意：在系统自检过程中，不要操作显微镜触屏，以防

2、自检不能通过。Leica Application Suite XConfiguration:Miaoscope:Resonant:STED:Apply Customized User Settings:MICROSYSTEMSOKCancelCopyright 1997 - 2014 Leica Microsystems CMS GmbH(5)在LAS AF操作界面，点击最上方的“Configuration”按钮进入配置界面一点 击左边“Laser Config”按钮一打开所需激光(OFF - ON)。注：白激光WLL (470nm-670nm),默认设置功率为70%STED592,设置为 7

3、0%； STED660 设置为 60%； STED775 设置为 50%。TCS SP8 $ConfigurationAcquireCamera MicroscopeStageStageBeam PathIPSLaser Config、Currently available Lasers Adjust Laser Settings注意：只开需要使用的！其他的不要开！592nm必须打开才能作Alignment, 592需要将钥匙关上再打开。(6)仍在Configuration配置界面下，点击左侧的STED”按钮，点击Align Beams” 进行光路自动校正，显示下图所示Alignment su

4、ccessful时，可以开始实验。注意：Alighment需要在100X物镜下进行臼 STED臼 STEDReset to Default STED SettingsDelay Time (STED 775) ps:oOptimal Pixel Size nm:V System OptimizedSTED Dichroic Slider:AutoselectBeam Alignment: STED MappingsActive STED Line:Sampling Factor:Pixel Dwell Time Independent of Zoom :Smart Pinhole:4611nm

5、 =Smart STED Slider MappingsVisualization of Slider Mappings100 | C2.50 Beam AlignmentAlignment in progress Preparing system for alignment Performing beam alignment Restoring settings Alignment successful!OK注意：显微镜机身右侧的楔形镜在STED实验时必须插入到光路!室温变化明显，或每12小时，进行一次Align beams。关机流程:(1)保存已采集的图像。(2)在电脑上进行图像数据的FT

6、P传输。(3)在 LAS X 软件 Configuration”一“Laser Config”界面关闭所有激光。(4)关闭LAS X软件。退出预约系统账号后，关闭计算机。(5)若使用过油镜，需用擦镜纸蘸取无水乙醇清洁镜头。(6)关闭显微镜荧光电源。(7)关闭电脑桌右侧“LaserPower”按钮右侧的激光开关钥匙(LaserEmission) 0(8)关闭LaserPower”按钮。(9)关闭Scanner Power”按钮。(10)关闭电脑后，关闭“PC Microscope”按钮。(11)记录关机时间、仪器状况等信息。STED安全使用注意事项:1 .本机实行先预约后使用，多次迟到或爽约将被

7、取消预约权限。2 .网上预约机时必须使用自己的账户，不得擅自使用他人账户预约 按照预约时间使用仪器，并如实登记实际使用时间。3 .在管理员工作时段使用仪器的用户，在实验结束后必须通知管理 员；凡在管理员非工作时间段使用仪器的用户，在实验结束后必 须与下一个用户进行交接后方可离开。如确定下一个用户不能按 时使用或取消实验，则需按照仪器操作规定清理并关闭相关设备。4 .每天最后一个使用仪器的用户需按照规定关闭仪器及照明，按照 仪器管理员的要求完成仪器整理工作，如擦拭镜头等，并锁好门 窗。5 .用户在使用仪器过程中，应遵守中心有关规定并听从仪器管理员 的安排，尊重管理员的工作。6 .数据必须保存在指定位置，文件夹名称需标明日期，不得随意保 存。7 .实验数据及时备份，中心仅负责保留一个月。8 .数据使用FTP传输后，到126房间使用U盘或移动硬盘进行拷贝。9 .未经同意请勿私自使用用来采集实验数据的计算机的USB接口，以免计算机感染病毒影响他人使用。